切片制作与观察标准表

实验二：叶片下表皮的临时装片的制作与观察实验

1．观察叶片的结构，叶片的结构和各部分的主要功能是本节课的重点知识。

在完全叶的组成中，叶片是主要的部分。植物能够进行光合作用、呼吸作用和蒸腾作用，其根本原因在于叶具有执行这些生理功能的结构。这节课的关键就是要讲清楚叶片的结构与功能的辩证关系：表皮细胞排列紧密，外壁有不易透水的角质层，从而起到保护作用；表皮细胞无色透明，有利于光线的射入；表皮上有气孔和保卫细胞，从而使叶片与外界能够有调节地进行气体交换；叶肉细胞里含有许多叶绿体，因而叶片能够进行光合作用；栅栏组织的细胞呈圆柱形，排列比较整齐，这有利于光线照射在海绵组织上；叶脉支撑着叶片，使叶片充分接受到阳光，也使光合作用的原料和产物能够及时运输。

2．徒手切片的制作，是本节课的难点。

学生要想在较短的时间里掌握徒手切片的制作技术比较困难，所以，教师只要让学生学会操作的方法就行，而制成切片的观察效果可以不作过高要求，重点应放在观察叶片的结构上。

教学过程设计

叶片的结构：

叶片的结构可以分为三部分：表皮、叶肉和叶脉。为了加深学生的印象，教师在课前可以准备一些菠菜叶，上课时发给学生观察。首先说出叶片的形态特点（正反两面的颜色深浅不同，有网状叶脉），然后让学生把叶片的正面向上对折，轻轻地斜撕开，这时可以看到在撕口处有一层透明的薄膜。启发学生思考：这层透明的薄膜是叶片的什么部分？如果把叶片向背面对折，撕开，是否也能看到一层薄膜？教师可以告诉学生，这两层透明的薄膜分别是叶片的上、下表皮，夹在两层表皮之间较厚的深绿色部分是叶肉，在叶肉中还穿插着许多粗细不同的叶脉。

为了使学生看清楚叶脉在叶中的分布，教师可以将自制的叶脉标本发给学生，同时把一个叶脉标本放在投影仪上，在屏幕上可以见到一个放大的叶脉标本。启发学生思考：叶脉有什么生理功能？

最后，教师引导学生总结出叶片的三个组成部分。

（1）表皮

为了使学生更好地理解和掌握有关知识，调动学生的学习热情，“叶片的结构”的教学应采取实验与教学同步进行的方法，使学生在探索知识的实践中学习。

病理组织切片制作技术

病理组织切片制作技术

病理组织切片常用的制作方法有三种。即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：

组织取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→组织包埋→组织切片→展片附贴→切片脱蜡→染色→脱水→染片透明→封固。

以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。

一、取材

采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。切取的工具要清洁。采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24小时。应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。特殊病料应根据器官的结构特点切取。管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。

切取组织块大小，以1.5×1.5×0.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。

二、固定

固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。材料取下后，应迅速固定。固定液数量应为病理组织块的5到20倍。由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。

最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90毫升配成。

三、冲洗 固定后的组织块，应将固定液洗去。一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。

冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔相当时间换水一次。整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。酒精固定的组织材料不需冲洗。

鸡 的 切 片 制 作

实

验

报

告

实验三 病变组织的取材、固定和修块

一.实验目的

掌握用于病理组织学诊断的组织材料的取材原则，固定方法及修块标准。

二．实验耗材

手术刀、组织剪、刀片、生理盐水、多聚甲醛固定液（福尔马林）、铅笔等。

三．实验过程

1.取材：用颈部放血法处死公鸡，打开腹腔，取需要的组织。切取的组织块不宜太大，以利于固定剂穿透，通常以5mm*5mm*2mm或10mm*10mm*2mm为宜。取下所需的组织，切成一小块2-3mm厚。

注意：取材动作要迅速。不宜做太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化，不要损伤所需要的部分。

2. 固定：将切好的内脏组织用 生理盐水把组织洗一下，立即投入中性福尔马林固定液中固定。

（固定的作用）

组织经一系列的处理后，就必须进行固定。

固定的作用，从组织学的角度其简单的定义是，保持细胞、组织的固有形态和结构，使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构，而从免疫组化技术的角度，固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固，尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应；防止细胞的自溶，以免使抗原扩散至组织间质；以保持组织的固有形态和结构；更重要的是保持组织或细胞的抗原性，不但要使抗原不导致失活，而且不使抗原发生弥散的现象，才能在免疫组化染色时，不产生过深的背景，影响对阳性物的判断。

3. 修块

样品要求：长，宽各1cm左右，厚不宜超过1cm（依据组织不同要求不同）。

肝、肾、脾、肺、肌肉、消化道、脑

其他注意

（1）组织固定越新鲜越好。组织一经离体，就能及时地固定，这是最好的。

（2）固定材料时，固定液必须充足，一般材料块的20-30倍，有些水分多的材料，中间应更换1-2次新液。

（3）组织固定，组织块不宜过大。对于产酶类的器官如肝、肾、脾等，更要处理好，否则更容易出现自溶现象。

（4）对不同类型的组织应适当合理地选择固定液。

（5）组织固定，时间不宜太短，也不宜太长。

纺织材料切片制作

一、目的要求

使用纤维切片器(机)制作各种纤维切片，在普通生物显微镜下观察各种纤维

的横断面形态特征。掌握纺织纤维切片制作的方法，熟悉制作切片用的仪器结构。

二、试验仪器和试样

试验仪器为Y172型纤维切片器，生物显微镜。

试样为棉、羊毛、苎麻、蚕丝、粘胶纤维；．涤纶、锦纶、腈纶、维纶等各种纺

织纤维。此外还需准备单面或双面刀片、载玻片、盖玻片、火棉胶、甘油、擦镜

头纸等。

三、一般知识

切片在纺织材料试验中是一项被广泛采用的实验技术。在原料和产品检验方

面，常常根据纤维纵向和横断面的形态特征结合物理、化学性质进行鉴别和质量

分析。在科研方面，如研究异形纤维的截面形态及其结构特征，染料在纤维内的

渗透扩散程度，浆料在纱线内的渗透与外面披覆情况，混纺纱中不同纤维分布与

转移特征以及纱线和织物的几何结构形态等，都需通过切片，并将切片放在显微

镜下观察，必要时可用摄影记录，以利分析研究。

切片的厚度，需薄而均匀，原则上将纤维切成小于或等于纤维横向尺寸(纤

维直径或宽度)的厚度，以免纤维倒伏。通常用的切片方法有哈氏切片法和手摇

切片法等。

四、哈氏切片法切片制作方法和程序

哈氏切片法是利用Y172型纤维切片器(或简称哈氏切片器)将纤维或纱线切

成薄片的方法。Y172型纤维切片器的结构有二块金属板，金属板1上有凸舌，

金属板2上有凹槽，两块金属板啮合，凹槽和凸舌之间留有一定大小的空隙，试

样就填在这个空隙中，空隙的正上方有与空隙大小相一致的小推杆，用螺杆控制

推杆的位置。切片时，转动精密螺丝，将纤维从金属板的另一面推出，推出距离

大小（切片厚度）由精密螺丝控制，切片的操作程序如下：

1、取Y172型纤维切片器，松开螺丝，取下销子，将螺座转到与金属板2

成垂直的位置(或取下)，抽出金属板1。

2、取一束纤维，用手扯法整理平直，把一定量的纤维放入金属板2的凹槽

中，将金属板1插入，压紧纤维，纤维数量以轻拉纤维束时稍有移动为宜。对有