实验三 蟾蜍实验(一)
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于刺激电极方向),用滤纸片吸去标本上过多的任氏液。
五、动作电位和传导速度
13.测定参数
采样参数
刺激器参数
显示方式
记忆示波
刺激模式
自动幅度调节
采样间隔
25us
主周期
1s
X 轴显示压缩比
2:1
波宽
0.1ms
通道
通道 2
通道 4
初幅度
0.2V
DC/AC
AC
AC
增量
0.02V
处理名称
神经干 AP
AP 传导速度
1.毁脑脊髓 2.去躯干上部及内脏和皮肤 在荐尾关节前 1cm 处用剪 刀剪断脊柱,将前半躯干、皮肤和内脏一并拉右上图 蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备甲、毁脑脊髓 剥弃之,仅保留一段腰背部脊柱及两后肢,并将其放入乙、丙 剪除躯干前段及内脏 丁、去皮肤 盛有任氏液的培养皿中。 3.洗净手和所用过的用具,以防沾染标本。 4.平分标本 沿脊柱正中线至耻骨联合中央将标本分为两半。放入任氏液中。 5.游离坐骨神经 任取一标本,用玻璃分针游离坐骨神经腹腔段。然后换至背侧向上,
11.将甲标本的神经放在乙标本的肌肉
上,再用锌铜弓刺激乙标本的神经,观察
是否引
起甲标本的肌肉收缩。
四、仪器联接和调试
12.打开 Medlab 生物信号采集系统软件,
任选二个通道(Medlab-U)和 2,4 通道
(Medlab-E)作为记录信号的通道或用于刺激信号的监视通道(不应期测定,Medlab-U 应用
Q9 三通将刺激输出分成两路,一路用于刺激标本,一路输入 4 通道,Medlab-E 则应按下 CH4
上方的 R-S 键)并用高阻抗导线将通道输入口与神经屏蔽盒的引导电极相连,用刺激导线将
Medlab 的刺激信号输出口与神经屏蔽盒的刺激电极相连。将神经屏蔽盒内所有电极用浸有
任氏液的棉球擦净。用镊子夹住已制备好的神经标本的一端,将其放置于电极上(脊椎端位
末幅度
1V
放大倍数
200-1000
200-1000
脉冲数
1
Y 轴压缩比
4:1
4:1
延时
5ms
14.实时调节 Medlab 生物信号采集系统和刺激器的延迟,使动作电位波形正好出现在显 示屏的适中位置同时调节刺激强度求出在相应刺激波宽下动作电位产生的阈强度和顶强度。
15.双相动作电位的观察: 计算双相动作电位时程及上升相、下降相宽度及幅值,计算
实验三 蟾蜍实验(一)
[目的]1、学习破坏两栖类脑脊髓的方法和神经肌肉标本、神经标本制备的方法。 2、测定蟾蜍坐骨神经的绝对不应期和相对不应期,并了解其测定原理。 3、观察蛙类坐骨神经干的单相、双相动作电位基本波形,并了解其产生原理。 4、测定蛙类坐骨神经兴奋的传导速度并了解其原理。
[原理]1、两栖类一些基本的生命活动和生理功能与温血动物类似,而离体组织器官所 需的生活条件比较简单,并且易于控制和掌握,因此在生理实验中常用两栖类离体组织器官 作为实验标本。
动作电位在神经干上传导有一定的速度。不同类型的神经传导速度不同,神经纤维越粗 则传导速度越快。
测定神经冲动在神经干上传导的距离与通过这段距离 所需的时间,可根据距离(s)、时间(t)、速度(v)的关系求出神 经冲动的传导速度,即 v=s/t。 [实验材料]蟾蜍 常用手术器械 任氏液 锌铜弓 培养皿 烧杯 Medlab 生物信号采集系统 神经标本屏蔽盒 蛙板 [实验步骤] 一、坐骨神经腓肠肌标本的制备
3、在有效刺激作用下(常用电刺激),神经纤维膜内外产生去极化,当其极化达到阈电 位时,能诱发膜产生一次在神经纤维上可传导的快速电位反转,此即为动作电位(AP)。神经 干动作电位是神经兴奋的客观标志,处于兴奋状态的部位对静止部位而言,膜外电位呈负电 性质,当神经冲动通过以后,膜外电位又恢复到静止时水平。
提起结扎线,在结扎线下端剪断跟腱。用玻璃分
针游离腓肠肌至膝关节处,剪去以下部位。制成
坐骨神经-腓肠肌标本。
1、股三头肌 2、股二头肌 3、半膜肌 4、股骨
8.检验标本:用沾有任氏液的锌铜弓轻触一下坐骨神经,如腓肠肌发生迅速而明显的收
缩,说明标本的兴奋性良好。将标本浸入任氏液中 15 分钟,以稳定其兴奋性。
自伪迹起点至动作电位起点所需的时间。
16.把神经干方向倒转后,AP 发生何变化?
17.传导速度测定:测出 CH2、CH4 采样窗之间的时间差:以刺激伪迹到第一个 AP 的时间为
二、蛙坐骨神经干标本制备
9.标本制备方法基本同坐骨神经—腓肠肌标本制备法,只是为了获得尽量长的神经干标
本,在分离到腓肠肌后再继续沿神经一分支(胫神经)一直分离至踝关节附近,末端结扎并剪
断。
三、生物电现象的观察
10.将一个神经肌肉标本的神经的一点轻置于臀部肌肉的损伤部,另一点置于正常部,
观察在接触时是否引起肌肉的收缩?
如果两个引导电极置于正常完整的神经干表面,兴奋波先后通过两个电极处,便引导出 两个方向相反的电位偏转,称为双相动作电位。如果两个引导电极之间神经组织有损伤,兴 奋波只通过第一个引导电极,不能传至第二个引导电极,则只能引导出一个方向的电位偏转 波形,称为单相动作电位。
神经干由许多神经纤维组成,故神经干动作电位与单根神经纤维的动作电位不同, 它是由许多神经纤维动作电位综合成的综合性电位变化。所以神经干动作电位幅度在一定范 围内可随刺激强度的变化而变化。
持玻璃分针沿坐骨神经沟(股二头肌及半膜肌肌间沟)小心分离坐骨神经大腿段,用剪刀剪
去神经干上各细小分支(切忌撕扯),将坐骨神
经中枢端连带一小块椎骨剪下,游离坐骨神经至
膝关节处。
6.分离股骨头 沿膝关节剪去股骨周围的肌
肉,将股骨刮净,保留膝关节端股骨 1cm,剪去
其余部分。
7.分离腓肠肌 在腓肠肌跟腱下穿线、结扎。