父母们都明白，教育孩子需要用好方法。那么什么是好方法呢？在我看来，最好的也是最有效的儿童教育方法，就是培养良好的行为习惯。
有一位母亲跟我说，我的孩子真讨厌，坏毛病太多了，不爱写作业、贪吃零食、乱花钱、整天粘着电视，你说怎么办呢？我都说他八百遍了，就是改不了。
因为比较熟悉，我和她开玩笑说，“你要是这样说孩子八千遍，他就更改不了了。一位著名的儿科医生跟我说，一句话重复三遍就是对别人的折磨。你对你的孩子重复了八百遍，怎么受得了？”我建议父母们，如果不信我的话，可以把你们每天对孩子说的话录下来，录一星期放给自己听听，父母自己都会烦死。
孩子们对我抱怨说，我妈妈真烦人，每天都唠叨不完，她只要嘴唇一动，我就知道她要讲什么，因为她天天都讲一样的话。
我也惊讶地发现，全国许多父母都像克隆人，都对孩子唠叨一样的话：别看电视了，赶快写作业！你要是考不上好中学，怎么考上得好大学？上不了好大学，以后怎么找好工作？没有好工作，你喝西北风去？等等。这样的话说一遍两遍还可以，说多了之后就变成一堆噪音，只能让孩子情绪混乱信心崩溃。这是您想要的结果吗？
实际上，没有一个孩子不想成为好孩子，也没有一个孩子不想好好学习。他学习不好一定是碰到了困难，孩子需要的是你具体有效的帮助，而不是唠叨或训斥。所以我给大家一个忠告----“训子千遍不如培养一个习惯”。
其实，今天的父母已经开始重视孩子的习惯培养，可是为什么效果不明显呢？我发现，问题在于许多父母还是把习惯培养当成了说教的内容，而忽略了习惯培养的根本途径是坚持不懈的行为训练。换句话说，习惯培养是一套科学的教育方法，需要按照其规律来做才会见效。
在这里，我愿意试着分享一下习惯培养的六大步骤，或许会给大家一些帮助。
习惯培养的第一步-----提高认识，或者说，引导孩子对养成某个习惯产生兴趣。
研究结果发现：儿童时期最好的教育莫过于养成良好的习惯。所谓的好孩子一定是有好习惯的孩子，所谓有问题的孩子一般都是坏习惯很多的孩子。一个坏习惯可能使你丧失了良机，而一个好习惯则可能使你走向成功。
我先给大家讲一个故事：
2003年，全国研究生入学考试外语听力成绩首次计入总分。虽然外语考试要14：00正式举行，但为了保证听力测试的效果，教育主管部门明确规定：“考生必须在13：45前进入考场，利用这一段时间进行调试收音机和试听等工作，13：45后禁止考生入内。”该规定在考场纪律和考生准考证上均明确写明，各大媒体也都在考前一再提醒。
考试当天下午，上海市某大学考点，13：45以后一连来了4名迟到考生，而这时13：55都已过了。当老师告诉他们不得入内时，这几名同学当场傻眼，这才想起看准考证。
他们纷纷表示没有看清该规定，求监考老师放行。其中一位不断向老师苦苦哀求：“我为今年考研已经准备了3年，我很有信心考上，老师给我一次机会吧。”一位考生边哭边说考官不近人情。
这几名男生迟到的理由，有的竟是因为睡觉睡过了头，有的是因为吃饭吃晚了，最主要的是他们都忽视了“1：45前入场”这一规定。据说，全国很多考点都
有类似情况发生，可以说，任何对自己负责的同学都不应该有这样低级的失误。
上面这个让人感慨的事情告诫我们，每个人都需要养成确认的习惯，否则就会有吃不消的苦头。对于一个学生来说，养成确认的习惯更会终身受益，例如，平时写完作业认真检查，考试的时候仔细审题，与别人有约的事情要牢记在心并提前落实等等。这样的学生不仅学习成绩会好，为人处事也会受到欢迎。
让我们来欣赏另一个故事
1959年10月，原苏联首位宇航员的选拔工作在全国展开。加加林从3400多名35岁以下的空军飞行员中脱颖而出，成为20名入选者中的一员，并于1960年３月开始在原苏联宇航员训练中心接受培训。
1961年4月12日，莫斯科时间上午9时零7分，加加林乘坐“东方”１号宇宙飞船从拜克努尔发射场起航，在最大高度为301公里的轨道上绕地球一周，历时１小时48分钟，完成了世界上首次载人宇宙飞行，实现了人类进入太空的愿望。
当时20个宇航员在培训，为什么加加林能脱颖而出，起决定作用的是一个偶然事件。原来，在确定人选前一个星期，主设计师罗廖夫发现，在进入飞船参观前，只有加加林一个人把鞋脱下来，只穿袜子进入座舱。就是这个细节，一下子赢得了罗廖夫的好感，感动了他。罗廖夫说：：“我只有把飞船交给一个如此爱惜它的人，我才放心。”
所以，加加林的成功，得益于他良好的习惯。有人开玩笑说：成功从脱鞋开始。
这个故事告诉我们：加加林为什么成功呢？因为好习惯给他带来好运气，因为好习惯解放了他，他根本不需要考虑要不要脱鞋，他的文明行为已经自动化了。也就是说，好的习惯能够给人带来更多成功的机会，坏的习惯往往使你在不知不觉之中走向失败。
有人会问，习惯到底是什么呢？习惯就是习以为常的行为，是一种稳定的自动化的行为，是经过反复练习而养成的语言、行为、思维等生活方式，它是人们头脑中所建立起来的一系列的条件反射。
教育家叶圣陶说，教育就是培养习惯。俄罗斯教育家乌申斯基说得更深刻更形象：好习惯是人在神经系统中存放的资本，这个资本会不断地增长，一个人毕生就可以享用它的利息。而坏习惯是道德上无法偿还清的债务，这种债务能以不断增长的利息折磨人，使他最好的创举失败，并把他引到道德破产的地步。
习惯培养的第二步-----明确行为规范，让孩子对养成某个良好习惯的具体标准清清楚楚。
北京市史家小学的一个男孩子上课时很调皮，把任课老师惹生气了，下课了全班同学都埋怨他，这个小男孩很懊恼，就去找他的班主任孙蒲远老师。
孙老师做过40多年的小学班主任，经验丰富，是位全国特级老师。她听了小男孩的话，对他说：“犯了错就认错还是好孩子嘛。那你决定怎么认错呢？”小男孩说：“我去给老师赔
礼道歉，再给老师鞠个躬。”孙老师说：“鞠躬很好，会让对方知道你很有诚意。可是你会鞠躬吗？试一下我看看。”小男孩直挺挺地点了一下头。孙老师摇摇头说：“这不是鞠躬，这只是点头嘛，点头道歉缺乏诚意。”那个男孩愣住了，因为长这么大，他从来不知道鞠躬与点头有什么区别。这时，孙老师站起来，给小男孩演示怎么鞠躬：挺胸抬头，
双手自然下垂，然后上身向下弯曲与地面平行，再平身，这才是鞠躬。然后，孙老师让男孩子练习了几次，才让他去给任课老师认错。
孙蒲远老师不愧是全国特级老师，她教育学生不光有耐心，还有细心，因为只有细致入微的指导，才能培养出真正的好习惯。甚至可以说，没有细节的指导，就没有儿童教育。
习惯培养的第三步-----适时进行榜样教育，让孩子对养成某个良好习惯产生亲切而向往的感情。
天津社科院的关颖研究员曾与儿子难以沟通，但儿子房间里贴了许多篮球明星乔丹的画像，因为乔丹是他心中的偶像。
后来，一向不喜欢篮球的关颖，开始与儿子一起看篮球比赛了，并且收集了许多乔丹的故事，这让儿子对妈妈刮目相看，自然亲近了起来。关颖发现，只要与儿子谈乔丹，儿子就心服口服，因为他对这个偶像有认同感、亲切感。
结果，借助乔丹这个榜样的力量，全家人和谐相处，儿子也越来越可爱。
儿童时代就是榜样时代和偶像时代，因为儿童的学习特点就是观察和模仿。当然，儿童的榜样和偶像并非都是名人，更多的是他们的伙伴。因此，父母和教师既可以选择孩子喜爱的名人榜样，也可以选择孩子的优秀伙伴，只要发现他们的某些好习惯，都会对孩子产生巨大的影响力。
习惯培养的第四步-----坚持不懈的行为训练，让孩子由被动到主动再到自动，养成某个良好习惯。
根据美国心理学家拉施里的动物记忆实验研究，行为主义心理学认为，一种行为重复21天就会变为习惯动作，而90天的重复会形成稳定的习惯。就是说，一个习惯的形成，一定是一种行为能够持续一段时间，他们测算是21天到90天。当然，这只是一个大致的概念。根据我们的研究发现，不同的行为习惯形成的时间也不相同，总之是坚持的时间越长习惯越牢。
举一个例子，孩子洗手你就得给他训练，不洗手就不能吃东西，只要是吃东西就必须洗手。吃饭的时候洗手了吗？看看，你老问孩子，还老看孩子，孩子慢慢就习惯了。开始一看妈妈，就知道“哦，我要洗手”，到以后他就不用提醒了，就如现在我们大人早上起来洗脸刷牙，还要提醒吗？这是习惯！养成了习惯就成了稳定的自动化的行为。
那么孩子的习惯养成呢，有一个由被动到主动再到自动的过程，因此要训练。做父母的都很明白，孩子小的时候容易乱，早上起来，我的袜子呢？我的鞋呢？裤子都找不到了，东找西找的，很乱。这就是没养成一个习惯。
我就建议父母采取一个办法，孩子要从小就开始养成一些良好的习惯。比如晚上睡觉以前，把衣服叠好，把鞋子放好，都放在一个固定的位置，把自己上学的书包有序地整理好。孩子开始不会，父母可以指导，演示一下，然后弄乱了让孩子做，孩子往往就很有兴趣，像军人一样，被子叠得整整齐齐的。
要注意，培养孩子好习惯，关键在头3天，决定在1个月。这是习惯培养专家周士渊先生的发现。培养习惯需要持之以恒，但开始的一个月是关键时期。过了这一个月，孩子就能够养成初步的习惯。所以说很多好习惯都要这么一步一步训练出来的。
习惯培养的第五步-----及时评估和奖惩，让孩子在成功地体验中养成良好习惯。
有的父母对孩子说：“假期到了，这个假期你要好好把你写字握笔的姿势练好，开学前我要检查。”
这种做法恐怕不行，孩子经常管不住自己，笼统的要求对他们难以起作用。因此父母要把大计划分割成很多个小计划，并不断地与孩子一起总结评估：今天做得好，可以奖励一颗小星星；7天都得到小星星，可以换1颗大星星；获3颗大星星，就可以获得更高的奖励。
这样，孩子每天都会知道自己是否进步了，并期待着明天的进步。
北京有一个妈妈，儿子上五年级，写作业磨蹭。在心理学专家的指导下，妈妈开始采取习惯培养的措施。
有一天，妈妈下功夫观察儿子到底是怎么写作业的。发现儿子写一个小时的作业站起来7回，一回打开冰箱看看有什么好吃的，一回打开电视看看动画片开始了没有，不到十分钟站一回转两圈，这样写作业能不磨蹭吗？
妈妈于是对儿子说，你是一个很聪明的孩子，但是我刚才给你数了数，一个小时站了7回，是不是太多了。我看你写一个小时的作业站起来3回就差不多了吧。儿子一楞，想不到妈妈挺宽容的，说3回就3回。妈妈继续说，你如果一个小时内站起来不超过3回，当天晚上的动画片随便看。儿子听了高兴的不得了。妈妈又说，先别开心，有奖必有罚，如果你一小时写作业站起来超过了3回，当天晚上的电视就不能看，包括动画片。
母子协议达成了。
结果是5天下来，儿子3天做到了，一小时写作业站起来不超过3回，兴高采烈地看了动画片。但是有两天忘了，一到了6点钟，就急，因为不能看动画片，可怎么央求妈妈也不能看。
真正的教育是自我教育，真正的控制是自我控制。孩子就这样慢慢地变化了，一想到一个小时只能站起来3回，就会慢慢的控制，并用争取晚上看动画片来激励自己。
就这样，经过三个月的训练，这个孩子终于养成了专心写作业的好习惯。
我觉得这个妈妈就是一个了不起的妈妈。我从她的成功经验中，总结出了习惯培养的基本方法------加减法，也就是说，培养好习惯用加法，改正坏习惯用减法。你想让孩子养成什么样的好习惯，就千方百计让他把好的行为不断的出现，出现的次数越多，好习惯越牢。我们可以借鉴这个做法，就是给孩子一个可以接受的过程，让他们慢慢地把坏习惯改掉。
用递减法减去孩子的不良习惯，就像戒毒。有一年，我到阿姆斯特丹去访问的时候，在大街上发现有的店里卖毒品。我很奇怪：全世界都在戒毒，你们怎么卖毒品呢？荷兰人说，我们是卖给那些戒毒的人的，他戒毒一下子戒不掉，我们允许他们微量吸毒，凭一个证，可以来买点儿，让他逐渐减少。这就是递减法。
我想这是很有道理的。坏习惯就和毒瘾差不多，一定要用递减法去矫正，就是说他的坏行为比原来次数减少，就可以容许他甚至奖励他，一次比一次少，直到成功。
习惯培养的第六步-----形成良好的环境或风气，让家庭生活和学校环境乃至社会风气成为孩子养成良好习惯的支持力量。
什么叫良好的环境和风气？我一说大家就明白了。
北京有很多外国的教师，某中学的外教我跟他们有过接触有位女外教刚到北京的时候，很不习惯跟学生靠得很近说话。外国人都习惯说话隔得远点，大概得隔上一米，这样说话就很有安全感。但是中国的学生不习惯这样，老往外教跟前凑。学生往前凑，外教就往后倒，一直退到墙角，倒退不了了。周围都是学生，外教很不习惯，但是在北京生活时间长了就习惯了。
当这位女外教回到自己的国家以后，她的同事就害怕，因为她老往人家跟前凑。这就是环境的影响，入乡随俗，一切都是以环境条件为改变的。
上面的故事耐人寻味，我们培养孩子好习惯一定要注意，一定要形成一个良好的环境。比方家里都不能骂人，孩子如果骂人，全家人都不理他，就是好的环境。
家里有个学生，就需要家庭成为书香之家。当孩子在学习的时候，父母千万别打麻将。有的父母边哗啦哗啦打麻将，边说：“儿子，好好学习啊，考北大、考清华。”他能考上吗？
再比方你老在家里看电视，韩国电视剧一集接一集地看，看得泪水涟涟，你还说：“孩子，别看电视，你要好好学习，写作业去。”你说这孩子能专心学习吗？你知道孩子这个时候都怎么办吗？你看电视他不敢过来，但是他想看，他就把门开个缝儿，耳朵竖得尖尖的，用耳朵听电视，这多累呀！所以说人是环境的产物，这个时候怎么办呢？孩子不在家的时候你尽可以看电视，或者孩子睡觉了你再看电视，孩子学习的时候你最好别看电视。你是个大人都控制不了，孩子还那么小，他更抵抗不住诱惑了。
培养习惯不是一件简单的事情，但是这并不是说习惯培养不起来，是你的方法不到位。习惯的培养是门科学。那么习惯培养的原则是什么呢？是要尊重孩子，尊重孩子的主人地位。习惯培养的目标是什么呢？是培养良好习惯来解放孩子的大脑，让孩子从一些低级的、束缚自己的不良行为习惯中解放出来。比方不磨蹭，不言而无信，不做一些低级趣味的事情，要使孩子生活得很有情趣、很有意义。
21世纪是两代人相互学习、共同成长的世纪，习惯培养的过程也是两代人相互学习、共同成长的过程。有些习惯孩子比大人形成的早，像环保，我们就要向孩子学习。父母和孩子一起成长。而且好的关系胜过许多教育，父母老师跟孩子的关系越好越有助于孩子良好习惯的形成，这样才有亲和力，亲其师信其道。
习惯决定孩子命运，教育的核心是培养健康人格，培养健康人格最有效的途径就是从培养行为习惯做起。我们抓住行为习惯培养这个根本，就抓住了家庭教育最有效的一条途径，这就是我们家庭教育最基本的任务。让我们记住这样一句名言：家庭是习惯的学校，父母是习惯的老师，儿童教育就是培养好习惯，我们通过培养好习惯来缔造孩子的健康人格。
良好行为习惯养成的六个原则 习惯的养成是行为积累的结果，孩子从某种行为中获得了成功感，自然就会重复这种行为，从而变成他的习惯。习惯决定人的性格，良好的行为习惯的培养要从小开始，从家庭开始。在促使孩子养良好的行为习惯方面，家长可遵循以下 6 个基本原则： 默契的合作 成人之间态度的不一致极大地阻碍着孩子良好习惯的培养。即使成人有不同的意见，也要在孩子不在场的时候讨论，大家在商谈中寻求一个共同的解决办法。 例如，妈妈正在称赞小华自己吃饭，不用大人帮忙，奶奶走过来说：“ 别让他自己吃了，弄得地上全是饭粒，身上又脏兮兮的。还是大人喂他吃饭，又快又干净，多省事。” 这样小华刚刚开始自己吃饭的兴味全被打断了，自助的好习惯又怎能养成呢？ 有利的环境 必须给孩子提供养成好习惯的适当环境，尽量避免任何破坏这种环境的行为。 例如我们想帮助孩子养成早睡的习惯，但今天晚上有最精彩的电视节目，明天晚上要带孩子出去做客，后天晚上家里又要请客…… 孩子根本没有早睡的机会，或者早睡的习惯尚未养成就一再遭到破坏，怎样可以养成早睡的习惯呢？ 耐心的引导 望子成龙的心情人人都有，但操之过急往往达不到预期的效果。我们不能指望孩子马上就养成许多好习惯，必须有耐心，慢慢地引导孩子。 比如亮亮每天从幼儿园回来后就喜欢看电视，谁说也不听。妈妈非常生气，一见到亮亮看电视，就走过去粗暴地把电视机关掉，任由孩子哭闹。这样不但不能帮助孩子养成不看电视的好习惯，还会造成孩子的逆反心理。
遇到这种情况，家长应耐心地给孩子说清道理，花时间陪孩子做一些他感兴趣的其他事情，时间长了，孩子就会摆脱对电视的依赖。 及时的称赞 发现孩子无意中有良好的行为表现时，家长应立即给予称赞以示鼓励，强化孩子的这种行为。 例如小明玩完了玩具，顺手把玩具收拾整齐放回原处，妈妈马上注意到这件事，对小明说：“ 小明真乖，真是一个会收拾玩具的好孩子。” 小明得到妈妈的称赞，心里非常高兴，下一次更乐意把玩具收拾好，渐渐就养成这种良好的习惯了。但家长的赞赏应着重控制在言语和态度上，尽量少用买玩具、买东西吃等鼓励方式，因为这些方式若使用不慎就会变成一种“ 贿赂” 或交易。 良好的示范 家长的一举一动都逃不过孩子的眼睛，必须以身作则，时时刻刻给孩子起到良好的示范作用。比如孩子礼貌的行为、早睡早起的行为、整齐清洁的习惯、喜欢读书的习惯等，都跟家长的日常生活习惯有很大关系。而成人不知不觉间做成的不良示范，同样会对孩子产生极大的影响。父母喜欢乱发脾气，孩子的脾气一定也不会好；父母喜欢常常骂人，孩子自然也会常常骂人。 坚决的态度 在孩子面前，家长必须有主见，做每一件事都要态度坚决。家长自己拿不定主意，孩子就会受到影响。 有一位母亲很怕她的孩子不吃她准备的食物，每次拿东西给孩子吃的时候，总是很紧张地问：“ 喜欢不喜欢吃？” 长此以往，孩子就养成了挑食的坏习惯。
实验一动物细胞培养 细胞培养是用无菌操作的方法将动物体内的组织(或器官)取出，模拟动物体内的生理条件，在体外进行培养．使其不断地生长、繁殖，人们借以观察细胞的生长、繁殖、细胞分化以及细胞衰老等过程的生命现象。 细胞培养的突出优点，一是便于研究各种物理、化学等外界因素对细胞生长发育和分化等的影响；二是细胞培养便于人们对细胞内结构(如细胞骨架等)、细胞生长及发育等过程的观察。因而细胞培养是探索和指示细胞生命活动规律的—种简便易行的实验技术，同时我们也不可忽略的另一个因素，那就是它脱离乐生物机体后的—些变化。 细胞培养技术目前已广泛地被应用于生物学的各个领域。如分子生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学、肿痛学及病毒学等 为此有必要使学生在细胞培养方面得到一些初步的感性知识，了解动物细胞培养的基本操作过程，观察体外培养细胞的生长特征，对原代细胞与传代细胞有一个基本概念。 本实验分两次进行．即清洗与消毒和传代细胞的培养与观察。 Ⅰ清洗与灭菌 一、实验目的 能独立地进行用于细胞培养的各种器皿的清洗与消毒，掌握干热灭菌法、湿热灭菌法和滤过除菌法的操作，了解化学消毒法的使用方法。 二、实验原理 清洗与消毒是组织培养实验的第一步，是组织培养中工作量最大，也是最基本的步骤。体外培养细胞所使用的各种玻璃或塑料器皿对清洁和无菌的要求程度很高。细胞养不好与清洗不彻底有很大关系。清洗后的玻璃器皿，不仅要求干净透明，无油迹，而且不能残留任何物质。如有毒的化学物质，哪怕残留0．1个，也可能影响细胞生长。灭菌手段的选择十分重要，对不同的物品需采用不同的灭菌方法。假如选用的方法不对，即使达到了无菌却使被灭菌药品丧失了营养价值、生物学特性或其他使用价值也不行。以下在每种灭菌步骤中都介绍其使用范围。 三、实验材料、用品
传代细胞培养的视频拍摄脚本 一、实验准备 器材 液氮冷冻灌、恒温培养箱、电冰箱、高压灭菌锅、磁力搅拌器、离心机、分析天平、倒置显微镜、超净工作台、弯头吸管（1个）、胶头滴管（9个）、离心管（9个）、带塞培养瓶（不定个）、试管架、量桶、烧杯、酒精灯、抽滤瓶、G6型号细菌过滤漏斗、带塞小玻璃瓶，大三角瓶、无菌冻存管、液氮瓶（一）、器皿 1玻璃器皿的清洗灭菌： 种类：小玻璃瓶、弯头吸管、滴管（3个）、培养瓶、量桶、烧杯、抽滤瓶、大三角瓶，细菌过滤器接口管 药品：5％盐酸溶液、重鉻酸钾120ml、硫酸200ml、蒸馏水200ml （1）浸泡:新使用或重复使用的玻璃器皿须经5％盐酸溶液或自来水浸泡过夜或煮沸30min，水洗。以去除新购进玻璃器皿所带有灰尘、铅、砷等物质，并消除其弱碱性。 （镜头一：实验人员将器皿放进加有5％盐酸溶液的盆内，并以字幕和配音的形式显示浸泡或煮沸时间和浸泡目的） （2）刷洗:浸泡后用软毛刷和优质的洗洁精进行刷洗。刷洗后经行烘干 （镜头二：实验人员刷洗器皿，使用正规的清洗方法，并烘干，只示范其中2--3种即可，实验人员必须介绍操作示范烘干箱的使用方法和相关数据的设置方法） （3）酸浸:刷洗后的玻璃制品酸浸前须适当晾干或烘干，以免造成酸浸液稀释，影响效果。将玻璃制品完全浸泡入清洁液中24h。清洁液具有极强酸蚀作
用，操作过程需戴防护用具。 （镜头三：带好橡胶手套将清洁液加入到盆中，让后进行酸浸，并以字幕的形式显示浸泡时间） （4）冲洗、烘干备用:浸酸后的玻璃器皿先用自来水充分冲洗，吸管需冲洗10min，器皿需每瓶灌满自来水、倒掉反复10次以上，不留任何酸浸液残迹，然后用蒸馏水漂洗2～3次 将清洗好的玻璃器皿放入烘干箱中，烘干后的玻璃器皿要求干净透明，无油烟，不能残留任何有害物质及化学药品等。 （镜头四：自来水冲洗，蒸馏水清洗，烘干一起完成，在这个过程中可在装器皿的盘中放入一定量的玻璃器皿，只对其中一种进行自来水冲洗、蒸馏水清洗，洗好后就将所有仪器放入烘干箱中烘干，并在每一个步骤中以字幕或语音的形式显示相关操作次数和时间） （5）包装灭菌:器材经清洗烤干或晾干后，先应严格包装，然后再行消毒灭菌处理，以防止消毒灭菌后再次遭受污染。包装材料常用包装纸、牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、玻璃或金属制吸管筒、纸绳等。 （镜头五：实验人员对实验器皿中的1—2种进行包装示范，然后将其他包装过的器皿一起放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌） （实验人员必须示范操作高压灭菌锅和恒温干燥箱的用法，示范操作步骤，只示范一次即可，在下面的不同灭菌温度和不同灭菌时间可以字幕的形式显示）2、橡胶制品清洗消毒 种类：玻璃瓶橡胶塞、培养瓶瓶塞、皮管、滴管头 新的橡胶制品洗涤方法：0.5mol/L NaOH煮沸15分钟，流水冲洗，0.5mol/L HCl煮沸15分钟，流水冲洗，自来水煮沸2次，蒸馏水煮沸20分钟，50℃烤干备
养成良好习惯的六个秘诀 怎样才能养成好的习惯呢？ 第一,要有目标，人活着总得有个方向。树立好目标后，就要能抵御诱惑。比如电脑游戏，虽然好玩，可真耽误事，你要是被它抓住了，陷在里面一时爽了，一辈子可就不爽了。我们的学习效率越高，玩的时间就越多，可一定要玩有益于身心健康的东西，而且一定要管住自己。人是一种很奇怪的动物，有些事是该干的，有些事是想干的，要命的是，该干的往往不想干，想干的又往往不该干，怎么办呢?只能靠管住自己，想办法把想干的纳入该干的范围，把该干的有兴趣地干好，能比较自觉地这样做了，就是成熟。能够在学习的成功中，享受巨大的快乐，那是任何游戏都不能相比的。 第二，要从小事做起，注意细节，一个人的习惯好不好，往往反映在小事上。 第三，要开好头不要开坏头，习惯是通过过程养成的，只要想好了准备做的事，就要果断地开头，不要拖，不要等。比如说我打算背单词，那就立刻开始背；我打算写日记，那就立刻开始写。一段时间之后，你觉得它已经成为你生活的一部分，到时候就自然去做了，好习惯就养成了。 第四，就是咬牙坚持，开了好头，就要持之以恒，千万不能松懈。从小学一年级开始写日记，一天都没有间断过，有累得实在不想动的时候，有病得起不来床的时候，还是咬牙顶住，把日记本放在床头，写一句也要写。事后呢，甚至会被自己的
精神所感动，进而更加珍惜自己的成果，越来越不忍心放弃，于是就形成了好的习惯。 第五，是创造好环境，可以约定几个人，大家相互督促，形成一个相互竞争、相互帮助的氛围，这个氛围一旦形成，往往对学习影响很大，从这个意义上来讲，建设一个非常好的班级，对于一个学生个人的成功，是非常重要的。 第六，是不找借口，美国的西点军校的校训就是，不准找借口。我发现现实生活中，很多人做错了，却不肯承认错误，不去深刻地认识错误的根源在哪儿，而是找一些客观原因。所以有时候，我的学生完不成任务，或者做错了事，到我这儿反反复复地解释，我就告诉他，如果你的智商、你的智慧，全用在怎么找理由上，你不觉得你的智慧用错了地方吗？我说，人最容易原谅自己，事情没做好，想办法找一些原因，让自己心安理得，这是一种坏习惯，它会让你软弱，让你偷懒，让你逃避，让你丧失勇气，让你不去反思，不去分析原因，不去总结经验，结果你丧失了智慧，从找借口到编借口，最终会丧失诚信！ 一个人要养成一种良好的习惯，可能一开始会难一点儿，但是一旦达到一定的高度，或者一旦坚持了一个阶段，形成一种自然，那么就可以说，一切进入到一种自主的状态，一个普通的学生变为一个优秀的学生，也就成了一件很容易的事了。
培养孩子好习惯的10个方法 激趣式： 激发兴趣与严格训练相结合 在训练中我强调“苦练”，提倡不怕苦，不怕烦。但只有家长的严格没有孩子的积极性往往产生“逆反情绪”，孩子会在过度的限制中，厌恶习惯训练，逃避习惯培养。 所以，训练中一定要注意调动孩子的积极性和主观能动性。要根据孩子的天性和个性来培养习惯，把“苦练”与“趣练”结合起来。 训练中要增加一定的游戏性，让训练形式多样化，成为一种愉快的活动过程。如学会使用礼貌用语，家长可以选用小品表演的形式；还可以结合故事、童话、儿歌、音乐等形式进行，让孩子在愉快、生动有趣的氛围中接受行为训练，从而达到事半功倍的效果。 分解式： 明确要求与具体指导相结合 训练中给孩子提要求要明确，要孩子养成卫生习惯就要教孩子如何刷牙、洗脸、洗脚、叠被、扫地等等。要把明确要求与具体指导结合起来，只要求不指导等于空要求，特别是年龄小的孩子更要具体指导。有些操作过程较复杂的行为要求，可采用分解操作的指导方法。如学手洗手绢、袜子等，操作时把它分解成五个步骤：一浸、二抹、三搓、四漂洗、五晾晒。这样孩子就很容易掌握其要领，且印象深刻。 家长的指导还可以扩展到更广的方面，现在国外的“生活科”课程，就是教孩子日常生活的知识，这些都可以通过分解式进行。 检查式： 检查督促与自我评价相结合 只要求不检查，就等于没要求。检查是中心环节，必须经常坚持。例如，要让孩子养成每天早晨自己叠被的生活习惯，家长就要每天检查孩子的被子叠了没有，叠得整齐不整齐，发现不合格及时纠正，这样训练才能对孩子形成良好习惯起到督促作用。但是，检查终究是外力，养成良好习惯必须靠内因，为此，家长要把检查督促与自我评价结合起来，要重视孩子的自我评价。自我评价，是孩子进步的力量源泉，只有认识到自己的行为正确与否，才会产生美化自我行为的强大动力。 制约式：
细胞传代培养的原理及操作步骤 （一）原理：细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，须进行传代再培养。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。 （二）细胞传代培养具体操作 1、细胞：贴壁细胞株 2、操作步骤 1）将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。 2)加入0.5-1ml 0.25％胰酶溶液，使瓶底细胞都浸入溶液中。 3)瓶口塞好橡皮塞，放在倒置镜下观察细胞。随着时间的推移，原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时将胰酶弃去，加入10ml培养液终止消化。 观察消化也可以用肉眼，当见到瓶底发白并出现细针孔空隙时终止消化。一般室温消化时间约为1-3分钟。 4)用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液，分到另外两到三瓶中，实践培养液塞好橡皮塞，置37℃下继续培养。第二天观察贴壁生长情况。 细胞冻存 1. 实验前准备：细胞室及工作台紫外线照射15min；培养液、PBS、胰酶、小牛血清、DMSO、恒温水 浴箱37℃预热备用；收集对数生长期细胞，在冻存前一天最好换液 2．用吸管吸出培养瓶中的细胞培养液，PBS清洗2遍吸出冲洗液，加入适量胰蛋白酶消化。 3. 适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。吸管吸取培养液吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的 细胞悬液。 4. 用吸管将培养液加入冻存管中，离心(1000r/min，10分钟)。 5. 去上清液，加入与细胞悬液等量的冻存液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀 6. 冷存管置于4℃10分钟----20℃30分钟----80℃16～18小时(或隔夜)---液氮槽vaporphase长期储 存。-20℃不可超过1h，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。 7．记录每一个冷冻管的位置以确保在以后应用时能够找到每一个冷冻管。 细胞复苏 1.室内紫外消毒；培养基、PBS于37℃恒温水浴预热备用。 2.自液氮罐中取出冷冻管，立即放入37℃水槽中快速解冻，离心。 3.去上清，加入培养基，吹打，然后移入培养瓶中，用培养基清洗冻存管，清洗液也移入培养瓶中。 4.于培养瓶中加入适量培养基，放入CO2培养箱中培养 5.记录复苏日期；次日换液。
中考心理辅导：十个步骤培养一个新习惯 培养一个新习惯并不需要有强意志力，但是需要有策略地进行。这里我列举了十个步骤希望能改进你的策略，最后成功的培养新习惯： 坚持30天——无论如何坚持新习惯三十天。这需要你95%的努力，所以一定要在第一个月里坚持、坚持、再坚持。 记录下来——温斯顿·邱吉尔曾经说过“计划表并没有用，难能可贵的是计划”。如果你想改变一个习惯，就马上计划你想干什么并且记录下来。 保持一致——你决定培养锻炼的好习惯。但是你第一天跑步;第二天改成自行车;然后第三天又换成舞蹈，这样虽然让你的习惯变得有趣，可是却很难坚持并且形成固定的习惯。在培养习惯的第一个月内，保持你的习惯内容一致，不要任意的改变。 每日培养——请问是一周内更新3个博客还是坚持更新3个博客七周更容易?我惊讶的发现，起先坚持每日更新，过了一段时间后一周内更新几次更容易。所以我建议在培养好习惯的第一月内，每日都要坚持，这样就可以更容易的将习惯变成长久的。 了解收获——如果你想培养一个永久的习惯，你就需要一点点的动力。了解你能从新习惯里获取什么利益。建立一个好的饮食习惯?那阅读一些介绍健康饮食的杂志，感受健康生活的滋味。培养节约经济支出的好习惯?搜索一下，了解这个习惯对你未来财政有什么样的影响。只有发现了这些习惯能带来的好处，你会有不断的动力促使你培养这个习惯。 提前计划——找一段适当的时间培养习惯。提前找出这个月内可能会破坏你培养的新习惯的事情，比如说假期旅游、工作日程改变
等等。提前计划可以让你避免苦心培养的减肥计划被突然起来的生 日party给搅浑了;也可以让你避免因旅游而捣乱了自己尝试建立的 节约支出的好习惯。 举行仪式——在你开始新习惯前，最好举行一个仪式。如果你想养成早起的习惯，尝试关掉闹钟，培养形成自动的生物钟。 加点糖浆——有些习惯并不固定。一个新习惯形成，必然有旧习惯被抛弃，从而产生一些空洞。比方说：减少上网时间、减少某种 形式的休息时间、减少看电视时间等等都会导致有空余的时间产生，所以你就要“加点糖浆”来填补空隙，使事情变得有连续性。 重金悬赏——每当自己成功培养了一个新习惯，就给自己一些奖赏(不一定是钱啦)。这样可以增援你的动力，让你继续坚持。 用“但是”——这是我从一位杰出的习惯培养专家那儿学会的，使用“但是”来改变习惯培养中的坏情况。每当你坚持新习惯一段 时间后，就或多或少地产生消极的想法。所以在每一个消极的想法 后面加入“但是”，并且加入一些积极的想法。比方说，“我不知 道这件事怎么做，但是!我是一个很聪明的人，会马上就学会的。”
第一单元第一课好习惯受用一生 第三课时培养好习惯教案（二） 教学目标 知识与能力目标:掌握科学的、合理的方法，培养良好的习惯。 过程与方法论目标:通过学生讲述和讨论，引导学生感知生活。充分利用教材上的“探究”活动。 情感、态度与价值观:能够在学习、生活中自觉地严格要求自己，培养良好的习惯。 教学重难点 教学重点: 好习惯的培养 教学难点:好习惯的培养 教学过程 (一)导入新课 你有这样的经历吗？ (二)进入新课 1．培养好习惯必须有完善可行的计划。 教师活动：出示材料《好孩子是“惯”出来的》 眼看暑假到了，怎么办呢？我想出了一个“遥控”的办法：和孩子一起制订一份作息时间表和计划书：进行一小时的体育活动，画三幅小国画，写三张毛笔字，然后看电视、睡午觉、看书。看电视要有选择性，买份《中国电视报》，圈出适合她看并且她也喜欢看的节目，定时看，每天看电视的时间不超过两小时。 计划订好之后，画一张表，每天登记，完成一项打一个勾。总体完成利好的奖励，否则处罚。 日复一日之后，孩子的习惯慢慢养成了，无论父母在家不在家，该做什么的时候，她会自觉去做。阅读感悟：看了这则故事，你想到了什么？ 【学生活动】制定完善可行的计划 2.培养好习惯必须有实际行动 教师活动:计划的制订,充其量是一种想法,一种愿望,梦想成真,还必须付诸行动.接下来,让我们欣赏一段名言:”心理知道该怎样,未必就能养成好习惯;必须怎样去做,才可以养成好习惯.” 学生活动:叶圣陶的名言给了我们什么启示？ 学生活动:阅读课本第11页的教材，反思自己的学习习惯，谈谈你准备如何调整改变你的学习习惯。 3.培养好习惯必须有毅力 人生不会一帆风顺,做任何事情也不会一蹴而就,习惯的培养也是如此.那我们又该如何呢?学生讲述铁杆磨成针的故事. 学生活动:这则故事给你以怎样的启示? 学生活动：你还有哪些养成好习惯的方法要与大家一起分享呢？
培养基的配置：基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置：DMS018ml+胎牛血清2ml。 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套（2.5小20 d、200 pl> 1ml）,酒精灯1盏，液器1台，斜架1台， 酒精喷壶 1 个，酒精棉球缸 1 个，污缸 1 个， 常规耗材：培养瓶（50 cm 2）,定量移液管（5ml、10ml）,枪头（1ml、200小 10 d）,培养皿，6/24/48/96孔板，医用脱脂棉球，保种管 所需试剂：gibco高糖培养基，胎牛血清，双抗，DMSO,胰酶，苯扎溴氨，75% 酒精…… 实验前准备： 所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内，用酒精喷壶喷洒实验台面，并关闭工作台打开紫外灯照射30min 后开始实验操作。 首次传代前细胞的复苏，首先用一大烧杯盛满37C的温水放于液氮罐旁边，待 细胞株取出后留上端1/3于37C水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若 种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。 实验步骤 一、原代细胞的培养 1. 紫外消毒30min 后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的 双手。 2. 将所需的培养基确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基瓶口用酒 精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3 次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放于斜架上，瓶口对准酒精灯，且放在距离酒精灯最近的位置，瓶盖置于酒精灯的另一侧。 3. 取1 个高压后的新培养瓶，瓶口在酒精灯上消毒2-3 次，旋开后分别再次消毒瓶 口和瓶盖2-3 次分别放于酒精灯两侧，把保种管在超净台外用酒精棉球擦拭下2/3 后拿进超净台内在酒精灯上消毒保种管口2-3次放于台面左手边，取1ml 移液器快速移动在酒精灯上消毒1-2 次，然后再装上枪头吸取保种管内的细胞液，悬空移入培养瓶内。 4. 拿出1 支高压后的5ml 定量移液管，在酒精灯上灼烧尾部后装于电动移液器上， 再次放于酒精灯上灼烧整个定量移液管管身2-3 次，悬空进入培养基瓶内吸取4ml 培养基再悬空移入培养瓶内，将培养瓶瓶口和瓶盖在酒精灯上消毒2-3 次后拧紧平放，在瓶身做好实验标记。 5. 将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3 次后拧紧，熄灭酒精灯，整理实验台面，取出实验试 剂及污缸等，关闭超净工作台。 6?将培养瓶放于28C,5%CO2的培养箱内培养，旋开瓶口少许。注意整个培养箱底托盘内一定要放高压后的水，且定期更换确保无菌。 在CO2培养箱内培养10-12h，瓶盖拧紧后拿出培养箱，置于荧光倒置显微镜下观察细胞贴壁情况，及细胞形态。最后更换培养液。 、培养液的更换
一年级小学生应该培养 的六个良好学习习惯 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998
一年级小学生应该培养的六个良好学习 习惯 我们的孩子，从幼儿园升入小学，有一个适应和转换的过程，此时，已经从以玩为主转到以学为主的阶段，在此后的一年内，学习习惯的养成是重中之重，这个阶段学习是很轻松的事，养成良好的学习习惯无疑于做好了坚实的基础。而这时也是年轻的父母最不重视的时候，只因父母不晓得，缺乏这方面的意识。通常经过了几年的学习，还是做作业太磨不认真，就是因为此时没有接受良好的训练。只因习惯是一种能量，如果不能及时的拥有，后劲显然就不足和艰难。以下是在几个方面提出的建议，当然每个孩子是不同的，有所侧重就能达到目的。 一、培养孩子集中精力做事情的习惯。 无论做什么事情，都要要求孩子专注，集中精力完成一件事情后再去做另外一件事情。有的小孩总是一边看电视，一边听音乐，一边做功课，这样，学习不够专心，注意力容易转移。可以采用让孩子用眼睛听的习惯培养他们集中精力，如：在安静之处，将手放在孩子的肩膀上，互相看着对方的眼睛说话，不管什么话题都没关系，每天进行一次。只要视线相连接，孩子就不得不集中注意力听，只要每天持续不断，就能培养出很会听“话”的孩子。经过训练，现在孩子回家后很快集中精力完成老师布置的作业。 二、培养孩子良好的阅读习惯。 作为家长首先要起表率作用，自己没有读书的习惯，强求孩子读书很难以理服人。从终身学习的角度来看，阅读习惯跟随并影响人的一生。阅读不仅仅
指教材，更多地是指课外读物，如童话、寓言、科普书籍等。孩子喜欢读书，养成读书习惯，可以培养听力、理解力，集中力和持久力也可在不知不觉中养成。如果孩子不喜欢看书怎么办这需要家长们的耐心。每个孩子都喜欢听故事，小学1年级还是幼儿园的延长教育，所以家长说给他听、念给他听是有必要的，最好念孩子自己想看的故事书给他听，不要强迫孩子接受大人的选择，不喜欢读书的孩子，多半讨厌看见许多密密麻麻的小字，家长可选择适合幼儿的图画书，字体要大一点的，可以先把故事中的部分情节念给孩子听，然后让孩子自己去读，并鼓励孩子把读后的感受说出来。无论孩子最后说的如何，都对他表扬和肯定。长此以往，阅读终将变成孩子的日常习惯。 三、培养孩子认真书写的习惯。 不要认为书写只是形式，对学习没有多大影响，书写的好坏直接影响到人们对书写者学习态度、学习质量、甚至个人素质的评价。书写能力是学力的指标，一个能够认真对待书写的孩子，往往也能认真对待学习及其他许多事情，还能促使其养成凡事认真仔细的好习惯，提高孩子的整体素质。所以，从一年级开始就得训练写字，家长可以准备一个日记本，当孩子放学后向家长叙述：“妈妈（爸爸），今天在学校……”时，既使只是很简单的几句话，也要鼓励他写下来，慢慢的，可以问他：“为什么这样呢”“你怎么想”“老师怎么说”等等，让孩子渐渐将文章扩大，加长。一年级的孩子喜欢使用学过的文字写字，看过之后家长要夸奖孩子、鼓励孩子、并慎重地保存起来，这有利于培养孩子认真书写，认真做事，认真做人的习惯。在学校老师也是这样来培养学生的，作业不多，但要求工整认真。 四、培养孩子养成有条理的习惯。
习惯的力量是惊人的。习惯能载着你走向成功，也能驮着你滑向失败。如何选择，完全取决于你自己。一个人一天的行为中，大约只有5%是属于非习惯性的，而剩下的95%的行为都是习惯性的。即便是打破常规的创新，最终可以演变成为习惯性的创新。 培养一个新习惯并不需要有强意志力，但是需要有策略地进行。这里我列举了十个步骤希望能改进你的策略，最后成功的培养新习惯：坚持30天——无论如何坚持新习惯三十天。这需要你95%的努力，所以一定要在第一个月里坚持、坚持、再坚持。 记录下来——温斯顿·邱吉尔曾经说过“计划表并没有用，难能可贵的是计划”。如果你想改变一个习惯，就马上计划你想干什么并且记录下来。 保持一致——你决定培养锻炼的好习惯。但是你第一天跑步；第二天改成自行车；然后第三天又换成舞蹈，这样虽然让你的习惯变得有趣，可是却很难坚持并且形成固定的习惯。在培养习惯的第一个月内，保持你的习惯内容一致，不要任意的改变。 每日培养——请问是一周内更新3个博客还是坚持更新3个博客七周更容易？我惊讶的发现，起先坚持每日更新，过了一段时间后一周内更新几次更容易。所以我建议在培养好习惯的第一月内，每日都要坚持，这样就可以更容易的将习惯变成长久的。 了解收获——如果你想培养一个永久的习惯，你就需要一点点的动
力。了解你能从新习惯里获取什么利益。建立一个好的饮食习惯？那阅读一些介绍健康饮食的杂志，感受健康生活的滋味。培养节约经济支出的好习惯？搜索一下，了解这个习惯对你未来财政有什么样的影响。只有发现了这些习惯能带来的好处，你会有不断的动力促使你培养这个习惯。 提前计划——找一段适当的时间培养习惯。提前找出这个月内可能会破坏你培养的新习惯的事情，比如说假期旅游、工作日程改变等等。提前计划可以让你避免苦心培养的减肥计划被突然起来的生日party给搅浑了；也可以让你避免因旅游而捣乱了自己尝试建立的节约支出的好习惯。 举行仪式——在你开始新习惯前，最好举行一个仪式。如果你想养成早起的习惯，尝试关掉闹钟，培养形成自动的生物钟。 加点糖浆——有些习惯并不固定。一个新习惯形成，必然有旧习惯被抛弃，从而产生一些空洞。比方说：减少上网时间、减少某种形式的休息时间、减少看电视时间等等都会导致有空余的时间产生，所以你就要“加点糖浆”来填补空隙，使事情变得有连续性。 重金悬赏——每当自己成功培养了一个新习惯，就给自己一些奖赏（不一定是钱啦）。这样可以增援你的动力，让你继续坚持。 用“但是”——这是我从一位杰出的习惯培养专家那儿学会的，使用“但是”来改变习惯培养中的坏情况。每当你坚持新习惯一段时间后，就或多或少地产生消极的想法。所以在每一个消极的想法后面加入“但是”，并且加入一些积极的想法。比方说，“我不知道这件事怎么做，
细胞复苏是将休眠的细胞重新活化，使之重新生长，进入细胞周期，进而分裂产生子细 胞的过程。细胞复苏后，可进入细胞周期，重新获得细胞类型特异的生物学功能。 一、实验前准备 实验开始前，水浴箱调节至36度恒温。取细胞完全培养基，放于水浴箱中预热。 消毒双手和超净台。取约1ml 细胞完全培养基放于15ml 离心管中。 水浴箱调节至40度恒温，由液氮中取出冻存的细胞，迅速将冻存管投入到已经预热到40度的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化，注意管口处高于水面，以免进入导致污染。整个解冻过程最好在1分钟以内，以防融化过程中产生大量冰晶损伤细胞，约1min后冻存管内液体完全溶解，用酒精喷拭冻存管的外壁，立即拿入超净台内。 注：解冻到0度时（即冻存管里还有最后一点冰）立刻转移到含培养基的离心管中。然后用5ml的热培养基以0.5ml的加入量逐步将细胞内的DMSO渗透出来，之后补全生于的培养基到细胞瓶中。 二、制备细胞悬液 吸取细胞冻存液，置于已放入细胞完全培养基的离心管中，吸取1ml培养液加入冻存管，将剩余细胞全部吸入离心管中。上下吹打5次，使冻存液与完全培养基充分混匀，尽量减少冻存液中DMSO 的浓度，减轻细胞损伤。 离心：1000rpm，室温离心3min。 注：细胞复苏后最好等几分钟再离心，因为冻存前加了胰酶消化，对细胞造成一定损伤，复苏后立即离心对细胞造成损伤较大。 三、细胞培养 离心后，倒掉上清液，缓慢操作，不要倒掉底部的细胞沉淀。向离心管内的细胞沉淀加入1ml 细胞完全培养基，反复吹打制成细胞悬液。培养瓶内加入4ml 完全培养基，细胞悬液加入培养瓶内，左右前后轻轻摇动培养瓶，把细胞摇均匀，将培养瓶放入37℃，5％CO2 的培养箱中培养。24-48 小时后换液或传代继续培养，换液传代的时间由细胞情况而定。 四、注意事项 1、解冻速度要快 在常温下，冻存液中的DMSO 对细胞的毒副作较大，因此，必须在一到两分钟内使冻 存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤。 2、一次复苏细胞不宜过多 细胞在解冻时，需要迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。并且一次复苏细胞过多，容易忘记更换吸头和吸管，导致细胞交叉污染。 3、培养瓶上注明细胞类型，日期，人名。
六年级学生培养哪些优秀习惯及品质 一、优秀习惯及品质 1．礼仪习惯： ①见到家长、领导、老师要问好；校内一律讲普通话。 ②尊重长辈，听老师教导，不顶嘴，讲话态度诚恳； ③不在教学楼、行政楼等公共场所大声喧哗；未经他人允许，不得进入各专用教室或其他处室； ④有客人来访，要热情周到，要使用“欢迎光临”、“再见”、“下次再来”等礼貌用语，并能主动让座、倒水； ⑤上下楼梯遇见老师让老师先行，同学之间高年级让低年级先行； ⑥上课回答问题先举手，跟老师说话要起立，进办公室前喊“报告”； ⑦同学要互助，不以强欺弱，不叫同学绰号； ⑧参加升降国旗，要严肃、庄重，根据学校要求穿校服，戴好红领巾，衣着整洁。 2．学习习惯： ①课前要预习，学会带着问题听课； ②上课专心听讲，会听讲，不乱说乱动，勇于提问，积极回答，抓重点，积极思考； ③作业要字体端正，纸面清洁，格式正确，不边做边玩； ④学会先复习后完成作业，先审题再解答的习惯； ⑤按时完成作业，做到独立、耐心、细致、书写规范； ⑥养成良好的读书习惯，坚持每天看半小时以上；关心国家大事，多看多听广播电视新闻，阅读报刊。 ⑦自我管理、自我评价的习惯及善于听取别人意见，虚心改错的习惯。 3．生活习惯： ①早晨早起，不睡懒觉——做勤快人； ②起床、穿衣、洗涮、整理房间行动快速——当利索人； ③吃饱饭、吃好饭、不挑食、不喧哗——做健康人； ④上学、上课不迟到——做守时人； ⑤早晚涮牙，天天洗脚，勤剪指甲常洗澡，穿戴整洁，勤洗红领巾、书包——讲卫生； ⑥积极主动打扫教室及卫生区，不在公共场所乱吃东西，不乱扔纸屑，不乱涂乱画，爱护公共财物——讲公德； 4．节俭习惯： ①利用水、电及时关闭开关，节约一度电、一滴水；
好习惯养成计划细则
精品文档 好习惯养成计划细则 好习惯，益终生。 习惯形成性格，性格决定命运。－－约·凯恩斯 不良的习惯会随时阻碍你走向成名、获利和享乐的路上去。－－莎士比亚 坚持才有习惯，习惯在于坚持。 人喜欢习惯，因为造它的就是自己。－－萧伯纳 习惯如此重要，我们要正视自己的习惯，坚持好习惯，改掉坏习惯，培养优良习惯，使自己更优秀，人生更完美。人的一生都是不断养成好习惯和改正坏习惯的过程。学生时代是人生的春天，春天是播种的季节，播下真善美的种子，开出良好习惯的花朵，收获健康人格的果实，享受美好幸福的生活。 为了这一目标，我们制定以下生活学习细则，希望你们能天天坚持。 一、生活方面 1.早晚按时起床休息，主动完成洗脸、刷牙、洗脚、喝水。（加4分，少一项扣1分） 2.每次起床后，叠好被子，整理好床铺。小学生自己穿好衣服。（加2分） 3.饭后主动收碗碟，整理桌凳。（加2分） 4.节假日自己洗衣服。（每洗一件加3分） 5.节假日主动学做、或单独做一餐饭。（加3--5分） 6.水是生命之泉，每天至少喝三杯水。（加3分，少一杯扣1分） 7.讲卫生，每天保持衣服干净整洁。（加2分） 8.每天三餐规律，不挑食，不吃垃圾食品。（加2分，吃一次垃圾食品扣2分） 9.家里来客人，或遇到熟人主动打招呼、问候。（加5分，不打招呼、害羞、躲避的扣5分） 10.家里来了客人或到外面做客主动给客人让座、倒水、发烟并和客人聊天5到10分钟。（加10分） 11.兄弟姊妹要相互关心、谦让、相互帮助，不打骂，不指责，能理解包容，和睦相处。（加5分，指责对方的扣2分，不和睦相处的扣3分，打骂对方的扣5分） 12.尊老爱幼：尊敬长辈，节日和长辈生日送上自己的祝福；关爱比自己小的孩子，不欺负小孩。（加5分） 13.没有永远的朋友，只有永远的利益。多交朋友、交好朋友。不分富贵贫贱，相识都是缘，学习别人的长处，认清他人的恶习，不刻意巴结，也不藐视讽刺，扬长避短。不了解清楚不深交，不树立矛盾，不跟风、不抢功、好人缘自然成。（交友要谨慎，交到好朋友或交友失败、交友不慎，要写出经验总结以自省，加20分） 收集于网络，如有侵权请联系管理员删除
习惯培养的六个步骤 育儿宝典 03-05 2240 习惯培养的六个步骤--孙云晓 父母们都明白，教育孩子需要用好方法。那么什么是好方法呢？在我看来，最好的也是最有效的儿童教育方法，就是培养良好的行为习惯。 有一位母亲跟我说，我的孩子真讨厌，坏毛病太多了，不爱写作业、贪吃零食、乱花钱、整天粘着电视，你说怎么办呢？我都说他八百遍了，就是改不了。 因为比较熟悉，我和她开玩笑说，“你要是这样说孩子八千遍，他就更改不了了。一位著名的儿科医生跟我说，一句话重复三遍就是对别人的折磨。你对你的孩子重复了八百遍，怎么受得了？”我建议父母们，如果不信我的话，可以把你们每天对孩子说的话录下来，录一星期放给自己听听，父母自己都会烦死。 孩子们对我抱怨说，我妈妈真烦人，每天都唠叨不完，她只要嘴唇一动，我就知道她要讲什么，因为她天天都讲一样的话。 我也惊讶地发现，全国许多父母都像克隆人，都对孩子唠叨一样的话：别看电视了，赶快写作业！你要是考不上好中学，怎么考上得好大学？上不了好大学，以后怎么找好工作？没有好工作，你喝西北风去？等等。这样的话说一遍两遍还可以，说多了之后就变成一堆噪音，只能让孩子情绪混乱信心崩溃。这是您想要的结果吗？ 实际上，没有一个孩子不想成为好孩子，也没有一个孩子不想好好学习。他学习不好一定是碰到了困难，孩子需要的是你具体有效的帮助，而不是唠叨或训斥。所以我给大家一个忠告----“训子千遍不如培养一个习惯”。 其实，今天的父母已经开始重视孩子的习惯培养，可是为什么效果不明显呢？我发现，问题在于许多父母还是把习惯培养当成了说教的内容，而忽略了习惯培养的根本途径是坚持不懈的行为训练。换句话说，习惯培养是一套科学的教育方法，需要按照其规律来做才会见效。 在这里，我愿意试着分享一下习惯培养的六大步骤，或许会给大家一些帮助。 习惯培养的第一步-----提高认识，或者说，引导孩子对养成某个习惯产生兴趣。 研究结果发现：儿童时期最好的教育莫过于养成良好的习惯。所谓的好孩子一定是有好习惯的孩子，所谓有问题的孩子一般都是坏习惯很多的孩子。一个坏习惯可能使你丧失了良机，而一个好习惯则可
十个步骤培养一个好习惯 经营管理 02-01 2203 十个步骤培养一个好习惯 培养一个新习惯并不需要有强意志力，但是需要有策略地进行。这里我列举了十个步骤希望能改进你的策略，最后成功的培养新习惯： 1.坚持30天——无论如何坚持新习惯三十天。这需要你95%的努力，所以 一定要在第一个月里坚持、坚持、再坚持。 2.记录下来——温斯顿·邱吉尔曾经说过“计划表并没有用，难能可贵的 是计划”。如果你想改变一个习惯，就马上计划你想干什么并且记录下来。 3.保持一致——你决定培养锻炼的好习惯。但是你第一天跑步；第二天改 成自行车；然后第三天又换成舞蹈，这样虽然让你的习惯变得有趣，可是却很难坚持并且形成固定的习惯。在培养习惯的第一个月内，保持你的习惯内容一致，不要任意的改变。 4.每日培养——请问是一周内更新3个博客还是坚持更新3个博客七周更 容易？我惊讶的发现，起先坚持每日更新，过了一段时间后一周内更新几次更容易。所以我建议在培养好习惯的第一月内，每日都要坚持，这样就可以更容易的将习惯变成长久的。 5.了解收获——如果你想培养一个永久的习惯，你就需要一点点的动力。 了解你能从新习惯里获取什么利益。建立一个好的饮食习惯？那阅读一些介绍健康饮食的杂志，感受健康生活的滋味。培养节约经济支出的好习惯？搜索一下，了解这个习惯对你未来财政有什么样的影响。只有发现了这些习惯能带来的好处，你会有不断的动力促使你培养这个习惯。 6.提前计划——找一段适当的时间培养习惯。提前找出这个月内可能会破 坏你培养的新习惯的事情，比如说假期旅游、工作日程改变等等。提前计划可以让你避免苦心培养的减肥计划被突然起来的生日party给搅浑了；也可以让你避免因旅游而捣乱了自己尝试建立的节约支出的好习 惯。 7.举行仪式——在你开始新习惯前，最好举行一个仪式。如果你想养成早 起的习惯，尝试关掉闹钟，培养形成自动的生物钟。 8.加点糖浆——有些习惯并不固定。一个新习惯形成，必然有旧习惯被抛 弃，从而产生一些空洞。比方说：减少上网时间、减少某种形式的休息
细胞培养的流程，从购买试剂、分装，到无菌操作、实验、观察的过程？ 对于新手来说，细胞培养真是太难了，很多的细节你不可能一下子就考虑到、预见到，因此请教细胞培养的高手就显得非常重要且可贵了。 细胞培养包括仪器的清洗、消毒灭菌，试剂的购买、配制、分装，细胞的分离，无菌操作，培养细胞的观察，实验的设计，及结果的分析等等。但这每一个过程的含金量都很高，要求非常严格。 如果你正在培养细胞，或曾经培养过细胞，你一定有很多的经验值得大家分享，你一定有你自己的一套培养细胞的流程，从哪开始到哪结束你也一定有太多的想说。因此，你不妨说说你的细胞培养流程，以便我们广大的细胞培养新借以一鉴。 于此，我先代表广大细胞培养新手谢谢各位园丁里的奉献者！ 有空整理一下再写写。。呵呵谢了先版主建议不错，我刚开始养细胞时遇到的各种困难可以说是不计其数了，解决困难耗费了大量地时间，可惜呀！ 养细胞是一项即有难度又很讲究技术的过程，作起来不易，要真正详细的写出来示人更难！书上的规范和标准很多，但作起来每人都有自己的方法，适宜就好。 我看还没有人跟帖，我就先说一点，从最初阶段开始：（自己的做法） （一）仪器的清洗 总的分为两大类：可泡酸的和不可泡酸消毒的。酸指消毒的清洁液（由浓硫酸、重铬酸钾和蒸馏水配置的次强酸液） 可泡酸的主要是玻璃仪器培养细胞的板子，离心管等塑料器皿。消毒过程：自来水冲洗3-5遍----→超声波清洗30′----→烘干----→濅入清洁液过夜（不少于6h）----→自来水冲洗15－20遍----→蒸馏水洗3-5遍，烘干备用。 不可泡酸的主要是胶塞和盖子，虑器等，先在清水中濅泡后冲洗烘干----→2%NaOH濅泡过夜，自来水冲洗，5%HCl濅泡三○min，流水冲洗----→蒸馏水漂洗----→烘干备用。 消毒好的器具一定找个干净的柜子保存，使用前高压消毒灭菌，我科室主要使用铝制饭盒分装器具，挺方便的，用前高压。 今天暂说一点，以后有机会再续，望给师弟妹们有所借鉴。斑竹不厚道，现在知道为什么没有别的战士跟贴了么？我怎么也耗了几十分钟打的字，你就这样打击别人的信心，还有可能往后面延续么！再说，经验何止这些这点...... 您的帖子我看见了，您的抱怨我也接受！并且跟您补上一分！ 每个斑竹给分的标准有一定的差别，但是可以肯定的是：我们有自己的加分原则，大原则是不变的！比如：版内讨论得很多的东西，重复发帖一般不予以加分！ 您的这个帖子属于改范畴！ 感谢您对细胞版的支持！如果有问题可以直接pm我们！ 再次感谢！再多说点啊！ 呵呵接着说呀，很好，很有帮助，我是新手，要多向你学习顶一下。我也说说我的一些体会吧。 1、首先说清洗： 对于玻璃器皿（如移液管、盖玻片之类）可先用酸液浸泡24h以上，再用清水浸泡24h。之后用清水将移液管冲洗10遍，除去残留酸液，再用双蒸水冲洗3-5遍，彻底洗净后放入不锈钢筒中，双层牛皮纸扎口，高压灭菌20min，烘干待用。我们实验室的酸液一般是次强酸液（重铬酸钾120g 浓硫酸200 mL 蒸馏水1 000 mL）配液时要小心烫伤。装培养基的瓶子则要在每次用完培养基以后就要立即洗净，临用时再次用清水冲洗3-5遍，再用双蒸水漂洗3次，洗净后瓶口盖上锡箔纸，外包双层牛皮纸扎口后高压灭菌20min，与其配套的瓶盖则洗净后另行包好同时灭菌、烘干。培养基过滤器灭菌同瓶子，也要在用完后及时洗净、
精品文档 细胞间基本规定 每次操作结束后开启超净台紫外（30 min）和房间大紫外（30 min）。 显微镜开启使用后将光调暗，最后一个操作者将显微镜关闭。 超净台用完收拾干净，移液器、盒子等摆放整齐。 带走空盒子、细胞圆盘以及封口膜等任何因你而产生的垃圾。 细胞培养盘至少需备注：所属者，细胞系名称 细胞间冰箱内物品至少需备注：所属者，物品名称。基培需写上开启时间。 细胞培养标准流程 1、细胞换液、传代（以圆盘培养为例） Note：所有用于培养细胞的液体均需提取20-30分钟从冰箱取出恢复到室温或置于37℃的水浴箱内。所有物品（包括双手）进入安全柜之前要酒精消毒。 步骤：1.观察：高倍镜下观察细胞状态、密度以及是否染菌 2.弃旧：细胞生长融合达90%时，吸出培养基 3.漂洗：PBS（2mL）漂洗1-2次 4.消化：加入1ml 0.25%胰蛋白酶，轻轻晃动圆盘让所有细胞接触到胰酶，后吸去胰酶计时CO放置40s-1min,，轻轻拍打圆盘侧壁促使细胞2 脱壁。 5.终止：吸弃胰酶后加入2ml含10?S的完全培养基终止消化。 6.吹悬：轻轻吹打混匀，(倒置显微镜下观察细胞完全脱壁，呈卵圆形)，吹打成单细胞悬液后按1：2 或1：3 比例传代接种于新培养皿。再加入10ml全培。（大盘10ml全培，小盘6ml全培） （细胞生长快留30%，慢40%-50%；其余细胞可提取蛋白或RNA） 7.培养：每天或每两天更换一次培养基，直至细胞生长至融合时再次进行传代，每日在倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况。 PS:六孔板一般加培养基2300μL/孔。 . 精品文档 2、细胞转染 TurboFect 转染试剂转染（用于质粒的转染，说明书附后） 细胞接板24 h 后转染。转染时细胞密度需达到70-90%。