耐药基因引物和SCCmec引物

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因检测

赖奋强; 郭庆昕; 杨滨; 郑韵芳

【期刊名称】《《中国人兽共患病学报》》

【年(卷),期】2019(035)008

【总页数】6页(P726-731)

【关键词】耐甲氧西林金黄色葡萄球菌; 杀白细胞毒素; 基因分型

【作 者】赖奋强; 郭庆昕; 杨滨; 郑韵芳

【作者单位】福州大学医院 福州 350002; 泉州市正骨医院 泉州 362000; 福建医科大学附属第一医院检验科 福州 350005; 福建卫生职业技术学院 福州 350101

【正文语种】中 文

【中图分类】R378.1

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,

MRSA)是全世界范围内的主要公共卫生问题，在美国每年因MRSA感染所致的死亡人数高于艾滋病[1]。这是由于社区获得性MRSA(Community-acquired

methicillin-resistant Staphylococcus aureus，CA-MRSA)的发展所致，也是急诊科中皮肤和软组织感染的主要原因[2]。然而，分子特征决定CA-MRSA菌株在医院外传播和感染健康人群的能力仍然很差[3]。细胞溶解肽，α-型苯酚可溶蛋白(Phenol-soluble modulinsα，PSMα)和α-毒素(α-toxin，hla)对CA-MRSA疾病的进展起决定性作用[4-5]，这两种毒力因子并非专门出现在CA-MRSA中，基因表达的差异可部分解释CA-MRSA菌株增强毒力的原因[4]。值得注意的是许多CA-MRSA菌株携带有编码杀白细胞素(Panton-Valentine leukocidin，PVL)的lukSF-PVL基因，而其他菌株中lukSF-PVL较少[3]，因此，PVL已被认为是导致CA-MRSA毒力增加的主要因素之一[6]。

1 材料与方法

抗生素耐药性基因的检测与监测方法探索

抗生素耐药性是当今全球医疗领域面临的一大挑战。随着过度使用和滥用抗生素，耐药菌株的出现日益普遍，已成为公共卫生领域的一种全球性威胁。因此，开发有效的抗生素耐药性基因检测与监测方法成为了当前科研工作者关注的焦点。

一、抗生素耐药性基因检测技术

1.1 PCR技术

聚合酶链反应（PCR）是最常用的无标记方法来进行抗生素耐药性基因检测。通过设计特异引物，可以扩增目标基因片段，并通过电泳等手段判断阳性样品。

1.2 DNA芯片技术

DNA芯片技术是近年来快速发展的高通量平行分析方法之一，可实现对多个基因和目标序列同时进行筛查。这种技术能够准确鉴定不同类型的抗生素耐药性相关基因。

1.3 循环延伸反应（CET）

循环延伸反应（CET）通过将靶向DNA引物连续循环和鉴定分子结构中可变区域组合起来进行多重分析，可快速而准确地检测抗生素耐药性基因。

二、抗生素耐药性基因监测方法

2.1 宏基因组学

宏基因组学是通过构建宏基因组图谱以鉴定和比较个体或环境中微生物及其功能基因的一个高通量技术。利用这种方法，研究人员可以检测和监测不同样本中抗生素耐药性相关基因的存在和表达。

2.2 PCR扩增与限制性片段长度多态性（PCR-RFLP） PCR-RFLP结合了两种技术的优点，不仅可以扩增目标序列，还可以通过限制酶切产物的长度差异来区分不同的抗生素耐药性基因。

2.3 基于下一代测序技术的元转录组学研究

利用下一代测序技术（NGS）对元转录组进行全面分析，并结合计算机算法将获得的数据进行筛选和分类，可以确定与抗生素耐药性相关的新型基因。

三、未来发展方向

随着科学技术的进步和世界范围内对抗生素耐药性问题的关注日益加深，对于抗生素耐药性基因的检测和监测方法也将不断改进和发展。

3.1 快速便携式设备

未来研究人员希望开发出手持式、快速便捷的抗生素耐药基因检测设备，使得在实验室以外的环境中也能进行检测，加快诊断和治疗的速度。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药特征

发表时间：2012-10-31T10:14:31.733Z 来源：《医药前沿》2012年第21期供稿 作者： 朱青川

[导读] 了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性。

朱青川 (福建省漳州市中医院检验科 363000)

【摘要】目的 了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性 方法 采用纸片扩散法检测MRSA对抗菌药物的耐药分析。结果 MRSA

的检出率为34.13%(43/126),多数菌株具有多重耐药性,但对万古霉素、氯霉素和复方磺胺甲口恶唑较为敏感。结论 MRSA具有多重耐药的

特征。

【关键词】葡萄球菌 金黄色 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

金黄色葡萄球菌(SAU)是临床上常见病原菌,其对抗菌药物的耐药性日趋严重,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的出现及流行,使得原来用于治疗该类细菌感染的多种抗菌药物, 如β-内酰胺类、酶抑制剂复合抗菌药物及碳青酶烯类药物不再具有疗效。耐甲氧西林金黄

色葡萄球菌(MRSA)是医院内感染常见的病原菌之一,检出的MRSA一般呈多重耐药性,增加了治疗困难,已成为日益严重的临床问题。有关医

院内感染中MR-SA研究的报道较多[１-２], MRSA的甲氧西林耐药决定簇(methicillin resistant deter minant,mecA)位于葡萄球菌盒染色体

mec(staph ylococcal cassette chromosome mec,SCC mec)上,该结构类似于转座子,可以介导mecA基因游离传播,使敏感的葡萄球菌获得甲氧西林耐药性;部分SCC mec还携带有其他多种耐药基因,是MRSA多重耐药性产生的重要遗传学基础[3-4]。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 2005年6月—2006年6月,广州、深圳和湖南省部分地区临床分离的金黄色葡萄球菌(无重复)共126株,分离自126例患者。其中116例依据2006年9月卫生部颁布的《医院感染管理办法》附则确定为医院内获得性感染。采用法国生物梅里埃API Staph试条进

- 21 - /bf Biotechnology Frontier April 2015, Volume 4, Issue 1, PP.21-25

MecA Resistant Gene Detection Based on

Biosensor

Ting Wang, Zhang Zhang, Guoming Xie#

Key Laboratory of Medical Diagnostics of Education, Department of Laboratory Medicine, Chongqing Medical University,

400016, China #Email: guomingxie@

Abstract

A novel electrochemical strategy was designed for the detection of methicillin-resistant staphylococcus epidemidis resistant gene

using methylene blue as signal tag. First, the hairpin probes are immobilized on the gold electrode, and the MCH are used to close

non-specific binding sites on the surface of the electrode. Next, the immobilized hairpin probes recognized the targets to trigger

primer extension reaction by target-induced conformational transition, leading to an ultrasensitive electrochemical bioensor. The