荧光探针的设计合成与表征

第４１卷第２２期　

２０１３年１１月　广州化工　Ｖｏ１．４１　Ｎｏ．２２　

Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２０１３　

香豆素酰胺荧光探针的合成及金属离子识别性能研究术　

陈国锋，张立艳，李弘扬　

（河北大学化学与环境科学学院，河北保定０７１００２）　

捅　要：以问氨基酚为原料，通过五步反应合成了两个香豆素酰胺荧光探针：Ｎ一（２一羟乙基）一２一（（４一甲基一２一氧代一　

２Ｈ一苯并吡喃一７一基）氨基）乙酰胺（Ｃ１）和Ｎ一（３一羟丙基）一２一（（４一甲基一２一氧代一２Ｈ一苯并吡喃一７一基）氨基）乙酰胺　

（Ｃ２），以　Ｈ　ＮＭＲ，”Ｃ　ＮＭＲ和质谱对所化合物的结构进行表征。在乙腈中，该类探针对Ｆｅ　和ｃｕ　有淬灭作用，其中ｃ２对　

Ｃｕ“具有较高的选择性。　

关键词：荧光探针；香豆素；酰胺；金属离子　

中图分类号：０６９　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１—９６７７（２０１３）２２—００５２—０３　

Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　Ａｍｉｄｅ——ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　Ｃｏｕｍａｒｉｎ　Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　

Ｐｒｏｂｅｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　Ｒｅｃｏｎｇｎｉｔｉｏｎ　ｔｏ　Ｍｅｔａｌ　Ｉｏｎｓ　

ＣＨＥＮ　Ｇｕｏ一　ｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｌｉ—ｙａｎ，ＬＩ　Ｈｏｎｇ—ｙａｎｇ　

（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｈｅｂｅｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｅｂｅｉ　Ｂａｏｄｉｎｇ　０７　１　００２，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｗｏ　ｎｏｖｅｌ　ａｍｉｄｅ—ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｐｒｏｂｅｓ，Ｎ一（２一ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙ１）一２一（（４一ｍｅｔｈｙｌ一　

２一ＯＸＯ一２Ｈ—ｃｈｒｏｍｅｎ一７一ｙ１）ａｍｉｎｏ）ａｃｅｔａｍｉｄｅ（ＣＩ）ａｎｄ　Ｎ一（３一ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙ１）一２一（（４一ｍｅｔｈｙｌ一２一ＯＸＯ一２Ｈ—　

ｃｈｒｏｍｅｎ一７一ｙ１）ａｍｉｎｏ）ａｃｅｔａｍｉｄｅ（Ｃ２）ｗｅｒｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｍ—ａｍｉｎｏｐｈｅｎｏｌ　ａｓ　ｓｔａｒｔｉｎｇ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｂｙ　ｆｉｖｅ　ｓｔｅｐｓ　ｏｆ　

一种基于罗丹明b衍生物的多通道荧光探针及制备方法与应用

嘿，朋友们！今天我要给你们讲个超酷的东西——基于罗丹明b衍生物的多通道荧光探针。这玩意儿就像是荧光世界里的超级特工，有着各种神奇的本领。

先来说说这罗丹明b衍生物，它就像是荧光界的魔法原料。制备这个多通道荧光探针的时候啊，就像是在做一道超级复杂又超级有趣的魔法料理。首先呢，得把各种原料准备好，那些原料就像是一群小士兵，在反应容器这个战场上准备大干一场。

制备方法有点像一场精心编排的舞蹈。各种化学试剂要按照特定的顺序和比例加入，就像舞蹈演员要按照编排好的舞步依次登场。比如说，要在合适的温度下进行反应，这个温度啊，就像是指挥这场化学舞蹈的指挥家手中的指挥棒，稍微偏差一点，整个舞蹈就乱套啦。

这多通道荧光探针一旦制备成功，那可不得了，就像孙悟空有了火眼金睛一样。它可以在不同的环境下，像在酸性环境里，就像是一个敏锐的酸侦探，荧光颜色会发生特定的变化。在金属离子的环境中呢，又像是金属离子的追踪小能手，能准确地捕捉到它们的存在并且通过荧光信号告诉我们，就好像是在和金属离子玩捉迷藏，它总能一下子就把对方找到。

它的应用那更是广泛得不像话。在生物检测领域，它就像是一个小小的生物间谍，悄无声息地潜入细胞内部，探测细胞内的各种信息。不管是检测细胞内的酸碱度变化，还是发现那些隐藏起来的有害物质，它都能轻松搞定。就像一个无所不能的小侦探，在微观世界里穿梭自如。

在环境检测方面，这个多通道荧光探针就像是一个环境卫士。如果有污染物质像小偷一样偷偷潜入环境中，它立马就能通过荧光信号发出警报。无论是水里的重金属污染，还是空气中的有害气体，它都能像嗅探犬一样敏锐地察觉到。

而且啊，这个探针的多通道特性就像是拥有好几把不同的钥匙，可以打开不同的检测之门。每一个通道都像是一个独特的信号通道，就像收音机的不同频道一样，各自传递着独特的信息。

它的稳定性也是杠杠的，就像一个坚强的小战士，不管是在复杂的化学环境还是物理环境中，都能坚守岗位，稳定地发挥自己的荧光探测功能。

ict机理荧光探针

ICT机理荧光探针

一、引言

ICT（Intra-molecular Charge Transfer）机理荧光探针是一种基于分子内电荷转移的荧光探针。该探针通过分子内部的电荷转移过程，实现对分子结构和环境的敏感检测，具有广泛的应用前景。本文将介绍ICT机理荧光探针的基本原理、应用领域以及发展前景。

二、ICT机理荧光探针的基本原理

ICT机理荧光探针基于分子内电荷转移的原理，其核心是分子内部的电子从一个部分转移到另一个部分。这种电荷转移过程会导致分子的激发态发生变化，从而引起荧光发射的变化。ICT机理荧光探针通常由供体和受体两个部分组成，其中供体部分具有较高的电子亲和力，受体部分则具有较高的电离能。在基态下，供体和受体之间存在电荷转移的平衡状态。当供体和受体之间的电荷转移受到外界条件的影响时，这种平衡状态会发生改变，进而导致荧光发射的变化。ICT机理荧光探针的荧光发射强度和颜色可以通过控制供体和受体之间的电荷转移过程来调控，从而实现对分子结构和环境的敏感检测。

三、ICT机理荧光探针的应用领域

1. 生物传感器

ICT机理荧光探针具有高灵敏度和高选择性的特点，可以用于生物传感器的设计与制备。通过引入适当的生物识别分子，ICT机理荧光探针可以实现对生物分子的高效检测和定量分析。例如，利用ICT机理荧光探针可以实现对生物标志物的检测，从而在生物医学领域中应用于疾病诊断和治疗。

2. 环境监测

ICT机理荧光探针对环境中的物理和化学参数敏感，可以用于环境监测。例如，通过引入特定的环境敏感基团，ICT机理荧光探针可以实现对温度、pH值、金属离子等环境参数的检测。这种探针可以应用于环境污染监测、食品安全检测等领域，为环境保护和公共安全提供有力支持。

3. 化学分析

ICT机理荧光探针可以用于化学分析领域。通过引入适当的功能基团，ICT机理荧光探针可以实现对有机物或无机物的快速、高效检测。这种探针可以应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域，为化学分析提供新的方法和手段。

实验室很多同学都要做Real time PCR实验，实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见，不过也有实验室前没有做过的，查找了下资料和大家分享下关于实时荧光Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。

荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交探针(荧光共振能量传递探针)和分子信标Molecular Beacon。

广泛使用的TaqMan探针法是指PCR扩增时在加入一对引物的同时另外加入一个特异性的荧光探针，该探针只与模板特异性地结合，其结合位点在两条引物之间。探针的5′端标记有荧光报告基团(Reporter, R)，如FAM、VIC等，3′端标记有荧光淬灭基团(Quencher, Q)，如TAMRA等。当探针完整的时候，5′端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团淬灭，仪器检测不到5′端报告基团所激发的荧光信号(就是说5’荧光基团的发射波长正好是3’ 荧光基团的吸收波长，因而能量被吸收传递到3’荧光基团而发出其它荧光)。随着PCR的进行，Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针，其5′-3′外切酶活性(此活性是双链特异性的，游离的单链探针不受影响)就会将切割探针，释放5′端报告基团游离于反应体系中，远离3′端荧光淬灭基团的屏蔽，5′端报告基团受激发所发射的荧光信号就可以被探头检测到。也就是说每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。报告信号的强度就代表了模板DNA的拷贝数。

(请注意，该图显示的不是普通的Taqman探针法，而是Taqman MGB探针法)Taqman探针检测的是积累荧光。常用的荧光基团有FAM，TET，VIC，HEX等等。当探针完整的时候，由于3′端的荧光淬灭基团在吸收5′端报告基团所发射的荧光能量，本身会发射波长不同的荧光而导致本底高，因此TaqMan探针近来又有新的发展——TaqMan MGB探针。MGB探针的淬灭基团采用非荧光淬灭基团(Non-Fluorescent