配制室配制工作基本规范
1．进入配制室工作人员必须衣帽整洁，着装符合配制室工作要求；
2．配制人员必需进行快速手消毒剂洗手、佩戴口罩、帽子，更换配制服、拖鞋再次进行快速手消毒剂洗手后方可进入配制室。
（洗手指征：进出配制室前后、接触营养制剂包装前后、配制工作开始前后、接触非营养制剂物品后）
3．配制工作开始之前工作人员应将手用洗手液洗净，用流动水冲洗干净，方可开始进行配制。
4．在配制工作中配制人员身体不得与配制台直接接触。
5．配制工作结束后要保持三洁。
（配制台面清洁、配制缸内外清洁、配制好的营养液瓶身清洁）
6．在配制工作中，做到不浪费营养制剂，保证患者利益。要密闭保存好未及时使用完毕的营养粉剂。
（称重前查看营养粉剂的生产日期）
7．每类成品营养液取200ml做留样，放置留样冰箱48小时。
8．配制好后的营养液，再次核对患者营养标签，核对无误后放入分发保温箱。
常用液体配制标准操作规程（SOP）
国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心
二〇〇八年九月修订 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 常用液体配制SOP
2 目录
一、细菌培养系统（责任人：郑子峥）
二、DNA操作系统 （责任人：罗文新、陈瑛炜）
三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕）
四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛）
五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、）
六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）
国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 常用液体配制SOP
3
一、细菌培养系统
1、LB培养基:
每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O配制，再用10M NaOH调pH至7.4(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:
LB培养基中加入琼脂至1.5％，高压蒸汽灭菌15min后使用。
3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）：
注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。
4、2.5%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan）
注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含0.5g卡那霉素。取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养：
目的：规范指示剂的配制，确保检验结果的准确性。
范围：适用于化验室所有的工作人员
职责：化验室主任对本规程的实施负责
内容：该配制方法根据GB/T 603-2002标准制定
1 甲基橙指示剂（1g/L）：称取0.1g甲基橙，溶于70℃的蒸馏水中，冷却，稀释至100mL
2 酚酞指示剂 （10g/L）：称取1g酚酞，溶于乙醇（95%），用乙醇（95%）稀释至100mL
3 溴甲酚绿-甲基红
溶液I：称取0.1g溴甲酚绿，溶于乙醇（95%），用乙醇(95%)稀释至100mL
溶液II：称取0.2g甲基红，溶于乙醇（95%），用乙醇(95%)稀释至100mL
将2种溶液混合，摇匀
4 二甲酚橙指示剂（1g/L）：溶解25mg二甲酚橙钠盐于25ml蒸馏水中，混匀
5 甲基红指示液：取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围 pH4.2～6.3（红→黄）。
6 溴麝香草酚蓝：取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol／L的氢氧化钠溶液3.2ml使溶解， 加 水稀释至200ml，即得。pH变色范围6.0(黄色)～7.6(蓝色)。
7 0.1%二苯胺硫酸溶液：取二苯胺0.1g，加硫酸100ml使溶解，即得。
8 10％氯化钾溶液：取氯化钾10g，加水使溶解成100ml，即得。
9 0.05 mol/L氢氧化钠溶液：取0.2g分析纯氢氧化钠，用水稀释至100ml。
10 稀盐酸溶液：取盐酸234ml，加水使稀释至1000ml，即得。本液含HCl应为9.5%-10.5%。
11 对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1→100）：取氨基苯磺酰胺1g，加稀盐酸溶液使溶解成100ml。
12 盐酸萘乙二胺溶液（0.1→100）：取盐酸萘乙二胺0.1g，加水使溶解成100ml。
13 碱性碘化汞钾试液：取碘化钾10g，加水10ml溶解后，缓缓加入二氯化汞的饱和水溶液，随加随搅拌，至生成的红色沉淀不再溶解，加氢氧化钾30g，溶解后，再加二氯化汞的饱和水溶液1ml或1ml以上，并用适量的水稀释使成200ml，静置，使沉淀，即得。用时倾取上层的澄明液应用。
v1.0 可编辑可修改
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常用液体配制标准操作规程（SOP）
国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心
二〇〇八年九月修订
22 目录
一、细菌培养系统（责任人：郑子峥）
二、DNA操作系统 （责任人：罗文新、陈瑛炜）
三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕）
四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛）
五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、）
六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）
一、细菌培养系统
1、LB培养基:
33 每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O配制，再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:
LB培养基中加入琼脂至％，高压蒸汽灭菌15min后使用。
3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）：
注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
4、%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan）
注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含卡那霉素。取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养：
配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm培养。剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。
44 6、化学感受态制备：
1）原理:：
细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态，这时的菌细胞称为感受态细胞（Competent cell）。将细菌置于0℃，低渗CaCl2 溶液中时，菌细胞壁和膜的通透性增强，菌体膨胀成球型。外源DNA与Ca2+形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面，在经42℃短暂的热冲击处理（一般热休克90s）后能促进细胞吸收外源DNA复合物。
第1页 共3页 SOP-QM-426-00 执行日期： 年 月 日
题目 滴定液配制、标定操作规程
起草： 年 月 日 部门审核： 年 月 日
质量部审查： 年 月 日 批准： 年 月 日
发放部门 质量部
目的：规范滴定液配制、标定操作法
范围：滴定液
职责：检验室对本规程的实施负责
正文：
1.简述
1.1滴定液系指在容量分析中用于滴定被测物质含量的标准溶液，具有准确的浓度（取4位有效数字）。
1.2滴定液的浓度以“mol/L”表示,其基本单元应根据药典规定。
1.3滴定液的浓度值与其名义值之比,称为“F”值，常用于容量分析中的计算。
2.仪器与用具
2.1分析天平 其分度值应为0.1mg或小于0.1mg。
2.2滴定管 应附有该滴定管的校正曲线。
2.3移液管 其真实容量应经校准，并附有校正值。
2.4容量瓶 应符合国家A级标准，或附有校正值。
3.试药与试液
3.1均应按照中国药典附录XV F“滴定液”项下的规定取用。
3.2基准试剂应有专人负责保管与领用。
4.配制
——滴定液的配制方法有间接配制法与直接配制法两种，应根据规定选用，并应遵循下列有关规定。
4.1所用溶剂“水”，系指注射用水或纯化水，在未注明有其他要求时，应符合中国药典“纯化水”项下的规定。
4.2采用间接配制法时，溶质与溶剂的取用量均应根据规定量进行称取或量取，并使制成后滴定液的浓度值应为其名义值的0.95-1.05；如在标定中发现其浓度值超出其名义值的0.95-1.05范围时，应加入适量的溶质或溶剂予以调整。当配制量大于1000ml时，其溶质与溶剂的取用量均按比例增加。
4.3采用直接配制法时,其溶质系采用“基准试剂”，并按规定条件干燥至恒重后称取，取用量应为精密称定（精确至4-5位有效数字），并置1000ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀。配制过程中应有核对人，并在记录中签名，以示负责。
