磷酸三钙钙磷测定方法

4 试验方法本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和符合GB 668规定的三级水。

试验中所需标准溶液、制剂在没有注明其他规定时，均按GB 601、GB 603的规定制备。

4．1 磷酸盐含量的测定4．1．1方法提要在酸性介质中，膦酸盐和亚磷酸在硫酸和过硫酸铵存在下，加热，氧化成磷酸。

利用钼酸铵、酒石酸锑钾和磷酸反应生成锑磷钼酸配合物，以抗坏血酸还原成“锑磷钼蓝”，用吸光光度法测定总磷酸盐（以PO43-计）的含量。

然后再减去磷酸（以PO43-计）和亚磷酸（以PO33-计）的含量，计算出膦酸盐含量。

4.1.2试剂和材料4.1.2.1磷酸盐（以PO43-计）标准储备液：1ml，溶液含有0.500mg PO43-称量0.7165克预先在100℃～105℃干燥至恒重的磷酸二氢钾(GB1274)，精确至0．000 2g。

置于烧杯中，加水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

4.1.2.2磷酸盐（以PO43-计）标准溶液：1ml溶液含有0.020mg PO43-吸取20.00ml磷酸盐标准储备液(4．1．2．1)于500ml容量瓶中，用水稀释至刻度．摇匀；4.1.2.3钼酸铵溶液：称量6.0g钼酸铵（GB657）溶于约500ml水中，加入0.2g酒石酸锑钾及83ml硫酸（GB625），冷却后用水稀释至1000ml，摇匀。

储存于棕色试剂瓶中，储存期6个月；4.1.2.4抗坏血酸溶液：称量17.6g抗坏血酸溶于约50mL水中．加入0.2g乙二胺四乙酸二钠（GB1401）及8ml甲酸，用水稀释至1000ml，摇匀。

储存于棕色试剂瓶中，储存期15d；4.1.2.5硫酸(GB625)： c(1/2H2SO4)＝lmo1/L溶液：4.1.2.6过硫酸铵(GB656):24．0g/L溶液，贮存期7天。

4.1.3仪器和设备:一般实验室用仪器。

4.1.3.1分光光度计：波长范围400～800nm4.1.3.2可调电炉：800W4.1.4 分析步骤4．1．4．1 试液制备4.1.4.1.1 称量约3.0g试样，精确至0.0002g，用水溶解后移至500ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

总磷的测定1、方法原理在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应，生成磷钼杂多酸，被还原剂抗坏血酸还原，则变成蓝色络合物，通常即称磷钼蓝。

2、干扰及消除砷含量大于2mg/L有干扰，可用硫代硫酸钠去除。

硫化物含量大于2mg/L有干扰，在酸性条件下通氮气可以去除。

六价铭大于50mg/L有干扰，用亚硫酸钠去除。

亚硝酸盐大于1mg/L有干扰，用氧化消解或加氨磺酸均可以去除。

铁浓度为20mg/L，使结果偏低5%；铜浓度达10mg/L不干扰；氟化物小于70mg/L是允许的。

海水中大多数离子对显色的影响可以忽略。

3、方法的适用范围本方法最低检出浓度为0.01mg/L （吸光度A=0.01时所对应的浓度）；测定上限为0.6mg/L。

可适用于测定地面水、生活污水及日化、磷肥、机加工金属表面磷化处理、农药、钢铁、焦化等行业的工业废水中的正磷酸盐分析。

仪器分光光度计。

试剂1、1+1硫酸。

2、10% (m/V)抗坏血酸溶液：溶解10g抗坏血酸于水中，并稀释至100ml。

该溶液贮存在棕色玻璃瓶中，在冷处可稳定几周。

如颜色变黄，则弃去重配。

3、钼酸盐溶液：溶解13g钼酸铵［(NH 4 ) 6 Mo 7 O 24 • 4H 2 O］于100ml水中。

溶解0.35g酒石酸锑氧钾［K(SbO)C 4 H 4 O 6 • 1/2H 2 O］于100ml水中。

在不断搅拌下，将钼酸铵溶液徐徐加到300ml (1+1)硫酸中，加酒石酸锑氧钾溶液并且混合均匀。

4、浊度一色度补偿液:混合两份体积的(1+1)硫酸和一份体积的10% (m/V)抗坏血酸溶液。

此溶液当天配制。

5、磷酸盐贮备溶液：将磷酸二氢钾(KH 2 PO 4 )于100°C干燥2小时，在干燥器中放冷。

取0.217g溶于水，移入1000ml容量瓶中。

加(1+1)硫酸5ml，用水稀释至标线。

此溶液每毫升含50.0p g磷(以P计)。

6、磷酸盐标准溶液：吸取10.00ml磷酸盐贮备液于250ml容量瓶中，用水稀释至标线，此溶液每毫升含2.00M g磷。

饲料级磷酸三钙情况介绍饲料级磷酸三钙是由石灰石或磷矿石经过矿石选矿、矿石破碎、河砂洗选、煅烧、除杂处理等工序加工而成的。

它是一种无色结晶体，具有高溶解性和可溶性钙磷比例的稳定性。

磷酸三钙的化学式为CaHPO4（磷酸钙），属于无机化合物。

它的化学性质稳定，具有较高的生物利用率，可有效补充动物体内的磷元素，并提高饲料的磷含量。

饲料级磷酸三钙主要用于饲料中的磷补充。

作为重要的矿物质元素，磷对动物的生长和发育具有重要影响。

缺乏磷会导致动物骨骼发育不良、牙齿贫瘦、毛发稀疏、免疫力低下等问题。

因此，在动物饲料中添加适量的磷酸三钙，可确保动物获得足够的磷元素，提高其生长和发育的质量和效率。

1.高生物利用率：与磷矿石相比，饲料级磷酸三钙的生物利用率更高。

它在动物体内容易被吸收和利用，能够更好地满足动物对磷的需求。

2.稳定的钙磷比例：磷酸三钙中的磷和钙的比例是稳定的，对动物的钙磷平衡起到良好的调节作用。

这对于动物的骨骼健康和生长非常重要。

3.改善饲料品质：添加适量的磷酸三钙可以提高饲料的磷含量，改善饲料的营养平衡，弥补矿物质的不足。

饲料中磷酸钙的添加可以提高饲料的稳定性和可加工性，有利于饲料的保存和运输。

此外，饲料级磷酸三钙还具有一些其他的特点和应用情况：1.抗霉变作用：饲料级磷酸三钙具有一定的抗霉变作用，能有效抑制饲料中霉菌的生长，延长饲料的保质期。

2.低重金属含量：饲料级磷酸三钙经过专业的生产工艺处理，其重金属含量较低，符合食品安全和环保的要求。

3.广泛应用于各种动物饲料中：饲料级磷酸三钙广泛用于家禽饲料、畜牧饲料、水产饲料等不同的饲料配方中。

不同种类的动物对磷的需求量和比例不同，可以根据动物的具体需求进行合理的添加使用。

总的来说，饲料级磷酸三钙是一种重要的饲料添加剂，可提供动物所需的磷元素，改善饲料的矿物质平衡，促进动物的生长发育，提高饲料的品质。

由于其优良的特性和广泛的应用范围，饲料级磷酸三钙在动物饲料生产中占据着重要地位。

磷含量的测定磷钼蓝分光光度法通过分析PO43-，可了解水垢缓蚀剂有效成分的变化情况，若PO43-过高，易引起磷酸三钙沉淀，难于消除。

1 适用范围循环水中总磷包括总无机磷酸盐和有机磷酸盐总和，总无机磷酸盐包括正磷酸盐和聚磷酸盐。

本标准适用于PO43-0.02～50mg/L工业循环冷却水中正磷酸盐、总无机磷酸盐、总磷含量的测定。

2 正磷酸盐含量的测定2.1 方法原理在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵反应生成黄色的磷钼杂多酸，再用抗坏血酸还原成磷钼蓝，于710nm最大吸收波长处分光光度法测定。

12（NH4）2MoO4+H3PO4+24H+→［H2P（Mo3O10）4］-+24NH4++12H2O磷钼黄［H2PMo12O40］ + C6H8O6 → H3PO4·10MOO3·Mo2O5磷钼蓝磷钼蓝颜色（蓝色）的深浅与PO43-含量成正比，故可用分光光度法测定。

2.2 试剂2.2.1 磷酸二氢钾：AR2.2.2 硫酸溶液：1+12.2.3 抗坏血酸溶液 20g/L：称取10克抗坏血酸，精确至0.5克，称取0.2克乙二胺四乙酸二钠盐（简称EDTA），精确至0.01克，溶于200ml水中，加入8.0ml甲酸，用水稀释至500ml，混匀，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）。

2.2.4 钼酸铵溶液 26g/L：称取13克钼酸铵，精确到0.5克，0.5克酒石酸锑钾(KSbOC4H4O6·1/2H2O)，精确至0.01克，溶于200ml水中，加入230ml（1+1）硫酸溶液，混匀，冷却后，用水稀释至500ml，混匀，贮于棕色瓶中（有效期两个月）。

2.2.5 磷酸根标准贮备溶液（0.5mg/ml）：称取0.7165克预先在100～105℃干燥并已恒重过的磷酸二氢钾，精确至0.0002克，溶于约500ml水中，定量转移至1升容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

2.2.6 磷酸根标准工作溶液（0.02mg/ml）准确吸取20.00ml磷酸根标准贮备溶液（2.2.5）于500ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

饲料级磷酸氢钙中磷的测定一、原理在酸性介质中，试验溶液中的磷酸根全部与加入的喹钼柠酮形成磷钼酸喹啉沉淀，过滤、干燥、称重，计算出磷含量。

二、试剂和材料（1）盐酸溶液：（1+1）水溶液（2）硝酸溶液：（1+1）水溶液（3）喹钼柠酮溶液的制备：①称取70g钼酸钠溶解于150mL水中。

②称取60g柠檬酸溶解于150mL蒸馏水和85mL（1+1）硝酸中。

③在搅拌下将溶液①倒入溶液②中。

④在100mL水中加入35mL硝酸和5mL喹啉。

⑤将溶液④倒入溶液③中，放置24h后，用坩埚式过滤器过滤，再加入280mL丙酮，用水稀释至1000mL，混匀。

贮存在聚乙烯瓶中备用。

三、仪器、设备（1）玻璃砂坩埚：孔径为5~15um。

（2）电烘箱：温度能控制在180±5℃。

四、测定步骤1.试验溶液A的制备称取约1g试样（精确至0.0002g），置于250mL容量瓶中，加10mL盐酸溶液，用水稀释至刻度，摇匀。

此溶液为试验溶液A，用于磷和钙含量的测定。

2.空白溶液的制备除不加试样外，其他加入的试剂量与试验溶液的制备完全相同，并与试样同时进行同样的处理。

3.测定用移液管移取20mL试验溶液A和空白溶液分别置于250mL烧杯中，加入10mL硝酸溶液，加水至总体积约100Ml，加热煮沸5min后，加入50mL 喹钼柠酮溶液，盖上表面皿，保温30s（在加入试剂和加热过程中，不得使用明火，不得搅拌，以免凝结成块）冷却。

在冷却的过程中搅拌3~4次，用预先在180±5℃下烘干至恒重的玻璃砂坩埚抽滤。

先将上层清液过滤，用倾斜法洗涤沉淀6次，每次用水约30mL，最后将沉淀移入玻璃砂坩埚中过滤，再用水洗涤沉淀3次，将玻璃砂坩埚连同沉淀置于电烘箱中从温度稳定时计时，在180±5℃下干燥45min，取出稍冷后，置于干燥器中冷却至室温，称重。

五、计算以质量百分数表示的磷（P）含量按下式计算：磷含量（%）=六、允许误差取平行测定结果的算术平均值为测定结果。

枸溶磷指能被中性柠檬酸铵溶液或用c（EDTA）=0.2mol/L溶液提取的磷。

枸溶磷一般是评价磷酸氢钙质量好坏的指标，通常暗指有效磷，枸溶磷占总磷的百分比越高，说明该磷酸氢钙的质量越好。

枸溶磷的测定方法一.试剂:1.柠檬酸;2.无水乙醇;3.氨水;4.盐酸溶液1+1;5.硝酸溶液1+1;6.•中性柠檬酸铵溶液:溶解74g柠檬酸于300毫升水中,加69毫升氨水,在酸度计上用氨水调节PH值为7.0,用比重计测其比重为1.09(20℃).将溶液贮存于密闭的瓶中备用(如长期使用,用前校正其酸度)7.喹钼柠酮溶液的制备:a.称取70g钼酸钠溶解于150毫升水中;b.称取60g柠檬酸溶解于150毫升水中和85毫升硝酸中;c.在搅拌下将溶液a倒入溶液b中;d.在100毫升水中加入35毫升硝酸和5毫升喹啉;e.•将溶液d倒入溶液c中,放置24小时后,用坩锅式过滤器过滤,再加入280毫升丙酮,用蒸馏水稀释至1000毫升,混匀,并贮存于聚乙烯瓶中.二.测定:称取1g样品,•准至0.0002g,置于250毫升容量瓶中,加入100毫升中性柠檬酸铵溶液,将容量瓶置于(65±1)•℃的水浴中保温1小时,时常打开瓶塞,每隔15分钟摇动一次,每次摇动30秒钟,取出容量瓶,冷却至室温,加水至刻度,摇匀,干过滤,弃去初始的30毫升滤液,用移液管移取20毫升试验溶液置于250毫升烧杯中,•加入10毫升硝酸溶液,加水至总体积100毫升,•加热煮沸5分钟后,加入50毫升喹钼柠酮溶液,盖上表面皿,保温30秒(再加入试剂和加热过程中,•不得使用明火,不得搅拌,以免凝结成块),冷却,在冷却过程中搅拌3-4次,•用预先在(180±5)℃下烘至恒重的玻璃砂坩锅抽滤,先将上层清液过滤,再用倾泻法洗涤沉淀6次,•每次约用水30毫升,最后将沉淀移入玻璃砂坩锅中过滤,再用水洗涤沉淀3次,将玻璃砂坩锅连同沉淀置于干燥箱中从温度稳定时计时,在(180±5)℃下干燥45分钟,取出稍冷后,置于干燥器中冷却至室温,称重;同时做空白试验.三.结果计算:(m1-m2)*0.0014X=───────── * 10020m* ───250式中:m1----试验溶液中生成磷钼酸喹啉沉淀的质量,g;m2----试验空白中生成磷钼酸喹啉沉淀的质量,g;m-----试样的质量,g;0.00140-----磷钼酸喹啉换算成磷的系数.饲料级磷酸氢钙(HG 2636-94)标准规定枸溶磷≥9%即可视为磷酸氢钙。

过磷酸钙肥料中磷含量的测定方法探讨过磷酸钙是一种常用的磷肥，其磷含量的准确测定非常重要。

以下是在过磷酸钙肥料中磷含量测定方法的探讨：1.加以浸渍法：加以浸渍法是常用的磷肥磷含量测定方法之一、该方法的基本原理是将过磷酸钙肥料样品加以酸溶液（如稀盐酸）浸渍后，使磷溶出，然后用酸溶液浸渍方法测定浸渍液中磷的含量。

具体步骤如下：a.取一定质量的过磷酸钙肥料样品，粉碎并称取一定量的样品。

b.将样品加入一定量的酸溶液中，进行浸渍。

c.过滤浸渍液，得到溶液。

d.用酸溶液浸渍法，测定磷的含量。

2.光度法：a.取一定质量的过磷酸钙肥料样品，进行酸化处理，酸化后沉淀中含有磷酸根。

b.将沉淀物溶解在稀酸（如硝酸）中，并与显色剂混合。

c.记录溶液的吸光度，利用标准曲线计算出磷的含量。

3.ICP法：ICP（电感耦合等离子体）法是现代化学分析中常用的一种测定磷含量的方法。

该方法基于样品中的磷原子在电感耦合等离子体燃烧室中激发发射特定频率的光谱线。

具体步骤如下：a.取一定质量的过磷酸钙肥料样品，进行酸溶。

b.将样品溶液注入ICP仪器中，加热燃烧以激发光谱线。

c.通过光谱线的测量，获得磷元素的浓度。

4.液相色谱法：液相色谱法（HPLC）是一种高效分析技术，可用于测定过磷酸钙肥料中磷的含量。

该方法通过将样品分离后，通过比色法进行测定。

具体步骤如下：a.取一定质量的过磷酸钙肥料样品，进行样品制备和稀释。

b.使用液相色谱仪分离样品中的磷化合物。

c.使用比色法进行测定，通过测量吸光度计算出磷的含量。

综上所述，过磷酸钙肥料中磷含量的测定方法包括加以浸渍法、光度法、ICP法和液相色谱法等。

根据不同实际情况，可以选择合适的方法进行磷含量的测定。

每种方法都有其特点和适应范围，在实际应用过程中要综合考虑各方面因素选择最合适的测定方法。

现代农业科技2024年第4期动物科学·生物技术解磷真菌分离鉴定及其溶磷能力分析姜焕焕张嘉敏梁云燕范宇清何洪活（肇庆学院生命科学学院，广东肇庆526061）摘要解磷菌能够溶解土壤中的难溶性磷或不溶性磷，在促进土壤养分循环和植物生长方面起着重要作用，是生物肥料中重要的微生物资源。

本研究采用稀释涂布平板法筛选得到5株解磷真菌（菌株SZ1、SZ2、GZ1、GZ2、HZ1），对菌株进行分子生物学鉴定，并利用液体摇瓶法测量菌株对磷酸三钙的溶磷能力。

结果表明，菌株SZ1、SZ2、GZ1、GZ2、HZ1的溶磷能力存在一定的差异，其中菌株SZ1、GZ2、HZ1的可溶性磷含量分别为58.30、2.69、8.65mg/L，菌株SZ2和GZ1没有溶解磷酸三钙的能力；菌株SZ1、SZ2、GZ1、GZ2、HZ1分别为香港史努基菌（Hongkongmyces snookiorum）、杂色曲霉（Aspergillus versicolor）、香港史努基菌（Hongkongmyces snookiorum）、棘孢木霉（Trichoderma asperellum）、林尼曼菌（Linnemannia exigua）。

关键词根际土壤；解磷真菌；分子生物学鉴定；溶磷能力中图分类号S154.3文献标识码A文章编号1007-5739（2024）04-0170-03DOI：10.3969/j.issn.1007-5739.2024.04.041开放科学（资源服务）标识码（OSID）：磷是植物生长发育所需的矿物质元素之一，但土壤中的难溶性磷占比高达95%，能被植物直接吸收利用的磷占比不足5%[1]。

据相关报道，全世界范围内缺磷耕地占比约为43%，我国缺磷耕地比例约为74%[2]。

传统农业主要通过施用磷肥增加土壤中的有效磷含量，但过量施用磷肥导致磷被进一步固定在土壤中，造成土壤退化、重金属累积、水体富营养化等问题[3]。

随着人们环境保护意识的增强和农业可持续发展战略的实施，开发利用土壤微生物并将其制成微生物肥料用于提高土壤中的有效磷含量成为农业生产研究热点。