临床微生物检验知识点
临床微生物检验是通过对临床样本进行微生物学检验，利用各种实验
方法和技术手段，对病原微生物进行鉴定、分离、培养和药敏试验，从而
帮助医生进行准确诊断和合理治疗的一项重要检测技术。以下是一些临床
微生物检验的知识点。
1.微生物的鉴定：通过观察病原微生物的形态特征、生理生化指标、
生物学特征等，进行鉴定。常用的方法包括显微镜观察、革兰染色、培养
特性观察等。
2.微生物的分离：将样本中的微生物分离出来，使其能够单独生长并
进行后续的检验和鉴定。常用的方法包括涂布法、稀释涂布法、过滤法等。
3.微生物的培养：将分离后的微生物进行培养，使其能够增殖形成纯种，并提供足够的数量用于进一步检验。常用的培养基包括富养基、选择
性富养基、增菌富养基等。
4.微生物的药敏试验：通过对分离的病原微生物进行不同抗菌药物的
敏感性试验，确定该微生物对抗菌药物的敏感性和抗药性。常用的方法有
纸片法、扩散法、微量稀释法等。
5.微生物的快速检测方法：为了达到更快速、准确的临床微生物检测
结果，目前发展了许多快速检测方法，如PCR技术、基因测序技术、质谱
技术等。
6.微生物的标本采集和保存：正确的标本采集对于临床微生物检验结
果的准确性和可靠性至关重要。常见的标本有血液、尿液、痰液、脑脊液、伤口分泌物等。标本采集后应存放在适当的条件下，以避免微生物的生长
和变质。
7.常见病原微生物的检验：临床微生物检验主要涉及到常见的病原微
生物，如细菌、真菌、病毒和寄生虫等。对于每种病原微生物的检验方法
和操作要点有所不同。
8.质量控制：临床微生物检验对质量控制要求较高，包括内、外质控。内质控主要通过引入质控菌株进行培养和药敏试验等操作，确保检测结果
的准确性和可靠性。外质控则是通过参加各种质量评估项目来衡量实验室
的检测质量。
在临床微生物检验过程中，需要严格遵守相关的操作规范和质量控制
要求，以确保检验结果的准确性和可靠性。临床医生在接到微生物检测结
果后，应结合临床病情和患者的病史等信息，合理解读检验结果，并进行
科学的诊断和治疗。
临床微生物学检验 显性感染（n）：如果宿主的抗感染免疫力较弱，或侵入的病原体数量较多，毒力较强，机体的组织细胞受到不同程度的损害并出现一系列的临床症状和体征。 细菌大小以微米为测量单位。鞭毛是细菌的运动器官。 培养基按用途分类：1.基础培养基。2.营养培养基。3.鉴别培养基。 4.选择培养基（n）:在培养基中加入某些特殊化学物质，抑制某些细菌的生长而有助于需要的细菌种类的生长，使需要菌从混杂的微生物群体中分离出来。 细菌的遗传物质包括染色体和质粒，其化学组成为DNA，DNA籍其构成特定基因来传递遗传信息。 质粒（n）：是染色体外的DNA，携带有编码某些遗传特性的基因，它能独立于染色体进行自我复制。 质粒的特性:不相容性；可转移性；自主复制质粒；质粒可自然丢失或用人工方法消除。（P67） S-R变异（n）：新从患者体内分离的沙门菌通常为光滑型，经人工培养后菌落呈粗糙型。 丝状菌（或称霉菌n）：营养体呈多细胞类型的真菌是由菌丝和孢子交织组成。 细菌的科学命名：属名在前，是名词，首字母大写；种名在后，是形容词，无论是人名还是地名均小写，两者均用斜体表示。中文译名则种名在前属名在后。
氧化-发酵试验（O-F）：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须以分子氧作为电子受体的称为氧化型；细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行无氧降解的称发酵型，此类细菌无论有氧或无氧均可以分解葡萄糖，通常为兼性厌氧菌；不分解葡萄糖的细菌称产碱型。此试验用于细菌种属间的鉴别：肠杆菌科细菌为发酵型，非发酵菌通常为氧化型或产碱型。此外，微球菌属可氧化葡萄糖，而葡萄球菌属则能发酵葡萄糖。迟缓分解乳糖(n):只有β-半乳糖苷酶而缺乏半乳糖苷渗透酶（或是其活性很弱）的细菌，不能很快将乳糖运送到细菌细胞内，需要几天时间乳糖才能被分解。 氧化酶试验：氧化酶或称细胞色素氧化酶，是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。作氧化酶试验时，此酶首先使细胞色素C氧化，然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。本试验肠杆菌科阴性，弧菌科和非发酵菌阳性（个别菌种除外），奈瑟菌属阳性。 荚膜肿胀试验:有夹膜的细菌如肺炎链球菌等，当与相应的抗血清反应时荚膜将明显增宽，在显微镜下可见在蓝色细菌周围有边界清晰的环状物，厚薄不等，而对照侧则无，则为荚膜肿胀试验阳性。 二倍体细胞培养广泛用于病毒分离和疫苗制备。 体外联合药物敏感试验的意义:1.治疗混合性感染；2.预防或延迟细菌抗生素耐药性的发生；3.联合用药可以减少剂量以避免达到毒性剂量；4.联合用药比单一用药时常常效果更好。 联合抑菌试验的判断标准：FIC指数<0.5为协同作用；0.5到1为相加作用；1到2为无关作用；>2为拮抗作用。
微生物与检验重点 1. 简述致病菌引起全身感染后，常见的几种类型？ 答：①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症 3. 试述构成细菌侵袭力的物质基础。 答：①荚膜②黏附素③侵袭性物质 4. 简述病原菌感染机体后，机体如何发挥抗菌免疫功能？ 答：首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构，血脑屏障，胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。7-10天后，机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌 1. 简述细菌耐药性产生的主要机制。 答：①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力，在这种压力的作用下，原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来，并不断扩大。 1．举例说明细菌命名的原则。 答：细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。一个细菌种的学名由两个拉丁字组成，属名在前，用名词，首字母大写；种名在后，用形容词，首字母小写；两者均用斜体字。中文译名种名在前，属名在后。如Mycobaterium tuberculosis（结核分枝杆菌）。属名亦可不将全文写出，只用第一个大写字母代表，如M. tuberculosis 2.如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌？并确定其有无致病性。答：①直接镜检，经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌，可初步报告疑为葡萄球菌，需进一步分离培养鉴定。②分离培养：血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定，若无细菌生长，需连续观察7天，并以血平板确定有无细菌的生长。脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板，37℃过夜，可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。金葡菌菌落周围有透明溶血环。③试验鉴定：血浆凝固酶试验，甘露醇发酵试验，耐热核酸酶试验，肠毒素测定，SPA检测。致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环，血浆凝固酶试验阳性，甘露醇发酵试验阳性，耐热核酸酶试验阳性，SPA检测有A蛋白的存在。 1．什么是不耐热肠毒素（LT）？它的物理性质、基本结构、致病机理及与霍乱毒素（CT）的关系如何。 答：LT是肠产毒型大肠杆菌产生的致病物质，因对热不稳定，故称为不耐热肠毒素。其65℃30min可被破坏。LT分为LT-Ⅰ和LT-Ⅱ，LT-Ⅱ与人类疾病无关，LT-Ⅰ是引起人来胃肠炎的致病物质。其结
微生物检验 临床微生物学：与临床医学密切结合，侧重研究感染性疾病快速、准确的诊断病原体的策略与方法，为临床诊断提供依据，又称诊断微生物学。 放线菌：是一群在生物学特性上与细菌同类的原核细胞型微生物 逆转录: 就是病毒的遗传信息在逆转录酶的作用下从RNA转移到DNA的过程。 感染: 外源性病原微生物或内源性条件致病性微生物侵入宿主后，生长繁殖，释放毒性物质或致体内生态环境失调等引起机体病理过程 药敏试验中－耐药: 即表示测定菌不能被在体内感染部位可能达到的抗菌药物浓度所抑制，临床治疗无效 放线菌:是一群在生物学特性上与细菌同类的原核细胞型微生物。 非发酵菌: 是指一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧.无芽胞的革兰阴性杆菌。 最小抑菌浓度（MIC）：以在试管内或小孔内完全一致细菌生长的最低药物浓度，成为最小抑菌浓度。（甲氧苄啶或磺胺药物的肉汤稀释法敏感试验的终点判断，以80%生长抑制作为判断指标） 最小杀菌浓度（MBC）：把无菌生长的试管（微孔）吸取0.1ml加到冷却至50℃CM-H琼脂混合倾注平板，同时以前述的稀释1：1000（或1：200）的原接种液作倾注平板，培养48-72小时后计数菌落数，即可得到抗菌药物的最小杀菌浓度（定义为接种菌减少99.9%） V-W变异：是指沙门菌失去V i抗原的变异。初次分离得到的具有V i抗原、O不凝集的沙门菌称V型菌；V i抗原部分丧失、既可与O抗血清发生凝集又可与V i抗血清凝集者称VW型菌；V i抗原完全丧失、与O抗血清发生凝集而与Vi 抗血清不凝集者称W型菌。 质量保证QA：是有计划、系统的评估和监测患者诊疗质量的整个过程，以便及时发现问题，采取有效措施，提高质量和服务。 微生物：是存在于自然界的一大群形体微小，结构简单，肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的微小生物。 细菌：一种单细胞微生物，形体微小，结构简单，有细胞壁和原始核质，无核膜和核仁，除核糖体外无其他细胞器。敏感：指所分离菌株能被测试药物使用推荐剂量时在感染部位通常可达到的抗菌药物浓度所抑制。 耐药：指所分离菌株可能存在某些特定的耐药机制，或治疗研究显示药物对分离菌株的临床疗效不可靠。 卫星现象：流感嗜血杆菌与金黄葡萄球菌一起培养时，可见到靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大，而远离葡萄球菌的流感嗜血杆菌菌落较小，这种现象称卫星现象。 超广谱β内酰胺酶（ESBLs）：是一种能水解青霉素，头孢菌素及单胺类的酶，主要由克雷伯菌属，奇异变形杆菌及大肠埃希菌等革蓝阳性杆菌产生，由质粒介导，能被酶抑制剂抑制，由广谱β内酰胺酶突变而来。 耐甲氧西林葡萄菌（MRS）：它是携带mecA基因、编码低亲和力青霉素结合蛋白导致耐甲氧西林、所有头孢菌素、碳青霉烯类、青霉素类+青霉素酶抑制剂抗生素的葡萄球菌。 1ug苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤10mm或其MIC≥4ug/ml的金黄色葡萄球菌；对1ug苯唑西林抑菌圈直径≤17mm或其MIC≥0.5ug/ml的凝固酶阴性葡萄球菌，均称为~ 微需氧菌：在5%左右的低氧环境中生长最好，氧浓度＞10%对其有抑制作用，如弯曲菌属和螺杆菌属。 细菌L型：细菌在体内外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚糖直接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。 原生质体：革兰阳性菌由于细胞壁主要由肽聚糖构成，细菌变为L型后，因为细胞壁完全缺失，细菌仅被一层细胞膜包裹，称为原生质体。原生质球：源于革兰氏阴性菌的L型称 质粒：细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，是小的双股闭合环状DNA分子，可独立于染色体存在并复制，也可整合到染色体上。 外毒素：是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程中释放到菌体以外的蛋白质。 内毒素：是革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，当菌体死亡崩解后游离出来。 培养基：是由人工方法配置而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。 CAMP实验：B群链球菌能产生CAMP因子，可促进葡萄球菌的β—溶血素溶解红细胞的活性，因此在两菌的交界处溶血力增加，出现矢形的溶血区。 MIC: 在体外培养细胞18~24h后能抑制培养基内病原菌生长的最低药物浓度。 MBC：能够杀灭培养基内细菌或使细菌数减少99.9%的最低药物浓度。 细菌分类学：是微生物分类学的一个分支，是对细菌进行分类、鉴定与命名的一门科学。 不动杆菌属：为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不能运动的革兰阴性杆菌。无芽胞。 不发酵革兰氏阴性杆菌：指一大群不发酵葡萄球菌或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性
医学微生物学 微生物：存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数 千倍。甚至数万倍才能观察到的微小生物。 3、病原微生物：少数具有致病性，能引起人类、植物病害的微生物。 机会致病性微生物：在正常情况下不致病，只有在特定情况下导致疾病的微生物。 4，郭霍法则：①特殊的病原菌应在同一种疾病中查见，在健康人中不存在；②该特殊病原菌能被分离培养得纯种；③该纯培养物接种至易感动物，能产生同样病症；④自人工感染的实验动物体内能重新分离得到该病原菌纯培养。 5、免疫学：㈠主动免疫；㈡被动免疫。 第一篇 细菌学 第一章 细菌的形态与结构 第一节 细菌的大小与形态 1、观察细菌常采用光学显微镜，一般以微米为单位。 2、按细菌外形可分为： ①球菌（双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌） ②杆菌（链杆菌、棒状杆菌、球杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌） ③螺形菌（弧菌、螺菌、螺杆菌） 第二节 细菌的结构 1、基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞 2、革兰阳性菌（G+）：显紫色；革兰阴性菌（G-）：显红色。 3、 细胞壁结构 革兰阳性菌 G+ 革兰阴性菌 G- 肽聚糖组成 由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构 由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构 肽聚糖厚度 20～80nm 10～15nm 肽聚糖层数 可达50层 仅1～2层 肽聚糖含量 占胞壁干重50～80% 仅占胞壁干重5～20% 磷壁酸 有 无 外膜 无 有
4、G-菌的外膜｛脂蛋白、脂多糖（LPS）→【脂质A，核心多糖，特异多糖】、脂质双层、｝ 脂多糖（LPS）：即G-菌的内毒素。LPS是G-菌的重要致病物质，使白细胞增多，直至休克死亡；另一方面，LPS也可增强机体非特异性抵抗力，并有抗肿瘤等有益作用。 ①脂质A：内毒素的毒性和生物学活性的主要成分，无种属特异性，不同细菌的脂质A骨架基本一致，故不同细菌产生的内毒素的毒性作用均相似。 ②核心多糖：有属特异性，位于脂质A的外层。 ③特意多糖：即G-菌的菌体抗原（O抗原），是脂多糖的最外层。 5、细胞壁的功能：维持菌体固有的形态，并保护细菌抵抗低渗环境。 G-菌的外膜是一种有效的屏障结构，使细菌不易受到机体的体液杀菌物质、肠道的胆盐及消化酶等的作用。 6、细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）：细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制，这种细菌壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。 原生质体：G+菌细胞壁缺失后，原生质层仅被一层细胞膜包住 原生质球：G-菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护 ■细菌L型的诱发因素，如：溶菌酶，青霉素，溶葡萄球菌素，胆汁，抗体，补体等。 溶菌酶：能裂解肽聚糖中N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1，4糖苷键，破坏聚糖骨架，引起细菌裂解。 青霉素：能与细菌竞争合成肽聚糖过程中所需的转肽酶，抑制四肽侧链上D-丙氨酸与五肽桥间的联结，使细菌不能合成完整的肽聚糖，在一般渗透压环境中科导致细菌死亡。 ■细菌L型需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长。 G+菌细胞壁缺损形成的原生体，在普通培养基中很容易胀裂死亡，必须保存在高渗环境中。 7、细胞膜： 细胞膜的主要功能：①物质转运；②呼吸和分泌；③生物合成；④参与细菌分裂：细菌部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，称为中介体。 8、细胞质： ①核糖体：链霉素（与细菌核糖体的30S亚基结合）和红霉素（与细菌核糖体的50S亚基结合）均能干扰其蛋白质合成，从而杀死细菌，但对人体核糖体无害。 ②质粒：染色体外的遗传物质，为闭合环状的双链DNA ③胞制颗粒：贮藏有营养物质。异染颗粒（也成迂回体，嗜碱性强，用甲基蓝染色时着色较深呈紫色）常见于白喉棒状杆菌。 9、核质：细菌的遗传物质。 10 ⑴荚膜：包绕在细胞壁外的一层粘液性物质，为多糖或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后并不影响菌细胞的生命活动。 ①厚度≧0.2微米边界明显的称为荚膜或大荚膜；厚度﹤0、2微米的为微荚膜。 ②若粘液物质疏松地附着于菌细胞表面，边界不明显且易被洗脱者成为粘液层。 ③大多数细菌的荚膜为多糖，多糖分子组成和构型的多样化使其结构极为复杂，成为血清学分型的基础。 ④荚膜对一般碱性染料亲和力低，不易着色。 ■荚膜的功能：①抗吞噬作用；②粘附作用；③抗有害物质的损伤作用。 ⑵鞭毛：包括：单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌 鞭毛由基础小体、钩状体、丝状体三部分组成。 ■鞭毛的功能：使细菌能在液体中自由游动，速度迅速。细菌的运动有化学趋向性，常向营养物质处前进，而逃离有害物质。有些细菌的鞭毛与致病性有关。
微生物重点 1.生物学按界门纲目科属种分类，种是最小单位。 2.结核菌可利用甘油为碳源，梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源，流感嗜血杆菌要Ⅴ，Ⅹ因子才能生长。 3.致病性岛：由基因编码决定的一团与致病性相关的基因组。 4.细菌诊断流程有：双岐索引法，表解法，数字编码鉴定法。 5.超净工作台应选择垂直气流通风方式。 6.O/129抑菌试验对弧菌有用而对气单胞菌无用。 7.杆菌肽用于A（敏感）与非A群链球菌的鉴定。 8.奥普托欣试验：肺炎链球菌敏感。 9.杂交分：斑点，菌落原位，Southern（DNA）印迹，Northern（RNA，DNA）印迹。 10.L型细菌（形态多样，染色不定，可过滤，渗透压敏感，生化减弱等）培养应高渗（20%蔗糖），染色多为G染阴性，形态不一（巨球形是特征），固定要用10g/L鞣酸不能用火焰。 11.一般菌落有：油煎蛋样（L），颗粒型（G），丝状菌落（F），鉴定要点：染色易变多形性，生长在增菌液中微浑，颗粒样沉淀或沿试管壁生长，返祖现象。 12.原生质体与原生质球都是细胞壁缺陷的细菌。 13.肽聚糖的结构由聚糖骨架，四肽侧链和五肽交联桥（G－无交联桥）。磷壁酸为G＋特有，分壁和膜两种。外膜层由脂多糖，脂质双层，脂蛋白组成。细胞质内有核蛋白体（蛋白合成地），核质（主要遗传物质）质粒，胞质颗粒，是细菌蛋白质和酶类合成的重要场所。鞭毛是由细胞质伸出的蛋白性丝状物。性菌毛仅有1～10根，毒力和耐药质粒都能通过它转移，有致病性。 14.RNA主要存在于细胞质中占细菌干重的10%，DNA存在于染色体和质粒中。 15.G＋菌等电点pI=2～3，G－菌等电点pI=4～5。 16.细菌营养转运的方式有：离子，透性酶，磷酸酶。营养摄取的机制：被动扩散，主动吸收，基团转位。 17.嗜冷菌最适温为10～20℃，嗜温菌为20～40℃，嗜热菌为50～60℃。 18.细菌代谢所需能量主要以生物氧化作用而来。 19.G－菌的菌体脂多糖能引起发热故称热原质。土中的厌氧芽胞杆菌是创伤感染病原菌的主要来源。 20.饮用水中1ml菌落总数不超过100个，1000ml水中大肠杆菌群不超过3个。 21.有芽胞破伤风菌需沸水煮3h才杀死。水中加入2%碳酸钠能将沸点提到105℃又能防止金属生锈。 22.紫外线波长265～266nm时杀菌力最强。无芽胞菌一般的致死为1800～6500微瓦/cm，杀死芽胞要十倍。 23.滤菌器用于除菌的孔径是0.22µm，另外以石棉板为滤板的金属滤器称Seitz滤器（蔡氏滤器）按滤孔大小分K：最大，澄清用，EK-S最小，可阻止大病毒通过EK：居中，除去一般细菌。玻璃滤菌器分G1～G6，G5，G6两型能阻止细菌通过。 24.高压灭菌指示物：嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC 7053），紫外线杀菌指示物：枯草芽胞杆菌黑色变种（ATCC 9372）。 25.细菌遗传物质主要在于染色体质粒和转位因子中。 26.影响基因表达的因素有：调控部位，调节蛋白，效应分子。
临床微生物检验知识点 1.微生物学基础知识：了解细菌、真菌、病毒、寄生虫等病原微生物的基本特征，包括形态、生长要求、代谢特性等。 2.微生物的分离和培养：熟悉常规培养基的选择和制备，掌握不同微生物的适宜培养条件，如温度、pH值、氧气需求等。 3.微生物鉴定：根据微生物的形态和特性进行初步鉴定，如形态学特征、革兰氏染色、厌氧性检测等。此外，还可以使用生物化学试纸、血清学试验、分子生物学等方法进行鉴定。 4.耐药性检测：对微生物进行药敏试验，了解其对各类抗生素、抗真菌药物、抗病毒药物的敏感性和耐药性。这有助于临床医生选择合适的药物治疗感染。 6.检验流程和规范：了解微生物检验的标本采集、处理和保存的基本要求，掌握各类检验方法的操作步骤，遵守无菌操作规范，以保证检验结果的准确性和可靠性。 7.抗生素治疗和微生物学监测：了解抗生素的分类、作用机制和临床应用，以及微生物的产生耐药性的机制和监测方法。合理应用抗生素，避免滥用和不当使用，是临床微生物检验的重要目标之一 8.感染控制：了解医院感染控制的基本原则和措施，包括手卫生、环境清洁、消毒灭菌、隔离措施等。临床微生物检验在感染控制中发挥着重要作用，通过对患者、环境和医务人员的监测，提供科学依据进行感染防控。
9.病原微生物的定量检测：对一些病原微生物，如HIV、肺结核菌等，需要进行定量检测。这有助于预测疾病进展、评估治疗效果和制定治疗方案。 10.新技术和新方法的应用：随着科技的进步，临床微生物检验也不 断发展，新的方法和技术被广泛应用，如实时荧光PCR、质谱技术、核酸 杂交等。了解这些新技术的原理和应用，可以提高检验的灵敏度和特异性。 总结起来，临床微生物检验的知识点涉及微生物学基础、分离培养、 鉴定、药敏试验、诊断、标本采集处理、抗生素治疗和感染控制等方面。 掌握这些知识，可以提高临床微生物检验的准确性和可靠性，为临床医生 提供更科学的诊断和治疗建议。
复习 一、重要专业名词 1.SPA：葡萄球菌蛋白A。是金黄色葡萄球菌细胞壁上的表面蛋白，能够与人类IgG的 Fc段结合，而不影响Fab段与相应抗原的特异性结合,常用于协同凝集试验。 2.OT试验：是应用结核菌素,进行皮肤试验来测定机体对结核分支杆菌能否引起迟发型 超敏反应的一种实验。 3.异染颗粒：胞质颗粒中有一种主要成分为RNA和多偏磷酸盐的颗粒，嗜碱性强,用亚甲 蓝染色时着色较深呈紫色，称为异染颗粒。 4.包涵体：某些受病毒感染的细胞内,用普通光镜可看到与正常细胞结构和着色不同的圆 形或椭圆形斑块,称为包涵体。 5.鞭毛：许多细菌，包括所有的弧菌和螺菌，约半数的杆菌和个别球菌，在菌体上附有细 长并呈波状弯曲的丝状物，这种丝状物称为鞭毛，是细菌的运动器官. 6.Vi抗原:表面抗原。是一种不耐热的酸性多糖的聚合体,存在于菌体的最表面,有抗吞噬和 保护细菌免受相应O抗体凝集和补体的溶菌作用。 7.二相性真菌：有些真菌可因营养、温度、氧气等环境条件的改变,而两种形态发生互变， 称为二相性，这类真菌称为二相性真菌. 8.肥达反应:肥达反应是用已知伤寒菌的H(鞭毛）和O（菌体）以及甲型（A）与乙型(B) 副伤寒沙门氏菌的标准液与病人血清做凝集试验，用于伤寒副伤寒的辅助诊断或用于流行病学调查的免疫凝集实验 9.回归热：体温急剧上升至39℃或以上，持续数天后又骤然下降至正常水平。高热期与 无热期各持续若干天后规律性交替一次。见于回归热疏螺旋体感染、霍奇金病等. 10.荚膜：包绕于细菌细胞壁外的一层黏液性物质，主要成分为糖和多肽，是细菌的特殊结 构。 11.菌落:由单个细菌分裂繁殖而来的一堆肉眼可见的细菌集团。 12.抗酸杆菌：细菌细胞壁含有大量类脂，一般不容易着色，但经加温或延长染色时间着色 后，能抵抗盐酸乙醇的脱色，故称为抗酸杆菌。 13.灭菌:杀灭物体上所有微生物，包括病原体、非病原体，繁殖体和芽胞的方法。 14.内毒素：是革兰阴性菌细胞壁中的脂多糖成分，只有菌体裂解后才释放出来。 15.耐药：指使用常规剂量的抗菌药物治疗时,患者感染部位通常所能达到的药物浓度不能
临床微生物学检 1、潜伏感染：若宿主与病原体在相互作用过程中暂时处于平衡状态，病原体潜伏在病灶内或某些特殊组织内，一般不排出体外，称为潜伏感染。 2、抗生素相关性腹泻，严重时引起伪膜性肠炎、真菌性肠炎、葡萄球菌肠炎等，如果肠道正常菌群破坏后艰难梭菌异常增长并分泌肠毒素，则可损伤肠粘膜引起伪膜性肠炎。 3、病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。病原菌在宿主间传播、侵袭、定植并逃逸免疫的能力，称为侵袭力。 4、细菌的大小以微米（um）为测量单位。 5、球菌呈圆球形、近圆球形、矛头状或肾形。 6、观察细菌动力可用悬滴法或压滴法在显微镜下直接观察其运动，也可将细菌穿刺接种半固体培养基观察动力。鞭毛染色 7、鞭毛可鉴别细菌，糖萼可作为细菌的鉴定和分型。 8、芽孢的功能： ⑴热力、干燥、辐射、化学消毒剂等具有强大的毒抗力。 ⑵以是否杀死芽孢作为物品消毒灭菌判断效果的指标。 ⑶芽孢在菌体的位置和直径大小随菌种的不同，这种形态特点有助于细菌鉴别。 9、生长曲线：细菌接种到液体培养基后以二分裂法进行繁殖。以倾注平板法计数孵育后的菌落数可换算出菌落形成单位，连续检测细菌不同培养时间的CFU，以CFU为纵坐标，培养时间为横坐标可以作出一条反映细菌生长数的变化规律曲线，称生长曲线。 10、生长曲线分为四期： ⑴迟缓期：是细菌适应环境的过程，为细菌的分裂繁殖做好准备。 ⑵对数生长期：细菌以最大的速率生长和分裂，细菌数量对数增加。此期细菌代谢活跃而稳定，其大小、形态、染色性和生化反应典型，对外界因素反应敏感，是检测细菌生物学性状和进行药物敏感性试验的适宜阶段。 ⑶稳定期：生长繁殖菌数和死亡数处于动态平衡，此期细菌合成较多的代谢产物（如抗生素）。 ⑷衰亡期：细菌死亡速率逐步增加，死亡数大于增加数，一般不用该期的细菌做鉴定和研究工作。 11、细菌的遗传物质包括染色体、质粒。 12、病毒的基本结构包括核心、衣壳。辅助结构是包膜，包膜对乙醚是敏感的，若呈阳性，则说明有乙醚存在。 13、营养体呈单细胞类型的真菌又称酵母菌。营养体呈多细胞类型的真菌是由菌丝和孢子交织组成，称为丝状菌或霉菌。 14、细菌的科学名称的生物双名式，有一个属名和一个种名构成，属名在前，是名词，首字母大写；种名在后，是形容词。例如Mycobecterium tuberculosis （结核分枝杆菌） 15、病原学检测（标本采集的原则）： ⑴尽早采集：一旦怀疑细菌感染，应及时采集标本进行细菌学检验。 ⑵选择不同采集时机和标本种类：根据临床症状和流行病学资料可预测感染性
临床微生物检验知识点 临床微生物检验是通过对临床样本进行微生物学检验，利用各种实验 方法和技术手段，对病原微生物进行鉴定、分离、培养和药敏试验，从而 帮助医生进行准确诊断和合理治疗的一项重要检测技术。以下是一些临床 微生物检验的知识点。 1.微生物的鉴定：通过观察病原微生物的形态特征、生理生化指标、 生物学特征等，进行鉴定。常用的方法包括显微镜观察、革兰染色、培养 特性观察等。 2.微生物的分离：将样本中的微生物分离出来，使其能够单独生长并 进行后续的检验和鉴定。常用的方法包括涂布法、稀释涂布法、过滤法等。 3.微生物的培养：将分离后的微生物进行培养，使其能够增殖形成纯种，并提供足够的数量用于进一步检验。常用的培养基包括富养基、选择 性富养基、增菌富养基等。 4.微生物的药敏试验：通过对分离的病原微生物进行不同抗菌药物的 敏感性试验，确定该微生物对抗菌药物的敏感性和抗药性。常用的方法有 纸片法、扩散法、微量稀释法等。 5.微生物的快速检测方法：为了达到更快速、准确的临床微生物检测 结果，目前发展了许多快速检测方法，如PCR技术、基因测序技术、质谱 技术等。 6.微生物的标本采集和保存：正确的标本采集对于临床微生物检验结 果的准确性和可靠性至关重要。常见的标本有血液、尿液、痰液、脑脊液、伤口分泌物等。标本采集后应存放在适当的条件下，以避免微生物的生长 和变质。
7.常见病原微生物的检验：临床微生物检验主要涉及到常见的病原微 生物，如细菌、真菌、病毒和寄生虫等。对于每种病原微生物的检验方法 和操作要点有所不同。 8.质量控制：临床微生物检验对质量控制要求较高，包括内、外质控。内质控主要通过引入质控菌株进行培养和药敏试验等操作，确保检测结果 的准确性和可靠性。外质控则是通过参加各种质量评估项目来衡量实验室 的检测质量。 在临床微生物检验过程中，需要严格遵守相关的操作规范和质量控制 要求，以确保检验结果的准确性和可靠性。临床医生在接到微生物检测结 果后，应结合临床病情和患者的病史等信息，合理解读检验结果，并进行 科学的诊断和治疗。
医学微生物学重点知识总结 细菌学总论 1、微生物的六大特点：体积微小、结构简单、种类繁多、分布广泛、繁殖迅速、容易变异。 2、微生物的种类与分布： ①非细胞型微生物最小，无典型的细胞结构，无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长繁殖，核酸类型为DNA或RNA，两者不同时存在，病毒属之。 ②原核细胞型微生物原始核呈dsDNA结构，无核膜、核仁，细胞器很不完善，只有核糖体，DNA和RNA同时存在，细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌属之。 ③真核细胞型微生物细胞核分化程度高，有核膜和核仁，细胞器完整，真菌属之。 3、细菌的细胞壁： ①G+和G-细菌细胞壁的共有组分为肽聚糖，G+细菌的肽聚糖由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥三部分组成，G细菌的肽聚糖由聚糖骨架和四肽侧链两部分组成。 ②G+细菌细胞壁的特殊组分为磷壁酸。 ③G-细菌细胞壁的特殊组分为外膜 外膜由脂蛋白、脂质双层和脂多糖三部分组成，脂多糖由脂质A、核心多糖、特异多糖三部分组成，即G-细菌的内毒素。脂质A是内毒素的毒性和生物学活性的主要组分。 ④细菌L型：细胞壁受损的细菌能够生长和分裂者叫叫细菌L型 细菌L型的四大特点：高度多形性、高渗、对作用于细胞壁的抗生素不敏感、可恢复到有细胞壁的状态。 4、质粒：细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子。能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染色体上。现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的，常含抗生素抗性基因，是重组DNA技术中重要的工具。
5、异染颗粒：胞质颗粒中有一种主要成分是RNA和多偏磷酸盐的颗粒，嗜碱性强，用亚甲蓝染色时着色较深呈紫色，叫异染颗粒或纡回体，常见于白喉棒状杆菌。 6、核质：细菌的遗传物质叫核质或拟核。 7、细菌的特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞 8、微生物学两大经典染色：①Gram染色：标本固定后，先用碱性染料结晶紫初染，再加碘液媒染，使之生成结晶紫－碘复合物，此时不同细菌均被染成深紫色。然后用95％乙醇处理，有些细菌被脱色，有些不能。最后用稀释复红或沙黄复染。此法可将细菌分为两大类：不被乙醇脱色仍保留紫色者为G+细菌，被乙醇脱色后复染成红色者为G-细菌。②抗酸染色：分枝杆菌一般用抗酸染色，以5％炭酸复红加温初染后可以染上，但用3％盐酸乙醇不易脱色，若再加美兰复染，则分枝杆菌呈红色，其他细菌和背景中的物质呈蓝色。 9、细菌的营养物质：水、碳源、氮源、无机盐、生长因子。 10、细菌生长繁殖的必备条件：营养物质、能量、适宜的环境。 11、耐酸之王－结核分枝杆菌；耐碱之王－霍乱弧菌 12、专性厌氧菌在有氧环境中不能生长的原因： ①缺乏氧化还原电势高的呼吸酶②缺乏分解有毒氧基团的酶 13、细菌群体的生长繁殖可分为四期：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。 14、吲哚I、甲基红M、V、枸橼酸盐利用C四种试验常用于鉴定肠道杆菌，合称IMViC试验。大肠埃希菌对这四种试验的结果是++--，产气肠杆菌则为--++。 15、细菌的合成代谢产物：致热源、毒素与侵袭性酶、色素、抗生素、细菌素、维生素。 16、培养基按其营养组成和用途不同，分为以下几类：基础培养基、增菌培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基。 17、菌落：经过一定时间的培养后，单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团，叫菌落。菌落分三型：光滑型菌落S、粗糙型菌落R、粘液型菌落M。
1．临床微生物学的概念是什么？ 临床微生物学是研究微生物的形态、结构、分类、生命活动规律的一门科学，包括细菌学、病毒学、真菌学等。是临床医学的基础之一，指导感染性疾病的诊断、治疗和预防。2．临床微生物学实验检查大概分几步骤？ ①从患者标本分离培养微生物。②对标本中分离到的微生物进行培养、鉴定。 ③进行药物敏感性试验，解释和预报结果。④阶段性分析药物敏感性实验，预测耐药趋势，监控和指导临床合理用药。 3．什么是感染性疾病及影响因素？ 凡是由病原微生物引起的疾病统称为感染性疾病，而感染性疾病的发生主要与病原体的侵袭力及宿主的抵抗力密切相关。别外，临床上抗生素的大量滥用，引起了正常菌群失调和大量耐药菌株的出现，从而加重了机体的内源性感染机率，这一定程度又加重了感染性疾病的发生。 4．临床医师主要需要从临床微生物学实验室得到什么？ ①能为临床提供医学决策的相关信息。②指导临床正确收集标本的原则。③安全及时的送检标本。④微生物的正确鉴定和药物敏感性试验结果。⑤能快速地报告实验结果，并做出相关的结果解释。⑥能及时反馈医院内细菌感染分布、耐药状况和流行趋势等。 5．临床医师应如何避免感染性疾病的爆发流行？ ①遵循病原学诊断，避免无指症用药。②正确及时的采集标本，按要求及时送检微生物实验室检查。③重视实验室的鉴定及药敏结果，结合临床患者病情合理使用抗生素。④注意经验性治疗与靶向治疗相结合，依据病原学诊断及时调整治疗方案，改为针对性治疗。⑤加强同临床微生物实验室交流沟通，积极配合实验室做好院内感染监测、预防和控制工作。 6．临床标本采集的一般原则是什么？ ①在最适宜的时间收集标本，最好在使用抗生素之前或感染急性期采集。②采集标本要有代表性和针对性，不同情况应区别对待，适宜地采取相应的方法收集标本，如尿液标本疑为厌氧菌感染时，应行耻骨上缘穿刺术取膀胱尿培养。③采集标本必须来自实际感染的部位，严格无菌操作尽可能避免外源性污染。④收集标本应当使用合适的收集器材、容器和培养基，以保证最大限度的发现微生物。 ⑤标本采集、运送过程中要有专人负责，避免人为操作失误。⑥采集标本不仅要防止被污染，同时也要注意安全，防止传播和自身感染。 7．采集过程中需要加抗凝剂的标本应注意什么？ 对任何容易形成凝块的标本都应使用抗凝剂，因为如微生物被已凝固的物质包围，生长较困难。另外，像胸水、腹水等液体标本一旦凝固，很难接种培养，直接影响微生物的培养鉴定。目前，微生物学标本最常用的抗凝剂是多聚茴香脑磺酸钠SPS（Sodium polyanethol sulfonate），但其浓度不得超过0.025%(W/V)，否则会抑制一些奈瑟菌和厌氧性链球菌的生长。肝素也是常用抗凝剂之一，主要用于病毒培养，因为它能抑制革兰氏阳性菌和酵母菌的生长。柠檬酸盐和乙二胺四乙酸通常不用于微生物学标本。 8．标本运送过程中应注意些什么？ 标本采集后，除了要及时送检外，另外在运送过程中要注意尽量保持标本的原有性状。对于不能及时送检的要用专用运送培养基运送，而对一些含有脆弱细菌的标本，需加入特别的保存剂。例如，尿液中加入硼酸能有效地抑制细菌生长，较好的保持尿液中菌落的数量；粪便中加入磷酸盐缓冲液有助于保持粪便中像志
临床微生物检验 1、微生物的分类：（三型八大类)**全部是重点** 2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。 3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素） 4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白） 5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥（G-菌无。是溶菌酶、青霉素作用部位） 6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环状DNA分子）、转位因子 7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动器官）、菌毛（普通菌毛—粘附，致病性；性菌毛—接合方式转移遗传物质） *将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标 8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细菌）。②颗粒型菌落（简称G型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。高渗环境生长。（环丙沙星） 9、自营菌：以无机物为原料；异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质；寄生菌：以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。 10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。 11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长 12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单位）。 13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法； 14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。
15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。 16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。 17、细菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染，使脱色菌体着色）。 18、胃部细菌喜酸，肠道细菌喜碱 19、SS琼脂有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强，可影响检出率，所以，使用时最好加一种弱选择平板以配对互补。 20、碱性琼脂或TCBS琼脂用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。 21、痰标本：血平板、中国蓝／麦康凯、巧克力平板作分离。 22、中国蓝／麦康凯用于筛选G-杆菌； 23、含杆菌肽的巧克力平板（含有V和X因子）用于筛选嗜血杆菌 24、连续划线分离法：杂菌不多的标本。分区划线分离法：杂菌量较多的标本。 25、斜面接种法：该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性 26、倾注平板法：牛乳、饮水和尿液细菌计数 27、涂布接种法：常用于纸片法药物敏感性测定，也可用于被检标本中的细菌计数。 28、半固体培养基用于观察细菌的动力（沿穿刺线生长呈模糊或根须状，并使培养基变混浊为动力阳性） 29、α溶血：菌落周围血培养基变为绿色环状；红细胞外形完整无缺。 β溶血：红细胞的溶解在菌落周围形成一个完全清晰透明的环。 γ溶血：无溶血。 双环：在菌落周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二圆圈。 30、氧化-发酵试验（O/F试验）：有氧参加——氧化型；无氧降解——发酵型；不分解葡萄糖而分解蛋白胨——产碱型。（肠杆菌科细菌发酵型全+） 31、甲基红试验(与V-P试验相反)：阳性红色，阴性黄色。大肠埃希菌（+），产气肠杆菌(-) 32、白喉棒状杆菌：G+，异染颗粒、毒力试验，Elek平板，亚碲酸钾血琼脂。外毒素（毒血症）只有携带β-棒状噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素。 33、内毒素测定主要用于确诊患者是否发生G-细菌感染。常采用鲎试验。本方法灵敏度高，可检查出0.0005～0.005μg/ml内毒素。 外毒素主要用于确诊患者是否感染革兰阳性菌及部分阴性菌。常用体内及体外毒力试验检测，也可通过ELISA法测定。 34、葡萄球菌属：G+，耐热、耐干燥、耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。 凝固酶阳性葡萄球菌：金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌
绪论 【内容讲解】 一、微生物 概念：微生物是存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、肉眼不能直接看到，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百至数万倍才能看到的微小生物。 微生物与人类的关系（寄居人类） 正常菌群：指定居在人类皮肤及与外界相通的腔道黏膜上的各类非致病微生物，非但无害，而且具有拮抗某些病原微生物和提供某些营养物的作用。 条件致病性微生物：原属正常菌群中的细菌，不会引起疾病，由于机体抵抗力下降、微生物寄居部位改变或菌群失调，此时该菌可致病。临床上多引起内源性感染。 病原微生物：可引起人类和动、植物致病的微生物，影响人类健康与生命，是医学微生物中要研究的主体。 二、微生物学、医学微生物学和临床微生物学 微生物学：生物学的一个重要分支。 医学微生物学：研究对人类致病的微生物及其生命活动规律，只涵盖了微生物学的很小一部分。 临床微生物学：属于医学微生物学的范畴。侧重研究感染性疾病快速、准确的诊断病原体的策略与方法，为临床诊断提供依据。 临床微生物学的性质和任务 临床微生物学： 属于医学微生物学的范畴。 侧重研究感染性疾病快速、准确的病原学诊断的策略与方法，为临床诊断提供依据。 （一）临床微生物学的性质和任务 1.研究感染性疾病的病原体特征 2.提供快速、准确的病原学诊断 3.指导临床合理使用抗菌药物 4.对医院感染进行监控 ①病原学诊断； ②药物敏感试验； ③环境、器械等微生物学调查；
④保证医院内消毒、灭菌质量； ⑤细菌学分型试验和同源性分析； ⑥对医院工作人员进行培训工作； ⑦建立医院感染预防控制体系，落实相关制度和措施。 （二）临床微生物检验的思路与原则 1.确保分析前质量临床标本可靠 2.全面了解机体正常菌群 3.保证检验质量、快速准确提供信息 4.微生物学定性、定量和定位分析结合患者病情，并对分离菌进行定性、定量及定位分析，方可保证检验结果符合临床诊断 5.加强与临床联系 临床微生物学检验的现状、发展和展望 （一）感染性疾病的现状 1.易感人群不断增加 2.新病原体不断出现、已控制的病原体死灰复燃 3.感染因子在非感染性疾病中的作用越来越明显 4.细菌耐药和医院感染的问题日趋严重 （二）快速诊断方法的发展 1.改变流程、缩短报告周期 2.非培养快速鉴定 （三）分子生物学技术飞速发展 （四）计算机技术的发展 （五）愿景和展望 【例题】不属于原核细胞型的微生物是 A.螺旋体 B.放线菌 C.病毒 D.细菌 E.立克次体 [答疑编号502383010101] 【正确答案】C 【例题】正常情况下，机体有菌的部位是 A.胃 B.骨骼 C.肌肉 D.血液 E.外耳道 [答疑编号502383010102] 【正确答案】E
微生物学检验重点知识总结微生物学检验 绪论 1.微生物的定义与特点;微生物的分类。 一、微生物的概念与特点 1.微生物（microorganism）是一群个体微小，结构简单，肉眼不能直接看见，必须借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观察到的微小生物的总称。 2.微生物的特点 个体微小，结构简单 比表面积大，吸收多，转化快 繁殖快，代谢强 适应强，易变异 种类多，分布广 1.微生物类型 根据微生物大小、结构和组成不同分为三类型 2.病原微生物的定义病原微生物：是指能引起动物、植物或人类产生疾病的微生物。 3.医学微生物学的发展简史。 .微生物的发现与研究
（1）列文虎克发明显微镜，最早观察到微生物；微生物学研究的创始人：XXX、XXX、XXX 第一章细菌的基本性状 第一节细菌的形态与布局 1.细菌细胞壁的结构和功能，肽聚糖结构及其化学组成；革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区别 （一）细胞壁 化学组成与布局，革兰染色共有组分：肽聚糖 特殊组分：G+菌、G-菌不同 革兰阳性菌细胞壁特殊组分：磷壁酸 革兰阴性菌细胞壁特殊组分：外膜 1 微生物学检验 革兰阴性菌细胞壁肽聚糖:聚糖骨架、四肽侧链 2.细胞壁的功用： （1）维持细菌固有形态和抵抗低渗作用。（2）物质交换作用。（3）屏障作用。（4）免疫作用。（5）致病作用。（6）与细菌药物敏感性有关。 G+菌与G-菌细胞壁布局比较
•细菌细胞膜的布局与真核细胞基本相同，由磷脂和多种蛋白质组成，但不含胆固醇。 •细菌细胞膜可形成一种特有的结构，称中介体。 2.细菌荚膜、鞭毛和菌毛的功能。 荚膜： 功能： 有抗吞噬和抵制杀菌物资的杀菌作用，增强细菌的侵袭力，构成细菌致病力的重要因 素之一。②具有免疫原性。③鉴别细菌和血清学分型 鞭毛：功能：细菌的运动器官 菌毛 通俗菌毛：具有黏附性，与细菌致病性有关。 性菌毛：与细菌的遗传变异相关 3.芽胞结构特点、意义、与消毒灭菌的关系；细菌L型的形态特征、检验要点。芽胞：某些细菌（主要为革兰阳性杆菌）在一定条件下，细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强，具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。 L型细菌：细胞壁缺陷的细菌。 常发生在作用于细胞壁的抗菌药物医治过程中。
（一）实验一 ①大吞噬现象、小吞噬现象 吞噬功能的测定计数方法： 吞噬百分率:计数100个中性粒细胞中具有吞噬作用的细胞数,即为吞噬百分率。 吞噬指数：观察100个中性粒细胞，计数被吞噬的细菌总数，求平均每个中性粒细胞吞噬的细菌数即为吞噬指数。 ①大吞噬现象要认识“巨噬细胞” ②小吞噬现象主要认识“中性粒细胞”（马蹄状形） （二）实验二 ①淋巴细胞转化试验（原理、分型、意义） 原理：T淋巴细胞可以在分裂剂的刺激下，向母细胞转化。促分裂剂能选择性地激发T淋巴细胞合成DNA与细胞分裂。转化百分率正常值为70%左右
分裂相：即染色体型 母细胞：较小淋巴细胞大4-5倍；核质疏松呈网状结构，有1-3个核仁；核周透明区；胞浆嗜碱性，有空泡 过渡型：较小淋巴细胞略大；核质略疏松；着色较淡 小淋巴细胞：核质致密；着色深；胞浆少 意义：体外淋巴细胞转化反应，可为测定机体细胞免疫状态的指标之一。 ② E玫瑰花环实验 原理： T细胞表面有绵羊红细胞受体，可在自然情况下与绵羊红细胞结合，形成E 玫瑰花环，由此可区分T淋巴细胞与B淋巴细胞 判定结果： 凡是淋巴细胞周围围绕4个以上绵羊红细胞者为阳性 ③血清学反应 1、基础： 抗原决定簇——抗体的互补决定区 2、特点： 特异性、可逆性、比例性、阶段性 3、抗原抗体反应因素： 电解质、温度、酸碱度 4、抗原或抗体的检测方法： 凝集反应、沉淀反应、免疫标记技术 I 凝集反应：（直接、间接） 概念：抗原 + 抗体 = 凝集团块 直接凝集：颗粒性抗原 + 抗体 = 凝集团块（玻片法、试管法） 间接凝集：可溶性抗原包被于载体 + 抗体 = 凝集团块 反向间接凝集：抗体包被于载体 + 抗原= 凝集团块