亚硝态氮的测定流程和步骤

FHZHJSZISO027 水质亚硝酸盐中的氮硝酸盐中的氮及二者总氮的测定流动分析光度检测法F-HZ-HJ-SZ-ISO-027水质—亚硝酸盐中的氮硝酸盐中的氮及二者总氮的测定—流动分析光度检测法1 适用范围本方法适用于不同类型的水（如地下水、饮用水、地表水和废水）中亚硝酸盐、硝酸盐中的氮或二者总氮的测定。

其中亚硝酸盐中的氮的浓度在0.01mg/L～1mg/L，总氮浓度在0.2mg/L～20mg/L。

2 原理概要总氮的测定：使用流动注射分析，样品注入连续流动的缓冲溶液中与之混合。

样品中的硝酸盐被金属镉还原为亚硝酸盐。

然后连续流动的硫酸溶液也被掺入。

原有的亚硝酸盐和还原产生的亚硝酸盐在酸溶液中使磺胺重氮化，生成重氮盐，此重氮盐再与N—（1—萘基）乙二胺偶合成红色染料。

亚硝酸盐中的氮：亚硝酸盐中氮的测定省去了镉还原的步骤，直接进行重氮化和偶合反应。

硝酸盐中的氮：通过总氮与亚硝酸盐中的氮的质量浓度的差值算出。

3 主要仪器和试剂3.1 仪器常规实验室仪器，流动注射装置，连续流动分析，容量瓶，移液管，烧杯，注射器，膜滤器，pH电极。

3.2 主要试剂磷酸，磺胺，N—（1—萘基）乙二胺二氯化氢，亚硝酸钠，硝酸钾，咪唑或氯化铵，37%的盐酸，1mol/L的盐酸，硫酸铜溶液，聚十二烷乙二醇酯，镉粒，0.25mol/L咪唑贮备溶液，载体或稀释溶液，硫酸铜缓冲溶液。

4 过程简述4.1 采样如果只测定亚硝酸盐中的氮或者要测定硝酸盐中的氮而亚硝酸盐的浓度在硝酸盐浓度的工作范围内，则用玻璃瓶或聚乙烯瓶采样。

如果只测定总氮或样品中亚硝酸盐和硝酸盐的浓度在总氮的工作范围以下，则使用聚乙烯或聚四氟乙烯的容器，用盐酸酸化样品至pH为2左右，在2～5℃保存，24小时内分析。

4.2 制备、活化、检查镉还原器4.3 测试在测试亚硝酸盐之前，让试剂溶液连续流过流动装置10分钟。

在测试总氮之前，让试剂溶液不经过镉还原器流过流动装置10分钟之后再流经镉还原器流过流动装置10分钟。

水中氨氮、亚硝酸盐和硝酸盐氮的测定一、目的和要求1、了解水中 3 种形态氮测定的意义。

2、掌握水中 3 种形态氮的测定方法与原理。

二、原理氮是蛋白质、核酸、酶、纤维素等有机物中的重要组分。

纯净天然水体中的含氮物质是很少的，水体中含氮物质的主要来源是生活污水和某些工业废水。

当含氮有机物进入水体后，由于微生物和氧的作用，可以逐步分解为无机氨（ NH 3 ）、铵（ NH 4+ ）、亚硝酸盐（ NO 2- ）和最终产物（ NO 3- ）微生物含氮有机物蛋白质、氨基酸、氨等亚硝酸菌硝酸菌菌NH 3 （ NH 4+ ） NO 2 NO 3-氨和铵的氮称氨氮。

亚硝酸盐中的氮称为呀硝酸盐氮。

硝酸盐中的氮称为硝酸盐氮。

这 3 种形态氮的含量都可以作为水质指标，分别代表有机氮转化为屋脊氮的各个不同阶段。

随着含氮物质的逐步氧化分解，水体中的微生物和其他有机污染物也被分解破坏，因而达到净化水体的作用。

水中有机氮、氨氮和硝酸盐氮等几项指标的相对含量，在一定程度上反映了含氮有机物水体的时间长短，从而对探讨水体污染历史、它们的分解趋势和水体自净状况有一定参考价值（见表 1-8-1 。

）表 1-8-1 水体中 3 种形态氮检出的环境化学意义三氮的测定方法如下：1、氨氮的测定 -------- 钠氏比色法氨氮与纳氏试剂反应生成棕色沉淀，当含量很低时呈浅黄色或棕色，因而可以比色测定。

2K 2 [HgI 4 ]+3KOH+NH 3 ＝＝＝＝ [Hg 2 O · NH 2 ]I+2H2O+7KI2、亚硝酸盐氮的测定 --------- 盐酸a —萘胺比色法在 pH 为 2.0~2.5 时，水中亚硝酸盐与对氨基苯硝酸生成重氮盐，当与盐酸 a—萘胺发生偶联后是生成红色燃料，其色度与亚硝酸盐含量成正比。

3、硝酸盐氮的测定 ------------ 紫外分光度法硝酸根离子在紫外区有强烈吸收，在 220nm 波长处的吸光度可定量测定硝酸盐氮，而其他氮化物在此波长不干扰测定。

实验一紫外分光光度法测定水体中的硝态氮一、实验目的1.认识天然水体中无机态氮的形态；2.掌握紫外分光光度计的结构和用途；3.掌握紫外分光光度法测定硝酸盐氮的技术原理及方法；4.熟悉回收率的含义及测定方法。

二、实验要求根据紫外分光光度法测定水体中硝态氮的原理和方法，利用实验室可提供的试剂、仪器和材料，选择最合理的方案（仪器、试剂、步骤等），寻找最合理的答案，完成下列任务，回答有关问题，并最终独立完成实验。

实验室可提供的试剂和仪器见表3-30。

表3-30 实验室可提供的试剂和仪器三实验原理1.无机态氮的形态及关系氨氮、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮互相转换。

问题1 无机态氮有哪几种形态？任务1 写出无机态氮形态之间的相互关系。

2.硝酸根离子的结构特征就硝酸盐而言，NO3-离子呈平面三角形结构（见图3-5），硝酸根中存在三个NOσ键，同时存在一个离域键，在紫外区域能够发生电子跃迁，从而吸收紫外辐射，形成紫外吸收光谱。

实验原理：本实验采用不经显色反应，利用硝酸根离子在200nm波长下有最大吸收的原理直接测定。

图3-5 硝酸根离子结构示意图3. 紫外分光光度计及测定原理：（1）构造：主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。

波长范围：190 nm～900 nm（200～400nm的紫外光区、400～900nm的可见光区）（2）紫外分光光度法的使用定性分析方法：测得标准物质的吸收峰以及其对应波长值（同时可获得该物质的最大吸收波长）；即最佳测定波长；定量分析：在最佳波长处，分别以（不同浓度）标准溶液的吸光度和溶液浓度为横、纵坐标绘出化合物溶液的标准曲线得到其所对应的数学方程。

四、实验内容1.试剂配制1.11000μg?mL-1NO3-标准储备液的配制1.2 10μg?mL-1NO3-标准使用液的配制1.3 1mol·L-1HCl溶液2.吸收光谱/吸收曲线的制作及摩尔吸光系数的测定选择任意两个浓度的硝酸盐溶液，按照下面表格测定吸光度。

植物组织中硝态氮含量的测定目的意义根系吸收的无机态氮，有铵态氮和硝态氯。

植物体内硝态氮合量可以反映土壤氮素供应情况，常作为施肥指标。

叶菜类和根菜类中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制过程中可转化为亚硝酸盐而危害人体健康。

测定植物组织硝态氮含量对研究植物氮素营养和农产品安全性均有重要作用。

一、实验原理本实验采用硝基水杨酸比色法测硝态氮，其原理是在有浓硫酸的条件下NO3-与水杨酸生成硝基水杨酸。

产物硝基水杨酸在碱性条件下(PH>12)呈黄色，在410 nm处有最大吸收峰，在范围内，其颜色的深浅与含量成正比，可直接比色测定。

二、材料、设备和试剂1.材料玉米、接骨木、瓜类、葡萄等植株幼苗。

2.设备电子天平、分光光度计、恒温水浴锅、容量瓶、刻度试管、漏斗、滤纸等。

3.试剂（1）100mg/L硝态氮标准溶液精确称取烘干至恒重的KNO3 0.7221g溶于蒸馏水（无离子水）中，定容至1000ml。

（2）5%水杨酸-硫酸溶液称取5g水杨酸溶于100ml浓硫酸中（密度为1.84），搅拌溶解后，贮存于棕色瓶中，置冰箱保存1周有效。

（3）8%氢氧化钠溶液称取20g氢氧化钠溶于250ml蒸馏水中。

三、操作方法1．标准曲线的制作(1)吸取100 mg/L硝态氯标准溶液1m1、2ml、4m1、6m1、8ml、10ml、12m1分别放入10ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，使之成为10、20、40、60、80、100、120µg /m1硝态氮的系列标准液。

(2)取8支试管，分别编号为0-7，以0号管加入0.1ml蒸馏水作空白，1-7号管分别吸取上述系列标准溶液0.1ml。

再分别加入0.4ml 5％水杨酸—硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20min后，再加入8％NaOH溶液9.5ml，摇勾冷却至室温，以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度，以硝态氯含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

见下表。

2．样品制备称新鲜植物组织l-2g研成匀浆，(或称经70℃烘干磨碎过60目即孔径0.25mm筛的干样100mg)装入20m1具塞刻度试管，加无离子水10-20ml，盖紧塞子，置于45℃恒温水浴浸提1h，其间不断摇动，然后过滤或离心(如含色素需脱色)，滤液备用。