哮喘动物模型的研究现状

综 述项目来源:国家重点基础研究发展计划( 973 计划)(2009CB 522708)第一作者:谭程(1981-),女,在读博士,研究方向:腧穴特异性的临床研究。

E -mail:tanch eng206@近十年针刺治疗支气管哮喘的临床及实验研究现状谭 程 赵吉平 张 昶1(北京中医药大学东直门医院针灸科,北京100007;1北京航天中心医院中医科,北京100076)摘 要 本文对近十年体针及电针治疗支气管哮喘的临床和实验研究进行评价分析。

临床研究一般选用外周血进行检测,发现针刺能改善肺功能,调整免疫状态,减轻炎性反应,从而达到改善哮喘临床症状的目的。

动物实验发现针刺能改善哮喘动物模型的肺功能,减轻哮喘症状,其疗效发生机制与针刺减少嗜酸细胞的聚集及浸润、减少细胞因子的释放以及延缓气道重塑、影响免疫应答的信号转导有关。

综合分析文献资料,认为目前临床研究设计不够严格,使研究结果的可信度受到影响;动物实验的指标选择虽种类多,但探讨指标之间的联系力度不够,使得研究结果之间彼此孤立。

因此还需根据循证医学原则对其疗效机制做进一步研究。

关键词 针刺 支气管哮喘 临床研究 实验研究中图分类号 R 246 1 文献标志码 A 文章编号 1000-0607(2011)04-0302-05Su rvey of C linical and Experimental Researches on Mechanisms of Acupuncture Treatment of Bronchial AsthmaT A N Cheng, ZH A O J-i ping , ZH A N G Chang 1(Dep ar tment of A cu -mox ibus tion,D ongz himen H os p ital A f f iliated to Bei-j ing Univ er s ity of Chinese M edicine,Beij ing 100007,China;1D ep artment of Chinese M edicine ,Beij ing A eros p ace Centr alH osp ital,B eij ing 100076)ABSTRACT In the pres ent paper,the authors review the developm ent of experim ental and clinical s tudi es on acupuncturetreatm ent of bronchial asthm a in recent 10years.R egarding clinical s tudi es,res ul ts s howed that acupuncture could 1)regulate cardiac -pulmonary functi on;and 2)adjust im mune state and reli eve i nflam matory reactions in bronchial asthma patients.Ani m al experim ents showed that acupuncture coul d function in 1)improvi ng pulmonary function;2)reducing accumulation of the peri pheral eos i nophile granulocytes (EOS),relieving the infiltration of inflamm ator y cell s in the air -passage m ucosa and pr om oti ng the apop -tosis of EOS in the lung and ai r -passages;3)down -regulating the express i on of air -pas sage remodeli ng -related protein insuli n growth factor -1;4)suppressing the secretion of tum or necros i s factor and endothelin;5)attenuati ng allergic reaction;6)regula -ting neuroendocri ne acti vity;and 7)modulating intracellular s econd m essenger acti vities.H owever,ri gor ous clinical study design is not enough,so that the reliabi lity of the results i s limited.In spite of many i ndicators of ani m al experi m ents have been selected,but their correlati ons are not i n close association,resulting i n poor com plementation and m utual identifi cation of the acquired find-i ngs.For thi s reason,i ts cli nical efficacies need to be researched further according to principles of evidence -based m edi cine.KEY W ORDS Acupuncture therapy; Bronchial asthm a; Clini cal studies; Experim ental studies 针刺治疗哮喘古代文献早有记载,现代临床应用也较广泛,目前针刺治疗哮喘的机制是临床研究和基础研究的关注点。

摘要：[目的] 探讨黄龙止咳口服液治疗咳嗽变异性哮喘的可能作用机制。

[方法]将50只BALB/c 小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、黄龙止咳口服液低、高剂量组，每组10只。

采用卵蛋白、氢氧化铝腹腔注射致敏并吸入卵蛋白激发法建立咳嗽变异性哮喘小鼠模型，黄龙止咳口服液组分别以0.75g/kg 和1.5g/kg 进行灌胃，每日1次，持续14d 后处死小鼠。

采集血清，以酶联免疫吸附（ELISA ）法检测血清总免疫球蛋白E （IgE ）及白细胞介素（IL ）-4、IL-5、IL-13的含量；分离小鼠肺组织，苏木精-伊红（HE ）染色后观察肺组织形态；蛋白免疫印迹（Western blot ）法检测肺组织中Toll 样受体4（TLR4）、髓样分化因子（MyD88）及核转录因子-κB （NF-κB ）的蛋白表达量。

[结果]与正常组比较，模型组血清中各炎症细胞及IgE 、IL-4、IL-5、IL-13含量均明显增高，肺组织中TLR4、MyD88和NF-κB 蛋白表达增高，差异有统计学意义（P ＜0.01）。

与模型组比较，地塞米松组、黄龙止咳口服液低剂量组和高剂量组病理切片表现均有所改善，血清中各炎症细胞及炎症因子含量、肺组织中TLR4、MyD88和NF-κB 蛋白表达均降低（P ＜0.01）。

[结论]黄龙止咳口服液能改善咳嗽变异性哮喘模型小鼠气道炎症及气道高反应性，其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路有关。

关键词：黄龙止咳口服液；咳嗽变异性哮喘；气道炎症；Toll 样受体；核转录因子-κB 中图分类号：R285.5文献标志码：Ａ文章编号：１６７３－９０４３（２０20）03－0330-06黄龙止咳口服液对咳嗽变异性哮喘模型小鼠的作用机制研究*王春燕1，隆红艳2（1.南京中医药大学研究生院，南京210029；2.南京中医药大学附属南京中医院，南京210023）*基金项目：江苏省中医药局科技项目（LZ13100）。

《间充质干细胞对哮喘大鼠Notch信号通路的调节作用》一、引言哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病，其发病机制复杂，涉及多种细胞和分子相互作用。

近年来，间充质干细胞（MSCs）因其具有免疫调节和修复损伤组织的能力，被广泛应用于哮喘等慢性疾病的治疗研究。

Notch信号通路作为调控细胞发育和分化的关键信号通路，在哮喘的发病过程中也发挥了重要作用。

因此，本研究旨在探讨间充质干细胞对哮喘大鼠Notch信号通路的调节作用。

二、材料与方法1. 实验材料实验所用的大鼠哮喘模型采用OVA致敏和激发的方法制备。

间充质干细胞取自健康成年大鼠骨髓，经体外扩增和鉴定后用于实验。

2. 实验方法将大鼠随机分为四组：正常组、哮喘模型组、MSCs治疗组及Notch信号通路抑制剂治疗组。

采用气管内滴注OVA溶液制备哮喘模型，MSCs治疗组通过尾静脉注射MSCs进行治疗，Notch 信号通路抑制剂治疗组在哮喘模型制备后给予Notch信号通路抑制剂。

通过实时荧光定量PCR、Western blot等方法检测各组大鼠肺组织中Notch信号通路相关基因和蛋白的表达水平。

三、实验结果1. 哮喘大鼠模型的建立与验证本实验成功建立了哮喘大鼠模型，表现为明显的气道高反应性、肺部炎症及气道重塑等特征。

2. MSCs对哮喘大鼠Notch信号通路的调节作用与哮喘模型组相比，MSCs治疗组大鼠肺组织中Notch信号通路相关基因和蛋白的表达水平明显降低，表明MSCs对哮喘大鼠Notch信号通路具有调节作用。

同时，MSCs治疗组的炎症反应和气道重塑程度也得到改善。

3. Notch信号通路抑制剂对哮喘大鼠的影响Notch信号通路抑制剂治疗组大鼠肺组织中Notch信号通路的活性受到抑制，与MSCs治疗组相似，炎症反应和气道重塑程度也得到改善。

这表明抑制Notch信号通路的活性可以减轻哮喘大鼠的病情。

四、讨论本研究结果表明，间充质干细胞对哮喘大鼠Notch信号通路具有调节作用，能够改善哮喘大鼠的病情。

2023靶向哮喘气道上皮研究进展（全文）摘要哮喘是一种遗传和环境因素共同作用的异质性疾病，气道上皮损伤是哮喘患者常见的气道病理改变。

气道上皮的物理屏障功能和免疫调节功能共同应对病毒、过敏原及大气污染物的刺激和损伤后修复，并在哮喘气道炎症、气道高反应性及气道重塑中发挥重要作用。

近年来，针对气道上皮的靶向疗法已经显示出临床治疗价值，有可能成为哮喘，尤其是重度哮喘新的干预靶点。

本文将重点探讨气道上皮在哮喘发病中的作用及靶向哮喘气道上皮的治疗策略。

关键词：哮喘；病理学，临床；上皮；综述文献（主题）气道上皮作为支气管与外界环境之间的交界，是抵御外界病毒、细菌、环境过敏原及大气污染物等刺激性因素的第一道防线。

气道上皮在启动宿主防御和调控免疫反应中起着关键作用，目前已经成为哮喘研究前沿的方向。

有研究证实,气道上皮与气道炎症、氧化应激、气道高反应性及气道重塑、抗病毒能力、激素抵抗等密切相关。

近年来,针对气道上皮源性细胞因子，如胸腺间质淋巴生成素（TS1P）和白细胞介素Q1）-33的靶向疗法已经显示出临床治疗价值，气道上皮已经成为哮喘新的治疗干预靶点，值得临床关注。

笔者重点探讨气道上皮在哮喘发病过程中扮演的角色，并进一步分析现有干预靶点的前景及未来研究的方向。

一、哮喘患者气道上皮损伤特点正常情况下，气道上皮可通过其机械物理屏障、纤毛清除和免疫调控功能维持气道黏膜完整性及稳定性。

临床及哮喘小鼠模型研究显示，不同表型哮喘均出现气道上皮损伤，主要表现为气道上皮屏障破坏、纤毛细胞脱落、痰中可见气道上皮细胞聚集体(creo1a小体)、对变应原的通透性增加，以及细胞间黏附连接破坏。

与之对应，1eino等通过气液界面培养气道上皮细胞发现，与健康对照组相比，哮喘患者气道上皮细胞通透性和对环境伤害的敏感性增加。

除此之外，在确诊哮喘或哮喘发病前伴有气道功能异常的儿童患者中，同样可观察到气道上皮结构病理性改变,提示气道上皮损伤可能在哮喘发病的不同阶段均扮演了重要角色。

【动物医学论文】探讨防治应激条件下大鼠哮喘的作用［论文摘要］目的：探讨心理因素对哮喘发病的影响和调肝法调节应激、防治哮喘的作用机制。

方法：用卵蛋白加束缚应激刺激建立应激条件下哮喘大鼠模型，采用放射免疫分析法、酶联免疫吸附法、原位杂交、免疫组化、光镜及电镜等方法，检测各组大鼠血浆皮质酮、白细胞介素4、干扰素γ、海马糖皮质激素受体mRNA和下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（adrenocorticotropic hormone corticoliberin, CRH）阳性神经元，并观察肺和海马组织形态学的变化。

结果：疏肝理肺方可明显降低血浆皮质酮水平，升高血浆干扰素γ，降低血浆白细胞介素4，减少下丘脑室旁核CRH阳性神经元，上调海马CA3区糖皮质激素受体mRNA 的表达，减轻海马神经元的损伤，并可明显减轻应激条件下哮喘大鼠肺组织的病理改变。

结论：疏肝理肺方通过抑制应激条件下哮喘大鼠下丘脑垂体肾上腺皮质轴功能的亢进及调节免疫系统的功能，从而起到防治哮喘的作用。

［论文关键词］应激; 哮喘; 疏肝理肺法Protective and therapeutic effects of Shugan Lifei Recipe on rats with asthma under stress and the mechanismsABSTRACT Objective: To explore the influence of psychological factor on asthma, the protective and therapeutic effects of Shugan Lifei Recipe on rats with asthma under stressand the mechanisms. Methods: Allergy and stressinduced asthma models were established in rats by giving ovalbumin and restraining stress. Radioimmunoassay, enzyme linked immunosorbent assay, in situ hybridization and immunohistrochemical method were used to detect plasma corticosterone, IL4, IFNγ, expression of glucocorticoid receptor (GR) mRNA in hippocampus and adrenocorticotropic hormone corticoliberin (CRH) positve neuron in hypothalamus. Optical and electron microscopes were used to observe the morphological changes of pulmonary hilar and hippocampal tissues.Results: Shugan Lifei Recipe (SGLFR) could reduce plasma corticosterone, decrease CRH positive neurons in paraventricular nucleus of hypothalamus, upregulate the expression of GR mRNA in hippocampus and reduce the injury of hippocampal neuron. SGLFR had certain inhibitive effect on hyperfunction of hypothalamopituitaryadrenal cortex (HPA) axis in rats with asthma under stress and could also relieve the pathological changes of the pulmonary hilar tissue. The level of plasma IFNγ was increased while the level of plasma IL4 was decreased in SGLFRtreated group. Conclusion: The mechanism of SGLFR in treating the rats with asthma under stress is probably to regulate the hyperfunction of HPA axis and the disorder of immuosystem.KEY WORDS stress; asthma; dispersing stagnated liver qi and regulating lung qi支气管哮喘是一种多病因疾病，发病机制十分复杂，严重危害人类的健康。

PPAR-γ在哮喘小鼠气道的表达及临床意义的开题
报告
引言：
哮喘是一种常见的慢性疾病，其特征是气道的可逆性梗阻。

哮喘的
发病机制涉及到炎症反应、支气管收缩和黏液分泌等多个方面，但具体
的发病机理还不完全清楚。

近年来，研究发现PPAR-γ在哮喘发病中可能起着重要作用。

本文旨在探讨PPAR-γ在哮喘小鼠气道的表达以及其在临床上的意义。

背景：
PPAR-γ是一种转录因子，参与脂质代谢、糖代谢和炎症反应等过程。

研究发现，PPAR-γ在哮喘病人和小鼠气道炎症反应中表达明显降低。

而PPAR-γ的激动剂则能够增加气道上皮细胞的黏液清除、减轻气道炎症反
应和支气管收缩等作用。

方法：
本文将使用小鼠模型研究PPAR-γ在哮喘小鼠气道的表达情况。

首先，选取多种刺激物如如牛奶、卵清蛋白等，将小鼠进行致敏处理，然后使
用不同的方法测定小鼠哮喘的表型特征。

随后，我们将测定小鼠气道上
皮中PPAR-γ的表达情况。

结果：
我们期望结果将呈现出PPAR-γ激动剂能够显著地减轻哮喘小鼠气道炎症反应和支气管收缩的情况，并且PPAR-γ在哮喘小鼠气道中的表达水平受到致敏处理的影响。

讨论：
本文旨在进一步证实PPAR-γ在哮喘中的作用，并且探讨PPAR-γ在临床上的意义。

如果PPAR-γ能够用作哮喘的潜在靶点，并且PPAR-γ激动剂可以作为治疗的一种手段来缓解哮喘病人的症状，那么将具有很大的临床意义。

该方法也可能具有很大的转化价值，可以为解决哮喘这种常见疾病的治疗难题提供一个新的思路。

《Th1-Th2与Treg-Th17平衡对儿童哮喘的调节作用研究》Th1-Th2与Treg-Th17平衡对儿童哮喘的调节作用研究摘要：本文着重探讨了Th1/Th2与Treg/Th17免疫平衡在儿童哮喘发病机制中的关键作用。

通过研究这些细胞因子之间的平衡关系，揭示了其对于调节儿童哮喘发作及疾病进展的重要性。

本文旨在为儿童哮喘的预防和治疗提供新的思路和方向。

一、引言儿童哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病，其发病机制复杂，涉及免疫系统、遗传因素和环境因素等多方面。

近年来，Th1/Th2与Treg/Th17细胞因子在哮喘发病机制中的作用日益受到关注。

因此，探讨这两种细胞因子平衡对儿童哮喘的调节作用具有重要意义。

二、Th1/Th2与Treg/Th17细胞因子概述Th1/Th2细胞因子是机体免疫应答的重要调节因子，它们之间的平衡对于维持机体免疫稳定至关重要。

Treg细胞是一种具有免疫抑制功能的调节性T细胞，能够抑制过度的免疫反应。

而Th17细胞则与机体抗感染免疫有关，其分泌的细胞因子在炎症反应中发挥重要作用。

三、Th1/Th2与Treg/Th17平衡在儿童哮喘中的作用研究显示，儿童哮喘患者体内Th2型细胞因子和Th17型细胞因子水平升高，而Treg细胞数量减少，导致Th1/Th2与Treg/Th17平衡失调。

这种失衡可能导致气道炎症、气道高反应性和哮喘发作。

因此，维持Th1/Th2与Treg/Th17平衡对于预防和治疗儿童哮喘具有重要意义。

四、研究方法本研究采用流行病学调查、实验室检测和临床观察等方法，收集儿童哮喘患者和健康儿童的样本，检测其Th1/Th2与Treg/Th17细胞因子水平，分析其与哮喘发病的关系。

同时，通过干预治疗，观察调节Th1/Th2与Treg/Th17平衡对儿童哮喘的疗效。

五、实验结果实验结果显示，儿童哮喘患者体内Th2型细胞因子和Th17型细胞因子水平显著高于健康儿童，而Treg细胞数量减少。

支气管哮喘（豚鼠）的动物模型制作方法支气管哮喘（bronchial asthma）有气管过敏性的，也有可逆性气管闭塞性的，它是一种慢性气管变体反应性炎症性疾病。

许多细胞包括肥大细胞、嗜酸粒细胞和T淋巴细胞在内都参与了支气管哮喘的发生和发展的过程。

支气管哮喘的致病原因很多，最常见的有过敏反应、支气管敏感性增高、自主神经功能紊乱、感染和内分泌失调等。

在制作实验性支气管哮喘的模型时要根据以上这些要原因去采用不同的方法。

一、模型制作实验性哮喘模型最为理想的是能找到自然发生哮喘的动物。

目前用于制备哮喘模型的动物很多，主要有大鼠、小鼠、豚鼠、犬、兔、羊及猴等。

实验中最常用的是豚鼠。

因为豚鼠的支气管平滑肌发达，适于哮喘发作时的观察。

豚鼠的实验哮喘模型分为4类：①实验过敏性哮喘。

②职业性哮喘模型。

③药物性哮喘（组织液、乙酰胆碱等）。

④支气管平滑肌模型（利用支气管组织切片）等。

可利用这些模型来研究抗体的产生、气管的过敏性和药物对支气管的影响。

激发动物的致敏原可用卵白蛋白、血小板激活因子、寄生虫、花粉，以及一些能引起职业性哮喘的物质，如甲苯二异氰酸、甲酯、邻苯二甲酸苷和乙二胺等。

根据制模方式的不同可分为主动免疫致敏动物模型和被动免疫致敏动物模型。

前者是利用大型动物，让其感染圆线虫类寄生虫。

由于其血液中长期存在抗某一感染寄生虫的特异性抗体（IgE），所以在再次受这一寄生虫抗原攻击时，就会迅速地产生特异的抗原抗体反应，并表现出支气管哮喘的症状。

后者是指在实验前，用一种特殊的抗原及免疫佐剂免疫动物，使动物过敏后，再用同一抗原进行攻击以建立哮喘动物模型。

（一）过敏性哮喘过敏性哮喘的模型制备也有两种方法，即主动致敏和被动致敏。

前者是给动物投与抗原物质以感作，再给与相同物质以诱发哮喘。

后者则是从感作的豚鼠体内采集血液，分离血清并将其注入未感作的豚鼠体内，次后再给与用于感作的抗原物质以诱发哮喘发作（ahaphylaxie）。

主动致敏常用于对某种物质有无抗原性的判断。

哮喘大鼠肺泡巨噬细胞膜钾通道活性及分泌功能的研究的开题报告一、研究背景及意义：哮喘是一种常见的慢性呼吸系统疾病，其发病机制十分复杂，包括神经因素、免疫因素、环境因素等。

哮喘患者的肺泡巨噬细胞（alveolar macrophages，AM）扮演着重要的免疫功能，能够吞噬、引爆及清除机体内的病原微生物、细胞废物等害群之马。

然而，在哮喘病变的肺组织中，AM功能异常，分泌介质失调，这使得其在哮喘的发病机制中占据了重要的地位。

因此，研究AM的功能异常以及下游的信号通路对于哮喘病理机制的深入了解十分必要。

在生物系统中，离子通道是一类非常关键和广泛存在的膜蛋白质，它在细胞膜上负责疏通不同种类的离子通信，并参与细胞的生理活动。

钾通道是其中的一种非常重要的离子通道之一，目前已经在不少哮喘相关的研究中得到了广泛的关注。

通过离子通道的研究，可以建立哮喘发病过程中的信号传导链条，分析钾通道在AM中的分泌规律及其对哮喘的影响，为临床治疗提供有力的依据。

因此，本文旨在研究哮喘大鼠AM的钾通道活性及分泌功能，并以此为基础，探索哮喘病理过程中钾通道的作用，为哮喘的生理及临床治疗提供理论支持和实验基础。

二、研究内容:1、建立哮喘大鼠模型，并经过组织学、免疫组化染色等手段进行确认。

2、采用全细胞膜片钳技术(record whole-cell patch clamp)记录哮喘大鼠AM的膜钾通道电流。

3、通过荧光定量PCR技术(real-time PCR)检测哮喘大鼠AM中钾通道mRNA的表达量。

4、采取酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)测定哮喘大鼠AM中钾通道的分泌程度。

5、研究钾通道在哮喘发病过程中的信号通路及其作用机制。

三、研究方法和技术路线：1、实验动物的选取和分组选取SD大鼠，随机分为对照组和哮喘模型组。

2、模型的建立采用鸡蛋清卵白(OVA)致敏方法对SD大鼠建立哮喘模型。

中药二步序贯治疗对哮喘小鼠气道炎症与重塑模型影响的对比研究的开题报告背景与意义哮喘是一种常见的慢性炎症性呼吸系统疾病，其症状包括气喘、咳嗽和胸闷等，严重时甚至会危及患者的生命。

尽管现有的现代医学疗法可以有效地缓解症状，但往往会伴随着许多不良的副作用，给患者带来更多的痛苦。

相反，中药治疗哮喘在避免副作用方面具有很大的优势，因此受到越来越多的关注。

然而，目前中药在哮喘治疗中的应用存在诸多不确定性，比如中药物质的复杂性和缺乏严格的药理学机制研究等。

因此，为了更好地了解中药的治疗效应以及其内在的机制，需要开展更多的相应研究。

在本研究中，我们将比较中药一次治疗与二步序贯治疗在哮喘小鼠气道炎症和重塑模型中的影响，以期为中药在哮喘治疗中的应用提供更为可靠的理论依据。

研究内容和方法1. 实验动物：选取105只SD小鼠，同龄、同性别。

2. 建立气道炎症和重塑模型：采用卵清蛋白致敏的方法建立气道炎症和重塑模型。

3. 中药治疗：将小鼠随机分为三组：正常组，模型组和治疗组。

治疗组分为一次治疗组和二步序贯治疗组。

一次治疗组在气道炎症和重塑模型建立后，用中药治疗一次。

二步序贯治疗组在模型建立后，先用一种中药治疗，再在第二周用另一种中药进行治疗。

4. 观察指标：比较各组小鼠气道阻力、炎症指标（白细胞计数、IL-4和IL-13）、重塑指标（肺泡面积和肺小叶数量）的变化。

预期结果我们预计，相对于一次治疗组和模型组，二步序贯治疗组将表现出更显著的治疗效应，具体体现在以下几个方面：1. 气道阻力下降：二步序贯治疗将更有效地改善小鼠的气道阻力，降低患者的呼吸困难程度。

2. 炎症指标下降：二步序贯治疗将在更大程度上减轻小鼠的气道炎症，从而减少哮喘症状的发作。

3. 重塑指标下降：二步序贯治疗将更有效地减轻小鼠肺泡面积和肺小叶数量的损伤，从而避免哮喘重塑的发生。

通过本研究的探讨，我们希望为中药在哮喘治疗中的应用提供新的思路和临床依据，为哮喘患者的治疗带来更多的选择和希望。

27第16卷 第5期 2014 年 5 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 16 No. 5 May，2014支气管哮喘（简称“哮喘”）属于慢性呼吸系统疾病，严重的威胁着人类的健康。

本实验以中西医基础理论为指导，制备了豚鼠过敏性哮喘模型，观察了人参蛤蚧散汤剂对模型动物肥大细胞脱颗粒率、血清总补体活性和IgE 含量的影响。

旨在观察人参蛤蚧散对机体免疫功能的影响，从而为过敏性支气管哮喘疾病的预防提供理论依据。

1 材料与方法1.1 实验动物及分组选用健康三色秘鲁种雄性豚鼠（由辽宁中医药大学实验动物中心提供），体重（300±30）g，共27只。

按照随机数字法随机分为正常对照组（A 组）、哮喘模型组（B 组）、人参蛤蚧散预防组（C 组），共3组，每组9只。

1.2 试剂、药品及设备抗原：卵蛋白25 g（由Sigma 公司提供），放免法检测豚鼠血清中IgE 含量试剂盒（试剂盒由北京美迪科生物技术有限公司提供）。

人参蛤蚧散：蛤蚧、甘草、杏仁、人参、茯苓、贝母、桑白皮、知母共8味药参考《御药院方》原方配伍，为了方便实验研究，改散剂为水煎剂。

每剂药煎煮3次，去药渣过滤浓缩制成100%药液，即1 g 饮片/mL。

402AI 型超声雾化器，江苏鱼跃医疗设备有限公司生产；SHA-B 型恒温振荡器，常州国华电器有限公司生产；C412型离心机，法国Jouan 公司生产。

1.3 实验方法过敏性哮喘豚鼠模型的建立参照文献方法[1]，实验第1天，B 组和C 组豚鼠经腹腔注射10％OVA 抗原液致敏，1 mL/只；A 组豚鼠以等量生理盐水进行腹腔注射。

实验第15天，用1％OVA 溶液经超声雾化器雾化后，注入4 L 密闭玻璃钟罩内，然后将B、C 组豚鼠逐个放入充满OVA 雾的玻璃钟罩内，持续喷雾20 s，每天1次，连续进行3 d；同时A 组以等量生理盐水代替1% OVA 雾化喷雾。

哮喘动物模型的制作及注意事项哮喘是一种常见的慢性炎症性疾病，可以影响人类和动物。

为了深入了解哮喘的病理机制和寻找新的治疗方法，研究人员经常使用动物模型来模拟哮喘病理过程。

下面介绍一种常用的哮喘动物模型制作方法，并提供一些注意事项。

1.哮喘动物模型制作方法：（1）选择合适的动物：大多数实验室使用小鼠作为哮喘模型的动物，因为小鼠更容易操作，并且基因解析的种类较多。

（2）感染准备：将小鼠分成两组，一组为实验组，一组为对照组。

在实验组中，使用合适的方法感染小鼠，如使用孵化的混浊液鼻腔喷射感染，或者使用刺激性药物吸入。

（3）模型监测：在感染后的不同时间点，对小鼠进行病理学分析，如病理性炎症指标的测定，呼吸道超声检测等。

（4）治疗方法：可以使用不同的治疗方法来治疗实验组的小鼠，如药物治疗或其他新的治疗方法。

然后对治疗效果进行评估。

2.注意事项：（1）伦理问题：在进行动物模型研究时，需要遵循动物实验的伦理原则，确保动物的福利和保护动物权益。

确保合适的实验动物数量，提供适当的饲养环境和食物，并定期检查它们的身体状况。

（2）模型选择：选择合适的动物模型对哮喘研究非常关键，因为不同的动物可能对特定的刺激物或治疗方法有不同的反应。

确保选择的动物模型能够准确地模拟人类哮喘的病理过程，并具有相似的症状和结果。

（3）技术和方法选择：在制作哮喘动物模型时需要使用适当的技术和方法，如感染方法、病理学分析方法等，以确保实验结果的准确性和可靠性。

可以参考相关文献和专家的建议，以获得最佳的实验条件和结果。

（4）数据分析和解释：在进行哮喘动物模型实验后，需要对实验结果进行数据分析和解释。

统计学方法和模型评估技术可以用来分析数据，确保实验结果的可靠性和科学性。

同时，对实验结果进行合理的解释，明确实验结果对哮喘病理机制和治疗方法的贡献。

总之，制作哮喘动物模型是研究哮喘病理机制和治疗方法的重要工具。

在制作哮喘动物模型时，需要注意伦理问题，选择合适的动物模型和技术方法，并合理地分析和解释实验结果。

・ｌ２２・　２０１０年３月第９卷第２期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｒｅｓｐｉｒ　Ｃｒｉｔ　Ｃａｒｅ　Ｍｅｄ．Ｍａｒｃｈ　２０１０．Ｖｏ１．９．Ｎｏ．２　Ｉ３２受体下调哮喘模型的构建研究　刘华　倪松石　蔡和群　张桦　殷凯生　南通大学附属医院呼吸科（江苏南通２２６００１）；２南京医科大学第一附属医院呼吸科（江苏南京　２１００２９）　

【摘要】　目的构建ｐ　受体（ｐ　Ｒ）下调哮喘动物模型，以研究Ｂ　Ｒ下调及其激素保护作用的　机制。方法３２只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分成对照组、哮喘组、ｐ　Ｒ下调组和地塞米松组，每组８只。哮　喘组、Ｂ　Ｒ下调组和地塞米松组分别于实验的第０、１４和２１　ｄ腹腔注射卵白蛋白（ＯＶＡ）和氢氧化铝　的混悬液２００　ＩＬＬ，第２８　ｄ开始连续１周（３０　ｍｉｎ／ｄ）雾化吸人１％ＯＶＡ（Ｗ／Ｖ）溶液；　Ｒ下调组和地塞　米松组在最后１周每天雾化吸入ＯＶＡ之前腹腔注射６０　ｇ沙丁胺醇及雾化吸人０．０１％沙丁胺醇　３０　ｍｉｎ；地塞米松组同时予以腹腔注射地塞米松５　ｍｇ・ｋｇ一・ｄ　，连续７　ｄ。对照组腹腔注射等量的　磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ），以ＰＢＳ雾化吸人。用体积描记箱测定各组小鼠气道阻力。测定ＢＡＬＦ中自细　胞总数和分类计数。ＥＬＩＳＡ法检测ＢＡＬＦ中ＩＬ－４、ＩＦＮ一＾ｙ以及血清总ＩｇＥ浓度。提取小鼠肺组织总蛋　白，免疫印迹实验测定Ｂ　Ｒ总量，放射配基结合实验测定　膜受体数量。结果　哮喘组、Ｂ　Ｒ下调　组与对照组、地塞米松组比较，高剂量乙酰胆碱激发下的气道阻力明显增高（Ｐ＜０．０１），ＢＡＬＦ中嗜酸　粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞明显增多（Ｐ＜０．ｏ１），ＢＡＬＦ中ＩＬ４和血清总ＩｇＥ水平显著增高（Ｐ＜　０．０１），ＢＡＬＦ中ＩＦＮ一　水平显著降低（Ｐ＜０．叭）。ｐ：Ｒ下调组肺组织ｐ：Ｒ总量和Ｂ　膜受体数量均显　著低于其余三组（Ｐ＜０．０１），对照组、哮喘组、地塞米松组之间无显著差异。结论在传统的ＯＶＡ致　敏激发哮喘动物模型基础上，采用腹腔注射结合雾化吸人沙丁胺醇的方法成功构建了Ｂ　Ｒ下调的哮　喘动物模型。地塞米松对Ｂ　Ｒ下调具有保护作用。　【关键词】哮喘；小鼠；动物模型；ｐ　受体；下调