人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA检测试剂盒说明书
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Human IgE ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI479Human IgE ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IgE ELISA Kit (Human IgE Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人总免疫球蛋白E 酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆中的IgE 的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为14.3ng/ml ,本试剂盒采用特异性抗体识别人IgE ,与IgG 、IgA 没有交叉反应性,板内、板间变异系数均小于10%。
免疫球蛋白E (IgE)只能在哺乳动物身上发现。
IgE 存在于血液中,是免疫系统抵御细菌和病毒等外来物质入侵的重要工具。
IgE 是一类具有δ链的亲同种细胞抗体,是参与过敏性鼻炎、过敏性哮喘和湿疹等发病机制调节的主要抗体。
IgE 是组胺和白三烯等肥大细胞释放抗炎剂水平的主要调剂者。
尽管只有少量IgE 在血液中,但它还负责触发严重过敏反应。
IgE 在I 型超敏反应中起作用,I 型超敏反应表现为各种过敏性疾病,如过敏性哮喘、大多数类型的鼻窦炎、过敏性鼻炎、食物过敏,以及某些类型的慢性荨麻疹和特应性皮炎。
此外,有足够证据证明IgE 还参与免疫系统对寄生虫入侵的反应,并增加与癌症发病有关的白血细胞数量。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA 法(Sandwich ELISA)检测样品中人IgE 的浓度,其原理见图1。
人IgE 特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人IgE 会与捕获抗体结合。
当加入辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体后,辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体与人IgE 结合,形成夹心的免疫复合物。
最后加入显色剂TMB 溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。
!N"!胸腺基质淋巴细胞生成素在肝脏疾病中的作用陈文赏,朱继金,李仕来广西医科大学第一附属医院急诊科,南宁530021摘要:胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是一种由四条短链的α螺旋束组成的Ⅰ型IL-2家族细胞因子,与IL-7具有同源性。
TSLP在很多过敏性疾病或自身免疫性疾病如哮喘、特应性皮炎、嗜酸性食管炎、炎症性肠病等具有重要作用,且促进了这些疾病的发展。
目前,也有一些关于TSLP与肝脏疾病的研究报道。
关于它在肝脏疾病中作用,有报道其能促进肝脏疾病的发生发展,但也有研究表明其在肝脏疾病中起到保护性的作用。
现从TSLP的分子组成及其生物学特性、TSLP与良性肝病、TSLP与肝脏肿瘤三个方面做一综述,阐述TSLP在肝脏疾病中作用的研究进展。
关键词:肝疾病;胸腺基质淋巴细胞生成素;信号传导基金项目:国家自然科学基金(81960358)RoleofthymicstromallymphopoietininliverdiseasesCHENWenshang,ZHUJijin,LIShilai.(DepartmentofEmergency,TheFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Nanning530021,China)Correspondingauthor:ZHUJijin,zhujijin63@vip.sina.com(ORCID:0000-0001-6419-1350)Abstract:Thymicstromallymphopoietin(TSLP)isatypeIinterleukin2familycytokinecomposedoffourshort-chainα-helixbundlesandhashomologywithinterleukin-7.TSLPplaysanimportantroleinmanyallergicdiseasesorautoimmunediseases,suchasasthma,atopicdermatitis,eosinophilicesophagitis,andinflammatoryboweldisease,andpromotesthedevelopmentofthesediseases.Atpresent,therearesomereportsonTSLPinliverdiseases,andsomestudiesshowedthatitcanpromotethedevelopmentandprogressionofliverdisea ses,whileothersshowedthatitplaysaprotectiveroleinliverdiseases.ThisarticlereviewsthemolecularcompositionandbiologicalfeaturesofTSLPandtheroleofTSLPinbenignliverdiseasesandlivertumorsandelaboratesontheresearchadvancesinTSLPinliverdiseases.Keywords:LiverDiseases;ThymusStromalLymphopoietin;SignalTransductronResearchfunding:NationalNaturalScienceFoundationofChina(81960358)DOI:10.3969/j.issn.1001-5256.2022.05.042收稿日期:2021-09-12;录用日期:2021-10-27通信作者:朱继金,zhujijin63@vip.sina.com1 胸腺基质淋巴细胞生成素(thymusstromallymphopoietin,TSLP)的分子组成及其生物学特性TSLP最初于1994年被鉴定为胸腺基质细胞产生的细胞因子,是一种由4条短链的α螺旋束组成的Ⅰ型IL-2家族细胞因子,与IL-7具有同源性。
6-丙酮酰四氢蝶呤合酶(PTS)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液6-丙酮酰四氢蝶呤合酶(PTS)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
6-丙酮酰四氢蝶呤合酶(PTS)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
6-丙酮酰四氢蝶呤合酶(PTS)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
6-丙酮酰四氢蝶呤合酶(PTS)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
专利名称:胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)-结合分子及该分子的使用方法
专利类型:发明专利
发明人:J-M·R·隆多,M·J·爱德华兹,D·米勒,D·黄,R·海米,H-P·科诺普夫,K·古普塔,G·A·范黑克,N·豪布斯特,B·安德
洛埃
申请号:CN202210150111.5
申请日:20160907
公开号:CN114507281A
公开日:
20220517
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明提供特异性结合胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的分子(例如抗体或抗体片段),包含这些分子的组合物,及使用及产生这些分子的方法。
申请人:诺华股份有限公司
地址:瑞士巴塞尔
国籍:CH
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人肿瘤特异性抗原(TSA)分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆上海乔羽生物专业供应:含量。
试验原理:TSA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TSA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将TSA和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中TSA的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
仅供科研使用,不得用于临床检验。
人促红细胞生成素(EPO )酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称:人促红细胞生成素(EPO )酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)英文名称:Human Erythropoietin(EPO )ELISA KIT【包装规格】48人份/盒,96人份/盒【预期用途】仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人促红细胞生成素(EPO )的浓度。
【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。
在预包被抗人促红细胞生成素(EPO )抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入人促红细胞生成素(EPO )校准品和待测样本,再加入另一株HRP标记的抗人促红细胞生成素(EPO )抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中人促红细胞生成素(EPO )的浓度正相关。
拟合校准品曲线,可以计算出样本中人促红细胞生成素(EPO )的浓度。
【主要组成成分】主要成分校准品检测范围:47-3000pg/ml。
校准品已经通过测试,结果表明HBs抗原阴性,HIV1、HIV2和HCV抗体阴性,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。
2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
EK165-01Catalog Number EK165-48EK165–96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)浓度。
本产品仅用于科学研究,非诊断试剂,不能用于临床诊断。
一、产品介绍1.背景介绍胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)主要由非造血细胞如成纤维细胞、上皮细胞和不同类型的基质或基质样细胞产生。
它主要影响骨髓细胞、诱导单核细胞释放T 细胞虏获趋化因子和增强髓样(CD11c +)树突状细胞成熟。
研究表明,TSLP 还可激活位于表皮的特定树突状细胞亚群—朗格汉斯细胞的成熟。
胸腺TSLP 激活髓样和浆细胞样(CD123+)树突状细胞会导致调节性T 细胞的产生。
TSLP 通过胸腺基质淋巴细胞受体CRLF2和IL-7Rα链组成的异源二聚体受体复合物产生信号。
结合STAT5后就会诱导其发生磷酸化,进而导致上游转录因子的表达。
TSLP 的表达与许多疾病包括哮喘、炎症性关节炎、特应性皮炎、湿疹及其它过敏状态有关。
2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。
特异性抗人TSLP 抗体预包被在高亲和力的酶标板上。
酶标板孔中加入标准品和待测样本,经过孵育,样本中存在的TSLP 与固相抗体结合。
洗涤去除未结合的物质后,加入生物素化的检测抗体孵育。
洗涤去除未结合的生物素化的抗体,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。
洗涤后,加入显色底物TMB ,避光显色。
颜色反应的深浅与样本中TSLP 的浓度成正比。
加入终止液终止反应,在450nm 波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。
3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。
2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。
3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变,都将影响结合反应。
4)本试剂盒在设计上去除或降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素,并非所有可能的影响因素都已经去除。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断小鼠小鼠((MouseMouse))肿瘤坏死因子可溶性受体肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ(TNFsR-TNFsR-ⅠⅠ)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
人淋巴细胞因子ELISA试剂盒说明书
人淋巴细胞因子ELISA定量检测试剂盒等ELISA试剂盒检测类型:双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法。
我司人淋巴细胞因子ELISA定量检测试剂盒等ELISA试剂盒,灵敏性高,高效性,原装进口抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA 试剂盒产品齐全,质量可靠。
详情可来电咨询销售人员或咨询我司在线客服。
人淋巴细胞因子ELISA定量检测试剂盒操作步骤:
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl (样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。
6、显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
7、终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA检测试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆樊克生物专业供应:使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)含量。
试验原理:TSLP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TSLP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将TSLP和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中TSLP的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗TSLP抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。
1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。
不要在37℃或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。
稀释比例按下表中进行:80 ng/ml (6号标准原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
品)40 ng/ml (5号标准100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液品)20 ng/ml (4号标准100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液品)10 ng/ml (3号标准100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液品)5.0 ng/ml (2号标准100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液品)2.5 ng/ml (1号标准100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液品)0 ng/ml (空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。
2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。
立即加入50ul的生物素标记的抗体。
盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。
避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。
建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A 80 80 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B 40 40 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C 20 20 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D 10 10 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E 5.0 5.0 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F 2.5 2.5 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G 0 0 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒性能1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TSLP标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TSLP含量可根据其OD 值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-80ng/ml4、敏感度:0.1 ng/mlThe performance of kit:1 sensitivity: minimum detection concentration is less than 1 standard. Linearity of dilution. Sample linear regression and the expected concentration correlation coefficient R value is 0.990.2: no specific reaction with other cytokines.3 repeatability: plate, plate between the coefficients of variation were less than 10%.Human type III procollagen amino terminal peptide ELISA kit steps:1 before use, all reagents and mixing. Do not allow liquid to produce a large number of bubbles, so as to avoid adding a large number of bubbles, resulting in the addition of the error.2 according to determine the number of sample number plus standard strip number. Each standard and blank hole is recommended to do the hole. Each sample can be made according to its own quantity, and can be used as a hole in the hole.3 diluted after standard 50ul in reaction hole, added to the sample 50 UL in reaction hole to be measured. Immediately joined the 50 UL antibody biotin. Cover the membrane plate, gently oscillating mixing, 37 degrees Celsius for 45 minutes.4 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. Repeat this operation 4 times. If the washing machine with washing, washing times increased once.5 per hole adding chain affinity enzyme -HRP 100ul, gently oscillating mixing, 37 degrees 30 minutes incubation.6 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. Repeat this operation 4 times. If the washing machine with washing, washing times increased once.7 per hole adding substrate A, B 50ul, gently oscillating mixing, 37 degrees 5 minutes incubation. Avoid light.8 remove ELISA plate, quickly add 50ul terminated liquid, adding the stop solution immediately after the determination results.9 od determination of each hole at the wavelength of 450nm.The result of judgment and analysis:1, instrument value: Yu Bo 450nm ELISA od read the hole on the instrument2, to the OD value as a vertical coordinate (y), corresponding ot standard concentrations as a horizontal coordinate (x), do have corresponding curve, sample ot content can be according to the OD value by standard curve conversion out corresponding concentration, multiplied by the dilution multiple; or with the standard concentration and the OD value calculated the regression equation of the standard curve, the sample OD value in the equation to calculate the sample concentration, multiplied by the dilution factor is the actual concentration of the sample.3, detection range: 0-100ng/ml4, sensitivity: 0.39ng/ml。