浅谈现场微量生物检材的发现、提取
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BIOTECHWORLD 生物技术世界目前随着犯罪分子的反侦察意识越来越强,犯罪手段的日益隐蔽化、科技化,微量生物检材在案件破获中的作用愈来愈重要,有时甚至对整个案件起着决定性作用。
随着PCR复合扩增和DNA分型技术的发展,对微量生物检材的检验成功率大大提高。
无论应用何种DNA分型方法,在DNA检验前对检材进行收集、提取,并以适当的形式保存对于成功获得满意的DNA分型结果都是至关重要的,如果检材在最初阶段没有妥善的处理好,在最后的分析或数据解释阶段做再多的工作也无济于事。
本文就现场微量生物检材的发现、提取问题做简要的讨论。
微量生物检材种类繁多, 从理论上说只要是与人体接触了,接触部位就会留下人体细胞, 皮肤是人体最大的器官,人每时每刻都在进行新陈代谢,每天有大量的表皮细胞脱落。
所以,人体皮肤表皮细胞就是脱落细胞类检材的重要来源,留存现场的可能性很大,对于这类检材,如果能成功的提取,获取满意的DNA分型,往往能给案件提供正确的侦查方向,甚至提供关键线索。
微量生物检材属于疑难生物检材,日常接案中常见的有:瓜子壳、猫眼纸、筷子、口香糖、指纹、眼睛托、指甲擦拭物、棉纱手套、触摸物品等。
微量DNA, 也称低拷贝模板DNA,是指量少的DNA, 一般低于50pg, 微量生物检材的成功检验往往在侦破中发挥着至关重要的作用,但由于这类检材DNA提取难度较大,短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型时有时会出现小片段等位基因优先扩增、等位基因的丢失、伪等位基因等现象,给实际正确判读DNA 分型增加难度。
足量的模板DNA是成功检出DNA分型的重要保障,故发现和有效的提取生物检材以获得足量的模板DNA成为法医工作者们经常思考的问题。
目前,犯罪分子的反侦察意识越来越强,对于现场显而易见的生物检材(常见的有血迹或血斑、精液或精斑、唾液或唾液斑等)都有一定的认知,容易对其进行破坏和毁灭。
与这些较为容易被人发现的物证相比,微量生物检材就具有隐蔽、体积小、不易发现的特点。
犯罪分子不易发现微量物证,对我们的现场勘查技术人员来说,有时也不是一件简单的事,由于犯罪分子在作案时一般很小心,尽量不留下任何痕迹,这就给发现和提取现场微量物证增加了难度,不仅需要我们的现场勘查人员有丰富的经验、严谨仔细的科学态度,而且要对生物检材的形成原理及形成过程有较深刻的认识,这样才能找出不易被人察觉的丝丝痕迹,提取到关键物证。
提取时应注意三点:(1)防污染原则:提取人员应注意戴口罩、手套、头套,严禁触摸检材。
提取的检材必须独立包装、防止交叉污染。
检材包装袋上应注明检材名称、来源、数量、采集如期等。
(2)提取部位的选择:检验人员在选择提取部位时要根据现场和正常人的生活习惯观察哪些部位可能是嫌疑人碰触较多、受力较大的部位以推测提取部位。
比如饮水杯口一般只会留下饮用者的口唇粘液,擦取该部位检验成功率较大,衬衣的领口、袖口因经常接触皮肤,沾有人体脱落细胞,用脱落细胞吸取这些部位,再纯
化,检验成功率较大。
(3)提取时应尽力多收集细胞。
提取时,对于体积小、方便运输的物体,原物提取送检。
如果载体条件不允许,可用干湿两步转移法提取,取1-3根1cm长的纱线或一枚医用棉签, 用超纯水浸湿后甩干反复擦拭提取部位, 再取另一根干的纱线或一枚棉签反复擦干, 要保证载体上的DNA浓度高、杂质(如泥土、色素等)少、切忌贪多求大。
对于野外现场尽量提取未被太阳暴晒或雨水冲刷位置的检材,因为暴晒或水浸泡会破坏DNA。
随着高灵敏度的DNA检验技术迅猛发展,我们检验微量生物检材的成功率大大提高。
检材必须要含有一定浓度的DNA,才能获得满意的DNA分型,满足法医检验者工作的需要,而如何获得一定浓度的DNA,是我们法医检验工作者最关心也是最难处理的问题。
但有些微量生物检材如作案工具、邮票或信封封口、西瓜皮、饮料瓶、手套等脱落细胞类检材,常受到其他生物检材或物质的干扰,且接触力度、时间长短、部位、接触物质的质地等也会影响检材的成功分型,有文献记载,2周内提取和6周内检验可以获得较好的分析结果,嫌疑人长时间接触的物品要比偶尔接触的物品检出率高的多。
故我们的检验人员提取检材一定要及时,且要注意不要裸手触摸,或者对着物证打喷嚏或咳嗽,要根据人们的生活习惯推测目标部位,重点提取。
水可加速DNA 的降解,故要避免用塑料袋包装检材,应等检材干燥后用纸包裹或装入纸袋中。
笔者认为无论怎么强调正确的提取微量生物检材都不过分,因为犯罪现场关键物证就那么多,一旦用完就不会再有,一个重要案件的调查可能半途而废了。
犯罪现场DNA证据的收集必须认真细致,并建立完善的保障体系,以确保DNA分析图谱有效性和作为法庭证据的合法性。
DNA分析技术十分灵敏,即使是肉眼不可见的微小生物学检材也可能将犯罪嫌疑人和犯罪现场联系起来,故在进行DNA检验之前,生物检材必须经过认真的收集、保存。
一个案件中作为证据收集的检材必须要经过仔细的选择,明确各类检材的利用价值,不要选择无用和多余的,这样才能充分发挥各类检材的价值,为破案尽可能多的提供线索。
在日常的案件中,有些案件现场比较复杂,微量生物检材很难发现,这就需要我们的现场勘查技术人员不断加强相关技术方面的理论学习、不定期的进行业务培训、多与外地市的同僚交流业务知识和心得,
才能在关键时刻发挥刑事技术的神威。
微量生物检材在案件中的作用虽然很重要,但现场勘查人员对送检的DNA生物检材必须进行必要的筛选,不可过分依赖DNA检验技术,而忽视其他技术对侦破案件的作用。
参考文献
[1][美] John M. Butler 法医DNA 分型 STR 遗传标记的生物学、方法学及遗传学.北京:科学出版社,2007:25-41。
[2]约翰.巴克尔敦、克里斯托弗.M.特里格斯、西蒙.J.沃尔什等.法庭科学DNA 证据的解释.北京:科学出版社,2010:225-244。
浅谈现场微量生物检材的发现、提取
施文娟1 李少华2
(1.铜陵市公安局 安徽铜陵 244000;2. 铜陵县公安局 安徽铜陵 244000)
摘要:随着DNA检验技术迅猛发展,检验微量生物检材的成功率大大提高。
如果能发现和有效的提取现场微量检材,法医DNA检验技术就能在破案中发挥更重要的作用。
关键词:微量DNA 生物物证 DNA分型中图分类号:[R89]文献标识码:A 文章编号:1674-2060(2015)11-0275-01
作者简介:施文娟(1984—),女,铜陵市公安局法医师,从事DNA 分析检测技术研究。
李少华(1978—),男,铜陵县公安局法医师,从事法医病理和法医临床工作。