分光光度法测定大枣中总黄酮含量

1 总黄酮含量测定1．1 紫外可见分光光度法严赞开［1］综述了紫外分光光度法测定植物中黄酮含量的方法．重点介绍了单波长法、差示法、双波长法、三波长法、导数法等紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理及分析特性。

1．1．1 紫外可见分光光度法: 是以分子吸收光谱为基础的紫外－可见分光光度法，利用某些物质的分子在峰带I( 300 ～400 nm) 和峰带Ⅱ( 220 ～280 nm) 光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。

具有简便、适用性广、准确度、精密度和重现性较好等特点，在总黄酮含量分析中发挥着重要作用。

1．1．2 比色法: 是一些药典最常用的总黄酮含量检测方法，它主要以Al( NO3 ) 3 为显色剂，在碱性条件下，利用其与总黄酮形成红色螯合物为特征。

常用于总黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al( NO3 ) 3、AlCl3 等。

1．1．3 差示分光光度法简称ΔA 法: 使用稍高于样品或稍低于样品的标准作参比，测量样品和参比间的相对吸光度。

而此相对吸光度又与样品和参比间的浓度差成比例关系，借差示工作曲线而求出样品的含量。

1．1．4 双波长和导数分光光度法: 用于测定吸收光谱曲线重达的混合物的含量而不须用解联立方程，还可分析高浓度及混浊样品，其灵敏度和准确度比普通分光光度法好。

在选择波长时，原则上除了要干扰物有相等吸光度外，还要求两波长比较接近，被测组分在该两波长处的摩尔吸收系数相差大些，这样方法的灵敏度会更高。

如果将上述双波长分光光度计上两个波长尽可能指近，使只相差1 ～2 nm，并且同时进行扫瞄，能得到试样一阶导数吸收光谱-吸光度对波长的变化率曲线，即导数分光光度法。

2 药理作用2．1 镇痛作用赵铁华等［4］研究结果显示灌胃、腹腔注射、皮下注射适宜剂量的黄芩茎叶总黄酮，对实验动物经化学和热刺激导致的疼痛反应皆有一定的抑制作用，其镇痛作用机制与中枢作用相关。

银杏总黄酮( TFG) 腹腔内注射可显著抑制甲醛致小鼠疼痛反应，延长小鼠舔足潜伏期并减少小鼠扭体反应数。

紫外分光光度法测定植物黄酮含量的方法紫外分光光度法是检测植物黄酮含量的最有效的方法，紫外分光光度的检测方法有很多，本文主要介绍了直接测定法、显色测定法、差示测定法、多波长法测定的方法，这些方法的应用条件不同，需要结合实际，综合考虑后选择适用的测定方法，这样才能提高测定的工作效率，保证测定结果的正确性。

通过对植物黄酮含量的测量，可以掌握黄酮类化合物含量的原理，还能对植物的特性进行科学的分析，具有一定的医药价值。

标签：紫外分光光度法植物黄酮方法【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）11-0709-02黄酮类化合物广泛存在于自然界，是一類重要的天然有机化合物，很多植物中都含有一定量的黄酮。

黄酮种类很多，其主要类型有黄酮、异黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷醇等等，具有一定的保健和药用价值。

黄酮类化合物的存在形式既有与糖结合成糖苷的，也有游离态，多呈黄色，在紫外光下一般具有荧光，具有很强的抗氧化性。

紫外分光光度法是测定植物黄酮含量的主要方法，下面对具体的测定方法进行一些介绍，以供参考。

一直接测定法黄酮是指具有α或β苯基苯稠吡喃酮的一类化合物，这种化合物的分子中含有肉桂酰基，也还有苯甲酰基，是一种综合的共轭体系，在甲醇溶液中，大多数黄酮类化合物在甲醇中的紫外吸收光谱由两个主要吸收带组成。

出现在300～400nm之间的吸收带称为带Ⅰ，出现在240～280nm之间的吸收带称为带Ⅱ。

带Ⅰ是由B环桂皮酰基系统的电子跃迁引起的吸收，而带Ⅱ是由A环苯甲酰基系统的电子跃迁引起的吸收，如图1所示。

峰带Ⅱ吸收紫外线的能力较强，也更适合直接测定法的检测。

在利用直接测定法对植物含黄酮量进行测定时，需要运用lambert- Beer 定律进行计算。

直接测定法主要利用了黄酮结构的特点，在测定的过程中不需要使用显色剂，在黄酮特征吸收峰处直接测定即可。

这种方法比较直接快速，而且操作简单，但是也具有一定的缺点，只适合单一成分的测定，在检测的过程中，若样品含有一定杂质，可能会影响检测结果的准确性。

大枣中黄酮类成分研究进展发表时间：2013-06-04T11:25:07.827Z 来源：《医药前沿》2013年第9期供稿作者：王雨艨[导读] 大枣(Ziziphus iujuba)为鼠李科植物枣的成熟果实，与桃、李、栗、杏并称为我国古代五果。

王雨艨 (安徽省亳州市食品药品检验所安徽亳州 236800) 【中图分类号】R284 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）09-0332-02大枣(Ziziphus iujuba)为鼠李科植物枣的成熟果实，与桃、李、栗、杏并称为我国古代五果。

始载于本经，在我国已有4000多年得栽培史。

枣的医疗保健价值我国研究最早。

大枣也常用于中药，其具有补血、健脑、抗癌及健脾强身等功效，于《神农本草经》中列为上品，历代本草中均有收载。

大枣中的有效成分包括黄酮类、多糖类、三萜类、氨基酸、维生素、环磷腺苷等，近年来随着提取工艺及检测方法的提高，对大枣中黄酮类成分的研究越来越深入，本文就大枣中黄酮类化学成分、提取工艺、含量测定、药理作用的研究作一综述。

1 化学成分从枣属植物中发现的黄酮类成分数量不多，但其总黄酮含量较高约为0.5～2.9mg.g-1[1],主要分布于果实及叶中。

除芦丁外，大多为黄酮苷，如当药黄素(swertisin)、棘苷(spinosin)、6，8-二-C-葡萄糖基-2(S)-柚皮素[6，8-di-C-glucosyl-2(S)-naringenin]和6，8-二-C-葡萄糖基-2(R)-柚皮素[6，8．Di-C-glucosyl-2(R)-naringenin]等[2]。

另外果实中还含有3种酰化黄酮苷，即acylatedflavuone．C—glycoside I、Ⅱ、Ⅲ[3]。

近年来又报道了5个新的黄酮类化合物。

它们分别是槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖醇（1→2）-a-L-吡喃鼠李糖基-4，-O-a-L-吡喃鼠李糖苷（89）、dodecaacetylprodel phinidin B3(90)[4]、未命名的化合物（91）[5]、异棘苷（isospinosin,92）[6]、6,,,-阿魏酰基异棘苷（93）[5]、槲皮素-4，-O -a-L-吡喃鼠李糖基-3-O-a-L-吡喃鼠李糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷（94）[7]。

总黄酮测定（紫外分光光度法，以柚皮苷计）[26]
1）标准曲线
精密称取柚皮苷对照品10mg ，以无水乙醇溶解并定容至50mL ，得0.2mg/mL 柚皮苷溶液。

分别取此浓度0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mL ，以无水乙醇定容至5mL ，在284nm 处测定吸光度。

从图1-2中，得回归方程：A=0.0067c-0.0033，R 2=0.9993（n=3）。

式中：c —测定用样品液中的总黄酮含量，μg
A —吸光度
图1-2 总黄酮标准曲线
Fig.1-2 The calibrate curve of flavonoids
2） 样品中总黄酮含量的测定
准确称取试样，以乙醇溶解定容，按标准曲线方法测定[26]。

样品中总黄酮提取率计算公式为：
10010
V m K V c %)P(621⨯⨯⨯⨯⨯= 式中：p: 样品中总黄酮提取率，%;
c ：从标准回归曲线中计算得到的样液的总黄酮含量，μg;
V 1：样品提取液总体积，mL ；
V 2: 测定用体积，mL ；
K ：稀释倍数;
m: 样品的投料量，g。

论文科目：中药制剂分析题目：紫外可见分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的应用班级：2012级药物制剂组员：何奇、张三军、段靓琳、杨雪超、赵甜甜可见-紫外分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的应用概况摘要：本文概述了国内外紫外可见分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的应用现状。

对黄酮类化合物含量测定中常用的紫外可见分光光度法进行归类，并分析总结其优缺点。

对紫外可见分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的发展前景进行了展望。

关键词:紫外-可见分光光度法黄酮类化合物含量测定自然界中,黄酮类化合物是广泛存在于天然植物中的一大类化合物,多具有颜色,在植物体内多为次生代谢产物,除部分以游离形式存在外,大部分与糖结合以苷的形式存在。

药理和临床试验表明:芦丁、葛根素等黄酮类化合物有益于心脑血管疾病的预防和治疗,大豆异黄酮、金雀异黄素等化合物均有抗菌作用,另外在抗炎、抗病毒、止咳平喘、祛痰等方雌性激素样作用,黄芩素和黄芩苷等有一定程度的面均有相应的黄酮类化合物存在[1]。

由于黄酮类化合物具有多种多样的生理活性,因此,针对该类化合物定量分析的研究报道很多,如高效毛细管电泳法、高效液相色谱法、薄层扫描法、极谱法等[2]。

但测定黄酮类化合物含量使用最多的方法仍为紫外-可见分光光度法。

1 直接扫描测定尽管黄酮类化合物种类繁多,但其基本母核为2-苯基色原酮,都具有C6-C3-C6的结构,因此,多数黄酮类化合物存在两个特征吸收,即在300~400nm区间由B环桂皮酰基系统电子跃迁引起的带Ñ和在240~285nm之间由A环苯甲酰基系统电子跃迁引起的带Ò。

约有6%的文献采用供试品溶液与对照品溶液通过紫外光谱扫描在以上区间获得共有吸收作为检测波长进行含量测定。

韦英杰等[3]采用化橘红中成份柚皮苷为对照品,经扫描,供试品溶液和对照品溶液在283nm处均有最大吸收,因此,确定283nm为化橘红总黄酮含量测定的检测波长。

2 与A13+形成络合物后测定在黄酮类化合物定量分析方法的研究中,约有88%的文献报道采用黄酮类化合物母核中某些位置的羟基与Al3+发生络合反应形成络合物后进行测定。

枣叶和酸枣叶的总酚、总黄酮以及抗氧化能力含量测定一、本文概述本文旨在测定枣叶和酸枣叶中的总酚、总黄酮含量，并评估其抗氧化能力。

酚类和黄酮类化合物是植物中常见的次生代谢产物，具有广泛的生物活性，如抗氧化、抗炎、抗癌等。

枣树和酸枣树作为常见的果树，其叶片中含有丰富的酚类和黄酮类化合物，因此具有一定的药用和保健价值。

本研究通过化学方法提取枣叶和酸枣叶中的总酚和总黄酮，并采用标准曲线法对其含量进行测定。

通过DPPH自由基清除实验和ABTS 自由基清除实验评估其抗氧化能力。

通过对比枣叶和酸枣叶中总酚、总黄酮含量及抗氧化能力的差异，为进一步开发利用这两种植物资源提供理论依据。

本研究的结果将为枣叶和酸枣叶的开发利用提供重要参考，同时也有助于深入了解植物次生代谢产物的生物活性及其与人体健康的关系。

本研究还将为植物资源的综合利用和农业可持续发展提供新的思路和方法。

二、材料与方法本实验所用的枣叶和酸枣叶采自同一地区、相同生长条件下的健康植株。

采样时间为春季，选择新鲜、无病虫害的叶片，经过清洗、干燥、粉碎后备用。

实验所用试剂包括福林酚试剂、碳酸钠、铝离子试剂、芦丁标准品等，均为分析纯。

实验仪器包括紫外可见分光光度计、电子天平、离心机、恒温水浴锅等。

采用福林酚法测定总酚含量。

取适量样品粉末，加入一定浓度的福林酚试剂，充分反应后，测定吸光度值，根据标准曲线计算总酚含量。

采用铝离子比色法测定总黄酮含量。

取适量样品粉末，加入铝离子试剂，充分反应后，测定吸光度值，根据标准曲线计算总黄酮含量。

采用DPPH自由基清除法测定抗氧化能力。

取适量样品粉末，加入DPPH自由基溶液，充分反应后，测定吸光度值，根据公式计算DPPH 自由基清除率，从而评估样品的抗氧化能力。

实验数据采用Excel软件进行整理与计算，采用SPSS软件进行统计分析。

所有数据均以平均值±标准差表示，不同样品间的比较采用t检验。

通过本实验方法，我们可以对枣叶和酸枣叶的总酚、总黄酮以及抗氧化能力进行定量测定，为深入研究这两种植物的药理活性提供科学依据。

２９１　前言总黄酮是很多保健食品中的重要功效成份，能促进胰岛素的亲和力，在降压、降脂、降血糖方面有显著效果，同时还具有增强毛细血管通透性等作用。

因此，测定其含量对于保健食品的品质和功效具有重要的意义。

但目前国内还没有保健食品中总黄酮测定方法的国家标准。

国内外对保健食品中总黄酮的测定，考虑到方法的简便、快捷以及平行性，多采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法。

但是，总黄酮这种天然植物的组分非常复杂，分光光度法在实测过程中会产生各种干扰，影响结果的准确性，本方法有针对性地对此开展了研究，进行了创新并取得了较好的结果，建立了一个高效、准确的测定方法。

目前总黄酮的分析方法国外报道的有溶剂抽提法、聚酰胺薄层分析法等。

但是，柱法操作复杂、时间长，难以避免实测过程中会产生各种干扰。

因此比较而言，本方法立足于用常规的化学及物理检测方法，采用了超声波提取、聚酰胺吸附法经过改进系统，试验得到了快速、简易、良好的效果，在实际测定、应用中，具有更大的意义。

２　检测方法２．１　试剂与仪器２．１．１ 试剂与材料ａ）无水甲醇、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、三氯甲烷，均为分析纯，以下用水除特殊说明外，均为ＧＢ／Ｔ　６６８２－２００８中规定的三级水。

ｂ）聚酰胺粉：过８０目～１００目筛。

ｃ）５　％亚硝酸钠溶液：称取５．００　ｇ亚硝酸钠，加水至１００ｍｌ，溶解混匀，当天配制。

分光光度法测定保健食品中总黄酮孔鲁裔（国家农业标准化监测与研究中心黑龙江）ｄ）１　ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液：称取４．００　ｇ氢氧化钠，加水至１００ｍｌ，溶解混匀。

ｅ）１０％硝酸铝溶液：称取１０．００ ｇ硝酸铝，加水至１００ｍｌ，溶解混匀。

ｆ）３０　％乙醇溶液：吸取３０．０ｍｌ无水乙醇，加水至１００ｍｌ，溶解混匀。

ｇ）芦丁标准对照品：９９．５％ｈ）芦丁标准溶液：精确称取经１０５℃干燥至恒重并按其纯度折算为１００　％质量的芦丁标准对照品０．０１５０　ｇ，加无水甲醇溶解并定容至１００ｍｌ，此溶液浓度为１５０　μｇ／ｍｌ，０℃～４℃密封保存，保存期为两个月。

第4期（总第526期）2021年4月农产品加工Farm Products ProcessingNo.4Apr.文章编号：1671-9646(2021) 04b-0062-05红枣中活性成分及其分析方法研究进展王 远1,2,邢丽杰1,张昊伟2,邹良君1, **李先义1收稿日期：2020-10-29基金项目：新疆农垦科学院项目（2020YJ018）；农产品质量安全风险评估项目（14205096）。

作者简介：王远（1983—），男，博士，高级实验师，研究方向为食品质量安全与风险评估。

*通讯作者：李先义（1974—），男，本科，实验师，研究方向为食品质量安全分析。

(1.新疆农垦科学院分析测试中心，新疆石河子832000; 2.石河子大学食品学院，新疆石河子832000)摘要：红枣作为一种食药同源的果实，包含多糖、类黄酮、酚类、环核苷酸、三萜化合物及生物碱等多种生物活性 成分，具有抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳及抗炎等作用。

对红枣中有效活性成分及其近年来的分析方法进行了综述，为红枣中活性成分的深入研究及功能性食品开发提供参考，为建立高效的检测方法提供依据。

关键词：红枣；活性成分；分析方法；研究进展中图分类号：TS201.2 文献标志码：A doi ： 10.16693/ki.1671 -9646(X ).2021.04.049Researsh Progress on Active Ingredients and Their AnalysisMethods of JujubeWANG Yuan 1,2, XING Lijie 1, ZHANG Haowei 2, ZOU Liangjun 1, *L I Xianyi 1(1. Analysis and Test Center ， Xinjiang Academy of Agricultural Reclamation ， Shihezi ， Xinjiang 832000， China ；2. College of Food Science ， Shihezi University ， Shihezi ， Xinjiang 832000， China)Abstract ： Jujube ， as a kind of fruit with food and drug homology ， contains polysaccharides ， flavonoids ， polyphenols ， cyclic nucleotides ， triterpenoids ， alkaloids and other biological active components ， which have anti-oxidation ， anti-tumor ， an ­ti-fatigue and anti-inflammation effects. In this paper ， the active ingredients in jujube and their analysis methods in recent years were reviewed ， which provided reference for the in-depth study of active ingredients in jujube and the development of functional food ， and provided basis for the establishment of efficient detection methods.Keywords ： jujube ； active ingredient ； analysis methods ； research progress0引言红枣为鼠李科枣属（Ziziphus jujuba Mill.）的成 熟果实叫营养物质丰富，同时含有多糖类、酚类、 黄酮类、皂苷类、三萜酸类和生物碱类等生物活性 物质。

紫外分光光度法测定蒙药广枣药材中总黄酮含量吴春芝;李海华;谷福根【期刊名称】《中医学报》【年(卷),期】2014(29)12【摘要】目的：建立蒙药材广枣中总黄酮（TFC）的含量测定方法,为完善该药材的质量标准提供依据。

方法：采用紫外分光光度法,以亚硝酸钠为还原剂,硝酸铝为络合剂,氢氧化钠为显色剂,在510 nm处测定TFC的吸光度值。

结果：芦丁质量在0.2～1.2 mg范围内与吸光度呈良好线性关系（r=0.999 0）,平均回收率为101.15%,RSD为0.84%（n=9）。

结论：本研究所建立广枣中TFC含量测定方法,操作简便,准确可靠,可用于该药材的质量评价。

【总页数】3页(P1786-1788)【关键词】广枣;总黄酮;含量测定;紫外分光光度法【作者】吴春芝;李海华;谷福根【作者单位】内蒙古医科大学附属医院;内蒙古医科大学【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.蒙药广枣总黄酮对离体大鼠心脏cAMP含量和腺苷酸环化酶活性的影响 [J], 杨玉梅;许翠英;徐继辉;覃建民;李增;周长凤;冯国庆;白音夫;宋一亭2.紫外分光光度法测定维吾尔医常用药材巴迪然吉卜亚中总黄酮含量 [J], 阿达来提;吐鲁洪·卡地尔;胡尔西旦·玉素甫3.蒙药广枣、麻黄、锦草中总黄酮的提取及含量的测定 [J], 孙占才;赵丹庆;刘鑫4.紫外分光光度法测定蒙药材多叶棘豆中总黄酮含量 [J], Ming Ming;Wu Shuang;Yang Liguo;Dai Nayintai;Sudunabuqi;Zhalagabaiyila5.蒙药广枣三味汤配伍变化对总黄酮及苦参碱含量的影响 [J], 巴根那;杨阿敏;李宝山;张昕原;孙福祥;乌日娜;王志民因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

黄酮含量的测定方法1、对照法1）①对照品制备：精密称取芦丁对照品20.8mg，置于100ml容量瓶中，加70%乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。

②样品溶液制备精密称取样品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。

③标准曲线的制备精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加1mol/L 氢氧化钠溶液10ml，加70%乙醇置刻度，摇匀，放置15分钟。

各取10ml 置于50ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度。

在510nm的波长下测定吸光度。

2）①样品溶液的制备：分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取，料液比1：15,提取两次，每次30min，将两次提取液合并浓缩至一定体积，用30%甲醇定容至50ml 容量瓶中。

从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀释至刻度，再从100ml 容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。

②最大吸收波长的选择：分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线，均在350 nm 处有一强吸收，因此选择350 nm为测定波长。

③标准曲线的制定：精密称取芦丁对照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解后，转移至50ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。

分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml 容量瓶中，于350 nm 波长处测定吸光值，以芦丁空白为参比，以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，提示在4.12～12.36mg／103ml浓度之间，吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。

④含量测定结果：分别吸取2．2．1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中，按标准芦丁一吸光度测定法，以样液空白参比，于350nm 波长下测定吸光值，计算各提取液中总黄酮含量。

紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点一、本文概述紫外可见分光光度法是一种基于物质对紫外和可见光的吸收特性进行定量分析的方法。

在生物化学和药物分析中，这种方法被广泛应用于测定各类化合物的含量，其中包括黄酮类化合物。

黄酮类化合物，也称为黄酮或黄碱素，是一类具有广泛生物活性的天然产物，它们广泛存在于植物中，并具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

因此，对黄酮类化合物进行准确、快速的定量分析具有重要意义。

本文旨在探讨紫外可见分光光度法在测定总黄酮含量中的应用，并对其方法学进行考察。

我们将详细介绍紫外可见分光光度法的基本原理、实验操作步骤，以及影响测定结果的各种因素。

我们还将讨论该方法的优点和局限性，以及在实际应用中可能遇到的问题和解决方案。

通过对这些内容的全面探讨，我们希望能够为相关领域的研究人员和技术人员提供有益的参考和指导，推动紫外可见分光光度法在黄酮类化合物分析中的应用和发展。

二、紫外可见分光光度法的基本原理紫外可见分光光度法（UV-Vis spectrophotometry）是一种基于物质对紫外和可见光区域内特定波长光的吸收特性进行定量分析的方法。

该方法基于朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law），即溶液对光的吸收与溶液的浓度成正比，与光通过溶液的路径长度也成正比。

在紫外可见分光光度法中，当一束单色光通过被测溶液时，部分光能会被溶液中的吸光物质吸收，导致光强减弱。

吸光度（A）与吸光物质的浓度（c）和光程长度（l）之间的关系可以表示为 A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数，它表示单位浓度、单位光程长度下的吸光度。

对于总黄酮含量的测定，黄酮类化合物在紫外可见光区域内有特定的吸收峰，通过测量这些吸收峰处的吸光度，并结合标准品的工作曲线，可以实现对总黄酮含量的定量分析。

紫外可见分光光度法还具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此在黄酮类化合物含量测定中得到了广泛应用。

需要注意的是，紫外可见分光光度法只能测定那些具有吸光特性的物质，且受到溶液的颜色、浊度以及其它共存物质的影响。

紫外分光光度法在食品检测及食品安全分析中的应用作者：董静吕肖楠来源：《食品安全导刊·中旬刊》2022年第01期摘要：紫外可见光分光光度法是利用物质对不同波长范围内紫外可见光的吸收能力不同对物质进行定性和定量分析。

食品是人们生活必需的物质，对其成分进行检测和安全分析具有重要的意义。

紫外可见光分光光度法由于具有操作简单、灵敏度高、适用范围广等优点被广泛应用于食品检测和安全分析中。

关键词：紫外可见光分光光度法;食品检测;食品安全Abstract： UV-Vis spectrophotometry can be used for qualitative and quantitative analysis of substances because of their different absorbability to UV-Vis light in different wavelengths. Food is a kind of necessary substance for human life， and it is of great significance for the analysis of its composition and food safety. UV-Vis spectrophotometry is widely used in food detection and safety analysis because of its simple operation， high sensitivity and wide range of application.Keywords： ultraviolet and visible spectrophotometry; food testing; food safety紫外-可見光分光光度法被广泛应用于生命科学、环境科学、农业科学、食品安全、医疗卫生以及化工等领域。

紫外分光光度法测定大千生总黄酮的含量作者：庄云，邹沈超来源：《农业开发与装备》 2016年第6期庄云，邹沈超（吉林农业科技学院，吉林吉林 132109）摘要：目的：建立大千生总黄酮的含量测定方法。

方法：采用紫外分光光度法测定大千生总黄酮。

结果：总黄酮在0.104～0.8958mg范围内具有良好的线性关系（R＝0.9997），回收率为98.07％，相对标准偏差（Relative standard deviation，RSD）为0.6％。

结论：该方法操作简便、快速、有效、灵敏、准确，具有良好的重复性和回收率，可作为大千生总黄酮含量的测定方法。

关键词：大千生；总黄酮；紫外分光光度法0 引言大千生（Nicandra physalodes）为茄科植物假酸浆属的一年生草本植物，原产于秘鲁，又名假酸浆，天珠等。

在我国南北均有作药用或观赏栽培[1]，以全草，花，果和种子入药，全草味甘、淡、微苦，性平，具有镇静、止咳、清热解毒之功效。

近几年上市的保健产品中，相当大的一部分产品种的主要成分是属于黄酮类化合物，如提高免疫力、降脂降压、防衰等。

近年研究表明，大千生富含假酸浆烯酮、察魏假酸浆酮等黄酮类化合物，在体外试验中对淋巴细胞白血病、鼻咽癌KB细胞具有明显抗肿瘤作用，同时具有抗病毒用于治疗流感，前列腺炎等功效，中药材大千生适应性强，易于栽培，产量高，成本低，综合各种情况选择了大千生茎为原料，研究大千生中总黄酮的相关性质。

对于大千生的研究，目前报道只说明了大千生茎的药用功效，对其成分含量测定笔者尚未见报道，更没见有关于大千生总黄酮含量测定方法研究。

该研究首次对大千生茎中的总黄酮进行含量测定方法研究，为进一步开发大千生提供依据。

1 实验仪器与材料1.1 试剂芦丁对照品（中国药品生物制品检验所，批号：100080－200707）；其它试剂均为分析纯；水为蒸馏水。

1.2 仪器UV－2450紫外分光光度计（日本岛津公司）；FZ102微型植物试样粉碎机（北京永光明仪器有限公司）；DGG－9053A型电热恒温鼓风干燥箱（上海森信试验仪器有限公司）；KH－250DB型数控超声波清洗器（昆山禾创市超声仪器有限公司）。

实验九食品中总黄酮的测定（－）目的意义黄酮类化合物（flavonoids）是广泛存在于植物界的一大类多酚化合物，多以苷类形式存在。

其分析方法有多种，对于黄酮类化合物的相互分离以及单一成分的定量分析，常采用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）；而对于总黄酮含量的测定，则主要采用分光光度法。

通过本方法的学习，可以掌握食物中总黄酮的测定方法。

（二）高效液相色谱法1. 原理植物类样品用石油醚脱脂后，经甲醇加热回流提取，以高效液相色谱法分离，在紫外检测器360nm条件下，以保留时间定性、峰面积定量。

2．仪器和试剂（1）高效液相色谱仪（2）紫外检测器（3）层析柱（4）超声波清洗仪（5）索氏提取器（6）微孔过滤器（滤膜0.45um）（7）甲醇（色谱纯）（8）芦丁标准品（9）石油醚，盐酸，磷酸（分析纯）。

（10）去离子水（11）芦丁标准溶液：精确称取经105℃干燥恒重的芦丁标谁品15.0mg，加甲醇溶解并定容至100ml，配成150ug／ml的芦丁标准溶液。

3. 操作步骤（1）样品处理1）固体样品：称取2.0g干燥的固体样品，研细，置于索氏提取器中，用石油醚（60～90℃）提取脂肪等脂溶性成分，弃去石油醚提取液，剩余物挥去石油醚，加人甲醇50ml和25％HC1 5ml，80℃水浴回流水解1h，取出后快速冷却至室温，转移至50ml容量瓶中，甲醇定容，经0.45um滤膜过滤，供分析用。

2）液体样品：准确吸取样品2.0ml，直接以石油醚萃取脱脂，挥去石油醚后，以甲醇溶解并定容，经微孔滤膜（0.45um）滤过后供测定用。

（2）色谱分离条件色谱柱：CLC－ODS，6mm×150mm，5um;流动相：0.3％磷酸水溶液：甲醇（V:V）＝40:80，临用前用超声波脱气；流速：lml／min；柱温：40℃；检测波长：360nm；灵敏度：0.02AUFS；进样量：20ul。

食品中总黄酮的测定方法黄酮类化合物(flavonoids)是广泛存在于植物界的一大类多酚化合物，多以苷类形式存在。

其分析方法有多种，对于黄酮类化合物的相互分离以及单一成分的定量分析，常采用高效液相色谱法 (high performanee liquid chromatography, HPLC)；而对于总黄酮含量的测定，则主要采用分光光度法。

通过本方法的学习，可以掌握食物中总黄酮的测定方法。

(一)高效液相色谱法1.原理植物类样品用石油醚脱脂后，经甲醇加热回流提取，以高效液相色谱法分离，在紫外检测器360nm条件下，以保留时间定性、峰面积定量。

2 •仪器和试剂(1)高效液相色谱仪(2)紫外检测器(3)层析柱(4)超声波清洗仪(5)索氏提取器(6)微孔过滤器(滤膜0.45um)(7)甲醇(色谱纯)(8)芦丁标准品(9)石油醚，盐酸，磷酸(分析纯)。

(10)去离子水(11)芦丁标准溶液：精确称取经105C干燥恒重的芦丁标谁品15.0mg，加甲醇溶解并定容至100ml，配成150ug/ml的芦丁标准溶液。

3. 操作步骤(1)样品处理1)固体样品：称取2.0g干燥的固体样品，研细，置于索氏提取器中，用石油醚(60〜90C)提取脂肪等脂溶性成分，弃去石油醚提取液，剩余物挥去石油醚，加人甲醇50ml和25% HC1 5ml，80C水浴回流水解1h,取出后快速冷却至室温，转移至50ml容量瓶中，甲醇定容，经0.45um滤膜过滤，供分析用。

2)液体样品：准确吸取样品2.0ml，直接以石油醚萃取脱脂，挥去石油醚后,以甲醇溶解并定容，经微孔滤膜（0.45um ）滤过后供测定用（2）色谱分离条件 色谱柱： CLC — ODS ， 6mm x 150mm ，5um;流动相：0.3%磷酸水溶液：甲醇（V:V ）= 40:80，临用前用超声波脱气； 流速: lml / min ；柱温: 40C ；检测波长：360nm ；灵敏度：0.02AUFS ;进样量：20ul 。