植物组织培养技术第七章 植物脱毒快繁技术PPT课件

力，而保持其本身的生活力，从而达到脱毒的目的。
该法尤其适用于类菌原体、类细菌的脱毒，而对于
类病毒的脱毒效果较差，因为类病毒通常有较强的
热稳定性。这种处理方法与1921年首先用于甘蔗的
脱毒，国内用这种方法处理柑橘，可脱除柑橘材料
内的黄龙病类细菌。 PPT课件
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2 低热长时处理法
低热长时处理一般不能使整株植株脱毒，而只能 使个别器官脱毒，大多是使在热处理过程中长出的 茎尖无病毒。因此，处理的最后步骤是要取新产生 的茎尖嫁接到无毒实生碊木上或将新产生的茎尖进 行扦插繁殖，以获得脱病毒植株。但对不同病毒及 不同植物种类的脱毒率差异很大。
明显药害。据分析，抗病毒醚不是直接作用于病毒，而是作 用于寄主的代谢，从而阻止病毒的增殖，使新梢逐渐脱除病 毒。因此，认为在果树植株生长期间定期喷布抗病毒醚，有 可能在苗木顶端部分扩大无病毒区域，进而可增加茎尖培养 的脱毒效率。除抗病毒醚以外，还有报道证明一些其他药剂 也具有同样的作用。
4、合并使用药剂
在应用组织培养方法以获得无病原菌植株时，所用的外植体可以是茎 尖，也可以是茎的顶端分生组织。在这里，顶端分生组织是指最幼龄叶原基 上方的一部分，最大直径约为100，最长长度为250.茎尖则是由顶端分生组 织及下方的1~3个幼叶原基一起构成的。虽然通过顶端分生培养基消除病毒 的机会较高，但在大多数研究中，无病毒植物都是通过培养100~1000长的 外植体得到的，即通过茎尖培养得到。
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二、组织培养脱毒
1.茎尖培养脱毒
Morel等（1952）首先从感染有花叶病毒的大丽花上分离 出茎尖分生组织（0.25mm）培养得到植株，嫁接在大丽花 实生砧木上检验未无病毒植株。从此，茎尖培养就成为脱去 病毒的一个有效途径，并相继在马铃薯、菊花、兰花等茎尖 培养脱毒的研究中获得成功。茎尖培养脱毒可脱除多种病毒、 类病毒、类菌原体和类立克次体，很多不能通过热处理脱除 的病毒可以通过茎尖培养而脱掉。茎尖培养脱毒直接从茎尖 生长获得植株，很少有变异，能很好地保持品种的特性。

☆过程 叶片等 脱分化
愈伤组织
再生植株
再分化
根 / 芽诱导 不定芽 （根）
虎 尾 兰
☆ 优点：
繁殖速度快
☆ 缺点：
需要诱导“愈伤组织”，可能会发
生少数细胞变异，导致部分植株 变异率，用于良种繁殖时要注意。
③ 经历愈伤组织增殖--
--B
❖外植体：叶片、子房、
花药、 鳞茎等
❖培养基：诱导培养基，
胚状体成苗培养基
培养基
基本培养基 植物激素
(1) 基因型和生理状态
A 取材基因型：不同品种在快繁时增殖倍数 会有很大的差别. y=man
B 生理状态：取材当时外植体的生理状态决 定快繁后再生植株的成苗率
（2） 培养基
1）基本培养基 ①种类：首先选择确定合适的基本培养基
（MS，B5，SH，White等） ②培养基中不同形态的氮的比例影响芽和根的分化
❖ ② 丛生芽增殖型
外植体：顶芽、腋芽
培养基：诱导培养基，生根培养基
过 程：
芽诱导
顶芽(腋芽)
新的腋芽
诱导生根 丛生芽
完整植株
（每个腋芽）
优点：遗传性状稳定；
繁殖快速；
培养简单，移栽成活率高。
非洲紫罗兰
月季侧芽
菊花侧芽
马铃薯茎尖
驱蚊草
❖③ 经历愈伤组织增殖---A
❖ 外植体：叶片、子房、花药、叶柄、胚轴等 ❖ 培养基：诱导培养基，分化培养基，生根培养基
离体快速无性繁殖：根据植物组织培养技术， 利用植物离体器官或组织，在人为控制的 培养和环境条件下，快速繁殖植物的方法。 简称，快繁。
简言之，无菌条件下的营养繁殖，又称微繁。
➢ 快繁的应用

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39、没有不老的誓言，没有不变的承 诺，踏 上旅途 ，义无 反顾。 40、对时间的价值没有没有深切认识 的人， 决不会 坚韧勤 勉。
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
植物的快繁与脱毒培养-文档资料
36、“不可能”这个字(法语是一个字 )，只 在愚人 的字典 中找得 到。--拿 破仑。 37、不要生气要争气，不要看破要突 破，不 要嫉妒 要欣赏 ，不要 托延要 积极， 不要心 动要行 动。 38、勤奋，机会，乐观是成功的三要 素。(注 意：传 统观念 认为勤 奋和机 会是成 功的要 素，但 是经过 统计学 和成功 人士的 分析得 出，乐 观是成 功的第 三要素 。

7.3 快速繁殖技术（micropropagation ） 快速繁殖技术（
3. 快繁的一般步骤：
③ 试管苗的壮苗与生根：
• 一般要分成单苗 ， 转移到盐浓度较低 、 不含细 一般要分成单苗， 转移到盐浓度较低、 胞分裂素， 含低浓度生长素的生根壮苗培养基， 胞分裂素 ， 含低浓度生长素的生根壮苗培养基 ， 至根、茎长到合适的长度，即可锻炼出瓶。 至根、茎长到合适的长度，即可锻炼出瓶。 • 问题：不易生根 （ 延长时间、 继代 ） ；易生根： 问题：不易生根（ 延长时间 、 继代） 壮苗阶段不加生长素， 壮苗阶段不加生长素 ， 试管外生根可减少费用； • 特殊方法：如马铃薯的小球茎法。 特殊方法：如马铃薯的小球茎法。
7.3 快速繁殖技术（micropropagation ） 快速繁殖技术（
4. 提高试管苗繁殖速度的措施：
① 选择合适的繁殖途径 ② 改良培养基： 激素 （腋芽 、 不定芽 、 胚状体 ） 等； 激素（ 腋芽、 不定芽、 胚状体） ③ 改良培养条件 ： 温 、光 、 湿度、 气体（有利气体、 湿度 、 气体 （ 有利气体、
7.1 茎尖培养
3. 茎尖培养技术： • 培养方法：固体培养、液体纸 桥培养（易愈伤化时）
7.1 茎尖培养
3. 茎尖培养技术： • 对培养基和培养条件的要求： • 一般可用MS培养基，加少量的生长素（不 用2,4-D）和细胞分裂素；GA3有时对抑制 愈伤等有一定的效果。
7.2 脱毒技术： 脱毒技术：
3. 茎尖培养技术： • 材料消毒：在温室种植或田间种植的健康植 株上取枝条，必要时母株可用杀菌剂处理； 在实验室切取2-3cm长的芽，去掉较大的叶 片，进行常规的表面灭菌；
7.1 茎尖培养
3. 茎尖培养技术： • 茎尖分离：将灭菌的芽置放有湿滤纸的无菌 培养皿中，置体视显微镜下，依次用镊子或 解剖刀剥去叶片直至露出生长点，用锋利的 解剖刀片把带或不带叶原基的分生组织切下 来，直接接种到培养基上；