疫苗佐剂CpG ODN的研究进展
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新型乙肝疫苗的研究进展摘要:乙型病毒性肝炎(简称乙肝)是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)。
乙肝流行范围广泛,危害严重。
至今尚无根治乙肝的特效药物,所以接种疫苗是预防乙肝最有效的方法。
现将研究新型乙肝疫苗的相关进展作一综述。
关键词:乙肝疫苗;重组疫苗;DNA疫苗乙型肝炎是由乙肝病毒(HBV)引起的以肝脏损害为主要病变的传染病[1]。
据统计,全球现有20 多亿人感染过HBV,其中(3.5 ~ 4)亿人为慢性 HBV携带者[2]。
接种疫苗是目前预防乙肝最有效的方法,乙肝疫苗分为血源性乙肝疫苗和基因工程乙肝疫苗,国际上称为第一代疫苗和第二代疫苗,新型乙肝疫苗是第三代疫苗。
1.血源性乙肝疫苗血源性乙肝疫苗即从乙肝抗原(HBsAg)阳性者的血浆中提取抗原制成的疫苗,故又称血源性乙肝抗原疫苗[3,4]。
我国在1985 年正式批准大量生产该疫苗[5],但是由于来源困难,难以满足普遍接种的需要,逐渐被重组疫苗所代替。
我国于 1998 年 7 月 1 日停止生产血源性乙肝疫苗,并于 2000 年 1 月 1 日停止使用该疫苗。
2.基因工程疫苗基因工程疫苗亦称重组疫苗,是采用基因工程技术将HBsAg的基因片段插入到受体细胞,在体外培养增殖过程中分泌 HBsAg,将其收集、提纯加工后制成乙肝疫苗,曾先后采用过大肠杆菌系统、啤酒酵母细胞系统、哺乳动物细胞系统[6]的重组乙肝疫苗。
含前 S 基因的重组乙肝疫苗是第三代重组疫苗[7]。
含有HBV PreS2 和 Pre S1 抗原成分或 HBV 的 S 基因变异株核心蛋白成分的各种新型重组乙肝疫苗具有更大的免疫原性,能诱导更高效的免疫应答和抗体产生,中和 HBV,保护机体免受病毒攻击。
3.新型乙肝疫苗基因工程疫苗效果比较理想,但是还存在一定的问题。
随着科技不断进步,近年来国内外对乙肝疫苗进行了大量的研究,开发各种新型疫苗,以降低生产成本、提高免疫效果。
添加CpG ODN佐剂对鸭坦布苏弱毒活疫苗免疫效果影响研究陆晨阳;张婷;任超超;包旦奇;马天馨;牛世奇;李雪松;杨建美;滕巧泱;李泽君;刘芹防【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2022(30)4【摘要】鸭坦布苏病毒是一种黄病毒科黄病毒属单股正链RNA病毒,可造成蛋鸭、种鸭产蛋下降,给养鸭业造成巨大经济损失的重要疾病。
目前,坦布苏弱毒活疫苗是临床上有效预防该病的重要手段之一。
CpG ODN作为疫苗佐剂被证实能够有效提高疫苗的免疫效果,但其对弱毒活疫苗的是否具有免疫增强的效果尚不清楚。
本研究选择鸭坦布苏弱毒活疫苗FX2010-180P,以CpG ODN为免疫佐剂,在鸭体内进行免疫以及攻毒保护实验。
通过检测鸭体内抗体水平、免疫保护率、组织切片来进行免疫效果的评估。
结果显示,FX2010-180P免疫组鸭子在免疫后3~4 d即可产生特异性抗体,而添加CpG ODN疫苗佐剂组,免疫鸭的抗体产生时间滞后于未添加组。
攻毒保护实验结果显示,两种方式免疫方式都可以保护鸭子不受坦布苏病毒野毒的感染。
本研究结果显示添加CpG ODN对鸭坦布苏FX2010-180P弱毒活疫苗并不具有免疫增强的效果。
【总页数】7页(P54-60)【作者】陆晨阳;张婷;任超超;包旦奇;马天馨;牛世奇;李雪松;杨建美;滕巧泱;李泽君;刘芹防【作者单位】中国农业科学院上海兽医研究所【正文语种】中文【中图分类】S858.32【相关文献】1.不同佐剂制备的鸡坦布苏病毒灭活疫苗免疫效果比较2.鸭坦布苏病毒病活疫苗(FX2010-180P株)毒种保存期的研究3.鸭瘟与鸭坦布苏病毒病活疫苗联合免疫效果研究4.头孢噻呋钠对鸭坦布苏病毒活疫苗免疫效果的影响5.鸭坦布苏病毒病-H9亚型禽流感二联灭活疫苗免疫佐剂筛选因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
兽用疫苗佐剂的研究进展随着人们对动物健康的关注不断增加,兽用疫苗的研究和发展也成为一个热门话题。
疫苗佐剂作为一种重要的辅助物质,在提高兽用疫苗效果和安全性方面发挥着重要作用。
在过去几年里,疫苗佐剂的研究也取得了一些重要的进展。
疫苗佐剂是一种需要与疫苗同时使用的物质,主要用于增强疫苗的免疫原性和免疫应答的持久性。
疫苗佐剂可以提高疫苗接种后免疫细胞的活性,增加免疫细胞的吞噬能力和产生更多的抗体。
疫苗佐剂可以帮助疫苗在免疫系统中更好地传递和被识别,从而提高疫苗的有效性。
目前,有多种疫苗佐剂正在研究和开发中。
其中一种被广泛研究的是佐剂免疫助剂(adjuvant),这种佐剂被证明能够提高免疫细胞的活性和动物对疫苗的免疫反应。
另外,一些新型的纳米颗粒佐剂也引起了研究人员的关注。
这些纳米颗粒佐剂具有较小的粒径和较大的表面积,可以更好地与免疫系统中的细胞发生作用,从而提高疫苗的免疫原性。
除此之外,一些生物活性佐剂,如细胞因子和抗原传送系统也被广泛研究。
近年来,针对兽用疫苗佐剂的研究也取得了一些进展。
研究表明,疫苗佐剂可以显著提高动物对疫苗的免疫应答。
举例来说,研究人员在家禽疫苗中使用了一种新型的纳米颗粒佐剂,发现其可以显著提高禽流感疫苗的免疫原性和免疫效果。
类似地,在比熊犬狂犬疫苗研究中,研究人员发现使用一种特定的疫苗佐剂可以显著增加疫苗的保护力。
这些研究结果为兽用疫苗佐剂的应用提供了新的思路和方向。
此外,疫苗佐剂的研究也面临一些挑战和难题。
首先,佐剂的安全性是一个重要的问题。
尽管疫苗佐剂可以提高疫苗的免疫效果,但一些佐剂可能会导致副作用或不良反应。
因此,在研究和开发新型疫苗佐剂时,需要充分考虑其安全性和毒副作用。
其次,疫苗佐剂的制备和生产也是一个挑战。
不同的疫苗佐剂可能需要不同的制备方法和生产流程,这对于工业化生产来说是一个难题。
综上所述,兽用疫苗佐剂的研究正在不断取得进展。
新型的佐剂免疫助剂、纳米颗粒佐剂以及生物活性佐剂等新技术被广泛研究,并且已经证明可以提高兽用疫苗的效果和安全性。
疫苗新型佐剂的作用机制和研发进展综述下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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CpG ODN佐剂序列的筛选及其免疫刺激活性研究赵玉娇;蔡路奎;王晓丹;席珏敏;陈俊英;潘玥;邱丽娟;姜黎明;孙强明【摘要】目的设计和筛选对入PBMC细胞和小鼠脾细胞具有免疫刺激活性的CpG ODN序列,研发能用于人用疫苗的有效核酸佐剂. 方法根据具有免疫刺激活性的CpG ODN序列结构特点,设计并合成出15条候选序列,分别合成并进行非硫代和硫代修饰.分选健康人PBMC细胞及Balb/c小鼠脾细胞,以不同CpG ODN进行体外刺激,MTT法检测CpG ODN诱导细胞增殖水平.随后将筛选出的有效CpG ODN序列与人类基因组序列进行同源性比较,以评估其安全性. 结果在刺激人PBMC和小鼠脾细胞72h后,硫代和非硫代修饰的15条序列A值均高于阴性对照组,其中IMB-AC5序列刺激人PBMC后A值分别达到0.377和0.334,与阳性对照ISS1018序列A值(0.387和0.338)接近;刺激小鼠脾细胞72h后,A值同样高于其他序列,达到0.571和0.486,与阳性对照ISS1018序列A值(0.588和0.464)接近.综合上述结果,选择5号非硫代序列作为候选佐剂.同源性比较结果显示,该序列与人类基因组序列没有同源性,与部分蛋白编码基因的同源性只有50%~65%,此外其部分序列与入18号染色体上的一些重复序列有同源性,最高同源性达62%.证明筛选出的新型CpG ODN佐剂IMB-AC5安全性较高.结论设计筛选出对人PBMC细胞和小鼠脾细胞具有免疫刺激活性的CpG ODN序列IMB-AC5,与人类基因组序列具有较低同源性,为进一步研发人用疫苗佐剂奠定基础.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2016(045)005【总页数】6页(P37-42)【关键词】CpG;ODN;佐剂;免疫刺激活性;同源性【作者】赵玉娇;蔡路奎;王晓丹;席珏敏;陈俊英;潘玥;邱丽娟;姜黎明;孙强明【作者单位】650118昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室;650118昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室;650118昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室;650118昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室;650118昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室;650118昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室;650118昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室;650118昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室;650118昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R3目前市场上预防用疫苗大部分使用氢氧化铝[Al(OH)3]作为佐剂。
牛支原体疫苗的研究进展季文恒;吴娅琴;翟肖辉;储岳峰【摘要】牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)是一种造成全世界范围内育肥牛和奶牛多种疾病综合征的重要病原体.临床症状主要包括长期性肺炎及多发性关节炎(CPPS)、呼吸道疾病综合征(BRD)、乳腺炎及生殖器官疾病.牛支原体能感染多种组织和器官,也能从健康的牛体内分离,是威胁畜牧业生产的主要病原体.由于临床上抗生素治疗效果不佳,预防或控制牛支原体感染最好的选择是研发有效的商业可用的疫苗.牛支原体疫苗的研究已历经多年,虽然存在很多问题,但也取得了一定进展.文章对牛支原体弱毒疫苗、灭活疫苗及亚单位疫苗的研究进展进行了总结,并讨论了疫苗设计的优化方案,为合理设计和研发有效的牛支原体防控技术提供参考.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2018(045)003【总页数】7页(P763-769)【关键词】牛支原体;弱毒疫苗;灭活疫苗;亚单位疫苗【作者】季文恒;吴娅琴;翟肖辉;储岳峰【作者单位】中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州730046【正文语种】中文【中图分类】S858.23支原体(Mycoplasma)是已知最小、最简单的能自我复制的原核微生物,普遍存在于自然界,是许多动物、植物及人类的病原体[1]。
目前支原体已接近200个种,其中有超过20种可感染牛[2]。
牛支原体于1961年在美国被首次分离,是能感染牛的一种非常重要的病原体[3]。
在美国,养殖场中牛支原体感染率最高可超过70%,每年对养牛业造成超过1.4亿美元的损失[4]。
在欧洲,25%~33%的牛肺炎与牛支原体有关[2]。
疫苗佐剂的研究进展作者:李丹等来源:《黑龙江水产》 2014年第5期李丹1 陈阳2 刘宇1 王爽1 王岩1 秦明伟1 史同瑞1(黑龙江省兽医科学研究所黑龙江齐齐哈尔 161000)(哈尔滨铁路兽医卫生处哈尔滨 150006)佐剂最早来源于拉丁语“adjuvare”一词,为“帮助”,是指能够提高机体对抗原的适应性免疫应答的物质,能够在免疫反应中诱导全面持久的免疫应答。
在疫苗制剂中,佐剂的功能主要包括:增强疫苗抗原的免疫原性;促进细胞免疫和体液免疫,优化免疫应答,促进免疫能力较弱人群中的免疫应答;增进抗原与黏膜之间的传递以及免疫接触;减少疫苗成分中抗原的需求量以及在实施过程中的免疫接种次数;优化抗原结构,维持抗原构象等。
从巴斯德至今近百年来已开发了许多菌苗和疫苗,但传统的疫苗一般多为全菌或全病毒制成,其中含有大量非免疫原性物质,这些物质除具有毒副作用外也有佐剂作用,所以一般不需要外加佐剂。
因此,很长一段时间以来主要是研究毒素、类毒素、抗毒素的学者在研究和使用佐剂。
直到1925年,法国免疫学家兼兽医学家Gaston Ramon发现如果在白喉和破伤风疫苗中加入某些与之无关的物质可以特异地增强机体的抵抗反应,从此佐剂引起了人们的注意,许多国家也开始不同程度的开展了这方面的研究。
1.传统佐剂1.1 铝佐剂铝佐剂是目前兽用疫苗和人用疫苗上应用最广泛的佐剂。
铝佐剂苗可以分为铝沉淀疫苗和铝吸附疫苗两种,铝沉淀疫苗是将铝剂悬液加至抗原液中,铝吸附疫苗是将抗原溶液加至氢氧化铝或磷酸铝中。
两种铝佐剂疫苗不仅能够减少抗原用量,还能够增强机体的免疫应答。
铝佐剂通常用氢氧化铝,其次是明矾及磷酸三钙。
1926年,Glenny发现用明矾沉淀的白喉类毒素悬液要比类毒素本身具有更高的抗原性,免疫豚鼠取得了较强的免疫效果。
1931年,Glenny等又报道了氢氧化铝吸附抗原制成的疫苗在注射部位具有缓慢释放的功能,就此提出氢氧化铝佐剂的作用机制为储存库效应。
免疫佐剂CpG-DNA的研究进展
范媛;谢光武;黎晓敏
【期刊名称】《中国动物保健》
【年(卷),期】2009(011)010
【摘要】特异性免疫即是含有PAMP的反应物与天然免疫细胞上的PRR相结合,激活天然免疫应答,从而活化抗感染途径,并最终发挥获得性免疫应答的一系列反应过程.CpG-DNA作为一种在进化中高度保守的PAMP,它可以模拟感染过程,克服新型疫苗PAMP不足的缺陷,从而诱导强烈的免疫应答.CpG-DNA可以直接激活B 淋巴细胞、单核/巨噬细胞和树突状细胞,上调免疫刺激分子的表达,调节免疫反应,诱导IL-12、IL-1和TNF-等多种细胞因子的分泌,此外,它还能间接刺激NK细胞、T淋巴细胞.由于其独特的优点,CpG-DNA在畜牧兽医临床中显示其极强的使用价值和广阔的应用前景.
【总页数】6页(P44-49)
【作者】范媛;谢光武;黎晓敏
【作者单位】西南大学动物科技学院,重庆北碚,400715;西南大学动物科技学院,重庆北碚,400715;西南大学动物科技学院,重庆北碚,400715
【正文语种】中文
【相关文献】
1.CPG-DNA免疫佐剂作用机理及应用前景 [J], 吴高锋;肖松云;李文刚;杨慧敏
2.CpG-DNA免疫佐剂作用研究进展 [J], 刘艳环;苗利光;王志刚
3.CpG-DNA对畜禽生物学活性的研究进展 [J], 王星;陈庄;王刚
4.CpG-DNA免疫刺激活性研究进展 [J], 景志忠;才学鹏
5.细菌CpG-DNA免疫刺激活性研究进展 [J], 郭爱珍;陆承平
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CpG ODNs抗感染免疫作用研究进展
申玉芹;孙新华
【期刊名称】《中国老年学杂志》
【年(卷),期】2009(029)011
【摘要】哺乳动物的免疫系统依赖于天然免疫和获得性免疫防御病原微生物的入侵。
天然免疫是机体的第一道防线,它在病原微生物入侵时首先被激活,表达于细菌、病毒、真菌的病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)被模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)识别。
【总页数】2页(P1439-1440)
【作者】申玉芹;孙新华
【作者单位】吉林大学口腔医院牙周科,吉林,长春,130041;吉林大学口腔医院正畸科,吉林,长春,130041
【正文语种】中文
【中图分类】R78
【相关文献】
1.CpGODN的免疫作用与哮喘的治疗 [J], 黄静;杨远;林勇
2.CpG-N ODN对CpG-S ODN诱导hPBMC释放TNF-α的抑制作用 [J], 蒋为薇;王良喜;丁国富;余双江;周红
3.CpG ODNs的免疫活性作用与肿瘤治疗的研究进展 [J], 颜伟;孙梯业;周红
4.CpG ODN的免疫作用机制及其应用现状 [J], 唐丽;许立博;赵玉军
5.CpG ODNs的研究进展及其抗肿瘤作用 [J], 袁素娟;乔田奎
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CpG-DNA免疫佐剂作用研究进展
刘艳环;苗利光;王志刚
【期刊名称】《特产研究》
【年(卷),期】2006(028)003
【摘要】CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以未甲基化的CpG基序(CpG motif)为核心的DNA序列,它包括含CpG基序的人工合成的寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)和自然界中细菌、病毒、无脊椎动物等低等生物的基因组DNA.随着对CpG基序的DNA和寡核苷酸免疫学特性的深入了解,人们对CpG特征结构在DNA免疫学中的重要作用有了逐步的认识,并在DNA疫苗、肿瘤免疫、病毒免疫等方面进行了临床应用.本文就CpG的特征结构、免疫活性、佐剂效应以及应用前景作一简要介绍.
【总页数】3页(P65-67)
【作者】刘艳环;苗利光;王志刚
【作者单位】中国农业科学院特产研究所,吉林,吉林,132109;中国农业科学院特产研究所,吉林,吉林,132109;中国农业科学院特产研究所,吉林,吉林,132109
【正文语种】中文
【中图分类】S852.4+3
【相关文献】
1.CPG-DNA免疫佐剂作用机理及应用前景 [J], 吴高锋;肖松云;李文刚;杨慧敏
2.霍乱毒素黏膜免疫佐剂作用研究进展 [J], 陈晓月;金宁一;邹伟;海洋
3.免疫佐剂CpG-DNA的研究进展 [J], 范媛;谢光武;黎晓敏
4.免疫佐剂作用机理的研究进展 [J], 孙红祥;潘杭君
5.细菌鞭毛蛋白免疫佐剂活性作用机制及应用研究进展 [J], 庞胜美;吴文文;丁雪燕;刘思国;王晓钧;段强德;朱国强
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兽用疫苗佐剂的研究进展疫苗佐剂(adjuvant)是指在兽用疫苗中作为辅助成分使用的物质,可以提高疫苗的免疫原性和保护效果。
佐剂通过激活免疫系统、增强免疫细胞的识别和应答能力,从而提升兽用疫苗的免疫效果。
随着科技的不断进步,兽用疫苗佐剂研究也取得了一系列重要的进展。
一、新型佐剂的研发近年来,研究人员在针对不同动物病原体的兽用疫苗佐剂方面进行了大量工作。
例如,沙门氏菌佐剂的研发是一个重要的研究领域。
研究人员利用微生物多糖、多孔微球、多肽和DNA等作为沙门氏菌疫苗佐剂,有效提高了对沙门氏菌的免疫效果。
此外,研究人员还研究了多种新型疫苗佐剂的应用,如脂质体、聚糖、微粒和抗原交联等,这些佐剂在兽用疫苗的研发中起到了重要作用。
二、免疫刺激机制的研究兽用疫苗佐剂的研究旨在通过激活免疫系统来提高免疫效果。
因此,了解免疫刺激机制对于佐剂的研发至关重要。
最近的研究表明,佐剂通过多种机制提高了疫苗的免疫原性和保护效果。
例如,佐剂可以激活抗原递呈细胞(APCs),提高APCs对抗原的摄取和处理能力;佐剂还可以促进细胞因子产生和T细胞的增殖,从而增强疫苗的免疫效果。
此外,佐剂还可以通过自身的免疫活性,直接诱导对抗原的免疫应答。
三、合理应用佐剂提高疫苗效果合理应用佐剂可以提高兽用疫苗的免疫效果,但佐剂的种类和使用方法需要根据具体的病原体和动物种类进行选择。
研究人员已经对多种兽用疫苗进行了佐剂优化,取得了显著的效果。
例如,研究人员通过将适量的佐剂添加到禽流感疫苗中,有效提高了疫苗的免疫效果,进一步提高了疫苗的保护效果。
此外,合理应用佐剂还可以减少疫苗剂量和频次,降低疫苗成本,提高兽用疫苗的接种覆盖率和使用率。
总结:兽用疫苗佐剂的研究进展涵盖了新型佐剂的研发、免疫刺激机制的研究以及合理应用佐剂提高疫苗效果等方面。
未来,研究人员应进一步研究佐剂的安全性和免疫增强效果,优化佐剂的配方和使用方法,推动兽用疫苗佐剂在动物健康和养殖业发展中的应用。
CpG ODN佐剂促进HBsAg疫苗诱导小鼠细胞免疫应答的探讨马瑞;黄俊;吴长有【期刊名称】《免疫学杂志》【年(卷),期】2006(22)3【摘要】目的探讨cpG ODN对重组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)诱导小鼠细胞免疫应答的影响。
方法HBsAg和HBsAg+CpG ODN分别肌肉注射免疫Balb/c 小鼠后,从淋巴组织(脾和淋巴结)和非淋巴组织(肺)分离淋巴细胞,体外经HBsAg抗原刺激后,利用ELISA检测细胞培养液中IFN-γ的水平,再利用流式细胞仪在单个细胞水平上检测IFN-γ^+细胞的频率,分析IFN-7^+细胞亚群。
结果对照组和HBsAg免疫组IFN-γ产生的水平很低,当HBsAg加强免疫1~2次后,IFN-γ表达仍然没有明显升高;而CpG ODN+HBsAg免疫1次或加强免疫后,CpG显著促进HBsAg诱导的IFN-γ产生。
进一研究结果表明CpG促进HBsAg诱导淋巴器官和非淋巴器官内CD4^+和CD8^+T细胞IFN-γ的表达。
结论CpG免疫佐剂不仅能诱导细胞免疫应答同时也诱导体液免疫应答,提示CpG ODN可以用于HBsAg预防和治疗性佐剂。
【总页数】4页(P235-238)【关键词】CpG;0DN;HBsAg;疫苗;佐剂【作者】马瑞;黄俊;吴长有【作者单位】中山大学基础医学院免疫学教研室【正文语种】中文【中图分类】R392.11【相关文献】1.分析CpG ODN佐剂对呼吸道合胞病毒重组疫苗诱导的细胞免疫应答的作用 [J], 杜晓敏;周益民;2.佐剂CpG-ODN与重组HBsAg疫苗联合免疫乙型肝炎病毒转基因小鼠的免疫应答研究 [J], 张卓然;杨淑凤;李炎;郑丛龙3.CpG ODN佐剂对呼吸道合胞病毒重组疫苗诱导的细胞免疫应答的作用 [J], 李娜;刘建勋;曾瑞红4.CD137L在HBsAg DNA疫苗诱导小鼠细胞免疫应答中的佐剂效应 [J], 江虹;黄茵;史丽云;吴炜;蔡玲斐;贾红宇;钟石根5.CpG-ODN调节小鼠免疫细胞对HBsAg体液免疫应答性的初步研究 [J], 刘兴田;冯永堂;孟洁;苗乃法;鞠吉雨;吴国庆;魏兵因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
疫苗佐剂CpG ODN的研究进展 摘要:CpG ODN是指含有非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤二核苷酸为核心序列的核苷酸序列,人工合成的CpG ODN是根据细菌DNA的结构特性及免疫特性而定的。CpG ODN通过TLR9可以直接激活B细胞和树突细胞引起直接的Th1型免疫反应。CpG ODN因其可以提高疫苗的反应速度,增强疫苗的反应强度以及免疫耐受力而被认为是一种有效的佐剂。例如CpG ODN联合OVA免疫可以明显的提高AVA的抗感染能力。CpG ODN联合多种疫苗均可以增强相应的体液免疫和细胞免疫,同时增强灵长类和啮齿类对病毒的抵抗能力。临床试验证明CpG ODN是一种对人类安全有效的佐剂,可以增强对疫苗的特异性反应。 关键词:CpG ODN;作用机制;佐剂;黏膜佐剂 Abstract:Synthetic oligodeoxynucleotides (ODN) containing unmethylated CpG motifs mimic the immunostimulatory activity of bacterial DNA. CpGODN directly stimulate B cells and plasmacytoid dendritic cells (pDC),promote the production of Th1 immune responses through Toll-like receptor 9. CpG ODN are finding use as vaccine adjuvants,where they increase the speed,magnitude and duration of vaccine-specific immune responses. For example, CpG ODN significantly prolong the protection induced by AVA (Anthrax Vaccine Adsorbed). Co-administering CpG ODN with a variety of vaccines has improved the resultant humoral and/or cellular immune responses, culminating in enhanced protective immunity in rodent and primate challenge models. Ongoing clinical studies indicate that CpG ODN are safe and well-tolerated when administered as adjuvants to humans, and that they can support increased vaccinespecific immune responses.
Key Words:CpG oligodeoxynucleotides;Mechanism;Adjuvant;Mucosal adjuvant
免疫佐剂概念最早在1924年由Ramon提出,至今已有近百年的深入研究,但是临床应用的疫苗佐剂还仅限于几种如弗氏佐剂,铝佐剂等,人用疫苗佐剂主要还是铝胶佐剂。新型佐剂的开发利用已成为现代疫苗研究中一个非常重要的领域。 CpG ODN是指具有免疫刺激作用的含非甲基化的CpG寡居核苷酸的DNA序列。1984年,Tokunaga等人[1]首次发现结核分枝杆菌的DNA除了是一种遗传物质外, 还具有抗肿瘤特性。1995年,Krieg等人[2]证实这些DNA中含有的非甲基化的CpG基序是与其免疫激特性密切相关的结构。随后,Tokunaga等人通过研究发现:以未甲基化CG二聚核苷酸为核心的特定核苷酸序列是DNA具有免疫学活性的重要特性,免疫系统通过对这些特定序列的识别来诱发免疫应答。Krieg等人认为使CpG具有强的免疫刺激作用的充要条件:(1)碱基数目不能少于8个,否者不能引起免疫刺激。(2)CpG核心序列的两侧需要2个5,嘌呤和2个3,嘧啶,且当5端为GpA、3,端为TpC或TpT时活性最强。(3)硫代磷酸酯修饰后的CpG,因增强了CpG ODN抗核酸酶降解的能力,延长了其半衰期,而相应的增强其免疫活性。CpG ODN既存在于细菌病毒等原核生物中,又存在于脊椎动物中。但是该序列在病毒和原核生物基因组中出现的频率远高于脊椎动物,且脊椎动物中60%--90%的胞嘧啶通常是甲基化的,这种差异使脊椎动物的免疫系统把未甲基化的CpG ODN作为一种免疫原,并通过特定受体诱导增强免疫反应。本文就CpG ODN的作用机制以及其作为佐剂增强系统免疫和黏膜免疫的研究进展做一简单综述。 1、 CpG ODN的生化特征及其作用机制 CpG ODN是由含未甲基化的CpG二核苷酸为核心的回形序列组成,其基本骨架为5’-PuPuCGPyPy-3’。 2 CpG ODN的结构和分类 通常CpG ODN的每一条DNA单链具有2~4个CpG双核苷酸,每条主链有两种磷酸化的修饰方式:磷硫酰(phosphorothioate,PTO)主链或磷酸二酯(phosphodiester,PO)主链。每种CpG ODN的结构和免疫激活作用均不同。根据CpG ODN的结构及其对不同免疫细胞的激活作用,可将CpG ODN分为3类。[abc] (1)A型CpG ODN(A-Class CpG ODN,CpG-A ODN)也称D型CpG ODN:在ODN的3’和5’末端主要由PO主链及PTO多聚G序列构成。CpG-A ODN可以刺激浆细胞样树突状细胞产生大量α干扰素进而激活NK细胞并引起γ干扰素的分泌。但CpG-A ODN对刺激B细胞活化的作用较弱。(2)B型CpG ODN(B-Class CpG ODN,CpG-B ODN)也称K型CpG ODN:CpG-B ODN完全由PTO主链构成,有很强的刺激B细胞活化的作用但刺激浆细胞样树突状细胞产生α干扰素的作用较弱。(3)C型CpG ODN(C-Class CpG ODN,CpG-C ODN):CpG-C ODN也完全由PTO主链构成,兼具CpG-A ODN和CpG-B ODN的作用。Kanellos等[4]通过研究发现脊椎动物免疫识别系统对CpG基序的识别有一定的差异。通过改变化学结构和碱基等,人工合成的CpG ODN 结合了三种类型的优点,同时客服了种属间的差异。 免疫应答的过程即病原体相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP)与天然免疫细胞上的模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)相结合,从而激活免疫应答的过程。细菌CpG ODN便是一个PAMP,其受体是PRR中的一种Toll样受体9(TLR9)。TLR9存在于B细胞,巨噬细胞等免疫细胞的内质网内表面中,但是T细胞中不存在这种TLR9。因此,CpG ODN可以引起直接的Th1型免疫反应,通过细胞因子,IFN—α等可以引起间接的Th2型免疫反应。 2 、CpG ODN提高抗原的免疫原性 2.1 CpG ODN提高蛋白的免疫原性 Klinman[5]等通过研究表明以CpG ODN作为佐剂提高蛋白抗原(如卵清蛋白)的免疫原性约3倍。当用OVA和CpG ODN免疫时,因其固着时间短免疫力低。联合OVA和CpG ODN在不完全弗氏佐剂中孵化后免疫IgG提高了10倍。通过生物素蛋白或化学桥梁交联OVA和CpG ODN也可明显的提高其免疫原性,而将交联的混合物通过DNA消化酶后其免疫原性即消除。另外将CpG ODN的核心序列替换后和OVA交联后其免疫原性亦消除。说明CPG具有很强的佐剂作用。 通过不同的实验证明CpG ODN具有疫苗佐剂的作用。H.xie,I.Gursel[6-7]等将脂质体作为免疫载体把CpG ODN和抗原一同包裹于重组的微体中,免疫后直接与抗原呈递细胞反应,引起高水平的CTL[8]。CpG ODN和抗原结合后可以提高免疫原的作用时间和强度,因此可以提高免疫效率。 2.2 CpG ODN对同源抗体的作用 Klinman[5]等通过研究表明CpG ODN可以引起IgG抗体的IgG1和IgG2a之间的转换。加入CpG ODN后IgG1:IgG2a的比例由原来的7:1变为2.8:1。产生IgG2a抗体的免疫反应增强。不同的抗原如肝炎B表面抗原、流感病毒、破伤风病毒、麻疹病毒、布鲁氏菌、天花的L1和A33蛋白、联合CpG ODN均可以改变IgG1和IgG2a抗体滴度的比例[9]。 2.3 CPG ODN对抗原特异性细胞因子产生的影响 Klinman[5]等人通过研究OVA和CpG ODN的联合作用对抗原特异性细胞因子IFNγ的作用。发现CPG ODN和OVA共免在动物体内产生的IFNγ比单独用OVA免疫高两倍,并且和CpG ODN的量呈剂量效应。用不含CpG核心序列的CpG ODN和OVA共免后IFNγ无变化。此外,CpG ODN能刺激单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DC)NK细胞,活化表达IL-1、IL-2、IL-6、IL-12、TNF、IFNα等细胞因子。表现为直接的Th1 型,并在Th1细胞的协同作用下激活细胞毒T淋巴细胞表现为强烈的细胞免疫反应[10]。 3、 CpG ODN作为佐剂的应用状况 因其独特而强烈的免疫激活作用,CpG ODN作为免疫佐剂及免疫治疗药物的研究取得了多方面进展。 3.1 CpG ODN作为疫苗佐剂增强系统免疫反应 CpG ODN作为疫苗的佐剂明显的提高系统的细胞免疫和体液免疫,与疫苗共同作用即可以提高以Th1型反应为主的预防治疗,又因其可以提高CTL,激活细胞因子引起一系列的