冬凌草甲素诱导人结肠癌细胞LOVO凋亡及其对P53作用的研究
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有抑制作用， 如人前列腺癌细胞 � � 乳腺癌细胞� 肺癌 C CK-8 ( 美国 EN ZO 公司) ， A nne i n V -FI TC /PI双染 P53-FI TC 单 克 隆 抗 体 细胞 � 结直肠癌细胞和急性白血病细胞等� 但是其 试剂 盒 ( 杭 州 联 科 生 物 ) � 抑制肿瘤作用的机制尚未完全阐明 � �本实验探讨冬 ( e Bi o ci e nc e ) ， 破膜剂 ( 美国 Cal ag 公司 ) 二氧化碳 凌草甲素诱导人结肠癌细胞凋 亡及 P53 表 达的影 培养箱 ( 德国 HA R R I S 公司) ; 倒置显微镜 ( TE -300 ， � � ) ( N I KO N c or 响 为结肠癌的治疗提供有利的实验依据 日本 公司 ) ， 多 功能免疫 分析仪 ( Vi X5 ， i n El m e r 公司 ) ， 材料与方法 美国 Pe rk 流式细胞仪 ( FC -500 ， � � 1. 1 材料 冬凌草甲 素 ( 南京泽朗 医药科技有限 美国 B e c k m an-C o le r 公司 ) 1
� 实 验 研 究 �
H PLC 检测纯度�9 8 % ) ， 近年来结肠癌已成为我国发病率增长最快的恶 公司， 用含 2 % 二甲基亚砜 性肿瘤之一， 目前的治疗以放化疗为主， � 但敏感性较 ( D M S O ) 的蒸馏水助溶， 配置成浓度为 1 6 m ol / � 低， 因此， 寻找更加有效的药物显得尤为迫切 �冬凌 ml 的储存液， - 20 保存备用� LO V O 结肠癌细胞 RPM I -1 6 4 0 培养 基 ( G I BI CO 公 草甲素是从冬凌草中提出的二萜类化合物， 占冬凌 株 ( 上 海细 胞所 ) ， 草有效成分 的 9 0 % 以上， 是抗肿 瘤的主 要活性 成 ［1 - 2 ］ 分� 已有的研究证实 ， 冬凌草甲素对多种肿瘤 I BI CO 公司 ) ; 0.25% 胰酶消化 司) � 胎牛牛血清 ( G 液 ( 杭州四 季青公司 ) ， 二甲 基亚砜 ( S i gm a 公司 ) ，
� � O I A E P 53 LOV O C
HUA N G Y ， ZH A N G Xi an， LIS ha- ha， ZH EN G F ang � � � � � G � � � � � � � � � � H � � � � T C M ， G 51 00 06 ， G P ， C � � � A � � � : O bj e c i e : To i ne i g � a e he � ef � f ec ofori doni n-i nd ce d ap op o i a nd e p re i on of P53 on LO V O c e l l. M e hod : Ce l l p rol i f � � � � er ai on � ofori � � d oni n on LO � VO c e l � l � a de � e rm � i ne� d � b CC K8 a a .A p op o i r a e and e p re i on ofP53 e re anal e d b F l o C om e� � r ( � F C M ) .Re � I : C CK-8 � a a � ho e d ha o ri � d oni n ha d a m od e ra e an i -p r ol i f er ai on e f f e c on LO V O ce l li na i m e -dep e nd an and d � o� e -de p e� ndan m � anner. � � LO � � VO c e l l re a e d ih 8 ， 5 and 1 . 5 m ol /m lf or 4 8 ho r and he ap op o i ra e ere 35.8 % ， 26 . 6 % and � 1 7. 4 % re p e c i e l( P � < 0. � 05 � ， � P< 0 . 01 ) .T he e p re � i on of P53 e re 4 8 . 4% ， 44 . 6 % and 1 7. 4 % re p e c i e l( P < 0 . 0 1 ) .C o nc l� � i on: O ri d oni n had ob � i o � � i nhi � bior e f � f ec � on � LO VO c e l li nad o ed e p e ndan m anne r.O ri d oni n ap o p o i -i nd c e d re l a e d ih P53. K : O ri d oni n; Hm nan c ol on c anc e r LO VO ; A p op o i ; P53
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LO V O
凋 亡 及 其 对P53来自�* 黄羽* 张娴
李莎莎 郑芳
( 广东省中医院中心实验室
广州 51 006 )
8 法检测 LO VO 细胞生长抑制 摘要: 目的: 探讨冬凌草甲素对 LO V O 细胞 凋亡的诱导及其对 P53 表达 的影响�方法: 应用 CC KO V O 细胞生长抑 制呈量效和 时效的关 系�其 率， 用流式细胞术检测 LO V O 细胞的凋亡 率和 P53 的表达�结果: 冬凌 甲素对 L 作用浓度为 1 . 5� 5和8 m ol /m l 时， LO VO 细胞凋亡率分别为 1 7. 4% ， 26 . 6 % 和 35. 8% ， 与对照组比较有差异 ( P < 0 . 05 ， P < 0. 0 1 ) ; P53 的表达分别为 4 8 . 4% ， 4 4. 6 % 和 1 7. 4% ， 与对照组比较， 差异有显著性( P< 0 . 01 ) �结论: 冬凌 草甲素对 LO V O 细胞 的生长有抑制作用， 可诱导结肠 癌细胞的凋亡并且和 P53 的调控有关� 关键词: 冬凌草甲素; 人结肠癌细胞 LO V O ; 凋亡; P53 中图分类号: R 28 5. 5 文献标识码: A
江 西 中 医 学 院 学 报2 0 1 1 年 6 月 第 2 3 卷 第 3 期
� � J OU RNAL O F J I ANG I UN I VE R S I T
. 23 N o. 3 OF TCM 2 01 1 V ol
冬 凌 草 甲 素 诱 导 人 结 肠 癌 细 胞 作 用 的 研 究
