双光束紫外可见分光光度计使用、清洁和维护操作规程
1.目的
为规范TU-1901型双光束紫外可见分光光度计的使用、清洁和维护的操作，特制定本规程。
2.适用范围
适用于TU-1901型双光束紫外可见分光光度计使用、清洁和维护。
3.引用文件
3.1 《TU-1901型双光束紫外可见分光光度计使用说明书》
3.2 《UVWIM5 使用指南》
4.责任者
4.1 质量控制部
5.工作原理
5.1 分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度计定性和定量分析的基础。
5.2 紫外可见分光光度计的工作原理基于朗伯-比尔定律，即当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时, 其吸光度与吸光物质的浓度及吸收层厚度成正比。
6.具体内容
6.1 操作步骤
6.1.1 测量前的准备
6.1.1.1 打开计算机的电源开关及显示屏开关，进入Windows操作环境。
6.1.1.2 确认样品室中无挡光物，打开紫外可见分光光度计主机电源开关。
6.1.1.3 双击联机计算机桌面的“UVWin5 紫外软件”快捷方式图标，进入紫外控制程序，出现初始化工作界面，计算机将对仪器进行自检并初始化，每项测试后，在相应的项后显示“OK”，整个程序需要4分钟左右，自检结束。
6.1.1.4 仪器经过预热30分钟后再开始测定。
6.1.2 仪器操作
6.1.2.1 光度测量
6.1.2.1.1 激活光度测量窗口，选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单，打开光度测量参数设置窗口。
6.1.2.1.2 在测量选项卡中，在【波长】编辑框中输入要测量的波长点，然后点击【添加】按钮，即可在下面的波长点列表中添加一个测量波长点，测量波长最多可设置26个，最少需要设置一个。如果需要删除波长点或清除波长列表，可点击【删除】按钮和【清除】按钮。若在波长列表中选择了一个波长后，波长编辑框中同样显示此波长，这时可以修改波长，然后点击【修改】按钮，即可修改列表中相应的内容。
6.1.2.1.3 光度测量允许重复测量，如果不希望重复测量，选择【重复测量】中的【无】。如果需要手动重复测量，可选择【手动】，然后在【重复测量】编辑框中输入需要重复的次数。【自动重复】功能与手动重复类似，都是进行重复测量，但自动重复测量可自动完成多次重复测量，无须每次都去按重复测量键，但自动测量需要指定一个测量【时间间隔】。还可以选择【计算平均值】，这样每次重复测量结束后，系统会自动计算平均值并显示在测量表格中。
6.1.2.1.4 依据测量需要选择光度模式，可供选择的光度模式有：Abs(吸光度模式)、T％(透过率模式)、Es(能量模式-样品光)、Er(能量模式-参比光)、R％(参比透过率-积分球附件专用)。
6.1.2.1.5 光度测量参数设定完毕后，单击【确定】保存。
6.1.2.1.6 将空白溶液分别倒入两个比色皿中，再放入样品池和参比池中并关好样品室
盖，单击【校零】按钮或【F8】键进行空白校零。
6.1.2.1.7 将样品池中的比色皿取出，再放入供试品溶液关好样品室盖，单击【开始】按钮或【F9】键对供试品进行测量。
6.1.2.2 光谱扫描
6.1.2.2.1 激活光谱扫描窗口，选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单，即可打开光谱扫描参数设置窗口。
6.1.2.2.2 在测量选项卡中设置光谱扫描的【光度模式】。可供选择的光度模式有：Abs(吸光度模式)、T％(透过率模式)、Es(能量模式-样品光)、Er(能量模式-参比光)、R％(参比透过率-积分球附件专用)。如果选择了能量方式(Es、Er)，还可以点击【能量】按钮对能量参数进行设置。
6.1.2.2.3 在显示范围中设置光谱扫描图形中纵坐标的范围，在【最大】和【最小】编辑框中输入相应的数值即可。
6.1.2.2.4 在扫描参数中设置扫描波长的范围、间隔、速度等参数。【起点】和【终点】构成了扫描范围。【速度】表示扫描速度。【间隔】表示扫描的波长间隔。
6.1.2.2.5 在扫描方式中设置光谱扫描的重复扫描模式。【单次扫描】表示只进行一次扫描。【重复扫描】表示可进行多次重复扫描。【重复扫描】是根据选择的附件样品池的数量进行扫描。若选择了自动扫描，则不需要设置重复次数，只要设置时间间隔即可。
6.1.2.2.6 光谱扫描参数设定完毕后，单击【确定】保存。
6.1.2.2.7 将空白溶液分别倒入两个比色皿中，再放入样品池和参比池中并关好样品室盖，单击【基线】按钮进行基线校正。
6.1.2.2.8 将样品池中的比色皿取出，再放入供试品溶液并关好样品室盖，单击【开始】按钮或【F9】键对供试品进行光谱扫描。若要终止扫描，可点击【停止按钮】或【Esc】键。
6.1.2.3 定量测定
6.1.2.3.1 激活定量测定窗口，选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单，即可打开定量测定设置窗口。
6.1.2.3.2 在测量选项卡中对定量测定的测量方法进行设定，可供选择的测量方法有：单波长法、双波长法、双波长系数法、三波长法、一次微分法、二次微分法、三次微分法、四次微分法、双波长二次微分法。选择单波长法，然后在【主波长】编辑框中输入测定波长。设置好后，单击【确定】保存。
6.1.2.3.3 在校正曲线选项卡中设置曲线方程为Abs=f(C)，方程次数为一次，浓度单
位(按实验要求设置)，校正方法为浓度法。
6.1.2.3.4 将空白溶液分别倒入两个比色皿中，再放入样品池和参比池中并关好样品室盖，单击【校零】按钮或【F8】键进行空白校零。
6.1.2.3.5 将样品池中的比色皿取出，再放入标准品溶液关好样品室盖，单击【开始】按钮或【F9】键会出现一个浓度对话框，在对话框中输入标准样品的浓度值，点击【确定】或按【回车键】即可以测量，每一标准样品重复操作。测量信息在标准样品表格中显示。
6.1.2.3.6 标准样品测完后，用纯化水洗涤比色皿三次后，倒入供试品溶液，关好样品室盖，将光标移至未知样品表格，点击【开始】按钮即可测量，每一供试品溶液重复操作。测量信息在未知样品表格中显示。
6.1.2.3.7 若标准样品浓度输入正确，未知样品的浓度可直接显示，无须计算。也可先不正确输入标准样品的浓度，然后将测定的吸光度值记下后再手动计算。
6.1.2.4 时间扫描
6.1.2.4.1 激活时间扫描窗口，选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单，即可打开时间扫描参数设置窗口。
6.1.2.4.2 在测量选项卡中对【时间扫描光度方式】进行设定。可供选择的光度模式有：Abs(吸光度模式)、T％(透过率模式)、Es(能量模式-样品光)、Er(能量模式-参比光)、R％(参比透过率-积分球附件专用)。如果选择了能量方式(Es、Er)，还可以点击【能量】按钮对能量参数进行设置。
6.1.2.4.3 在测量选项卡中对【测量波长点】，【显示范围】，【时间选项】，【扫描方式】进行设定，设定完成后，单击【确定】保存。
6.1.2.4.4 将空白溶液分别倒入两个比色皿中，再放入样品池和参比池中并关好样品室盖，单击【校零】按钮或【F8】键进行空白校零。
6.1.2.4.5 将样品池中的比色皿取出，再放入供试品溶液并关好样品室盖，单击【开始】按钮或【F9】键即可开始时间扫描。扫描过程中，系统会将测量结果以图形的方式显示在时间扫描窗口中。若要终止扫描，可点击【停止按钮】或【Esc】键。
6.1.3 关机
6.1.3.1 测量结束后，选择【文件】菜单下的【退出】项，退出系统，以便保存必要的操作数据。
6.1.3.2 先关掉紫外可见分光光度计主机电源，然后退出Windows系统并关掉计算机显示屏开关。
