试管苗生根 录入时间:2009-6-15 9:08:16 来源：百度 -------------------------------------------------------------------------------- 试管苗生根 离体繁殖产生大量的芽、嫩梢、原球茎，需进一步诱导生根，才能得到完整的植株。生根属试管繁殖的第三个阶段，其后栽入土中。这是最后一道微繁工序，也是能否进行大量生产和实际应用的又一重要问题，同时也是商品化生产出售产品，取得效益的最终关节，应给予高度重视。试管繁殖往往诱导产生大量的丛生芽或丛生茎、原球茎，再转入生根培养基中生根或直接栽入基质中，进一步长大成苗。试管苗的生根可分为试管内生根和试管外生根两种方式。 1、试管内生根 植物离体培养根的发生都来自不定根。根原基的形成和生长素有关，根原基的伸长和生长则可以在没有外源生长素下实现。一般从诱导至开始出现不定根时间，快的只需3d—4d，慢的则要3周—4周。植物组织培养中，关于根的发生规律研究的还不够，尤其是在木本植物培养中，往往芽易诱导并且生长良好，而根则难发生（例如牡丹），故应当加强这方面的研究。影响植物离体培养中生根的因素很多，有离体材料自身的生理生化状态，也有外部的多种因素。 （1）植物材料不同植物、不同基因型、同一植株不同部位和不同年龄对分化根都有决定性的影响。生根难易还与母株所处的生理状态有关，因为取材季节和所处环境条件均有影响。所以试管内若不生根，不要完全从培养中去找原因，也应在取材时考虑。不同植物生根的一般规律是：木本植物比草本植物难，成年树比幼年树难，乔木比灌木难。 （2）基本培养基大多数使用低浓度的MS培养基，其中不少使用1/2MS和1/3MS培养基。如许智宏等在无籽西瓜生根中，用不同浓度的MS培养基（用MS、1/2MS和1/2MS无机盐加铁盐）进行生根对此，结果降低无机盐浓度，有利于生根，而且根多而粗壮，发根也快，加铁盐则更好。水仙的小鳞茎在1/2MS培养基下才生根。矿质元素对生根的影响也有一些报道。大量元素中有人认为NH 多可能不利于发根，生根需要磷和钾元素，但不宜太多；而Ca2+多数报道有利于根的形成和生长。糖的浓度，生根培养时通常使用的是蔗糖，其浓度多数采用低浓度，一般在1%—3%。如桉树的不定枝发根最适蔗糖浓度为0.25%，马铃薯发根为1%。但也有些植物在高浓度时生根较好，李明军等（1998）在怀山药试管繁殖中发现3%—9%的蔗糖浓度均能诱导生根，但6%时根粗而发达。 （3）植物生长调节剂生根培养中使用激素的情况，据报道单用一种生长素的占51.5%，生长素加激动素占20.1%。按外植体类型归类统计，愈伤组织分化根时，使用萘乙酸最多，浓度在0.02—6.0，以1.0—2.0为多。使用吲哚乙酸+激动素的浓度范围分别为0.1—4.0和0.01—1.0，而以1.0—4.0和0.01—0.02居多数。而胚轴、茎段、插枝、花梗等材料分化根时，使用吲哚丁酸居首位，浓度为0.2—10，以1.0为多。可见生根培养多数使用生长素，大都以吲哚丁酸、吲哚乙酸、萘乙酸单独用或配合使用，或与低浓度激动素配合使用。萘乙酸与细胞分裂素配合时摩尔比在（20—30）：1为好。由此可见，在不定根形成中，植物激动起着决定性作用，生长素都能促进生根。一般赤霉素、细胞分裂素、乙烯通常不利于发根，如与生长素配合，一般浓度宜低于生长素浓度。脱落酸（ABA）可能有助于发根。植物生长延缓剂如多效唑（MET）对不定根的形成也有良好的作用，在诱导生根中所使用的浓度一般为0.1—4.0（李明军，1995）。 （4）植物生长调节剂的使用方法通常的使用方法是将植物生长调节剂剂预先加入到培养基中，然后再接种材料使其诱导生根。近年来为促进试管苗的生根，改变了这种做法，而将需生根材料先在一定浓度植物生长调节剂中浸泡或培养一定时间，然后转入无植物生长调节剂培养基中培养，能显著提高生根率。如将苹果新梢预先在吲哚乙酸溶液中浸泡1h，这样比预先加到培养基中效果要好。又如将栗的新梢基部1cm处在1.0浓度的IBA溶液中浸泡2min，然后转入1/2硝酸盐的MS培养基上，可使生根率高达90%，每茎生根数为12.3条。再如将桃新梢浸入100BA溶液中浸2h 后，再转入除去激素、蔗糖和水解乳蛋白的1/2MS培养基上，可诱导生根。 （5）其他物质有些材料报道培养基中加入一些其他物质，有利于生根。 （6）继代培养许多作者报道，新梢生根能力随继代时间增长而生根能力增加。如杜鹃茎尖培养，随培养次数的增加，小插条生根数量逐渐增加，第四代最高，最后达百分之百的生根。