西南科技大学硕士研究生学位论文第３页图１－１木醋杆菌的光学显徽镜图片Ｆｉｇ．卜１ＯｐｔｉｃａＩｍｉｃｒｏｇｒａｐｈｏｆＡｃｅｔｏｂａｃｔｅｒｘｙｌｉｎｕｍ图１－２纤维素链间的氢键示意图Ｆｉｇ．１－２ｈｙｄｒｏｇｅｎｂｏｎｄａｍｏｎｇｃｈａｉｎｓｉｎｃｅＩｌｕＩｏｓｅ对木醋杆菌进行培养生成细菌纤维素的过程可分为三个步骤““：在细菌的细胞壁侧有一列５０～８０个轴向排列小孔，在静态培养条件下，可将葡萄糖分子以Ｂ一１，４糖苷键相连成聚葡糖，从小孔中分泌出来，最后形成直径１．７８ｎｍ的纤维素微纤丝，如图卜３；相邻的几根微纤丝之间由氢键横向相互联接形成直径为３～４ｎｍ的微纤丝束，微纤丝束进一步伸长，束间仍由氢键相互联接，多束合并形成长度不定，宽度为７０～８０ｎｍ，厚度３～４ｎｍ纤维丝带“”；纤维丝带相互交织形成形成网状多孔结构，并在培养基的气液界面形成一层透明的凝胶薄膜，悬浮在培养液表面向培养基深层伸长。
即为细菌纤维素凝胶。
西南科技大学硕士研究生学位论文第４页图１－３细菌纤维素徽纤维模式图Ｆｉｇ．１－３ＭｏｄｅｐａｔｔｅｒｎｏｆＩｌｉｃｒｏｆｉｂｒｅｅｏｆＢＣ１．１．２细菌纤维素的结构及理化特性细菌纤维素是一种高度不溶于水、具有弹性及伸缩性的高聚物，具有较高的拉伸强度。
一般都具有网状结构（见图Ｉ－４），在这网状结构中，高度结晶状的及单轴方向的纤维素亚纤维构成了大量的带状纤维。
而植物来源的纤维素不具有这样的三维结构。
图Ｉ一４细菌纤维素的网络结构图Ｆｉｇ．１—４ＮｅｔｗｏｒｋｏｆＢａｃｔｅｒｉａＩＣｅＩＩＵＩｏｓｅ细菌纤维素在化学组成上与植物纤维相同，均是由１３一Ｄ－吡喃葡萄糖单体以１３—１，４－糖苷键连接而成的直链式大分子，直链间彼此平行，无分枝结西南科技大学硕士研究生学位论文第２６页未降解前：无变化降解初期：变薄降解中期：碎片增多降解后期：无块状图２－５细菌纤维素酶解不同程度典型特征ｅｎｚｙｍｔｉｃｈｙｄｒｏＩｙｓｉｓｏｆＢＣＦｉｅ．２－５Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｅｇｒｅｅｏｆ从表２－４知，酶浓度为１％时，随着酶解时问的增加，细菌纤维素的酶解程度加深，反应第６天时细菌纤维素均已降解成为碎片，以细微的颗粒状存在：从反应的第７人到第１０天，未观察到其它变化，町认为已经达到了反应的末期。
实验一纤维素的微生物降解一、实验目的1、掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术；了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术；掌握微生物培养方法。
2、了解纤维素分解的基本理论，并掌握有关纤维素好氧和厌氧分解的一些基本实验技术。
二、实验原理1、从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化2、常用的分离纯化方法：单细胞挑取法，稀释涂布平板法，稀释混合平板法，平板划线法等。
稀释涂布平板法的步骤：倒平板－制备土壤污水稀释液－涂布－培养－挑菌落；平板划线法的步骤：倒平板－标记培养基名称－划线。
3、测定纤维素分解酶，可观察其对提供的唯一碳源滤纸纤维的分解情况确定。
如果滤纸溃烂，说明有纤维素分解菌的作用。
4、纤维素分解微生物可根据需氧的与否分为两大类：好氧分解微生物和厌氧分解微生物。
三、实验材料1. 培养基A. 赫奇逊液固体培养基（好氧）：KH2PO4 1.0g，MgSO4٠7H2O 0.3g，FeCl3 0.01g，CaCl2 0.1g，NaNO3 2.5g，蒸馏水1000ml，pH值为7.2～7.3，0.1MPa灭菌20min。
B. 厌氧液体培养基：牛肉膏1.5g，蛋白胨2.5g，水1000ml，CaCO3 2.0g；0.1MPa 灭菌20min。
2. 器材A.近3mm粒度菜园土。
B.镊子，无淀粉滤纸，1ml和10ml无菌吸管，无菌水，天平。
3、土样：格物楼西，小树根部约10cm，地表覆盖较多枯叶、枯草，取土深度约15cm。
四、方法步骤1. 土粒法分离纤维素的好氧分解微生物⏹采土方式：在选好适当地点后，用小铲子除去表土，取离地面5～15cm处的土约10g，盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好、标记，记录采样时间、地点、环境条件等，以备查考。
⏹将赫奇逊培养基趁热倒入培养皿，冷却后加直径近于培养皿的滤纸一张，用少量培养液润湿。
