检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则

PCR荧光检测试剂盒生产质量控制规程一. 微量加样器的使用规定1．微量加样器校正：: 使用微量加样器吸10μl 10次是否为100μl。

2．加样前吸头润湿：当吸头排空时，仍会有一些残留的液体以薄膜的形式吸附在吸头里面，所以，在加样时先吸打液体数次，充分润湿吸头管腔,以保证加样的一致性。

3．加样时吸头应靠试管壁：加样时吸头的液体顺着管壁流出，防止液滴的形成由于其表面张力的作用而阻止样本的释放。

4．吸头是否与加样器上吸头套筒密封：样器上吸头与套筒密封完好。

5．加样时注意第一停点和第二停点：吸液是应注意大拇指按下按钮至第一停点，缓慢慢慢吸入液体。

停留1s，然后将吸头提离液面。

用吸纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。

放液时经过第一停点，停1-2s后，继续按压到第二停点，排出残余液体。

6．PCR反应原液由于有甘油在冷的状态较黏稠,易于1次吸取数人份，慢一些。

7．边加边看,直观估计,防止跳管。

8．低温冷藏批量DNA提取液、PCR反应液A和B取出时是否充分混匀后,分装使用，PCR反应液A和B是否避光低温冷藏和使用。

9．配PCR反应液应先加缓冲液再加PCR反应液充分混匀,必要时倒置混匀,再离心,或用灭菌吸头上下吸几次。

10．PCR反应液（包括样品）应充分混匀:保证PCR反应曲线呈S形，全阴性样品呈近似水平曲线。

二．PCR试验操作规程**血清稀释液：全阴性血清再加2倍HBV DNA提取液混匀, 5000rpm，离心1分钟，混匀血清98℃ 5分钟变性,12000rpm，离心10分钟,吸取上清液。

三.超净工作台的使用、维护保养与清洁标准操作规程1.目的建立一个超净工作台的使用、维护保养与清洁标准操作程序，使操作过程标准化。

2.职责质量部QC负责本文件的起草，质量部及QC检验人员负责本标准的实施。

3.范围本标准适用于超净工作台的使用、维护和保养与清洁。

4.内容4.1超净工作台的主要组成部分：高效过滤器、中效过滤器、通风机、电气控制及排气管道部分。

国家荧光pcr检测标准
荧光PCR 检测是一种常用的核酸检测方法，它可以快速、准确地检测出病原体的存在。

以下是国家荧光PCR 检测标准的一些基本要求：
1. 检测设备：荧光PCR 检测设备应符合国家相关标准，并经过严格的质量控制和校准。

2. 检测方法：荧光PCR 检测方法应经过严格的验证和优化，以确保检测结果的准确性和可靠性。

3. 检测试剂：荧光PCR 检测试剂应符合国家相关标准，并经过严格的质量控制和验证。

4. 检测人员：荧光PCR 检测人员应经过专业培训和考核，具备相关的专业知识和技能。

5. 检测环境：荧光PCR 检测环境应符合国家相关标准，并经过严格的质量控制和验证。

6. 检测结果：荧光PCR 检测结果应准确、可靠，并经过严格的质量控制和验证。

国家荧光PCR 检测标准是确保荧光PCR 检测结果准确、可靠的重要保障，检测机构应严格按照国家相关标准进行检测，以确保检测结果的准确性和可靠性。

广东省临床检验质量控制中心PCR验收标准
一、PCR技术必须具备的基本条件：
1、规范的PCR实验室。

2、编写适合本PCR实验室的质量手册。

3、经PCR专业知识培训的技术人员（PCR上岗证）。

4、使用有生产批文的PCR试剂，具备条件的二级以上医院可向卫生部或省临床检验中心申请技术验收。

二、PCR实验室验收标准细则：
1、填写PCR实验室技术验收申请表。

2、申报PCR实验室的基本情况，包括检验科基本情况和基因扩增检验实验室基本运行情况，必要性与可行性，着重分析开展项目运行情况、人员配置现状、内部质量管理体系执行情况与效果分析。

3、医疗机构执业许可证。

4、拟设置PCR实验室医院的医疗卫生资源状况，对PCR实验室的需求情况以及实验室运行的预测分析。

5、拟设PCR实验室的设置平面图。

6、PCR实验室主要负责人简历表。

7、PCR实验室工作人员一览表（附实验室工作人员简历）。

8、提供PCR实验室的主要仪器设备表。

9、拟开展的PCR实验室诊断项目。

10、PCR实验室质量手册。

11、检验报告单2份。

12、根据本PCR实验室建设进展情况和试运行进展，提出大致的现场技术验收时间。

13、志愿申请，承担两义务：遵守有关规定；不论能否获准通过验收，预付验收阶段的全部费用。

14、卫生部或省临床检验中心预审，对申报文件和现场进行预验收，初步确定是否进行现场验收和验收时间。

15、卫生部临床检验中心PCR实验室技术任务书现场技术专家组成员组成到现场进行技术验收。

检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则1、目的规范了本中心荧光定量PCR检测试剂盒的验收方法，以确保检测试剂盒的质量符合检测技术的要求；确保检测结果的准确、有效。

2、使用范围适用于本中心荧光定量PCR检测试剂盒的验收。

3、职责由动物疫病监测室相关人员负责荧光定量PCR试剂盒的验收。

4、验收内容4.1 荧光定量PCR检测试剂盒选用规定荧光定量PCR检测试剂盒的选用以政府招标的方式进行，由具有相关资质的供应商提供试剂盒。

所提供的试剂盒的保质期必须在半年以上，否则予以退货。

每一批号检测试剂盒都必须进行验收，符合要求后方可使用4.2 验收标准及方法4.2.1 荧光定量PCR检测试剂盒的验收按照《H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》（GB/T19438.2-2004）与《新城疫病毒中强毒株检测方法荧光RT-PCR法》（SN/T1686-2005）中的规定执行。

试剂盒中提供的试剂有荧光RT-PCR反应液、转录酶、反转录酶和Taq 酶。

验收指标就是使用试剂盒的反应体系，按照GB/T19438.2-2004中的反应程序，使质控阴性对照无Ct值且无扩增曲线；阳性对照Ct值≤30.0，且出现特定的扩增曲线。

4.2.2 主要使用仪器荧光定量PCR扩增仪，生物安全柜4.2.3 验收步骤按照GB/T19438.2-2004以及SN/T1686-2005中的规程对质控阴、阳性对照进行核酸提取，再进行荧光RT-PCR反应。

质控阴性对照无Ct值且无扩增曲线；阳性对照Ct值≤30.0，且出现特定的扩增曲线。

这两个参数同时满足，表明试剂盒符合要求，可以使用。

5、相关记录FNAJ/BG-B-406-05 日常采购（包括易耗品）验收记录表GB/T19438.2-2004 H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法SN/T1686-2005 新城疫病毒中强毒株检测方法荧光RT-PCR 法。

检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则一、引言荧光定量聚合酶链反应（PCR）是一种常用的分子生物学技术，广泛应用于医学、生物学和农业等领域。

在检测中心中，正确使用和验收PCR试剂盒对确保检测结果的准确性和可靠性至关重要。

本细则旨在规范检测中心对PCR试剂盒的验收工作。

二、验收前的准备工作1.阅读试剂盒说明书，了解试剂盒的基本信息、存储条件和使用方法。

2.确保试剂盒未过期，检查试剂盒上的生产日期和有效期限。

三、试剂盒物品清点1.打开试剂盒包装，对照说明书上的清单，确认试剂盒所含物品是否齐全。

2.检查试剂盒内的试剂、标准品和控制品的外观是否正常，如颜色、透明度、凝聚物等。

3.检查试剂盒内的试剂、标准品和控制品的容量是否符合标注要求，比较标贴上的容量和体积。

四、试剂盒存储条件和有效期检查1.检查试剂盒包装上的存储条件是否符合实验室的存储环境。

2.检查试剂盒上的有效期是否仍在有效期范围内，避免使用过期试剂进行实验。

五、试剂试验1.使用空白样品（无样本）进行试剂试验，检查试剂盒的表现如何。

2.检查试剂盒的放大效果，使用适当的阳性对照进行检测，并与实验室标准结果进行比对。

六、数据分析1.将试剂盒试验结果录入实验数据管理系统，并与试剂盒说明书和实验室标准结果进行比对。

2.检查试剂盒试验结果的准确性和可靠性，评估试剂盒在实验室中的适应性和性能。

七、实验记录1.记录试剂盒的验收日期、试验结果和验收结论。

2.如有问题或异常情况，记录并及时向上级主管报告。

八、试剂盒处置1.将已经使用完毕的试剂盒及时处理，按照实验室的废弃物管理规定进行处置。

2.未使用的试剂盒按照包装说明妥善保存，避免存放环境受潮、暴露于阳光直射等不良条件。

九、验收报告1.编写试剂盒验收报告，包括试剂盒信息、试验结果和验收结论等内容。

2.将验收报告归档并交由实验室主管保存。

总结：以上是对检测中心荧光定量PCR检测试剂盒的验收细则进行规范的一份详细说明。

pcr实验室验收标准一、设备和仪器1. 实验室应配备PCR仪、电泳仪、离心机、移液器等必要的设备和仪器。

2. 设备和仪器的数量和规格应符合实验室规模和检测项目的要求。

3. 设备和仪器应放置在合理、方便操作的位置，并标明名称和用途。

4. 设备和仪器应定期进行维护和保养，保证其正常运转。

5. PCR仪应配备有实时荧光检测系统，并应定期进行校准。

二、实验材料和试剂1. 实验室应配备PCR反应液、引物、DNA模板等必要的实验材料和试剂。

2. 实验材料和试剂的种类和数量应满足实验室常规检测项目的需求。

3. 实验材料和试剂应按照规定的储存条件进行保存，并定期进行检查和更换。

4. 实验材料和试剂应有质量保证，如购买凭证、合格证明等。

5. 实验材料和试剂应有明确的标识，包括名称、浓度、生产日期等信息。

三、实验操作方法和流程1. 实验室应有标准的PCR实验操作流程，包括样品处理、PCR反应液配置、PCR扩增等步骤。

2. 实验操作方法和流程应科学、合理，并符合实验室检测项目的特点。

3. 实验操作人员应经过培训和考核，能够熟练掌握实验操作方法和流程。

4. 实验操作过程中应严格遵守实验室安全规范，防止交叉污染和实验室事故的发生。

5. 实验操作完成后，应进行数据分析和结果报告的编写，确保结果的准确性和可靠性。

四、实验室环境与安全1. 实验室应保持整洁、卫生，实验台面和地面应清洁、无尘。

2. 实验室应具备适宜的照明和通风条件，保证实验的准确性。

3. 实验室应设置专门的试剂储存区域，并按照试剂的特性进行分类存放。

4. 实验室应配备消防设施和急救箱等安全设备，并定期进行检查和更新。

5. 实验过程中，应遵守相关的安全操作规程，佩戴必要的个人防护用品。

6. 实验室应设立安全出口和应急照明设施，确保在紧急情况下人员能够安全撤离。

7. 实验室应定期进行消毒和清洁，防止细菌和病毒的传播。

8. 实验室应建立严格的样品管理制度，确保样品的采集、存储和使用过程符合规范。

1 目的保证基因室检测所使用的试剂及耗材供货渠道和质量的稳定可靠。

2 范围适用于基因室试剂和耗材的供应。

3 内容3.1 试剂耗材的选择3.1.1 PCR检测试剂选择3.1.1.1 选取与扩增仪或检测项目配套的试剂。

3.1.1.2 经有关机构检定批准上市的商品化学试剂盒，商品试剂应三证（生产许可证、经营许可证、产品注册证）齐全。

3.1.2 标本制备区移液器吸头必须使用有滤芯的PCR专用吸头。

3.1.3 离心管、一次性手套等耗材的选购由实验室统一购买。

3.2 试剂及耗材的申购：定期（每月初）由试剂管理员按盘点情况申购下个月的试剂及耗材。

3.3 试剂及耗材的初步验收：由本科室上班人员接收并验收，验收合格后按要求贮存。

3.3.1 外包装检查：包装应完整无损无污，标识清楚（厂家名称、品名、批准文号、生产日期、有效期等）。

3.3.2 内包装检查：内包装是否有破损、泄漏，内容物是否齐全，是否有相应的使用说明书等。

3.3.3 上述验收在接收时完成，同时进行入库记录。

3.3.4 如以上验收不合格，则拒收该批试剂或耗材。

3.4 基因室严格执行试剂和耗材的性能质检、入库、领取、出库及试剂库存量记录，对新批号的试剂和耗材，使用前进行相关性能质检，以确认新批号试剂和耗材对实验结果无影响，对同一批号不同货运号的试剂和耗材，初步验收时发现包装损坏或冰袋融化，则应对此批试剂和耗材进行性能质检。

3.4.1 试剂和耗材的性能验证：见基因室试剂和耗材的质检操作程序。

3.4.2 试剂和耗材的领取：每周一由试剂管理员根据库存和上周使用量，到仓库领取所需试剂和耗材。

3.4.3 出库时应先出近效期的试剂或耗材，并填写《试剂出入库登记表》，试剂出库登记时应将所有阳性对照（包括临界值）、标准品取出，放入标本制备区对应项目的试剂盒内保存。

3.5 基因室试剂及耗材不符合以下要求时，应拒收：3.5.1 不符合试剂及耗材的初步验收要求时。

3.5.2 不符合试剂和耗材质检的性能验证要求时。

· 医学诊疗技术 ·1452020年　第24期自2019年底新型冠状病毒爆发以来，各地积极响应政府号召，在不断增强各地防护措施的同时，增加对于新型冠状病毒的认知[1]。

在临床检验诊断中实时荧光定量PCR 检测核酸更是目前已知的检测新型冠状病毒最为准确、广泛的方法[2]。

本实验室选用高灵敏度的湖南圣湘生物有限公司提供的检测试剂盒，在最低200拷贝浓度时即可检出病毒，因此对于检测试剂盒的性能质量，显得尤为重要。

1　材料和方法1.1检测样本：所有阳性样本和阴性样本均采用试剂盒配套的阳性对照和阴性对照（批号：2020129）1.1.1试剂：湖南圣湘生物生产的2019新型冠状病毒2019-nCoV 核酸检测试剂盒（荧光PCR 法），检测扩增试剂批号：2020129；仪器：扩增仪-ABI QuantStudio5；1.2操作程序：将PCR 反应管放入扩增仪样品槽。

荧光检测通道选择：选择FAM 和ROX 通道检测2019-nCoV 病毒核酸；选择HEX 通道检测内标。

推荐的循环参数设定如下表1：表1　推荐的循环参数设定步骤温度时间循环数1逆转录50℃30分钟12cDNA 预变性95℃1分钟13变性95℃15秒45退火，延伸及荧光采集60℃30秒4仪器冷却25℃10秒11.3结果曲线判定标准：（1）ORF 与N 基因为典型的S 型扩增曲线，且Ct ≤40的样本，报告为病毒阳性；（2）ORF 与N 基因未检测到典型的S 型扩增曲线，或Ct ＞40，内标有扩增曲线，且Ct ≤40的样本，报告为病毒阴性；（3）对于三通道均未检测到典型的S 型扩增曲线（No Ct），或Ct ＞40，该样本的检测结果无效。

1.4性能验证及提取仪适配性评估方法及指标1.4.1精密度：用模拟阳性样本和阴性样本。

分5天检测，每次4个复孔，计算每通道的符合率及CV 值，要求CV 值≤5%。

1.4.2最低检出限：用已知浓度的模拟阳性标本，通过倍比稀释的方法，复孔实验，直至无法检测出阳性基因为止，要求最低检测限满足200copies/ml。

pcr实验室验收标准
PCR实验室的验收标准可以包括以下几个方面：
1. 设备和仪器：实验室应具备PCR仪、电动注射器、离心机、超洁台等PCR操作所需的设备和仪器。

这些设备和仪器需要
工作正常、精度准确，并且符合相关的安全要求。

2. 实验材料和试剂：实验室应具备高纯度的实验材料和试剂，如核酸提取试剂、反转录酶、引物、探针等。

这些材料和试剂需要符合相关的纯度和质量标准，并且要储存妥善，以确保有效性和可靠性。

3. 实验操作方法和流程：实验室应具备标准化的PCR实验操
作方法和流程，包括核酸提取、反转录、扩增、分析等步骤。

这些方法和流程需要符合相关的质量控制标准和操作规范，以确保实验结果的准确性和可重复性。

4. 质量控制和数据分析：实验室应具备质量控制和数据分析的能力，包括对实验过程中的质量控制进行监测和记录，以及对实验数据进行分析和解读。

这些能力需要依据相关的质量标准和数据分析方法进行操作，以确保实验结果的可靠性和科学性。

5. 实验室管理和安全措施：实验室应具备科学的实验室管理和安全措施，如实验室操作规程、实验室标识、个人防护措施等。

这些管理和措施需要符合相关的安全和质量要求，以确保实验过程和实验人员的安全。

总的来说，PCR实验室的验收标准主要包括设备和仪器、实验材料和试剂、实验操作方法和流程、质量控制和数据分析、实验室管理和安全措施等方面，以保证实验室的操作质量和实验结果的可靠性。

检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则
一、科学选材
1.测序级合成核苷酸：合成产品应经全长光谱比色检测，确认无肽键
断和错义残基；
2.反应相关试剂：应经分子生物学检测，确认无污染情况；
3.其他活性物质：无反应性活性物质，可保证活性物质以及荧光活性
物质的稳定性；
4.荧光活性物质：其荧光活性物质的滴度必须稳定，没有偏离正常谱
线的情况；
5.合成核苷酸扩增片段：应确保试剂盒所使用的合成核苷酸扩增片段
的序列准确性及效率；
6.唯一性：检测试剂中所用活性物质的唯一性，比如它的荧光量子产
量在一些符合的范围内，可保证检测试剂的性能稳定，可以准确检测出检
测物质；
二、检测实验
1.合成核苷酸的检测：应在实验所用的检测试剂中检测它的质量，通
过GC/MS、全长光谱比色法，检测出来的结果要符合产品质量要求；
2.反应相关试剂的检测：通过分子生物学检测，检测每种试剂的活性，并定量测定；
3.荧光活性物质的检测：确保各种荧光活性物质的谱线分布正常，以
及它们的滴度稳定，没有异常偏移的情况；
4.核苷酸扩增片段的检测：通过质控检测，确保序列的准确性和扩增片段的效率；。

荧光定量PCR仪校验规程
1目的
荧光定量PCR仪是复杂精密仪器，其校准工作需由专业工程师进行。

除与仪器厂家达成协议定期校准以外，以实验判断仪器校准状态也可为何时进行仪器校准提供信息。

2范围
新购置、使用中、检修后的荧光定量PCR仪。

3校准用试剂
标准化荧光PCR试验试剂及102、103、104、106标准品。

4校准方法
4.1分析室内质控图，及时发现系统误差。

经过分析排除了试剂和人员误差后，确定仪器是否出现了检测偏差需要校准。

4.2确定仪器需校准后，进行仪器状态效验试验
4.2.1准备标准化试剂及标准品
4.2.2在仪器处于校准状态下，用标准化试剂对102、103、104、106标准品进行扩增实验，分别计算标准曲线的斜率、截距、相关性的控制限。

4.2.3绘制标准曲线，观察标准曲线的三个参数是否处在控制范围和102标准品是否检出。

4.2.4当仅有102标准品未检出时，检查实验全过程。

再次上机检测102标准品。

4.2.5当102标准品未检出、标准曲线的三个参数超出控制范围或仅出现后者时，先排除实验的人员、试剂因素，再重复实验。

如结果依然，联系厂家立即进行仪器校准。

4.3仪器经过校准后，重复该实验。

5.校验周期
一年。

6.参考文件
JJF 1071国家计量校准规范编写规则
JJF 1001 通用计量术语及定义
GBT/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定7.记录表格
《测试设备校验记录表》。

PCR清洁试剂盒质检流程1.抽检方式:从每批次生产的成品中抽取1‰样品进行检验，如该批次生产的产品少于1000盒，抽取一盒作性能检验。

2.检验要求:2.1 PCR清洁试剂盒组成：见产品说明书。

2.2组成核酸纯化试剂盒的塑料耗材的要求详见Q／WTJ-J01 00002。

2.3使用性能要求:2.3.1 对于从同一种样品回收的DNA，以标准试剂盒作为对照，两者回收DNA的质量差别≤±10％。

2.3.2 对于从同一种样品回收的DNA，以※Qiagen试剂盒作为对照，两者回收DNA的质量差别≤±10％。

2.3.3 对DNA进行纯化后要求其回收率≥70％（目测）。

2.3.4 针对特定长度片段长度的DNA清洁后回收率的要求（分光光度计测试）：75bp≥70％500bp≥80％1kb≥80％5kb≥80％10kb≥70％2.3.5 纯度要求：纯化后的DNA的OD260／OD280的比值应处于1.80±0.15。

※Qiagen试剂盒：QIAquick PCR Purification Kit.3. 试验方法3.1核酸纯化试剂盒的使用性能要求的试验方法：3.1.1性能要求2.3.1试验方法：1)至少取送检的三次产品，对照的标准的试剂盒三次产品作检测。

2)取六个（或更多管）1.5 ml 离心管，每管加入30 μl※100bp Marker，注意应保留部分Marker用于后续电泳时对照之用。

3)按产品说明书操作步骤操作，分别用检验试剂盒与对照的标准试剂盒清洁100bp Maker，最后用30μl洗脱液洗脱DNA。

4)走凝胶电泳，紫外灯下目测清洁后的Marker的回收率，拍摄图片并目测估算两批产品间回收的DNA的得率上的差别。

3.1.2性能要求2.3.2试验方法：1）至少取送检的三次产品，对照的Qiagen试剂盒三次产品作检测。

2）取六个（或更多管）1.5 ml 离心管，每管加入30 μl※100bp Marker，注意应保留部分Marker用于后续电泳时对照之用。

PCR实验室试剂的质检标准操作规程1. 目的：保证每批用于临床实验的试剂的质量良好，符合要求。

2. 范围：各种用于临床实验的核酸扩增荧光检测试剂（HBV、HCV、TB、CT）。

3. 职责：检测员负责试剂的质量检测。

4. 程序：4.1收到试剂后，目测试剂是否处在冻存状态。

4.2 核对试剂品种和数量并检查包装：对外包装的检查包括厂家名称﹑检测目的﹑批准文号﹑批号和有效期等，可防止使用假冒伪劣或过期试剂。

内包装的检查主要看试剂瓶是否漏液﹑真空包装是否破损﹑试剂是否齐全以及是否有使用说明书等。

4.3 及时将试剂转入－20℃冰箱保存。

将上述检测核对情况在记录本上登记。

4.4 最迟在前批次试剂存量尚可维持常规实验一周时，按如下要求对新批号试剂进行效验实验。

4.5 效验实验：4.5.1 要求设置：空白对照、阴性对照、阳性对照、室内质控各一，阳性标准品梯度（104，105，106，107）4.5.2 出现如下情况中任何一种的，判断为试剂不合格，不能用于临床检测：a）空白对照出现扩增。

如扩增曲线CT值大于25，需重复实验确证试剂污染。

b）阳性对照和阳性标准品均未检出，或阳性对照未检出而阳性标准品检出率大幅下降，表示试剂失效或检测灵敏度大幅下降。

4.5.3 阳性对照未检出，阳性标准品检测正常，提示样品提取液可能存在问题。

重复新旧提取液阳性对照实验，确定提取液失效问题。

更换提取液后该批试剂方可使用。

4.5.4 空白对照无扩增，阴性对照有扩增，排除其他污染可能性后，提取液存在污染可能。

单独用提取液点样上机，出现扩增，需更换提取液后方可使用该批试剂。

4.5.5 阳性对照检出，阳性标准品未检出或扩增曲线明显系统性CT值偏大5个循环以上。

提示阳性标准品存在问题。

更换阳性标准品后该批试剂方可投入使用。

4.5.6空白对照、阴性对照无扩增，阳性对照正常检出，阳性标准品导出的标准曲线之斜率（－2.9～－3.9）、截距（26～34）、相关性（﹤－0.99）均在使用范围内，表明该批试剂良好，可以投入临床使用。

PCR检测的质量控制孙明博士北京世纪元亨动物防疫技术有限公司随着兽医防疫工作重要性的逐步提高，PCR检测技术已被兽医工作者比较广泛认可，已经从实验室研究走进了临床应用阶段。

如何提高PCR检测质量，已成为实验室技术人员不可回避的一个问题，它直接影响实验室检测结果的可信度和兽医防疫工作质量。

我们认为，PCR检测质量的控制是一个系统工程，总体上涉及三个方面：一是试验仪器；二是试验试剂与耗材；三是人员操作。

任何一个方面出现问题，都会影响PCR检测质量。

一、试验仪器PCR仪和紫外凝胶成像系统（紫外分析仪或手提紫外等）以及移液器都可能影响PCR检测的质量。

PCR仪是控制PCR反应温度变化的，其温度和控制时间的准确程度可能会影性PCR检测质量。

移液器取液的准确程度影响反应体系是否能达到最佳反应环境。

紫外分析系统对检测敏感性有明显的影响。

紫外分析系统有3种类型仪器：紫外分析仪、紫外凝胶成像系统、手提紫外灯。

紫外分析仪直接用眼睛观察琼脂糖凝胶上DNA扩增带。

紫外凝胶成像系统是在计算机上通过摄像系统对琼脂糖凝胶上DNA扩增带进行观察。

手提紫外灯可以在电泳过程中直接对琼脂糖凝胶上DNA扩增带进行观察，使用方便，分辨率比较低。

依据这些仪器的分辨率由高到低顺序是紫外分析仪、紫外凝胶成像系统、手提紫外灯。

紫外分析仪有时能看到弱阳性扩增带，在紫外凝胶成像系统上却看不到。

手提紫外灯只有在阳性扩增带比较亮时才能看到，建议为保证检测质量最好不用手提紫外灯，可用于临时的电泳结果观察。

仪器的质量控制应该通过实验室质量认证来实施，定期进行仪器的效验。

没有质量认证的实验室可以定期请仪器生产厂家进行效验和保养，确保所有仪器处于正常的工作状态。

二、试验试剂与耗材在PCR检测质量控制中，试剂的选择具有十分重要的作用，也是实验人员最为关注的检测质量控制因素。

试剂一定选择质量和信誉好的厂商，一但选定后最好不要轻易改换。

如果必须改换时应与原产品进行严格比对试验，包括敏感性、特异性、试剂保存期等试验。