ABCA1基因R1587K及M883I与血脂及冠心病易感性的关联分析
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郭志 刚 吴平 生 刘亚 洋 王 琦光 赖 文岩
南方 医科大学南方 医院心 内科（ 州 ５０ １ ） 广 １５５
【 摘要 】 目的 探讨三磷 酸腺 苷 结合盒转 运子 Ａ （ Ｔ ｉ ｉ ｓ ｔ ａ ｐｒ ｒ １ 基 因 Ｒ ５７ ， ８３ １ Ａ Ｐｂ ｄ ｇ ａｓｔ ｔｎ ｏｅ Ａ ） ｎ ｎ ｃ ｅｅｒ ｓ ｔ １８ Ｋ Ｍ ８Ｉ
维普资讯 ・３ ８ ７ Ｇｕ ｌ ｄ ｎ ｅ ｉａ ｏ ｒ ａ Ｍａ．２０ Ｖｏ ８， ｏ ａ 【 ｏ ｇ Ｍ ｄｃ ｌＪ ｕ ｎ ｌ ｎ ｇ ｒ ０ ７， １ ．２ Ｎ ．３
Ａ Ｃ １基 因 Ｒ ５７ ＢＡ １８ Ｋ及 Ｍ８３ 与血 脂 及 冠 心 病 ８Ｉ 易感 性 的关 联 分 析 水
心病 患病风 险影响发现 ， 与携带 １８ Ｒ ５ ７ Ｒ和 ８３ ８ ＭＭ或 ＭＩ 因型比较 ， 带其 他组合基 因型者冠 心病患病 风险无 基 携 明显降低 。结论 中国人 １８ Ｋ，８ Ｍ 等位基 因携 带率明显不 同于 欧洲人 及 日本人 ，Ｒ ５７ ５７ ８３ １８ Ｋ可显著影 响冠心病 及 正常人血浆 Ｈ Ｌ—Ｃ水平 ， １８ Ｋ及 Ｍ８ ３ 与冠心病患病风险无明显 关联 。 Ｄ Ｒ ５７ ８Ｉ
１ 资 料 与 方 法
Ｃ１ ５ Ａ 的 ０个外显 子进行 Ｐ Ｒ扩增 ， Ｃ 并用 Ｓ Ｃ Ｓ Ｐ一银染 法对编码 区进行检测 。ＳＣ Ｓ Ｐ发现 异常 的患 者 ， 用测序 法及 限制性 内切酶法进一步证实。 １ ３ １ 基 因组 Ｄ Ａ提取 ．． Ｎ 外 周静脉 血 ３ｌ ， ｌ 乙二胺 Ｉ ｌ 四乙酸二钠 （ Ｄ Ａ ａ） Ｅ Ｔ Ｎ ２ 抗凝 ， 用基 因组 Ｄ Ａ提取试剂 Ｎ 盒（ 天为时代公 司） 提取基 因组 Ｄ Ａ Ｎ。
ｒ ｔｃｏ ａ ｓ —Ｐ Ｒ， Ｉ Ａ—Ｐ Ｒ） 限制 性 片段 长度 多 态性 （ｅｔｃｏ ａｍｅｔ ｅｇ ｏｙ ｒｈｓ ｅ ｒ ｔ ｎａ ｌ ｉ Ｃ ＰＲ ｓｉｉ ｎ ｙ ｓ Ｃ 、 ｒｓｉｔｎｆ ｇ ｎ ｌｎｔ ｐｌ ｐｉ ｒ ｉ ｒ ｈ ｍｏ ｍ，Ｐ Ｒ— Ｃ Ｒ Ｌ） Ｆ Ｐ 方法对 Ａ Ｃ 的 Ｒ ５ ７ Ｍ８ ３ 多态性进行检测。结果 中国人 １ ８ Ｋ等位基 因携带率 为 ２ ． ％ ，８ Ｍ Ｂ Ａ１ １８ Ｋ， ８ Ｉ ５７ ８９ ８ ３
性别差 异无显 著性 。
起着关键 性作用 ， 突变可 导致 Ｔ ｎ ｉ 病 （ Ｄ） 其 ａｇ ｒ ｅ Ｔ 和家 族性低 ｄ脂蛋 白血症 （ Ｉ ， 现为低 Ｈ Ｌ胆 固醇血 Ｆ－ 表 Ｉ Ａ） Ｄ 症和早发 冠心 病 。 国外 的研 究显 示 Ａ Ｃ １的基 ＢＡ 因多态性与血浆脂质水平及 冠心病 易感性有着不 同的 关联性 ， 已发 现 的 Ａ Ｃ １ 因 Ｓ Ｐ多达 １０余个 ， 现 ＢＡ 基 Ｎ ７ 其 中外显 子 Ｓ Ｐ有 ２ Ｎ ０余个 ， 按发 生率 高低排列 ， １ 第 位是 Ｒ １Ｋ（６ ３ ） 因其 发 生 率 高 及 可 显 著 影 响 ２９ ４．％ ， Ｈ Ｌ— Ｄ Ｃ水平 而被 国内外广 泛研究 ， 二、 第 三位分别 是
Ｒ ５７ （４３ ） Ｍ ８ Ｉ２．％ ） １８ Ｋ ４ ． ％ 和 ８ ３ （ ３ ８ 。本 研 究 对
１２ 临床 实验 室指标检测 血脂 生化指标 检测 ： ． 空腹 １ ２ｈ以上 ， 于清晨抽 取静脉 血 ， 分离 血清 ， 酶法测定 总 胆固醇（ ｃ 、 ｒ ） 总甘油三酯 （ ｃ ， ｒ ｒ ） 直接一 步法测定 高密 ｒ 度脂蛋 白胆 固醇 （ Ｄ Ｈ Ｌ—Ｃ 、 密 度 脂 蛋 白胆 固醇 ）低 （ Ｄ —ｃ 、 Ｌ Ｌ ） 极低密度脂蛋 白胆 固醇（ Ｌ Ｌ—ｃ （ ＶＤ ） 欧林 巴斯 Ａ Ｕ一８０全 自动 生化仪 测定 ） ０ 。空腹 血糖 、 肝功
能、 肾功能均 由全 自动生化分 析仪测量 。 １３ 基 因组 Ｄ Ａ提取及基 因型分析 ． Ｎ 本实验 对 Ａ — Ｂ
冠 心病组 Ａ Ｃ １ 因全部 编码 区 ５ ＢＡ 基 ０个外显子进行 检 测， 并对冠心病 组 和正常 人组 的 Ａ Ｃ １ １ Ｂ Ａ 第 ８外显 子 Ｍ ８ Ｉ第 ３ ８ ３、 ５外显 子 Ｒ ５７ １８ Ｋ多态性 进行 分析 。Ｍ８３ ８Ｉ 多态性为第 ３Ｏ４位碱 基 Ｇ Ａ， Ａ Ｃ １第 ８ ３位 ４ 使 ＢＡ ８ 甲硫氨酸（ Ｍ）变为异亮 氨酸 （） Ｒ ５７ Ｉ ； １８ Ｋ多 态性为第 ５５ １５位碱基 Ａ， Ａ Ｃ １ １ ８ 使 Ｂ Ａ 第 ５ ７位精氨酸 （ 变 Ｒ） 为赖氨酸（ ） Ｋ。
１８ ， 中男 ７ ０例 其 ４例 ， ３ 例 ； 女 ４ 年龄 （９ ８ ７９ ） ５ ．９± ， ２ 岁。 经询 问病史 、 体检 、 实验室检 查 （ 、 、 常规 ， 血 尿 便 血脂 ， 血糖 ， 、 肝 肾功能 ） 心电 图、 片等检查 排除冠心病 、 、 胸 高 血压病 、 尿病 、 糖 肿瘤和严重 的肝、 肾疾病 。两组 年龄、
等位基 因的携带率为 ６． ％。Ｒ ５ ７ ８９ １８ Ｋ位 点冠心病 组及 正常人 组 Ｋ携 带者 ＨＤ Ｌ—Ｃ水平均 明显低 于非携 带者 （ Ｐ ＜ ． １ ， １ ８ Ｋ基 因型对 Ｈ Ｌ—Ｃ水平 的影响有显著性 （ ０Ｏ ）Ｒ ５７ Ｄ Ｐ＜００ １ 。联合 分析 Ｒ ５７ ．０ ） １８ Ｋ及 Ｍ８３ ８ Ｉ多态性 对冠
单核 苷酸 多态性（ Ｎ ） 中国广 东人群 中的发 生情况 ， ＳＰ在 以及 该 多态性与脂代谢及冠心病 易感性的关 系。方法 确
诊的冠心病 患者 １２例 ， １ 同地 区正常人 １８例 ， ０ 以引物 引入限制性 内切 酶分析聚合酶链 反应 （ ｒ ｅ —ｉ ｒ ｕｅ Ｐｉ ｒ ｎ ｏ ｃｄ ｍ ｔｄ
Ｉ 《 关键词ｆ 觚 结舍盒转运子 ｐＩＩ 】Ｉ Ａｌ 单核阱 酸眵态性
血脂
冠状动脉疾病
Ａ Ｐ结合盒转运子 Ａ （ Ｔ ｉｄ ｇｃｓ ｔ ａｓ Ｔ １ Ａ Ｐｂｎ ｉ ａｓ ｔ ｔ ｎ— ｎ ｅｅｒ ｐ ｒ ｒ １Ａ Ｃ １ 在细胞 内胆固醇外流和 Ｒ Ｔ过程 中 ｏｔ ， Ｂ Ａ ） ｅＡ Ｃ
南方 医科大学南方 医院心 内科（ 州 ５０ １ ） 广 １５５
【 摘要 】 目的 探讨三磷 酸腺 苷 结合盒转 运子 Ａ （ Ｔ ｉ ｉ ｓ ｔ ａ ｐｒ ｒ １ 基 因 Ｒ ５７ ， ８３ １ Ａ Ｐｂ ｄ ｇ ａｓｔ ｔｎ ｏｅ Ａ ） ｎ ｎ ｃ ｅｅｒ ｓ ｔ １８ Ｋ Ｍ ８Ｉ
维普资讯 ・３ ８ ７ Ｇｕ ｌ ｄ ｎ ｅ ｉａ ｏ ｒ ａ Ｍａ．２０ Ｖｏ ８， ｏ ａ 【 ｏ ｇ Ｍ ｄｃ ｌＪ ｕ ｎ ｌ ｎ ｇ ｒ ０ ７， １ ．２ Ｎ ．３
Ａ Ｃ １基 因 Ｒ ５７ ＢＡ １８ Ｋ及 Ｍ８３ 与血 脂 及 冠 心 病 ８Ｉ 易感 性 的关 联 分 析 水
心病 患病风 险影响发现 ， 与携带 １８ Ｒ ５ ７ Ｒ和 ８３ ８ ＭＭ或 ＭＩ 因型比较 ， 带其 他组合基 因型者冠 心病患病 风险无 基 携 明显降低 。结论 中国人 １８ Ｋ，８ Ｍ 等位基 因携 带率明显不 同于 欧洲人 及 日本人 ，Ｒ ５７ ５７ ８３ １８ Ｋ可显著影 响冠心病 及 正常人血浆 Ｈ Ｌ—Ｃ水平 ， １８ Ｋ及 Ｍ８ ３ 与冠心病患病风险无明显 关联 。 Ｄ Ｒ ５７ ８Ｉ
１ 资 料 与 方 法
Ｃ１ ５ Ａ 的 ０个外显 子进行 Ｐ Ｒ扩增 ， Ｃ 并用 Ｓ Ｃ Ｓ Ｐ一银染 法对编码 区进行检测 。ＳＣ Ｓ Ｐ发现 异常 的患 者 ， 用测序 法及 限制性 内切酶法进一步证实。 １ ３ １ 基 因组 Ｄ Ａ提取 ．． Ｎ 外 周静脉 血 ３ｌ ， ｌ 乙二胺 Ｉ ｌ 四乙酸二钠 （ Ｄ Ａ ａ） Ｅ Ｔ Ｎ ２ 抗凝 ， 用基 因组 Ｄ Ａ提取试剂 Ｎ 盒（ 天为时代公 司） 提取基 因组 Ｄ Ａ Ｎ。
ｒ ｔｃｏ ａ ｓ —Ｐ Ｒ， Ｉ Ａ—Ｐ Ｒ） 限制 性 片段 长度 多 态性 （ｅｔｃｏ ａｍｅｔ ｅｇ ｏｙ ｒｈｓ ｅ ｒ ｔ ｎａ ｌ ｉ Ｃ ＰＲ ｓｉｉ ｎ ｙ ｓ Ｃ 、 ｒｓｉｔｎｆ ｇ ｎ ｌｎｔ ｐｌ ｐｉ ｒ ｉ ｒ ｈ ｍｏ ｍ，Ｐ Ｒ— Ｃ Ｒ Ｌ） Ｆ Ｐ 方法对 Ａ Ｃ 的 Ｒ ５ ７ Ｍ８ ３ 多态性进行检测。结果 中国人 １ ８ Ｋ等位基 因携带率 为 ２ ． ％ ，８ Ｍ Ｂ Ａ１ １８ Ｋ， ８ Ｉ ５７ ８９ ８ ３
性别差 异无显 著性 。
起着关键 性作用 ， 突变可 导致 Ｔ ｎ ｉ 病 （ Ｄ） 其 ａｇ ｒ ｅ Ｔ 和家 族性低 ｄ脂蛋 白血症 （ Ｉ ， 现为低 Ｈ Ｌ胆 固醇血 Ｆ－ 表 Ｉ Ａ） Ｄ 症和早发 冠心 病 。 国外 的研 究显 示 Ａ Ｃ １的基 ＢＡ 因多态性与血浆脂质水平及 冠心病 易感性有着不 同的 关联性 ， 已发 现 的 Ａ Ｃ １ 因 Ｓ Ｐ多达 １０余个 ， 现 ＢＡ 基 Ｎ ７ 其 中外显 子 Ｓ Ｐ有 ２ Ｎ ０余个 ， 按发 生率 高低排列 ， １ 第 位是 Ｒ １Ｋ（６ ３ ） 因其 发 生 率 高 及 可 显 著 影 响 ２９ ４．％ ， Ｈ Ｌ— Ｄ Ｃ水平 而被 国内外广 泛研究 ， 二、 第 三位分别 是
Ｒ ５７ （４３ ） Ｍ ８ Ｉ２．％ ） １８ Ｋ ４ ． ％ 和 ８ ３ （ ３ ８ 。本 研 究 对
１２ 临床 实验 室指标检测 血脂 生化指标 检测 ： ． 空腹 １ ２ｈ以上 ， 于清晨抽 取静脉 血 ， 分离 血清 ， 酶法测定 总 胆固醇（ ｃ 、 ｒ ） 总甘油三酯 （ ｃ ， ｒ ｒ ） 直接一 步法测定 高密 ｒ 度脂蛋 白胆 固醇 （ Ｄ Ｈ Ｌ—Ｃ 、 密 度 脂 蛋 白胆 固醇 ）低 （ Ｄ —ｃ 、 Ｌ Ｌ ） 极低密度脂蛋 白胆 固醇（ Ｌ Ｌ—ｃ （ ＶＤ ） 欧林 巴斯 Ａ Ｕ一８０全 自动 生化仪 测定 ） ０ 。空腹 血糖 、 肝功
能、 肾功能均 由全 自动生化分 析仪测量 。 １３ 基 因组 Ｄ Ａ提取及基 因型分析 ． Ｎ 本实验 对 Ａ — Ｂ
冠 心病组 Ａ Ｃ １ 因全部 编码 区 ５ ＢＡ 基 ０个外显子进行 检 测， 并对冠心病 组 和正常 人组 的 Ａ Ｃ １ １ Ｂ Ａ 第 ８外显 子 Ｍ ８ Ｉ第 ３ ８ ３、 ５外显 子 Ｒ ５７ １８ Ｋ多态性 进行 分析 。Ｍ８３ ８Ｉ 多态性为第 ３Ｏ４位碱 基 Ｇ Ａ， Ａ Ｃ １第 ８ ３位 ４ 使 ＢＡ ８ 甲硫氨酸（ Ｍ）变为异亮 氨酸 （） Ｒ ５７ Ｉ ； １８ Ｋ多 态性为第 ５５ １５位碱基 Ａ， Ａ Ｃ １ １ ８ 使 Ｂ Ａ 第 ５ ７位精氨酸 （ 变 Ｒ） 为赖氨酸（ ） Ｋ。
１８ ， 中男 ７ ０例 其 ４例 ， ３ 例 ； 女 ４ 年龄 （９ ８ ７９ ） ５ ．９± ， ２ 岁。 经询 问病史 、 体检 、 实验室检 查 （ 、 、 常规 ， 血 尿 便 血脂 ， 血糖 ， 、 肝 肾功能 ） 心电 图、 片等检查 排除冠心病 、 、 胸 高 血压病 、 尿病 、 糖 肿瘤和严重 的肝、 肾疾病 。两组 年龄、
等位基 因的携带率为 ６． ％。Ｒ ５ ７ ８９ １８ Ｋ位 点冠心病 组及 正常人 组 Ｋ携 带者 ＨＤ Ｌ—Ｃ水平均 明显低 于非携 带者 （ Ｐ ＜ ． １ ， １ ８ Ｋ基 因型对 Ｈ Ｌ—Ｃ水平 的影响有显著性 （ ０Ｏ ）Ｒ ５７ Ｄ Ｐ＜００ １ 。联合 分析 Ｒ ５７ ．０ ） １８ Ｋ及 Ｍ８３ ８ Ｉ多态性 对冠
单核 苷酸 多态性（ Ｎ ） 中国广 东人群 中的发 生情况 ， ＳＰ在 以及 该 多态性与脂代谢及冠心病 易感性的关 系。方法 确
诊的冠心病 患者 １２例 ， １ 同地 区正常人 １８例 ， ０ 以引物 引入限制性 内切 酶分析聚合酶链 反应 （ ｒ ｅ —ｉ ｒ ｕｅ Ｐｉ ｒ ｎ ｏ ｃｄ ｍ ｔｄ
Ｉ 《 关键词ｆ 觚 结舍盒转运子 ｐＩＩ 】Ｉ Ａｌ 单核阱 酸眵态性
血脂
冠状动脉疾病
Ａ Ｐ结合盒转运子 Ａ （ Ｔ ｉｄ ｇｃｓ ｔ ａｓ Ｔ １ Ａ Ｐｂｎ ｉ ａｓ ｔ ｔ ｎ— ｎ ｅｅｒ ｐ ｒ ｒ １Ａ Ｃ １ 在细胞 内胆固醇外流和 Ｒ Ｔ过程 中 ｏｔ ， Ｂ Ａ ） ｅＡ Ｃ
