曲古抑菌素A预处理在脑缺血再灌注损伤中对炎症因子和凋亡因子的影响

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曲古抑菌素A促进HL-60白血病肿瘤细胞的凋亡作用研究

１材料与方法
２１Ｓ．Ａ诱导ＨＬＯ细胞分化凋亡：ＬＯＴ一６Ｈ一６肿瘤细胞在含１Ｏ
效及机制，以了解ＴＡ用于治疗急性早幼粒白血病恶性肿瘤的临床ＦＳ的ＲＩ６０ＳＢＭＰ一１４培养基中增殖迅速，天传代。长势良好的细胞隔整体清秀，，圆形悬浮集落状生长，以看到细胞成片生长，可没有发生细
ｍｉ，ｋｔｏ，ｚｆ．ｓｏｅｅｃｔｌｓｈｂｔｒｉｈｓａＥｓｒｍＴＪＳｙＨｉｎｄａｅｙａｅｉｉｉｃｏｔ— ＭｔｎｏＴｒ
ｔｄｃｓｇｏａａｄｇｎ－ｓｅｉｃｉＡｉｕｅｌｂｌｎｅｅｐｃｉＤＮＡｄｍｅｈｌｔｎｉｈ — ｎｎｆｅｔｙａｉｕｏｎ
３ ℃、和湿度的培养箱培养，７饱每天补充适量的新鲜培养基。待细胞长
到８￣９％满后，ｏｏ即细胞连成片，可进行传代传代时，加样枪轻轻用吹打培养基使细胞分散均匀，然后将含细胞的培养基按１４均加到：平含新鲜培养基的培养皿中，Ｃｚ３＂饱和湿度培养。５Ｏ、７Ｃ、
病因至今仍不完全清楚。过去人们一直认为基因突变对包括白血病在度ＴＡ培养基，５Ｃｚ３℃、Ｓ于Ｏ、７饱和湿度的培养箱培养过夜，显微观
内肿瘤的发生具有非常重要的作用，相继发现了许多癌基因和抑制察加入ＴＡ后白细胞活力和形态。以上实验各重复三次。并Ｓ基因。随着研究的不断深人，来越多的证据向“ 因决定论” 越基提出了１３蛋白ＨＫ甲基化和乙酰化的细胞免疫检测：ＴＡ处理．组。２Ｓ挑战。最近研究发现表观遗传修饰异常（ＤＡ甲基化、如Ｎ组蛋白乙酰组和未处理组的细胞培养液吸至１ｍ的离心管中，００分钟，５ｌ１０转／离心化和甲基化）与肿瘤的发生密切相关，ＤＡ甲基化及组蛋白乙酰化５如Ｎ分钟。先弃去上清，将余下少量培养基与ＨＬＯ细胞吹匀吸至０一６．的异常表达调控着肿瘤的发生口］。已发现癌基因多为不充分ＤＡ５ｌＮｍ的离心管中，ＰＳ用Ｂ洗两遍，４多聚甲醛（ｇ）用ｓｍａ固定３ｉＯ分钟，甲基化，使癌基因重新表达及表达过高；癌基因则多为过度ＤＡ甲用ＰＳ洗两遍，抑ＮＢ然后用０４Ｔｒｏｓｍａ透膜２．ｉｎ（ｉ）ｔｇ０分钟，ＰＳ洗两用Ｂ

缺血前预处理改善脑缺血后再灌注损伤预后的效果研究

缺血前预处理改善脑缺血后再灌注损伤预后的效果研究谢凯胜;盘庆飞;黄贤;李圣海;何秀丽【期刊名称】《中国当代医药》【年(卷),期】2018(025)012【摘要】目的探讨缺血前预处理改善脑缺血后再灌注损伤预后的效果.方法随机选取75只健康雄性小鼠分为3组,包括假手术组(15只)、对照组(28只)、观察组(32只),其中假手术组小鼠仅结扎右侧颈总动脉,对照组、观察组小鼠均以线栓法建立小鼠脑缺血模型,并在小鼠缺血2h后进行再灌注24 h,对照组灌注前给予生理盐水处理,观察组使用头孢曲松处理,观察三组小鼠脑组织梗死的容积、神经功能缺陷评分以及组织内白介素1β(IL-1β)炎性因子的水平情况.结果观察组小鼠神经功能评分高于对照组,皮层脑内IL-1β水平低于对照组,脑梗死容积小于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);两组纹状体炎性因子水平及梗死容积比较,差异无统计学意义(P ＞0.05);假手术组神经功能评分高于对照组与观察组,IL-1β水平低于对照组与观察组,梗死容积小于对照组与观察组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论临床在脑缺血再灌注前使用头孢曲松进行预处理,能够降低脑内IL-1β炎性因子的表达、分泌,有效减少脑梗死容积,减轻脑神经功能损失.【总页数】3页(P116-118)【作者】谢凯胜;盘庆飞;黄贤;李圣海;何秀丽【作者单位】深圳市石岩人民医院急诊科,广东深圳518100;深圳市石岩人民医院急诊科,广东深圳518100;深圳市石岩人民医院急诊科,广东深圳518100;深圳市石岩人民医院急诊科,广东深圳518100;深圳市罗湖区人民医院急诊科,广东深圳518100【正文语种】中文【中图分类】R743【相关文献】1.HO-1蛋白介导艾灸预处理改善大鼠脑缺血再灌注损伤机制的初步研究 [J], 李秀坤;刘旭光;杨慎峭2.缺血前预处理对改善脑缺血后再灌注损伤预后的研究 [J], 谢凯胜;盘庆飞;黄贤;李圣海;何秀丽3.脑缺血预处理对大鼠缺血再灌注损伤后抗氧化应激通路的影响 [J], 王欢欢;薛茜;邹玉安;常青4.阿魏酸钠对缺血预处理后大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 邓志锋;李明;汪泱;宋书欣5.大黄素甲醚对大鼠脑缺血预处理后缺血再灌注损伤作用的探讨 [J], 陈立英;苏立凯;廖仁昊;王敬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

痘苗病毒致炎兔皮提取物对脑缺血再灌注脑损伤大鼠凋亡和神经炎症的影响

DOI:10.3969/j.issn.1006⁃9771.2020.09.008·基础研究·痘苗病毒致炎兔皮提取物对脑缺血再灌注脑损伤大鼠凋亡和神经炎症的影响陈小平，王明洋，马登磊，龚诗立，张丽，李雅莉，李林，胡朝英，张兰首都医科大学宣武医院药学部，国家老年疾病临床医学研究中心，神经变性病教育部重点实验室，北京市神经药物工程研究中心，北京市100053通讯作者：张兰，E-mail：***************基金项目：1.国家自然科学基金项目(No.81903880);2.北京市卫生系统高层次卫生技术人才项目(No.2014-2-014);3.北京市首都科技领军人才培养工程项目(No.Z191100006119017);4.北京市医院管理中心"登峰"计划专项(No.DFL20190803);5.北京市博士后工作经费资助项目(No.2018-ZZ-105);6.中国博士后基金项目(No.2019M650776)摘要目的探究痘苗病毒致炎兔皮提取物(AGC)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。

方法Sprague-Dawley大鼠61只分为假手术组(n=11)、假手术给药组(n=11)、模型组(n=20)和模型给药组(n=19)。

模型组和模型给药组线栓法脑缺血1.5h后恢复灌注。

模型组和模型给药组各有2只造模不成功。

再灌注3h后，假手术给药组和模型给药组尾静脉每天注射AGC20U/kg，假手术组和模型组尾静脉注射等体积生理盐水。

给药48h后每组取4只大鼠Western blotting方法检测脑组织热休克蛋白(HSP70)、Bcl-2和Bax表达；给药7d后，行抓握牵引实验；各组取4只大鼠，免疫组化法观察离子钙结合蛋白(Iba1)阳性和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性表达。

结果与模型组相比，模型给药组抓握时间明显延长(P<0.01)，HSP70和Bcl-2表达明显升高(P<0.01)，Iba1阳性和GFAP阳性面积下降(P<0.05)。

环孢素A对大鼠脑缺血-再灌注损伤炎症反应的影响

环孢素A对大鼠脑缺血-再灌注损伤炎症反应的影响肖伟忠;孙圣刚;朱红灿;黎钢;童萼塘【期刊名称】《现代医学》【年(卷),期】2004(32)3【摘要】目的探讨环孢素A对脑缺血再灌注损伤的保护作用。

方法将 10 8只健康Wistar大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组和环孢素A组 ,参照Zea Longa线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型 ,在脑缺血 2h再灌注 2 2h和 70h后 ,分别对各组各时间点大鼠的行为学评分 ,并对脑红四氮唑 (TTC)染色结果、缺血区白介素1β(IL 1β)含量和髓过氧化物酶 (MPO)活性进行测定和分析。

结果在各时间点环孢素A组与生理盐水对照组相比 ,前者行为学评分优于后者(均P <0 .0 5 ) ;环孢素A组脑梗死灶体积比生理盐水对照组明显缩小 (均P <0 .0 5 ) ;环孢素A组局灶性缺血再灌注后脑组织中IL 1β的含量明显降低 (均P <0 .0 1) ;环孢素A 可显著抑制MPO的活性 (均P <0 .0 1)。

假手术组与上述两组相比 ,各项观察指标无明显改变。

结论炎症反应参与脑缺血再灌注损伤 ,环孢素A可显著降低缺血再灌注后脑组织中IL 1β的含量、减轻缺血区内白细胞的浸润 ,对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。

【总页数】4页(P159-162)【关键词】环孢素A;脑缺血-再灌注损伤;大鼠;对照组;IL-1β;炎症反应;生理盐水;体积比;结论;时间点【作者】肖伟忠;孙圣刚;朱红灿;黎钢;童萼塘【作者单位】华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R743;R285.5【相关文献】1.环孢素A对大鼠急性脑缺血再灌注损伤小胶质细胞的活化及iNOS表达的影响[J], 杜家琇n;娄季宇;白宏英;曾志磊;杨霄鹏;王金兰2.西洋参叶20s-原人参三醇组皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应的影响 [J], 赵莹;宋岐;金芳;张文锐3.环孢素A对大鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应的影响 [J], 肖伟忠;孙圣刚;朱红灿;黎钢;童萼塘4.淫羊藿苷联合冰片对脑缺血-再灌注损伤模型大鼠抗氧化活性、炎症反应和血脑屏障通透性影响 [J], 闫磊;胡江平;邵新然;孙晓冬;蔡克瑞5.EGCG对脑缺血再灌注损伤大鼠炎症反应的影响 [J], 贺芳;叶蓓;陈建珍;李畅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

曲古抑菌素A对供体细胞组蛋白H3-K9乙酰化水平的影响的开题报告

曲古抑菌素A对供体细胞组蛋白H3-K9乙酰化水平的影响
的开题报告
题目：曲古抑菌素A对供体细胞组蛋白H3-K9乙酰化水平的影响
研究背景和意义：
组蛋白H3-K9的乙酰化是染色质结构的关键调控因子，它能够调控染色质的开放度和紧密度，影响基因的表达。

在干细胞重编程、细胞分化等过程中，乙酰化修饰的
变化也被认为是一个重要的分化状态标志。

曲古抑菌素A是一种具有抗菌、抗炎、抗
氧化等多种生物活性的化合物，对细胞分化和染色质修饰的影响也受到了研究。

因此，研究曲古抑菌素A对H3-K9乙酰化修饰的调节作用，有助于了解其生物活性机制。

研究内容和方法：
本研究将采用体外细胞培养的方法，利用曲古抑菌素A处理供体细胞，探究其对H3-K9乙酰化修饰水平的影响。

具体方法如下：
1.选择合适的供体细胞品系，将其分为两组：实验组和对照组。

2.实验组在培养基中添加适当浓度的曲古抑菌素A，链霉亲菌素A作为阳性对照，对照组仅添加培养基。

3.培养期间，观察供体细胞的形态变化、增殖情况和亲和染色法的结果。

4.通过Western blot分析，检测处理后供体细胞中H3-K9乙酰化修饰水平的变化。

预期结果和意义：
我们预计曲古抑菌素A可以显著调节供体细胞中H3-K9乙酰化修饰的水平，这
将有助于深入了解其生物活性机制，并为其进一步的应用提供理论基础。

此外，本研
究也可为探索细胞重编程和分化过程中H3-K9乙酰化修饰的变化提供一定的参考。

原花青素通过抑制Toll样受体4核因子-κB信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

安徽医药Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2021Mar ，25（3）原花青素通过抑制Toll 样受体4/核因子-κB 信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用任娟，覃宏伟，周冬亮，张敏杰，徐瑛作者单位：上海市宝山区仁和医院神经内科，上海200431通信作者：徐瑛，女，副主任医师，研究方向为脑血管病，Email ：******************基金项目：上海市宝山区仁和医院重点学科建设计划（YXK -2018-01A ）摘要：目的探究原花青素通过抑制Toll 样受体4（TLR4）/核因子-κB （NF -κB ）信号通路对大鼠脑缺血再灌注（ischemia -reper⁃fusion ，I/R ）损伤的保护作用。

方法选取60只雄性SD 大鼠，采用随机数字表法分为对照组、模型组、原花青素低剂量组（80mg/kg ）和原花青素高剂量组（160mg/kg ），每组15只；除对照组外，其他各组大鼠使用改良线栓法制成I/R 模型，原花青素低剂量组和原花青素高剂量组分别使用80mg/kg 和160mg/kg 的原花青素灌胃处理，连续处理1周。

比较各组大鼠脑含水量；采用神经行为学评估比较各组大鼠神经功能缺损评分；使用试剂盒检测各组大鼠超氧化物歧化酶（SOD ）、活性氧和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX ）水平；采用蛋白质印迹法检测TLR4/NF -κB 信号通路和凋亡蛋白B 细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl -2）、Bcl -2相关X 蛋白（Bax ）、胱天蛋白酶3（Caspase -3）表达水平；采用苏木素染色观察神经细胞凋亡率。

结果与对照组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、活性氧含量水平、TLR4蛋白、NF -κB 蛋白、Bax 蛋白和Caspase -3蛋白表达、神经细胞凋亡率升高，SOD 含量水平、GPX 含量水平、Bcl -2蛋白降低（P <0.05），其中TLR4蛋白和NF -κB 蛋白分别为（1.80±0.20）和（1.85±0.21），显著低于对照组的（0.45±0.04）和（0.51±0.04）；相比模型组，使用原花青素处理各组大鼠神经功能评分、脑含水量、活性氧含量水平、TLR4蛋白、NF -κB 蛋白、Bax 蛋白和Caspase -3蛋白表达、神经细胞凋亡率降低，且原花青素高剂量组低于原花青素低剂量组（P <0.05），其中原花青素高剂量组TLR4蛋白和NF -κB 蛋白分别为（0.59±0.06）和（0.64±0.06），显著低于原花青素低剂量组的（1.00±0.10）和（0.98±0.09）；与模型组比较，使用原花青素处理各组大鼠SOD 含量水平、GPX 含量水平、Bcl -2蛋白升高，且原花青素高剂量组高于原花青素低剂量组（P <0.05）。

抗炎药物治疗脑缺血的研究进展

抗炎药物治疗脑缺血的研究进展发表时间：2019-01-20T20:17:29.797Z 来源：《心理医生》2019年第1期作者：黄竹燕[导读] 脑缺血损伤是一种多见病，其病理机制复杂，治疗药物效果层次不齐，也具有一定局限性（浙江大学医学院附属第二医院浙江杭州 310009）【摘要】脑缺血损伤是一种多见病，其病理机制复杂，治疗药物效果层次不齐，也具有一定局限性。

本文对基于抗炎机制的中西药治疗机制进行详细阐述，彻底深入了解脑缺血抗炎药物，为临床用药提供基础。

【关键词】脑缺血；抗炎药物【中图分类号】R743.3 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2019）01-0010-02 脑卒中在全球也最为多见，它可以引起病人面瘫、引发语言障碍、共济失调，致死或者致残等。

研究显示，其发病机制与脑缺血损伤有关，并和炎症反应也相关。

脑缺血发生以后，炎症因子与酶参发生反应，以此让脑组织受到损伤：例如白细胞，趋化因子（ICAM-1、MIP-1α、MCP-1等）、细胞因子（IL-6、IL-10、IL-1β等）、细胞粘附分子、巨噬细胞、小神经胶质细胞、星形胶质细胞、MMPs、环加氧酶、5-脂氧酶等[1,2]。

对此病的深入研究，有利于靶向药物的研究。

本文将综述基于抗炎机制使用的一些药物，为日后临床的用药提供更有效的选择。

1.西药1.1 米诺环素为广谱抗生素，属于四环素类。

研究表明其不仅有抗菌效果，还有抗脑缺血损伤和抗炎作用。

MCAO模型，其能降低小皮层梗死面积，还可以让梗死周围小胶质细胞激活受到抑制，抑制IL-1β转化酶，减少COX-2与PGE2的表达，炎症反应通过抑制，让脑缺血后继发性损伤得到减轻。

近期发现，米诺环素能使小胶质细胞活性钝化，小胶质细胞能产生TNF-α，引起脑水肿和神经元死亡。

米诺环素能间接让TNF-α减少，减轻脑缺血炎症反应。

米诺环素还能下调缺血性血栓模型中PARA与MMP-9的水平，让梗死面积缩减并让神经功能症状评分提高[3]。

曲古抑菌素A联合厄洛替尼对肺腺癌细胞株PC-9ER增殖及凋亡的影响

ＤＯＩ：１０．７６８３／ｘｘｙｘｙｘｂ．２０２０．０５．００２收稿日期：２０１９－０７－１３基金项目：河南省医学科技攻关项目（编号：２０１８０２０４０）。

作者简介：张群成（１９８６－），男，山东菏泽人，硕士，主治医师，主要从事肺癌基础和临床研究欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉氉氉氉。

本文引用：张群成，刘庆亮，安云霞．曲古抑菌素Ａ联合厄洛替尼对肺腺癌细胞株ＰＣ９／ＥＲ增殖及凋亡的影响［Ｊ］．新乡医学院学报，２０２０，３７（５）：４０４４０９．ＤＯＩ：１０．７６８３／ｘｘｙｘｙｘｂ．２０２０．０５．００２．【基础研究】曲古抑菌素Ａ联合厄洛替尼对肺腺癌细胞株ＰＣ９／ＥＲ增殖及凋亡的影响张群成，刘庆亮，安云霞（河南省人民医院呼吸与危重症医学科，河南　郑州　４５００００）摘要：　目的　探讨曲古抑菌素Ａ联合厄洛替尼对获得性耐厄洛替尼肺腺癌细胞株ＰＣ９／ＥＲ增殖、凋亡及耐药性的影响。

方法　取对数生长期ＰＣ９／ＥＲ细胞，接种于９６孔培养板，将细胞分为０．０、２．５、５．０、１０．０、２０．０μｍｏｌ·Ｌ－１厄洛替尼组和曲古抑菌素Ａ＋０．０μｍｏｌ·Ｌ－１厄洛替尼组、曲古抑菌素Ａ＋２．５μｍｏｌ·Ｌ－１厄洛替尼组、曲古抑菌素Ａ＋５．０μｍｏｌ·Ｌ－１厄洛替尼组、曲古抑菌素Ａ＋１０．０μｍｏｌ·Ｌ－１厄洛替尼组、曲古抑菌素Ａ＋２０．０μｍｏｌ·Ｌ－１厄洛替尼组；０．０、２．５、５．０、１０．０、２０．０μｍｏｌ·Ｌ－１厄洛替尼组细胞分别加入对应浓度的厄洛替尼１００μＬ，曲古抑菌素Ａ联合厄洛替尼组分别加入２５０ｎｍｏｌ·Ｌ－１的曲古抑菌素Ａ１００μＬ和对应浓度的厄洛替尼１００μＬ，４８ｈ后采用四甲基偶氮唑盐法检测各组细胞增殖抑制率。

右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

右美托咪定在临床试验中的表现和效果
右美托咪定在脑缺血再灌注损伤治疗中的未来研究方向
挑战：如何提高药物的靶向性和生物利用度，降低副作用和不良反应。
展望：期望通过进一步的研究和临床试验，为脑缺血再灌注损伤的治疗提供更加安全、有效的药物选择。
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机遇：深入研究右美托咪定的作用机制，探索与其他药物的联合应用，提高治疗效果。
减轻炎症反应，减少自由基的产生
抑制交感神经活动，减少去甲肾上腺素的释放
保护脑细胞，减少脑缺血再灌注损伤
抑制细胞凋亡和坏死等细胞死亡过程
手术麻醉：作为辅助用药，用于气管插管、全身麻醉和手术中维持镇静
重症监护：用于镇静和镇痛，改善患者舒适度和情绪状态
神经科疾病：用于治疗帕金森病、阿尔茨海默病等神经退行性疾病，改善认知功能
深入研究右美托咪定对脑缺血再灌注损伤的长期影响，为患者预后提供更多帮助。
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未来研究方向：加强基础和临床研究，深入探讨右美托咪定在脑缺血再灌注损伤治疗中的潜力和可能性。
深入探究右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤的具体作用机制，为临床治疗提供更可靠的依据。
开展右美托咪定与其他脑缺血治疗药物的联合应用研究，以提高治疗效果。
针对右美托咪定的剂型、给药途径和剂量等进行优化研究，以实现更安全、有效的治疗。
抑制细胞凋亡：右美托咪定可以抑制细胞凋亡信号通路的激活，减少脑细胞凋亡。
促进神经再生：右美托咪定能够促进神经干细胞的增殖和分化，促进神经再生和功能恢复。
右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的展望

PAD4抑制剂促进脑缺血再灌注后神经修复机制的研究

PAD4抑止剂增进脑缺血再灌注后神经修复机制的探究多功能正电荷蛋白-4（protein arginine deiminase 4，PAD4）是一种直接调控基因表达的核蛋白，已在多种疾病中发挥了重要作用。

最近的探究发现，PAD4在脑缺血再灌注毁伤过程中也发挥了重要作用。

PAD4主要通过催化蛋氨酸（arginine）的脱胺酶活性，转化为精氨酸（citrulline），从而修饰一系列蛋白质，参与基因转录调控和细胞凋亡等生物过程。

探究表明，PAD4在脑缺血再灌注毁伤中的主要作用是通过诱导炎症反应和神经元凋亡来加重毁伤。

PAD4的激活会导致细胞核内的染色质松弛和转录因子启动子重建，从而导致炎症相关基因的高表达。

这些炎症因子的过度表达会引发神经炎症反应，破坏脑细胞结构和功能，加剧脑缺血再灌注毁伤。

此外，PAD4还可以激活半胱氨酸蛋白酶（cysteine proteases），增进神经元凋亡的发生。

PAD4抑止剂具有广泛的神经保卫作用，并能增进脑缺血再灌注后神经修复。

最新的探究结果表明，PAD4抑止剂可以通过多种途径发挥其神经保卫作用。

起首，PAD4抑止剂可以有效抑止炎症反应的发生，减轻炎症相关基因的表达。

其次，PAD4抑止剂还可以抑止神经元凋亡的发生，保卫脑细胞免受毁伤。

最后，PAD4抑止剂对血脑屏障具有保卫作用，缩减脑缺血再灌注过程中的血管通透性增加。

此外，PAD4抑止剂还可以通过其他机制增进脑缺血再灌注后的神经修复。

例如，PAD4抑止剂可以缩减氧化应激和线粒体功能受损，从而保卫神经细胞免受氧化应激的毁伤。

此外，PAD4抑止剂还可以调整神经再生相关因子的表达，增进神经元的再生和突触重建。

综上所述，PAD4抑止剂作为一种新型治疗脑缺血再灌注毁伤的药物，具有分外广泛的应用前景。

将来的探究还需深度探究PAD4抑止剂的作用机制，寻找更有效的治疗策略，并进行更多的临床试验来验证其安全性和疗效。

信任PAD4抑止剂的探究将为脑缺血再灌注毁伤的治疗带来新的冲破，并为患者提供更好的治疗选择综合以上探究结果，PAD4抑止剂作为一种新型治疗脑缺血再灌注毁伤的药物，显示出广泛的神经保卫作用。

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曲古抑菌素A预处理在脑缺血再灌注损伤中对炎症因子和凋亡因子的影响王雅枫夏中元*袁泉刘恋赵博武汉大学人民医院麻醉科湖北武汉430060[摘要] 目的探讨曲古抑菌素A (TSA)预处理在脑缺血再灌注损伤中对炎症因子和凋亡因子的影响。

方法Balb/c小鼠随机分为3组(n=10)，假手术组(S组)，缺血再灌注组(IR组)，TSA预处理组(TSA组)。

采用MCAO法缺血1h，再灌注24h 建立脑缺血再灌注模型，TSA组在建立脑缺血再灌注前连续3d腹腔注射TSA 5mg/kg。

取脑组织，光镜下观察病理学结果，ELISA法检测TNF-α，IL-1β，免疫组化检测Bcl-2，Bax，Caspase-3，TUNEL法检测细胞凋亡。

结果与S组相比，IR组病理学损伤严重，TNF-α，IL-1β，Bax，Caspase-3，TUNEL增高，Bcl-2降低(P<0.05)；与IR组相比，TSA组病理学损伤减轻，TNF-α，IL-1β，Bax，Caspase-3，TUNEL降低，Bcl-2升高(P<0.05)。

结论曲古抑菌素A预处理通过抑制炎症因子和凋亡因子的表达，减少细胞凋亡，从而减轻脑缺血再灌注损伤。

[关键词] 曲古抑菌素A，炎症因子，凋亡因子，脑缺血再灌注损伤The Preconditioning Effect of Trichostatin A in Cerebral Ischemia Reperfusion Injury on Inflammatory factors and Apoptosis factorWang Yafeng, Xia Zhongyuan,Yuan Quan, Liu Lian, Zhao BoDepartment of Anesthesiology, Renmin Hospital of Wuhan University, 430060, China [Abstract]Objective to evaluate the preconditioning effect of Trichostatin A in cerebral ischemia reperfusion injury on inflammatory factors and apoptosis factor. Methods Three groups mice(n=10), sham group (S); ischemia reperfusion group (IR); ischemia reperfusion and pretreated with TSA group (TSA). The model of ischemia reperfusion group was established by middle cerebral artery occlusion (MCAO). TSA, 5mg/kg, was intraperitoneally given for 3 days before MCAO. The histopathology was detected by HE staining, TNF-α, IL-1βwere examed by ELISA; Bcl-2, Bax, Caspase-3 were detected by immunohistochemical, the apoptosis was detected by TUNEL. Results When compared with S group, histopathology, TNF-α, IL-1β, Bax, Caspase-3, TUNEL were increased, Bcl-2 were decreased in IR group (P<0.05); compared with IR group, histopathology, TNF-α, IL-1β, TUNEL were decreased, Bcl-2 were increased in TSA group (P<0.05). Conclusion TSA has a protective effect in cerebral ischemia reperfusion by decreasing the expression of inflammatory factors and apoptosis factor, reducing the apoptosis.[Key words] Trichostatin A, inflammatory factors, apoptosis factor, cerebral ischemia reperfusion injury脑缺血再灌注损伤是指经治疗后缺血脑组织再度获得血液供应，然而损伤程度并没有好转反而进一步加重的现象，称之为脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemic reperfusion injury，CIRI)[1,2]。

其具有高发病率、高致残率及高致死率的特点，是严重威胁人类健康的疾病之一[3]。

脑缺血再灌注后，机体组织的自我修复是研究的热点之一。

胶质细胞在中枢神经系统中发挥着支持神经元、分泌神经营养因子及免疫应答等重要功能[4,5]。

*通信作者: 夏中元, Email:基金项目: 国家自然科学基金()，湖北省自然科学基金(2017CFB267)因此在中枢神经系统受损时，其发生活化进而调控炎症因子和凋亡因子的表达，使受损神经元得到修复。

新近研究表明，脑缺血再灌注损伤中基因表达出现异常，而组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Histone deacetylase inhibitor，HDACi)可以产生脑保护作用[6]。

HDACi 是通过何种机制脑缺血再灌注损伤产生保护作用？本研究旨在探讨HDACi预处理在脑缺血再灌注损伤中对炎症因子和凋亡因子表达的影响。

材料与方法动物选择及分组：清洁级健康成年雄性Balb/c小鼠，体重18～22g，购自武汉市生物制品研究所。

采用随机数字表法分为3组(n=10)：假手术组(S组)，缺血再灌注组(IR组)，曲古抑菌素A预处理组(TSA组)。

采用MCAO法缺血1h，再灌注24h建立脑缺血再灌注模型，TSA组在建立脑缺血再灌注前连续3d腹腔注射TSA5mg/kg。

脑缺血再灌注损伤模型制备：异氟烷深度麻醉动物，暴露左侧颈外动脉(External carotid artery, ECA)，于ECA内插入6-0单丝线栓直达大脑中动脉分支处，线栓于大脑中动脉中留置45min后小心取出。

模型成功的标志是动物麻醉苏醒后出现缺血对侧以前肢为重的偏瘫。

指标测定：再灌注24h后处死小鼠取脑组织。

(1)制备石蜡切片，置于4%多聚甲醛溶液中固定24h，HE染色，光镜(×400)下观察病理学结果。

(2) ELISA法检测TNF-α，IL-1β：脑皮质组织匀浆，离心后提取上清液。

严格按试剂盒说明书(武汉博士德，中国)操作。

所得样本用酶标仪在测定吸光值并计算对应样品浓度。

(3) 免疫组化法检测Bax，Bcl-2，Caspase-3 (中杉金桥，中国)：切片入水，3%H2O2孵育10 min，滴加多克隆抗体，4℃孵育过夜；滴加二抗，37℃孵育20 min，滴加SP，37℃孵育20 min，DAB显色。

(4) TUNEL法测定细胞凋亡(Roche，美国)：切片入水，3%H2O2孵育10 min，滴加蛋白酶K，37℃消化10 min，加入反应混合液，37℃孵育60 min，加入转化剂，37℃孵育30 min，DAB显色。

统计学处理：采用SPSS17软件进行分析，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，组问比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。

结果光镜下：S组与TSA组神经元排列相对整齐，胞膜完整，胞质丰富，核圆形，结构较为清晰；IR组神经元形态不规则，胞质分布不均，有空泡，核固缩溶解或消失。

见图1。

图1：三组小鼠脑组织HE染色图片S组IR组TSA组与S组相比，IR组TNF-α，IL-1β，TUNEL增高(P<0.05)；与IR组相比，IR+T组TNF-α，IL-1β，TUNEL降低(P<0.05)；与IR+T组相比，IR+T/L组TNF-α，IL-1β，TUNEL升高(P<0.05)。

见表1，图2。

表1：三组小鼠TNF-α，IL-1β，TUNEL的比较(n=5，x±s)TNF-α (pg/mg) IL-1β (pg/mg) TUNEL(%)S组 5.7±0.813.6±1.3 6.3±0.6IR组12.8±1.5 a28.3±3.6 a21.4±2.8 aTSA组9.3±1.4 ab22.7±2.2 ab15.8±1.5 ab注：与S组比较，a P<0.05；与IR组比较，b P<0.05图2：三组小鼠脑组织TUNEL染色图片S组IR组TSA组与S组相比，IR组Bax，Caspase-3增高，Bcl-2降低(P<0.05)；与IR组相比，TSA组Bax，Caspase-3降低，Bcl-2升高(P<0.05)。

见表2，图3-5。

表2：四组Bax，Bcl-2，Caspase-3的比较(n=5，x±s)Bax Bcl-2 Caspase-3S组 6.3±1.123.7±2.7 5.4±0.7IR组19.4±2.2 a7.3±1.1 a17.6±2.5 aTSA组14.9±1.4 ab11.5±2.3 ab13.2±1.1 ab注：与S组比较，a P<0.05；与IR组比较，b P<0.05图3：三组小鼠脑组织Bax染色图片S组IR组TSA组图4：三组小鼠脑组织Bcl-2染色图片S组IR组TSA组图5：三组小鼠脑组织Caspase-3染色图片S组IR组TSA组讨论脑缺血性再灌注损伤有众多假说，包括炎症反应，氧化应激，细胞凋亡，钙超载，免疫调控，兴奋性氨基酸毒性，血脑屏障破坏以及神经血管单元的相互作用等。

在这些假说中，炎症反应与氧化应激最为经典[7,8]。

脑缺血再灌注损伤早中期主要表现为自由基的产生、线粒体功能障碍、炎性反应、神经元凋亡等，后期则以神经再生、血管新生、胶质细胞增殖及小胶质细胞活化等表现为主[7]。

新近研究表明，脑缺血再灌注损伤基因表达异常，组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Histone deacetylase inhibitor，HDACi)可通过调节组蛋白和非组蛋白的修饰，作用于缺血性脑卒中损伤机制中的多个环节，减轻脑组织损伤并积极促进缺血区血运重建，促进缺血后神经元可塑性和功能恢复[6,9]。