培养基制作方法

食用菌培养基配方 食用菌培养基的制作方法

在食用菌栽培过程中，其培养基的制作是一个关键步骤。下面我们了解一下食用菌培养基配方，同时也了解一下食用菌培养基的制作方法。

(1)食用菌麦粒培养基

小麦(或大麦、燕麦、玉米粒等)98%、石膏粉2%、ph值6.5-7.0。该培养基适用于大多数食用菌原种的生产。

(2)食用菌棉籽壳培养基

棉籽壳77%、麸皮20%、蔗糖l%、石膏粉1%、石灰1%．含水量65%左右。该培养基适宜于大多数食用菌菌种的生产。

(3)食用菌木屑麸皮培养基

阔叶树木屑77%、麸皮(或米糠)20%、蔗糖1%、石膏粉1%、石灰1%，含水量65%左右。该培养基适宜于木腐菌菌种的生产。

(4)食用菌玉米芯培养基

玉米芯77%、麸皮20%、蔗糖l%、石膏粉1%、石灰1%．含水量65%左右。该培养基适宜黑木耳、平菇菌种的生产。

(5)食用菌综合培养基

木屑20%、玉米芯20%、棉籽壳37%、麸皮15%、玉米粉3%、豆饼粉2%、石膏粉1%、蔗糖1%、石灰1%，含水量65%左右。该培养基适宜于大多数食用菌菌种的生产。

注意：所用原料要求新鲜、无霉变、无病虫；玉米芯应粉碎成黄豆粒大小的颗粒；木屑需晒干后，过筛使用，不可过细，以免影响培养基的通气性。

培养基制备的流程

培养基制备的流程主要包括以下几个步骤：

1. 计算配方：根据所需培养基的种类和实验需求，计算各成分的比例和用量。

2. 称量：准确称取各种成分，如蛋白胨、牛肉膏、琼脂等。

3. 溶解：将称取的成分放入适量的水中，搅拌均匀，使其充分溶解。对于一些不易溶解的物质，如琼脂，可能需要加热辅助溶解。

4. 调pH：根据微生物的生长需求，调整培养基的pH值。一般而言，细菌培养基的pH值范围在6.5-7.5，真菌培养基的pH值范围在4.8-5.8。

5. 过滤：将溶解好的培养基通过过滤器过滤，以去除可能存在的杂质。

6. 分装：将过滤后的培养基倒入无菌的培养皿或瓶子中，注意留出适当的空隙，以利于蒸汽的排出。

7. 灭菌：将分装好的培养基进行灭菌处理，常用的方法有高压蒸汽灭菌和干热灭菌。灭菌过程中要注意保持培养基内部的温度和压力，确保微生物被有效杀灭。

8. 检验：对制备好的培养基进行质量检验，如观察培养基的外观、透明度、pH值等，确保符合实验要求。

9. 储存：将检验合格的培养基在适当的条件下储存，如4℃冰箱或阴凉干燥处。在使用前，如需再次检验，可进行细菌或真菌的接种试验。

需要注意的是，在培养基制备过程中要严格遵循无菌操作规程，避免微生物污染。同时，根据实验需求选择合适的培养基类型和配方，以满足不同微生物的生长需求。

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植物组培培养基及其配制

培养基好比土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。因此，在组织培养基的各个环节中，应着重掌握培养基，了解它的组成和配制方法。

一、组成培养基的五类成分

目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。

1.无机营养物

无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子，在近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养基所需的钠和氯化物，由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。

2.碳源

培养的植物组织或细胞，它们的光合作用较弱。因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起重要作用。

3.维生素

在培养基中加入维生素，常有利于外植体的发育。培养基中的维生素属于B族维生素，其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。

4.有机附加物

包括人工合成或天然的有机附加物。最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。另外，琼脂也是最常用的有机附加物，它主要是作为培养基的支持物，使培养基呈固体状态，以利于各种外植体的培养。

5.生长调节物质

常用的生长调节物质大致包括以下三类：

(1)植物生长素类。如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)。

(2)细胞分裂素。如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素(Kt)。

制备培养基的操作要点和注意事项

制作培养基就像微生物实验室的家常便饭，培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，培养基由于富含营养物质，易被污染或变质，配制过程中有多个注意事项和操作要点需要我们掌握。

一、什么是培养基？

培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。

二、培养基的种类。

培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养

基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。

三、培养基配制须知。

培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。配好后不宜久置，最好现配现用。

四、玻璃器皿的清洗

在制备培养基的过程中，首先要使用一些玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。

1新购的玻璃器皿

除去包装沾染的污垢后，先用热肥皂水刷洗，流水冲净，再浸泡于１～２％的工业盐酸中数小时，使游离的碱性物质除去，再以流水冲净。对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上将水空干，即可使用。

2用过的玻璃器皿

凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。有可

能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。若用皂液未能洗净的器皿，可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸，其作用是将有机物氧化成可溶性物质，以便冲洗。洗液有很强的腐蚀作用，使用时应特别小心，避免溅到衣服、身体和其他物品上。