月季花药的培养1

月季花药离体培养

一、材料的选取

1、选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。

2、确定花粉发育时期最常用方法：醋酸洋红法；焙花青－铬矾法。

注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高

。

二、材料的消毒

1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒

2、无菌水清洗

3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分

4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）

5、无菌水冲洗3~5次

用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。

三、接种和培养

灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。

通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。

一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。

课 题

学科组 高二生物 主备人 朱建国 执教人 朱建国

课 题 月季的花药培养1 课 型 新授 时 间

课时教学目标 1、识记被子植物花粉发育过程2、学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力3、列表比较花药培养与组织培养4、选择适宜的培养材料和培养基

教学

设想 重点：选取适宜的培养材料和培养基

难点：选取适宜的培养材料和培养基

教法学法指导：： 启发式教学 多媒体课件

教学过程 个性化修改

一．基础知识

活动2：阅读“被子植物的花粉发育”，回答下列问题：

1．被子植物的花粉是在 中由 经过 分裂形成的。

2．结合教材内容填下列示意图：

〖思考2〗由此可见，被子植物的花粉的发育要经历 四分体 时期， 单核 期和 双核 期等阶段。

〖思考3〗在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生 4 个精子；在一枚花药中可以产生 很多 个花粉。

〖思考4〗营养细胞在花粉萌发过程中的作用是什么？控制花粉的萌发并提供营养。

活动3：阅读“产生花粉植株的两条途径”，讨论并回答下列问题：

1．产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过 胚状体 阶段发育为植株，二是通过 愈伤组织 阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中 激素 的种类及其 浓度 的配比。

2．填写培育花粉植株的途径图解：

3．胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为 分化 ，而把从愈伤组织到从芽的过程称为 再分化 。

活动4：阅读“影响花药培养的因素”，回答下列问题：

1．影响花粉植株的主要因素： 材料的选择 和 培养基的组成 等。

2．材料的选择：

①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药；

②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉；

③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。

〖学习要求〗认识花药发育经历；知道花药培养途径和影响因素；学会材料的选择和消毒。

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论，完成下列问题，并初步巩固。

一、基础知识

【活动1】阅读教材P37“课题背景”，讨论并回答下列问题：

1．（记忆）生殖细胞和体细胞一样，在离体条件下，也具有全能性。

2．（理解）填写下列月季育种流程图：

【活动2】阅读教材P37“被子植物的花粉发育”，讨论并回答下列问题：

1．（记忆）被子植物的花粉是在花药中由花粉母细胞经过减数分裂形成的。

2．（理解）结合教材内容填下列示意图：

3．（记忆）被子植物的花粉的发育要经历四分体时期，单核期和双核期等阶段。在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生8个精子；在一枚花药中可以产生很多个花粉。 【活动3】阅读教材P38“产生花粉植株的两条途径”，讨论并回答下列问题：

1．（记忆）产生花粉植株（单倍体植株）的途径：花粉通过胚状体阶段发育为植株，二是通过愈伤组织阶段发育为植株。这两条途径取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。

2．（理解）填写培育花粉植株的途径图解：

3．（理解）胚状体的结构及其发育过程与种子胚相似，所以把胚状体到丛芽的过程称为分化，而把从愈伤组织到从芽的过程称为再分化。

【活动4】阅读教材P38“影响花药培养的因素”部分，讨论并回答下列问题：

1．（记忆）影响花粉植株的主要因素：材料的选择和培养基的组成等。

2．（记忆）材料的选择：从花药来看，应当选择初花期的花药；从花粉来看，应当选择单核期的花粉；从花蕾来看，应当选择完全未开放的花蕾。

3．（了解）影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？

植物种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养条件等。

【思考】花瓣松动会给材料消毒带来困难，原因是外界微生物容易侵入到花药中。

二、实验操作

【活动5】阅读教材P39“材料的选择”和“材料的消毒”，讨论并回答下列问题：

教学设计方案

课题名称 《月季花药的培养》

所属学科 生物学 授课班级 高二 计划课时 一课时

授课教师 苏成建 学校名称 汶川中学

一、 教学对象分析

高二学生在认识能力方面，感知更有目的性和系统性，更加仔细和深刻，能发现事物的细节、本质和因果关系。注意力已具有主动性，能和明确的学习目的联系起来，从而能较长时间地注意自己毫无兴趣的学习内容，记忆也发展到一个新的阶段，记忆的范围、速度、巩固程度都加强了。思维具有更大的组织性，能对事物进行分析，也具有一定的逻辑性和批判性，对未知事物及知识具有极高的兴趣和主动性。

学生已经在前面的学习过程中已经初步的掌握了基础的遗传方面的知识，这节课的学习，是学生对遗传学的了解更加深入。

二、 教学目标（知识、技能、情感态度）

1、 知识与技能

了解被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径，影响花药培养的因素，学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。掌握运用显微镜来观察花药细胞来确定它的花期。

2、 情感态度

① 识科学技术在生活中的应用，提升了科学素养和科学探究能力

② 培养团结合作、主动与他人交流、敢于提出自己见解的精神。

③ 初步领略遗传学的美妙，获得对生物遗传的热爱、好奇的情感

④ 对学生进行安全教育，增强安全意识。

三、内容结构

1、课题引入-月季花药培养的背景故事

2、提出问题-植物的花药培养在育种上有什么意义？

3、基础知识篇

a、被子植物的花粉发育 b、影响花药培养的因素（培养基、材料的选择）

c、提问，问什么花瓣松动会给材料消毒带来困难？

4、实验操作篇

a、材料的选择

b、材料的消毒

c、接种和培养

5、两种植物组织培养方法的比较。

6、练习篇

通过练习几道关于植物组织培养相关的习题，考察学生对本课的知识点的掌握情况以及了解程度。

四、教学事件设计

①引起注意

通过一个月季花的背景故事引起学生的注意

②告知学习者目标