苏云金芽孢杆菌使用说明
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芽孢杆菌农药的使用说明1. 什么是芽孢杆菌农药?嘿,朋友们!今天咱们聊聊一种神奇的农药——芽孢杆菌农药。
你可能会问,这玩意儿到底是个啥?简单来说,芽孢杆菌是一种天然的细菌,它可不是那种让你觉得毛骨悚然的坏家伙,恰恰相反,它可是咱们的好朋友,专门用来对付那些讨厌的害虫和病菌。
想想看,谁不想在自家菜园里种点儿无农药的蔬菜,吃着放心呢?芽孢杆菌农药的主要成分是芽孢杆菌,这种细菌在土壤里可算是个老油条了,能够自然地产生一些物质,专门对付害虫的防御系统。
用它来喷洒作物,既环保又有效,真是一举两得。
就像吃了个双皮奶,既满足了味蕾,又不会担心长胖,爽歪歪!2. 如何使用芽孢杆菌农药?2.1 准备工作要使用芽孢杆菌农药,首先得准备好喷雾器。
这玩意儿可是咱们施药的“神器”,没有它,咱的好东西可就派不上用场了。
然后,记得选择个晴朗的天气,最好是在早上或傍晚,不然阳光太猛烈,药效可能会打折扣哦!就像出门前选衣服,不能在大太阳下穿毛衣吧?接下来,咱们要根据说明书上的比例,将芽孢杆菌农药稀释到合适的浓度。
一般来说,药水和水的比例得根据不同的作物来调整,别一味地随意加哦!就像调味料,太多了就容易掩盖原味。
调配好后,摇一摇,确认药水均匀,这样才能给作物最好的保护。
2.2 喷洒技巧喷洒的时候,可得讲究点儿技巧哦!记得把喷雾器的喷嘴调到合适的状态,喷出细腻的雾状,这样能更好地覆盖到每一片叶子。
喷的时候,不妨顺着风向喷,避免风把药水吹跑,简直是“瞎猫碰上死耗子”,费力不讨好!喷洒的力度也要控制得当,别太猛了,不然不仅药水飞到你身上,作物也受不了,结果适得其反。
喷完之后,记得把喷雾器洗干净,别让它留下药水的痕迹,免得下次用的时候“阴魂不散”。
而且,刚喷完的作物,最好能让它们“安静”一会儿,不要马上去触碰,给它们点儿时间吸收养分,慢慢变得强壮起来,就像锻炼后要给肌肉恢复的时间。
3. 注意事项3.1 观察效果用芽孢杆菌农药后,别忘了观察一下作物的状态哦!如果发现害虫数量明显减少,那就说明咱的选择没错,效果杠杠的。
微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌(Bt)的研究现状及应用作者:高成华来源:《农业工程技术·温室园艺》2015年第06期苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌,简称Bt。
苏云金杆菌的发现,为人们利用微生物消灭植物病虫害提供了美好的前景。
化学杀虫剂的长期使用对生态环境产生了严重的破坏,而害虫种群的抗药性也日益提高,因此生物杀虫剂因为其“绿色环保”的特点日益引起人们的广泛关注。
现在,人们已经用发酵罐大规模地生产苏云金杆菌并制成粉剂或可湿剂、液剂,应用于农业,对100多种害虫有不同的致病和毒杀作用。
苏云金芽孢杆菌是目前世界上产量最大、应用最广的生物杀虫剂。
本文简要介绍作为生物杀虫剂的Bt的发展历史、研究现状和应用情况。
研究历史[1]1901年,日本学者石渡繁胤(Ishiwata Shigetane)从虫尸体液中分离出苏云金杆菌猝倒变种(Bacillus.thuringiensis var.sott)成为苏云金杆菌研究的起点[2]。
1911年,Berliner发现一杆菌,并详细描述了该菌的形态和培养特征,定名为苏云金杆菌(Bacil-lus.thuringiensis),指明苏云金杆菌含伴孢晶体(Paraspora crystl)[3]。
1938年,苏云金杆菌商品化,用于防治地中海粉螟。
20世纪50年代许多国家进行了商业性生产。
1953年,Hannay第一次发现苏云金杆菌的杀虫活性与伴孢晶体有关,并和Fitz-James于1955年证实,伴孢晶体是一种蛋白质。
1981年,Schnept和Whiteley首次将HD21菌株伴孢晶体的基因克隆到大肠杆菌中,并得到表达。
20世纪60年代用血清学技术进行Bt的鉴定和分类。
自二次世界大战后,苏云金芽孢杆菌被广泛使用,至今已有60多年[4]。
由于其推广力度以及人们的农药使用意识的传统观念限制,目前生物农药仅占全部农药市场份额很少一部分,从此可看出,苏云金芽孢杆菌杀虫剂任然具有较大的发展潜力。
从崖城农田土壤中发现一种具有杀死植物害虫功能的细菌——苏云金芽孢杆菌崖城高级中学高一(1)班龚彩秀指导老师:翟鸿武一次偶然的机会让我在一本生物杂志上接触到苏云金芽孢杆菌(Bacillus Thuringiensis ,Bt)当时的我觉得很神奇——它能杀死农作物害虫。
人类从刀耕火种以来,一直备受害虫的威胁,给人类的生活造成了多种危害,其中虫害是威胁农作物高产的主要原因之一,全世界每年因此损失约数千亿美元,每年世界上因虫害而造成的农产品损失估计为13%。
在我国,水稻每年因虫害减产10%以上,小麦减产近20%,棉花产量损失达20%~30%。
为了控制农林病虫害,人们不得不大量使用化学农药,但长期大剂量地使用化学合成的农药,致使多种害虫对化学杀虫剂产生了一定的抗性,因此不但不能有效地控制害虫,结果还面临着三大难题无法解决,①环境污染,残毒上升,人畜均遭毒害;②用药浓度不断提高,防治费用不断增加,不得不无休止地研制新农药;③杀伤天敌,破坏了生态平衡,引起害虫再猖獗和次虫害虫大爆发,导致自然界中恶性循环。
苏云金芽孢杆菌由于能在生长代谢过程中产生对多种农林害虫具有特异性杀虫毒力的生物活性蛋白,并能由此生产相应的微生物杀虫剂来用于害虫生物防治而受到国内外的广泛重视。
广泛的研究与应用实践证明,与化学农药等其他类型的杀虫剂相比,Bt杀虫剂具有杀虫特异性强,对人、畜及非目标昆虫无毒副作用;安全性能好,不污染环境,由于具有多种类型的杀虫晶体蛋白,昆虫难以产生抗性或产生抗性较缓慢;具较低的生产成本等优点。
目前已推广使用的表达Bt毒素基因的转基因植物都有较为显著的抗虫性能,在大田栽培中无需或只需喷洒少许化学杀虫剂,从而大大减少了对环境的污染。
因此苏云金芽孢杆菌作为新型生物农药解决了一个长期以来让无数劳动农民头痛的问题。
而对生物有着浓厚兴趣的我对它有种相识恨晚的感觉,而这次的“科技创新”活动让我坚定了对它认识的决心,在老师和同学们的帮助下,我开始了我的创新实验。
ABSTRACTInsectswoulddevelopresistancewhichcorrelatedwiththeB口cf盯淞历“rf愕fP珊括toxins,aIlddecreasingofpHofitsmidgutjuicetothemechanismisunknown.AmodifiedSDS—alkalinemethodwasusedtoextractplasmidsofBt4.0718strain,andPCRanalysisdemonstratedthatP3plasmidcontainc,),1Aagene.Byanalyzetheconsensusregionof13kindsofcWlAagenewithmeNationalCenterforBiotechnologyinfbnnation’sBLASTWWWserver’primersH01andH02weredesignedtoampli6edfWlAagenefromP3plasmid,thenthePCRDmductssubclonedtoobtainrecombinantMDAastrain.The3.5一kbB日历HIandS口fIinsertofpMDl8一TwasinsertedintothepET30avector,thentransfoⅡnedE∞,fstrainBL2l(DE3)togiVingETAastrain,anda141-kDfusionproteinwasoverexpressedasinclusionbodybyinducedwithIPTGSite—directedmutagenesiswasperfomedinat、Vo-st印PCRwiththreeprimers.Thefragmentsproducedinmefirststepwereusedasthe“bigprimer"inthesecondPCRtoarnplifiedthel048-bpfragmentsandsubcloned.A224-bpmutatedf}agmentobtainedbydigeStingpMDMXwith砌PIand丑fsHIIandsubstitutedmefhgmentinpMDAaatthesarnepositiontogetrecombinantplasmidpMDMa.pMDMadigestedwithB日mHIandSb,I,the3.5-kbmutated矗agmentwasinsertedintothepET30aVectortoobtainthemutagenicstrainETMaC812AandC814A.SDS—PAGEshowedthatthemutamc,),1AagenewasalsooVerexpressed.Inclusionbodies舶mETAastrajna11dmutatedETMastraindissolVedunderdifferentpHorconcentrationsof2一M[ercaptoemanols锄epHorindiVidually.SDS-PAGEshowedt11at,undertheconcentrationof2-Mercamoethanol,inclusionbodies疔ommutatedETMastrainweremoreeasytodissolve,andcoulddissolvebetterin10wpHorlowconcentrationof2一MercaptoethanolthaJlinclusionbodiesf_romETAastrain.ItdemonstratedthatthernutagenesisofC8l2AandC814Acouldsignallychangethedissolvabilityofjnclusjonbodies.ThestudyprDVideaValuableoptionflorresistancemanagement,andonsuchabase,出eroleofdisulphideintheprotoxinstabiIitya11dtoxicitycanbemr出erachievedKleywords:8口c“,£岱f是“r豫il拿挖s扭,c,ylAagene,overexpression,Site—directedmutagenesis,resistance前言1.苏云金芽孢杆菌1.1苏云金芽孢杆菌(Bt)概论苏云金芽孢杆菌(肋cf,,“s胁“rf娼招瑚如,简称Bt)是一种在自然界广泛分布的革兰氏阳性细菌,按照《伯杰氏细菌鉴定手册》第九版可将其归属为第二类第十八群芽孢杆菌属(口口c讲珊)中的一种【lJ。
种植专用EM菌种使用方法一、产品特点本品由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、光合菌、乳酸菌、酵母酸、和放线菌等10属80多种微生物复合培养而成的有益微生物菌群。
1、外观:灰白色粉末,略带腥臭味。
2、主要成分:枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、光合菌、乳酸菌、酵母酸、放线菌和少量培养基干物质,总菌数≥200亿/克。
二、EM原液的制作方法本品10克可以制作10-20公斤EM原液【制作方法】制作EM菌种发酵液——EM原液A、菌种活化:取EM菌种10克、红糖0.1公斤(红糖先用热开水溶化),加入1公斤无菌的水中。
注:(先把水加热到100°C后加入红塘,而后继续加热5分钟。
冷却到40°C时加入EM种),密闭发酵( 35°C—37°C温度 )3-5天(第二天开始每天松动容器封口减压放气一次),打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。
可以作为液体菌种使用。
B、制作原液:将活化好的液体菌种加入二级发酵罐( 密闭 )( 加水比例按1:10-20的比例加入)。
二级发酵液配方:10% 的红糖、0.3% 微量元素、0.1% 氨基酸(尿素也可以),温度35-37度,发酵5-7天(第二天开始每天松动容器封口减压放气一次),打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。
可以作为原液使用。
成品发酵液标准:(气味:酸甜,PH值:4.0-5.0,活菌含量:大于100亿/ml )【作用功效】1、EM菌种原液能分解木质素、粗纤维等大分子有机物,使其转化为利于动、植物吸收利用的小分子物质。
2、EM菌种原液在发酵代谢过程中形成优势菌群和产生的多种抗生性物质,能有效抑制有机物中病原菌的滋生。
3、EM菌种原液能分泌与合成有机酸、多种酶、生理活性物质,提高肥效。
4、EM菌种原液可以鳌合有机肥料中的重金属,降解其中的有毒有害物质,防止对土壤和作物的危害。
【用法用量】1、发酵农家肥或有机垃圾:每公斤本品可发酵农家肥(有机垃圾)500-1000公斤(生料、粗料用量大些)。
苏云金杆菌(B.t)是一种细菌杀虫剂,是由昆虫病原细菌苏云金杆菌(Bacil-lusthurgiensis)的发酵产物加工的制剂。
此菌1911年因贝利纳(E.Berliner)发现于德国苏云金地区而得名,属芽孢杆菌,革兰氏染色阳性,横裂繁殖。
一、苏云金杆菌(B.t)的杀虫机制和杀虫范围苏云金杆菌(B.t)制剂是胃毒剂,进入昆虫消化道后,伴孢晶体(主要成分为蛋白质)被昆虫碱性肠液破坏成较小单位的δ-内毒素,使中肠停止蠕动、瘫痪,中肠上皮细胞解离、停食,芽孢则在肠中萌发,经被破坏的肠壁进入血腔,大量繁殖,使害虫得败血症而死。
目前已知苏云金杆菌有30多个变种,某些变种营养体对数生长时期产生β—外毒素,耐热,是一种腺嘌呤核苷酸,也起杀虫作用。
苏云金杆菌杀虫谱广,能防治上百种害虫,对鳞翅目幼虫特别有效。
目前苏云金杆菌(B.t)及其混配制剂已用于防治蔬菜、水稻、玉米、棉、果树、茶树和林区等害虫。
如防治菜青虫、小菜蛾、稻苞虫、稻纵卷叶螟、玉米螟、棉铃虫、枣尽蠖、松毛虫、烟青虫、茶卷蛾、茶尺蠖等百种虫害,是应用最广的微生物杀虫剂。
中国50年代初曾从法国引进苏云金杆菌,并进行防治玉米螟试验,1959年又从捷克引进苏云金杆菌,1961年从前苏联引进苏云金杆菌蜡螟变种青虫菌。
与此同时,四川省农科院植保所与农业部成都药械厂合作从事苏云金杆菌的研发工作,至今全国已发展到80个厂家开发生产,使用面积达近600万公顷。
目前苏云金杆菌(B.t)的开发工作正在向改善工艺流程和提高产品质量方向发展,同时继续寻找自然存在的B.t新菌系和利用分子生物学技术已确定的菌系基因形成转合的B.t菌系。
近年来四川省农科院植保所植保技术工程公司与湖北康欣农药业有限公司(湖北省农科院Bt研究开发中心)合作推广应用苏云金杆菌(B.t)。
二、苏云金杆菌(B.t)杀虫效果好,持效期较长,并有后效作用据上海市蔬菜技术推广站用生绿B.t粉剂(16000国际单位/mg),亩用30g、50g和70g防治小菜蛾,施药后7天的平均防效分别为74.4%、82.1%和90.3%;5%抑太保乳油用亩50ml,防治小菜蛾,施药后7天的平均防效为79.9%。
苏云金杆菌杀虫剂的简介及研究应用情况作者:魏云阶来源:《卷宗》2016年第02期摘要:微生物防治是目前指防治或者减少害虫的最有效手段之一,其中,苏云金杆菌由于其自身没有毒害作用、不污染环境等特点,在生物防治中占有重要地位,目前在整个生物杀虫剂中占95%,备受世界各国科学家的关注。
本文介绍了苏云金杆菌的特点,并对其在生物防治中的应用情况进行论述。
关键词:苏云金杆菌;微生物防治;生态环境苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)是一种微生物杀虫剂,对人、畜及害虫天敌极少或完全没有毒害作用,不污染环境,保持生态平衡,在农业、林业、卫生害虫的生物防治中占有重要地位。
1 苏云金芽孢杆菌简介苏云金芽孢杆菌是一种革兰氏阳性、杆状、能形成内生芽孢的土壤细菌,其营养体细胞具有周生鞭毛或无鞭毛。
鞭毛是细菌的一种运动器官,因此,具有鞭毛的菌株能运动,而不具鞭毛的菌株不能运动养体在形成芽孢的同时,在细胞的另一端形成不同形态、具蛋白性质的伴孢晶体,它可以是一个、两个或多个。
苏云金芽孢杆菌分类上属于原核生物界,细菌纲,芽孢杆菌科(Bacillaceae),芽孢杆菌属(Bacillus)的一种,在《伯杰氏细菌鉴定手册》第九版中被列为第二类第十八群。
1901年,日本细菌学家石渡从患病的家蚕幼虫上得到了一种杆状芽孢菌,并在1905年发表的另一报告中称之为“碎倒芽孢杆菌”。
但直到1911年Berliner从德国苏云金地区谷仓中患病的地中海粉螟幼虫体内分离到另一株类似的细菌之后,1915年才正式将此昆虫病原细菌命名为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt).1938年,第一个苏云金芽孢杆菌商品制剂Sporeine在法国问世,并在地中海粉螟的防治中得到了应用(戴莲韵等,1997)。
苏云金芽孢杆菌广泛分布于世界各地,从热带雨林到北极冻土带,从土壤、昆虫尸体、植物体表面、贮藏物或仓库灰尘、污水等基质上均可分离到该菌,而土壤为微生物的大本营,是其分布最为丰富的生境。
苏云金芽孢杆菌简介组员:张晓云李文慧2010年5月10日明治维新后,日本成为当时最大的蚕丝产地和最主要的蚕丝出产国猝倒病病蚕停止进食桑叶,随后出现颤抖的症状,并且很石渡繁胤(いしわたしげたね)(1868-1941)猝倒杆菌恩斯特·贝尔林纳(ErnstBerliner)在德国苏云金省重新分离得到正式定名为苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t.)Mattes在1927年重新从地中海粉螟中分离出了Bt 能杀死鳞翅目昆虫,对其它动物却没有什么影响Bacillus thuringiensis))苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis革兰氏阳性土壤杆菌芽孢杆菌属菌体短杆状,生鞭毛,单生或形成短链20世纪20年代末,美国用于控制舞毒蛾法国在1938年成功地研制出第一个商业化的Bt杀虫剂Sporine。
20世纪50年代,Bt作为绿色有机农药,取代DDT在美国开始被大规模地应用Bt 的没落和新生•不需要人工喷洒•新作物不确定性大大降低•误伤非农业害虫的几率变低•尚未发现对人类健康有任何负面影响•对环境贡献巨大新特点•价格昂贵•须多次喷洒•化学合成杀虫 剂出现旧缺点转基因技术抗虫蛋白基因转入基因转入玉米、棉花基因克隆cry 基因蛋白提纯cry 蛋白-内毒素伴胞晶体蛋白发现δ-内毒素伴胞晶体蛋白虫吃了会死,人吃也有害?Bt安全性毒性检测毒理研究免疫学•老鼠:3.8-5g/kg体重•我国≤2.5微克/g•60kg的人吃120吨稻米•原毒素•受酶激活,作用于肠道受体造成穿孔•人体不存在激活蛋白酶•结构与已知过敏原相差很大•没有能引起过敏反应的实验依据•争议案例缺乏说服力Bt对环境的影响节肢动物群落特征参数特征参数MH—BT MH-bt田水MH—常规SY-Bt SY-bt田水SY—常规物种 535153525152 SIMPSON(J) 0.888180.890810.893020.890950.88910.89395 SHANNON(H) 3.90161 3.92576 3.94629 3.95656 3.92669 3.97552均匀度 0.681160.692080.688960.694080.692240.69741新型抗虫蛋白鞘翅目昆虫(天牛)双翅目昆虫(黑蝇)河盲症(RiverBlindness),仅次于沙眼之后的第二大致盲传染病蟠尾丝虫症控制计划(OCP),3000万人得到保护,直接避免盲眼的人数26.5万人基因组测序概况2 complete,2 assembly,14in progressB. thuringiensis 97-27,B.thuringiensis Al Hakam,均无杀虫活性苏云金芽孢杆菌YBT-1520,华中农业大学,含有cry1A a、cry1A b、cry1A c、cry2A a和cry2A b,但拼接困难内生质粒,在细胞内呈共价闭合环状的形式(cccDNA),已有22 个质粒完成了全序列测定Bt 97-27 的染色体圈图注: 最外面两圈表示基因的起始位点和指定的功能分类;第1 圈包括正链基因产物;第2 圈包括负链基因产物;第3 圈和第4 圈表示特有基因;第5 圈和第6 圈表示原噬菌体基因;第7 圈表示插入序列元件;第8 圈表示(G+C)含量;第9 圈表示GC 偏好性(卡其色表示值>1, 紫色表示值<1)颜色代表功能分类如下: 浅蓝色—氨基酸的生物合成; 浅肉色—辅助因子的生物合成; 暗肉色—细胞膜; 橙色—细胞加工; 橙红—重要中间代谢; 绿色—能量代谢; 黑色—脂肪酸和磷脂代谢; 青色—其他分类; 暗灰色—蛋白凋亡; 黄色—嘌呤、嘧啶、核苷和核苷酸; 浅绿色—调控功能; 蓝色—复制;浅灰色—转录和翻译; 洋红色—转运和结合蛋白; 褐色—未指定的编码; 红色—未知功能pBtoxis 质粒圈图注: 外边两圈表示正反链上预测的基因, 外圈刻度标尺的单位为kb; 最里面一圈表示GC 偏好性, 黄褐色表示值>1, 紫色表示值<1; 第2 圈表示(G+C)含量基因由不同的颜色来代表如下: 灰色—毒素和肽类抗生素; 粉红色—转座子相关; 橙色—保守假定的;红色—DNA 代谢; 蓝色—调控; 鲜绿色—表面关联的; 灰绿色—未知; 黄色—各种代谢因子谢谢!References/archives/37319.html谭寿湖等. 苏云金芽孢杆菌基因组研究概况[J].基因组学与应用生物学, 2009, 28(1),202-208图片来源于参考文献及网络图片。