胚胎的发育与培养
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一、实验目的1. 掌握小鼠胚胎的采集方法。
2. 了解小鼠胚胎的发育过程。
3. 培养实验操作技能。
二、实验原理小鼠胚胎的获得是通过人工操作,将雌鼠的受精卵取出,进行体外培养,直至发育成胚胎。
该实验旨在研究小鼠胚胎的发育过程,为后续的胚胎移植、基因编辑等研究提供基础。
三、实验材料1. 实验动物:雌性小鼠、雄性小鼠2. 实验仪器:显微镜、解剖显微镜、培养箱、离心机、培养皿、手术器械等3. 实验试剂:生理盐水、DEPC水、培养液、抗凝剂、消毒剂等四、实验步骤1. 实验动物处理(1)将雌性小鼠和雄性小鼠分别饲养于清洁、通风的动物房中,保持适宜的饲养条件。
(2)雌性小鼠和雄性小鼠分别进行交配,交配后观察雌性小鼠的阴道涂片,确认受精情况。
2. 胚胎采集(1)雌性小鼠交配后第2天,用解剖显微镜观察雌性小鼠的阴道涂片,确认受精情况。
(2)雌性小鼠交配后第3天,将雌性小鼠麻醉,固定于解剖显微镜下。
(3)用手术器械取出雌性小鼠的子宫,置于培养皿中。
(4)在解剖显微镜下,用镊子取出受精卵,置于培养皿中。
3. 胚胎培养(1)将受精卵放入培养箱中,在37℃、5%CO2、95%空气的条件下培养。
(2)观察受精卵的发育过程,记录胚胎的形态变化。
4. 实验结果分析(1)观察胚胎的发育过程,记录胚胎的形态变化。
(2)分析胚胎发育过程中各阶段的形态特征。
五、实验结果1. 胚胎发育过程(1)受精卵在培养箱中培养24小时后,可见胚胎开始分裂。
(2)培养24小时后,胚胎发育至桑椹胚阶段。
(3)培养48小时后,胚胎发育至囊胚阶段。
(4)培养72小时后,胚胎发育至原肠胚阶段。
2. 胚胎形态特征(1)受精卵:透明、圆形,直径约100μm。
(2)桑椹胚:细胞数目增多,排列紧密,形成桑椹状。
(3)囊胚:细胞分化明显,形成囊胚腔。
(4)原肠胚:细胞分化更加明显,形成原肠。
六、实验结论1. 通过人工操作,成功获得小鼠胚胎。
2. 小鼠胚胎在体外培养过程中,经历了受精卵、桑椹胚、囊胚、原肠胚等阶段。
筮宣医堂里±苤壶垫!垒生垒旦丝至鲞丝至塑』望!!!!!卫坐!堕坐鱼:垒匹垫!垒:y!!至:盟!.兰体外培养中胚胎发育潜能的评价甄碌然郁琦(中国医学科学院,北京协和医学院妇产科,北京100730)自1978年世界上首例采用体外受精一胚胎移植(i n vi t r o fe r t i l i zat i on and em buo t r ansf er,I V F—ET)技术的婴儿诞生的30年以来,一系列辅助生殖技术蓬勃发展,并在全世界范围内广泛开展。
I V F—E T已经成为治疗不孕症最为有效的方法之一。
尽管技术不断完善,出生婴儿数目逐年上升,但辅助生殖技术的发展仍面临着一系列困难,包括I V F—E T过程的关键技术——卵母细胞与胚胎的体外培养。
通常患者每个周期促排卵治疗后会获得10个左右的受精卵。
卫生部规定每次移植2~3个胚胎。
胚胎质量是影响临床妊娠结局的重要因素,如何评判胚胎的质量,选择最有发育潜能的胚胎进行移植,是胚胎工作中面临的一个重要问题。
胚胎的形态学评估是人类辅助生殖实验室工作的一个关键部分。
形态学评估无损伤性,是辅助生殖技术中最为常用的用于评价胚胎质量的方法,甚至是目前判断胚胎质量的唯一较为公认的标准。
完善的胚胎的形态学评分标准的建立,有利于胚胎发育与种植潜能的预测,为临床妊娠提供保障。
一、形态学评分方法胚胎的形态学评分是目前最常用的评价胚胎质量的方法。
从卵母细胞成熟、受精到胚胎分裂、囊胚形成,是一个复杂的动态过程,目前常规采用的形态学指标,是根据胚胎的一些形态学观察指标对质量进行的分级,这种方法具有一定的局限性。
胚胎的形态并不能够准确反映卵子与胚胎的发育潜能,而且,除了分裂期胚胎的形态学观测有较为公认的评估指标以外,在其他时期胚胎质量评定缺少国际公认的标准。
此外,形态学评117综述价不可避免的带有观察者的主观因素,影响了胚胎质量评估的可重复性。
二、代谢组学的胚胎评估胚胎质量的检测是I V F—ET技术中很重要的步骤,目前常规采用的是形态学指标,根据胚胎的一些形态学观察指标对胚胎质量进行分级。
人的胚胎发育摘要个体发育是指多细胞生物体从受精卵开始,经过细胞分裂、组织分化、器官形成,直到性成熟等过程。
该过程可以分为两个阶段,即胚胎发育和胚后发育。
胚胎发育是指从受精卵发育到成熟的胎儿的过程。
胚胎发育包括受精卵(0~1天),卵裂(1~3天),囊胚(4天),原肠胚(7~12天),胚胎前期(13~60天)和胎儿(61~280天)。
关键词:受精卵,卵裂,囊胚,原肠胚,胚胎前期,胎儿1.受精卵1.1受精:成熟获能后的精子与卵子结合成受精卵的过程,称为受精。
一般发生在输卵管壶腹部。
正常成年男性一次射精可射出3亿~5亿个精子,其中300 ~500个最强壮的精子能到达输卵管壶腹,但最终只有一个精子能与卵子结合。
1.2受精过程精卵相会就是形成受精卵。
这个过程就是受精的过程。
受精过程约需24小时。
当一个获能的精子进入一个次级卵母细胞的透明带时,受精过程即开始。
到卵原核和精原核的染色体融合在一起时,则标志着受精过程的完成。
1.3受精过程①精子穿过放射冠;②精子穿过透明带;③精、卵质膜融合,细胞核融合。
精子的进入激发卵子完成第二次成熟分裂,这时精子和卵子的细胞核分别称为雄原核和雌原核,二者在细胞中部靠拢染色质混合,形成受精卵,即合子。
2.卵裂受精卵形成后立刻开始向子宫方向运行,一边进行细胞分裂。
由于子细胞被透明带包裹,在分裂间期无生长过程,仅原受精卵的胞质不断分到子细胞中,故随着细胞数的增加,细胞体积不断变小。
受精卵这种特殊的有丝分裂称卵裂。
产生的子细胞,称卵裂球。
受精后第三天,卵裂球达12~16个,共同组成一个实心的细胞团,外观如桑椹,故称桑椹胚。
桑椹胚细胞继续分裂,但卵裂球达100个左右时,细胞间出现若干小的腔隙,逐渐融合为一个大腔,腔内充满液体。
此时透明带开始溶解,胚呈现为囊泡状,故称为胚泡。
由滋养层和内细胞群构成。
3. 囊胚随着胚胎的进一步发育,胚胎的内部开始出现了含有液体的囊胚—囊胚腔,这个时期的胚胎叫做囊胚。
实验九鸡卵的人工孵育和胚胎发育观察实验内容与目的鸡胚作为生物学的实验材料,其历史已经相当悠久。
鸡蛋取材方便,孵育条件简单,且一年四季都有新鲜材料可取,是胚胎学、发育生物学教学、科研的良好材料。
鸡的个体发生中,许多早期发育如受精及卵裂过程并没有象蛙胚那样观察得如此清楚。
当鸡蛋产出时,胚胎发育已处于原肠期(原条形成期)。
随着温度的降低,发育停止。
只有将蛋放到孵育温度下才能继续发育。
实验目的:了解鸡胚发育的大体阶段以及各阶段的形态特征;了解实验室鸡胚胎孵化的基本条件,明确环境对胚胎发育和健康胚胎的重要性。
实验内容:学习和掌握鸡胚胎发育所需要的条件,观察鸡胚胎发育的外部形态变化,掌握器官形成的基本规律;明确环境因素对胚胎发育和健康的影响。
实验材料与实验仪器实验材料:鸡胚装片,共8片:24小时鸡胚装片,24小时鸡胚连续横切,48小时鸡胚装片,48小时鸡胚连续横切,72小时鸡胚装片,72小时鸡胚连续横切,96小时鸡胚装片,96小时鸡胚连续横切;受精鸡蛋。
实验仪器:孵蛋箱、检蛋灯、解剖器、解剖镜、温度计、湿度计、小碗、培养皿、光学显微镜等。
实验内容(一)观察鸡胚切片观察24小时至96小时鸡胚的整装片和横切片,掌握在鸡胚发育的不同时段的组织结构。
(二)学习鸡卵的人工孵育及其注意事项1、孵蛋箱结构及使用方法:孵蛋前几天,将孵蛋箱擦净后,再用来苏尔、或过氧乙酸、或70%酒精消毒灭菌。
然后接通电源,打开气窗,转动调温旋钮,将温度调节到37-39℃。
再将同1%HCl 浸洗冲净的砂粒放于盛水盘中,加入适量蒸馏水,使箱内湿度达到50-60%的相对湿度。
待温湿度稳定2-3天后,即可使用。
2、受精蛋的选择和保存:为保证较高的孵化率,必须对蛋进行选择。
最好选用刚产出一周以内的蛋。
过圆、过长或畸形蛋淘汰。
壳上具凹凸不平条纹的蛋不宜使用。
用照蛋灯检查时,要选气室小,无裂纹的蛋。
卵黄破散,蛋内有黑点或血块的蛋均不能使用。
3、孵育前蛋的消毒及升温处理:入孵前将蛋从10℃冰箱中取出,先放室温下平衡温度3-4小时,使之逐渐升温,再用温水(30-40℃)浸洗干净蛋壳上的污物。
植物胚胎培养的意义
植物胚胎培养是指在无菌条件下,将植物的胚胎(如幼胚、成熟胚、胚珠等)接种到培养基上,使其在人工控制的环境下生长和发育的技术。
植物胚胎培养具有以下重要意义:
1. 加快育种进程:通过植物胚胎培养,可以在较短的时间内获得大量的后代,从而加快育种进程。
2. 拯救珍稀濒危植物:对于一些珍稀濒危植物,可以通过胚胎培养来拯救和保护它们。
3. 提高育种效率:通过胚胎培养,可以在较小的空间内进行大量的育种试验,从而提高育种效率。
4. 研究植物发育机制:植物胚胎培养可以为研究植物发育机制提供重要的实验材料。
5. 生产无病毒植株:通过胚胎培养,可以获得无病毒植株,从而提高植株的品质和产量。
6. 保存种质资源:通过胚胎培养,可以保存植物的种质资源,以备将来使用。
植物胚胎培养是一种重要的植物生物技术,具有广泛的应用前景和重要的意义。
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