总胆汁酸测定试剂盒 (酶循环法)产品技术要求aipuyi

总胆汁酸（TBA）试剂盒标准操作程序1.摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆样本中总胆汁酸（TBA）的含量。

2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清或血浆样本中总胆汁酸（TBA）的含量。

3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定直接胆红素浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行，室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的总胆汁酸（TBA）试剂盒采用的是循环酶法。

5.原理血清中微量的胆汁酸（3α-羟甾醇）会被3α-羟甾醇脱氢酶（3α-HSD）及β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）特异性氧化生成3α-酮甾醇，同时Thio-NAD被还原成β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）。

新生成的3α-酮甾醇在3α-HSD及β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还化型（NADH）存在下，还原成胆汁酸，同时NADH氧化为β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（NAD）。

这样，血清中微量的胆汁酸在多次酶循环的过程中被放大，同时可使生成的Thio-NADH扩增。

在405nm处测定Thio-NADH吸光度的变化值，可以求得血清中胆汁酸的含量。

胆汁酸THio−NAD3α−HSD→THio−NADHNAD←NADH3α−铜羟甾醇6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2注册号：沪食药监械（准）字2011第2400009号7.3试剂瓶内主要成分：R1： -硫烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（THio-NAD）、Good’s缓冲液；R2 ：β-硫烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（NADH）、3α-羟甾醇脱氢酶（3α-HSD）、Good’s 缓冲液、叠氮钠7.4试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年；开瓶后2-8℃避光保存，可稳定一个月8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司的校准品对自动分析仪进行校准。

总胆红素测定试剂盒（钒酸盐氧化法）适用范围：用于体外定量检测人血清中总胆红素的浓度。

1.1包装规格a) 试剂1：2×60ml，试剂2：2×15ml；b) 试剂1：4×60ml，试剂2：4×15ml；c) 试剂1：3×80ml，试剂2：3×20ml；d) 试剂1：2×40ml，试剂2：2×10ml；e）试剂1：2×400ml，试剂2：2×100ml；f）试剂1：2×72ml，试剂2：2×18ml；g）试剂1：12×16ml ，试剂2：12×4ml；h）试剂1：1×40ml，试剂2：1×10ml。

1.2主要组成成分试剂1主要成成组分试剂2主要组成成分2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。

2.1.2 试剂1应为无色或淡黄色透明溶液；试剂2应为无色或淡黄色透明溶液。

2.2 净含量应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白吸光度在450nm波长下，测定试剂空白吸光度，应≤0.05。

2.4 分析灵敏度测试550 umol/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.15。

2.5 准确度测定国家标准品（YY90377），测定值与靶值相对偏差不超过±10%。

2.6 精密度2.6.1批内精密度批内精密度应不大于5％。

2.6.2批间差抽取3个不同批号试剂，对两个浓度样品进行重复检测，批间差应不大于10%。

2.7 线性2.7.1 在[3，628]umol/L区间内，线性回归的相关系数（r）应不低于0.990；2.7.2 (50,628]umol/L区间内，相对偏差不超过±15%。

2.7.3 [3,50]umol/L区间内，绝对偏差不超过±7.5umol/L。

2.8 稳定性该产品在2℃～8℃条件下贮存有效期为18个月，取效期末的产品进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7之规定。

同型半胱氨酸测定试剂盒(酶循环法)适用范围：用于体外定量检测人血清中同型半胱氨酸的浓度。

1.1 包装规格a) 试剂1：2×30ml，试剂2：1×9ml；b) 试剂1：2×60ml，试剂2：2×9ml；c) 试剂1：1×30ml，试剂2：1×4.7ml；d) 试剂1：12×20ml，试剂2：12×3ml；e）试剂1：1×60ml，试剂2：1×9ml；f) 试剂1：1×20ml，试剂2：1×3ml；g）试剂1：1×60ml，试剂2：1×20ml；h) 试剂1：1×40ml，试剂2：1×10ml。

1.2 主要组成成分试剂1主要组成成分试剂2主要组成成分2.1外观和性状2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。

2.1.2试剂1应为无色或淡黄色溶液；试剂2应为淡黄色溶液。

2.2净含量应不低于试剂瓶标示装量。

2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度测定试剂空白吸光度应≥1.0。

2.3.2试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.05。

2.4分析灵敏度测试40μmol/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.01。

2.5准确性在样品中加入一定体积的纯品（sigma）（纯品溶液体积与样品体积比应不会产生基质的变化，加入纯品溶液后样品总浓度必须在试剂盒检测线性范围内），重复检测3次，回收率80%～120%范围内。

2.6重复性采用正常值和高值两个浓度样品重复测定不少于10次，变异系数（CV）应不超过5％。

2.7线性2.7.1在（1,50）μmol/L范围内，线性回归的相关系数应不低于0.990；2.7.2[10,50) μmol/L范围内，相对偏差≤15%。

2.7.3(1,10)＜10μmol/L范围内，绝对偏差≤2μmol/L。

血清总胆汁酸测定标准操作规程1.检验原理：（酶循环法）胆汁酸和硫代氧化型辅酶Ⅰ（Thio-NA +D ）在3α-羟类固醇脱氢酶的作用下转化为硫代还原型辅酶Ⅰ（Thio-NADH ）和3α-酮类固醇，此反应是可逆的。

在大量还原型辅酶Ⅰ（Thio-NADH ）存在的情况下，逆向反应同时进行，再生成胆汁酸和氧化型辅酶Ⅰ（NA +D ）。

通过循环使胆汁酸的量得到放大。

在一定的反应时间内，酶循环产生的硫代还原型辅酶Ⅰ与样品中的胆汁酸浓度成正比，在405nm 处测定吸光度并计算每分钟吸光度的变化率可得出样本中胆汁酸的含量。

胆汁酸+Thio-NA +D −−−→−-HSDα3Thio-NADH+3α-酮类固醇 3α-酮类固醇+NADH −−−→−-HSD α3NA +D +胆汁酸 2.试剂组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清，勿使用肝素抗凝血浆。

22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V ）的氯化钠溶液稀释样本。

通常稀释2倍，当样本浓度较大时提高稀释倍数。

6.2单位换算：mmol/L=umol/L ×0.001 7检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊或以水空白在405nm处吸光度大于0.800时不能使用。

8.产品性能指标8.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本试剂线性范围可达0-180umol/L。

8.2试剂空白吸光度：在405nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.800，△A空白/分钟≤0.005.8.3准确度：相对偏差≤10%。

8.4精密度8.4.1批内精密度CV≤3%8.4.2批间精密度：R≤10%8.5分析灵敏度：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，1umol/L的总胆汁酸对应的△A不低于×4108.6干扰试验无明显干扰：添加干扰物后的测定值与初始测定值的相对偏差处于±10%以内。

2性能指标
2.1外观和性状
2.1.1颜色性状
质控品复溶前为浅黄色或黄色冻干粉末，复溶后为浅黄色或黄色液体。

2.1.2包装
分装瓶为棕色硬质玻璃瓶，盖有橡胶瓶内塞；盒贴、瓶贴、标签标识应完整、清晰。

橡胶瓶内塞与玻璃配合后应无泄漏；外盖应无明显划痕、崩缺。

2.2装量
质控品装量差异应在±7.0%以内。

2.3均一性
2.3.1瓶内均一性
质控品瓶内均一性应不大于表2的要求。

表 2 质控品瓶内均一性要求
2.3.2瓶间均一性
质控品瓶间均一性应不大于表3的要求。

表 3 质控品瓶间均一性要求
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2.4参考值及参考范围
每批质控品均应提供本批产品的参考值表。

经迈瑞校准品校准的适用仪器及配套试剂对质控品进行测定，测定结果应在给定的参考范围内。

2.5生物安全性
质控品使用国家权威管理机构认可的、且不低于我国法定用于血源筛查体外诊断试剂灵敏度的检测试剂，乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体、丙型肝炎病毒（HCV）抗体、梅毒螺旋体（TP）抗体检测应为阴性。

2。

胆汁酸测定试剂盒（循环酶法）标准化操作规程1 目的规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。

2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。

3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中胆汁酸的含量。

4 检验方法本试剂盒采用循环酶法测定胆汁酸的含量。

5 检验原理本试剂采用酶分析法测定血清总胆汁酸。

3α-羟基类固醇脱氢酶特异性作用于3α-羟甾族化合物，使之转化为相应的酮类固醇，反应中thio-NAD被还原为thio-NADH。

通过在405nm波长处测定单位时间内吸光度的变化值，可以计算出样品中总胆汁酸的含量。

6 标本要求6.1 样本为空腹患者血清。

样本应及时离心分离，不得使用溶血或被污染的样本。

6.2 样本应避免微生物污染，在2℃～8℃可稳定数月。

7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司胆汁酸试剂盒（循环酶法）7.27.3试剂的稳定性与贮存：7.3.1 试剂在2℃~8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为12个月。

7.3.2 试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天。

8 实验仪器及性能指标8.1 实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 试剂空白：试剂空白吸光度：A≤0.800。

试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.040。

8.2.2 分析灵敏度：测试1μmol/L被测物时，吸光度变化率（△A/min）＞0.0002。

8.2.3 线性范围：1μmol/L～180μmol/L；线性相关系数r≥0.9900；[1,36]μmol/L区间内，线性绝对偏差应不超过±7.2µmol/L；（36,180]μmol/L区间内，相对偏差不超过±15％。

8.2.4 准确度：比对试验：r≥0.9900；[1，36]μmol/L区间内，绝对偏差不超过±7.2μmol/L，（36，180]μmol/L区间内，相对偏差不超过±15%。

同型半胱氨酸测定试剂盒(酶循环法)适用范围：本产品适用于体外定量测定人血清中的同型半胱氨酸（HCY）含量。

1.1 产品规格1.2 主要组成成分注：校准品、质控品具有批间、赋值特异性，具体值详见靶值单。

2.1 外观2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无破损；2.1.2试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；2.1.3试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；2.1.4校准品：无色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；2.1.5质控品：无色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。

2.2 净含量净含量不低于标示值。

2.3 空白吸光度2.3.1 空白吸光度测定待检试剂在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下：A≥0.8；2.3.2 空白吸光度变化率空白吸光度变化率≤0.020/min(1cm,340nm/405nm 37℃)。

2.4 线性范围[3,50]μmol/L，相关系数r≥0.995；[3,10]µmol/L范围内绝对偏差≤±1.0µmol/L；（10,50]µmol/L范围内相对偏差应≤±10%。

2.5 分析灵敏度在产品说明书规定参数设定条件下，测定浓度为10.0μmol/L校准血清，△A/min≥0.01。

2.6 精密度2.6.1批内重复性CV≤5%。

2.6.2 批间差相对极差R≤10.0%。

2.7 准确度与已上市产品比对：[3,50]µmol/L范围内相关系数r≥0.990；[3,10]µmol/L范围内绝对偏差≤±1.0µmol/L；（10,50]µmol/L范围内相对偏差应≤±10%。

2.8 校准品均一性CV≤5%；2.9 质控品2.9.1赋值有效性测定值在质控靶值范围内。

2.9.2均一性CV≤5%。

2.10 稳定性未开封试剂2℃～8℃储存，可稳定12个月。

总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(酶微板法)简介：胆汁酸(Bile acid)是胆汁的重要成分，在脂肪代谢中起着重要作用，胆汁酸主要存在于肠肝循环系统并通过再循环起一定的保护作用。

Leagene 总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(酶微板法)其检测原理是3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)催化羟基胆酸与NAD +之间的反应，其后NADH 与INT 经黄递酶催化生成formazane ，其反应公式如下：在上述偶联反应中，formazane(红色)生成量与TBA 含量呈正比，酶标仪或生化分析仪测定500nm 处吸光度，进而计算TBA 含量。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃保存3个月有效，用于TBA 的检测。

2、 配制NAD-INT 工作液：取适量的NAD solution 和INT solution ，按NAD solution ：INT solution=9:1的比例混合，即为NAD-INT 工作液。

3、 分光光度计检测：按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。

如果样品中的浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

编号 名称TC1141 100T Storage试剂(A): 胆汁酸标准(50μM) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): NAD solution 36ml4℃ 避光 试剂(D): 3α-HSD solution15ml 4℃ 避光 试剂(E): TCA 终止液15mlRT 使用说明书1份加入物(μl)空白孔 标准孔 测定孔 蒸馏水15 － － 胆汁酸标准(50μM)－ 15 － 待测样品 － － 15 NAD-INT 工作液 120 120 120 3α-HSD solution404040混匀，水浴孵育。

TCA终止液40 40 40混匀，蒸馏水调零，500nm处读取吸光度。

总胆固醇测定试剂盒（酶法）性能要求行业标准（氧化酶法）检测方法4.1 物理性质试剂R1应为无色透明液体；试剂R2应为淡黄色透明液体。

5.2物理性质用目测法检查试剂盒内各组分的外观，其结果应符合上述4.1项的要求。

3.1外观符合制造商规定的正常外观要求。

4.1外观目测检查，结果应符合3.1的要求。

4.2试剂质量标准4.2.5装量允差10～5.7装量允差取经过校准的量具对试剂量进行检测，其结果应符合上述4.2.5项的要求。

3.2装量液体试剂的装量应不少于标示量。

4.2装量用通用量具测量,结果应符合3.2的要求。

100ml规格试剂装量应控制在要求量的≥97%；其余规格试剂装量应控制在要求量的≥100%。

4.2.1试剂空白试剂的空白吸光度≤0.10A 5.6试剂空白吸光度在波长600nm处、37℃反应温度下、1cm比色杯光径、按蒸馏水：试剂R1：试剂R2=2.4：240：80的混合后；孵育5分钟，测吸光度值，应符合本标准4.2.1的要求。

3.3试剂空白吸光度在500～550nm波长下，双试剂型试剂盒应不大于0.080。

单试剂型试剂盒应不大于0.100。

4.3试剂空白吸光度在500nm～550nm波长下，测定指定空白样品的吸光度值，重复两次，均值即为试剂空白吸光度。

结果应符合3.3的要求。

4.2.2线性范围 要求试剂盒在样本浓度5-800mg/dL 范围内，整个反应呈线性，r 2≥0.9905.5线性范围取含TC 浓度约800mg/dl 的高值血清，再用生理盐水按1/5、2/5、3/5、4/5、5/5（原倍）稀释,以生理盐水和以上5个稀释度作为标本,按标准实验操作步骤各测定3次，以理论值为X 轴，以实际测试值为Y 轴，绘制线性曲线，计算r 2r 2=∑∑∑==--=---⋅-⎪⎭⎫ ⎝⎛--n i n i ni Y Yi X Xi X Xi Y Yi 112221)()())(( 其结果应符合上述4.2.2项的要求。