影响细胞核移植效率的因素
- 格式：pdf
- 大小：279.22 KB
- 文档页数：5
一
［ 收稿日期］０ ７ １～ ９ ２０—２２
［ 目基金］ 项 中科 院 “ 科技支 黔 ” ，国家科技 部 “ 热带 ，亚热带地 区高产 奶牛胚胎移植技术集 成和养 殖试验示范 ” ０Ｅ Ｎ ５ ０ ２ Ｓ ，科技部国际合 作 （５ Ｆ ２ ３ ０ ｆ ） ｉ 计 划 “云 南 高 品 质 奶 牛 性 控 胚 胎 生 产 及 种 公 牛 胚 胎 克 隆 技 术 研 发 ”
中图分类号 ￥ ５ ． ２ ８２１＋ ６ 文献标识码 Ａ 文章编号 １ ７－ ６ ２ ２ ０ ） ２ ０ ４ － ５ ２ ９９ （０ ８ ０ － ０ ６ ０ ６
１９ ９ ７年 ，世 界上 第 一只 成 年 绵羊 乳 腺上 皮 胞类 型及 细胞 周期 ，供体细胞 的遗传背景 ，受 体 细胞核移植后代 Ｄ ｌ 的诞生ｆ ｏｙ ｌ １ 】 ，标志 着核移植技 胞质 ，核移 植程序 以及 体外培养系统等 ，达 到提 术进入 了一个崭 新的发展阶段 。这 一成就具有跨 高其 总体效率 的 目的。 时代 的意义 ，而且进 一步证实 了基 因活性学说 的 １ 供 体 细 胞 的 种 类 与细 胞 时 相 对 克 隆 效 率 的 影 响 正确性 ，证 明高度 分化 的体细胞 仍然具有基 因组
卵 丘细 胞 进 行 的核 移 植 研 究其 总效 率 为 ２ ％； 核移 植胚胎 ，雄性生殖细胞 的核移植胚 的囊胚 发 ． ３ Ｃｂ ｌ 等ｆ 牛体细 胞核 移植 研究 中其 总效率 为 育率高于雌性，但这个差异并不显著。采 自不 同个 ｉｅ ｉ ３ ｌ 】 在 １ ％；Ｗｅ ｓ ４ ． ２ ｌ 等ｆ ｌ 】 用奶牛卵泡壁颗粒细胞 作核供体 体 的卵丘 细胞其克隆胚胎的发育潜力有明显不 同， 其原因还不清楚。乳腺细胞支持重组胚 的发育能力 进行核 移植 的总效率是 ２ ％；Ｐ ｌ ａｖ 等［ ． ８ ｏ ｊｅａ ５ ｅ １ 用来
核 移植 总效 率也 仅为 ４ ％。研 究表 明克 隆 效率 发育率 与供核细胞 的细胞类 型有关 ，由颗 粒细胞 ． ０ ２ ０ 高于成 纤维细胞构 ５％ 低 主要是 由于 克隆胚胎重构化 的不完全 ， 目前 人 构建 的重构胚的发育 率（ ． ） １． 。 们对重构胚 胎 的发育机制 知之 甚少 。需要从克 隆 建的重构胚（２９％） 般 认 为分化程 度较 低 的细胞用 作核供体 时 程序各环节入 手 ，充分考虑各 影响 因素如供体 细 的核移植效 率要高于分化程 度高 的供体细胞 。与
囊胚 率 ７１％） ． ４ 显著低于 成纤维细胞 （ ． ％） １ １ 和颗 ６９ 自成年 猪 的颗 粒 细胞 进 行 核移 植 ，其 效率 也 是 （ １． ｌ （ ０ ） ｐ ０ ｐ １％。Ｋ ｅ ｒ ６ 山羊 的卵丘颗粒细胞系作供 粒 细 胞（９０ ％） ＜ ．５，卵 裂 率无 显 著 差异 （＞ ２ ２ ｅｆ 等［ ｅ １ 用 核 ，得 到 活 的后代 ，其 中核 移植 的效率 在 ２ ０ ５ｔ 以卵 丘 细胞 为核 供 体细 胞 组成 重 构 胚 ， ％～ ． ）； ０ ９ Ｊ
１％。迄今 为止，体细胞 核移植研 究中获得 最高 卵裂率达 到 ５ ． ，发育 至桑椹 胚达 ｌ． ３ ６７ ％ １ ％、孵 ７ ． ７ 效率 的是 Ｋ ｔ 等 牛卵丘细胞 核移植研 究中获 化囊 胚 率为 ６ ％，显 著高 于成 纤 维细 胞组 成 的 ａ ｏ 在 ｐ ． ）ｌ ＜０ ・ ｏ ｌ ｌ 】 得 ，其 总效率为 １． ３８ ％，但在他们 后来 的研 究 中 重构胚 （ ０ ５ｔ。而 成勇等ｆ也证 实了重构胚 的
未转染 的牛生殖 嵴细胞 、牛肌 肉细胞 、牛初乳乳 胎 的发育 率也有差异 。一般认 为 ，用雌性生殖 系 腺上 皮细胞 、肺组 织细 胞 、兔 子成 纤维 细胞 等 。 统 的细胞 作供核体可提 高体细胞核移植 效率 。来
目前克 隆研 究主要集 中在如何提 高动物克 隆的效 自胚 胎干 细胞 的克 隆胚 不 需或 几乎不 需重编 程 ， 故而 发育超 过附植期 的胚远 好于来 自体 细胞 的克 率上 。至 目前为止 ，据发表 资料 来看 ，对于 已获 得 成 功 的体 细胞 克 隆动 物 ，其 总体 效 率仍 然较 隆胚 。以小 鼠胚胎干 细胞为供体细胞 所做的试验 低 。Ｗｉ ｕ 等ｆ 绵羊乳 腺上皮 细胞得 到克 隆羊 也似乎证实 了这 一点 ，其核移胚 的囊 胚率最高达 ｌ ｔ ｌ ｍ 】 用 ８ ｓ ｌ 。来 自同一发 育阶 段 的牛胎 儿 生殖 细胞 的 （ｏ ｙ的总效率仅 为 ０ ％。Ｗａａａ 等翻 小 鼠 Ｄ ｌ） ｌ ． ２ ｋ ｙｍａ 用 ８％ｔ
维普资讯
银海 苏 ， 雷 ｚ３ ，
（ 云 南农业 大学动物遗传 育种 与繁 殖专业 ，云 南 昆明 ６ ０ ０ ； １ ． ５２１ ２ 云南 中科胚胎 工程 中心 ，云南 昆明 ６ ０ １ ； ． ５２７ ３ 中国科 学院 昆明动 物所 ，云 南 昆明 ６ ０ １） ． ５２３
的等 同性 ，其 细胞核仍然 具有 支持哺乳动物全 程 １ １ 细胞 种 类 供体 细胞 的组 织特 异性 对克 隆 ． 发育 的全能性 。此后 ，以不 同动物不 同组织来源 效 率有重要影 响，在 已经做过 的超过 ２ ｏ 组织 ｏ种
的体细胞进行核移植均得 到 了后代 。这些 细胞 包 学类 型的哺乳 动物供 体细胞 中，只有 不到 ５ ％的 括颗粒 、卵丘细胞 、鼠尾尖细胞 、乳腺 细胞 、皮 产下克 隆后代 。研 究表 明，不仅不 同细胞系 ，即 肤成纤维细胞 、输卵管 和子宫上皮细胞 、转染或 使是 同一 原代细胞 系 的不 同克 隆株 ，其核移植胚
［ 收稿日期］０ ７ １～ ９ ２０—２２
［ 目基金］ 项 中科 院 “ 科技支 黔 ” ，国家科技 部 “ 热带 ，亚热带地 区高产 奶牛胚胎移植技术集 成和养 殖试验示范 ” ０Ｅ Ｎ ５ ０ ２ Ｓ ，科技部国际合 作 （５ Ｆ ２ ３ ０ ｆ ） ｉ 计 划 “云 南 高 品 质 奶 牛 性 控 胚 胎 生 产 及 种 公 牛 胚 胎 克 隆 技 术 研 发 ”
中图分类号 ￥ ５ ． ２ ８２１＋ ６ 文献标识码 Ａ 文章编号 １ ７－ ６ ２ ２ ０ ） ２ ０ ４ － ５ ２ ９９ （０ ８ ０ － ０ ６ ０ ６
１９ ９ ７年 ，世 界上 第 一只 成 年 绵羊 乳 腺上 皮 胞类 型及 细胞 周期 ，供体细胞 的遗传背景 ，受 体 细胞核移植后代 Ｄ ｌ 的诞生ｆ ｏｙ ｌ １ 】 ，标志 着核移植技 胞质 ，核移 植程序 以及 体外培养系统等 ，达 到提 术进入 了一个崭 新的发展阶段 。这 一成就具有跨 高其 总体效率 的 目的。 时代 的意义 ，而且进 一步证实 了基 因活性学说 的 １ 供 体 细 胞 的 种 类 与细 胞 时 相 对 克 隆 效 率 的 影 响 正确性 ，证 明高度 分化 的体细胞 仍然具有基 因组
卵 丘细 胞 进 行 的核 移 植 研 究其 总效 率 为 ２ ％； 核移 植胚胎 ，雄性生殖细胞 的核移植胚 的囊胚 发 ． ３ Ｃｂ ｌ 等ｆ 牛体细 胞核 移植 研究 中其 总效率 为 育率高于雌性，但这个差异并不显著。采 自不 同个 ｉｅ ｉ ３ ｌ 】 在 １ ％；Ｗｅ ｓ ４ ． ２ ｌ 等ｆ ｌ 】 用奶牛卵泡壁颗粒细胞 作核供体 体 的卵丘 细胞其克隆胚胎的发育潜力有明显不 同， 其原因还不清楚。乳腺细胞支持重组胚 的发育能力 进行核 移植 的总效率是 ２ ％；Ｐ ｌ ａｖ 等［ ． ８ ｏ ｊｅａ ５ ｅ １ 用来
核 移植 总效 率也 仅为 ４ ％。研 究表 明克 隆 效率 发育率 与供核细胞 的细胞类 型有关 ，由颗 粒细胞 ． ０ ２ ０ 高于成 纤维细胞构 ５％ 低 主要是 由于 克隆胚胎重构化 的不完全 ， 目前 人 构建 的重构胚的发育 率（ ． ） １． 。 们对重构胚 胎 的发育机制 知之 甚少 。需要从克 隆 建的重构胚（２９％） 般 认 为分化程 度较 低 的细胞用 作核供体 时 程序各环节入 手 ，充分考虑各 影响 因素如供体 细 的核移植效 率要高于分化程 度高 的供体细胞 。与
囊胚 率 ７１％） ． ４ 显著低于 成纤维细胞 （ ． ％） １ １ 和颗 ６９ 自成年 猪 的颗 粒 细胞 进 行 核移 植 ，其 效率 也 是 （ １． ｌ （ ０ ） ｐ ０ ｐ １％。Ｋ ｅ ｒ ６ 山羊 的卵丘颗粒细胞系作供 粒 细 胞（９０ ％） ＜ ．５，卵 裂 率无 显 著 差异 （＞ ２ ２ ｅｆ 等［ ｅ １ 用 核 ，得 到 活 的后代 ，其 中核 移植 的效率 在 ２ ０ ５ｔ 以卵 丘 细胞 为核 供 体细 胞 组成 重 构 胚 ， ％～ ． ）； ０ ９ Ｊ
１％。迄今 为止，体细胞 核移植研 究中获得 最高 卵裂率达 到 ５ ． ，发育 至桑椹 胚达 ｌ． ３ ６７ ％ １ ％、孵 ７ ． ７ 效率 的是 Ｋ ｔ 等 牛卵丘细胞 核移植研 究中获 化囊 胚 率为 ６ ％，显 著高 于成 纤 维细 胞组 成 的 ａ ｏ 在 ｐ ． ）ｌ ＜０ ・ ｏ ｌ ｌ 】 得 ，其 总效率为 １． ３８ ％，但在他们 后来 的研 究 中 重构胚 （ ０ ５ｔ。而 成勇等ｆ也证 实了重构胚 的
未转染 的牛生殖 嵴细胞 、牛肌 肉细胞 、牛初乳乳 胎 的发育 率也有差异 。一般认 为 ，用雌性生殖 系 腺上 皮细胞 、肺组 织细 胞 、兔 子成 纤维 细胞 等 。 统 的细胞 作供核体可提 高体细胞核移植 效率 。来
目前克 隆研 究主要集 中在如何提 高动物克 隆的效 自胚 胎干 细胞 的克 隆胚 不 需或 几乎不 需重编 程 ， 故而 发育超 过附植期 的胚远 好于来 自体 细胞 的克 率上 。至 目前为止 ，据发表 资料 来看 ，对于 已获 得 成 功 的体 细胞 克 隆动 物 ，其 总体 效 率仍 然较 隆胚 。以小 鼠胚胎干 细胞为供体细胞 所做的试验 低 。Ｗｉ ｕ 等ｆ 绵羊乳 腺上皮 细胞得 到克 隆羊 也似乎证实 了这 一点 ，其核移胚 的囊 胚率最高达 ｌ ｔ ｌ ｍ 】 用 ８ ｓ ｌ 。来 自同一发 育阶 段 的牛胎 儿 生殖 细胞 的 （ｏ ｙ的总效率仅 为 ０ ％。Ｗａａａ 等翻 小 鼠 Ｄ ｌ） ｌ ． ２ ｋ ｙｍａ 用 ８％ｔ
维普资讯
银海 苏 ， 雷 ｚ３ ，
（ 云 南农业 大学动物遗传 育种 与繁 殖专业 ，云 南 昆明 ６ ０ ０ ； １ ． ５２１ ２ 云南 中科胚胎 工程 中心 ，云南 昆明 ６ ０ １ ； ． ５２７ ３ 中国科 学院 昆明动 物所 ，云 南 昆明 ６ ０ １） ． ５２３
的等 同性 ，其 细胞核仍然 具有 支持哺乳动物全 程 １ １ 细胞 种 类 供体 细胞 的组 织特 异性 对克 隆 ． 发育 的全能性 。此后 ，以不 同动物不 同组织来源 效 率有重要影 响，在 已经做过 的超过 ２ ｏ 组织 ｏ种
的体细胞进行核移植均得 到 了后代 。这些 细胞 包 学类 型的哺乳 动物供 体细胞 中，只有 不到 ５ ％的 括颗粒 、卵丘细胞 、鼠尾尖细胞 、乳腺 细胞 、皮 产下克 隆后代 。研 究表 明，不仅不 同细胞系 ，即 肤成纤维细胞 、输卵管 和子宫上皮细胞 、转染或 使是 同一 原代细胞 系 的不 同克 隆株 ，其核移植胚
