肺腺癌实验动物造模

第1篇一、实验目的1. 理解肺的基本结构和功能。

2. 掌握肺模型的制作方法。

3. 通过肺模型实验，观察肺在不同条件下的生理和病理变化。

4. 分析肺功能障碍的机制。

二、实验原理肺是人体重要的呼吸器官，主要负责氧气的吸入和二氧化碳的排出。

通过制作肺模型，可以模拟肺在正常和病理状态下的功能变化，为研究肺疾病提供实验基础。

三、实验材料1. 实验动物：家兔（雌雄不限，体重2-3kg）。

2. 实验仪器：手术器械、显微镜、肺模型制作材料、气体分析仪、麻醉机、呼吸机等。

3. 实验试剂：生理盐水、肾上腺素、肝素等。

四、实验方法1. 动物麻醉：采用吸入麻醉法，将家兔麻醉后固定于手术台上。

2. 肺模型制作：取家兔双肺，沿肺门处切开，取出肺实质，保留肺泡壁和血管。

3. 模拟正常呼吸：将肺模型置于呼吸机，调整呼吸参数，观察肺模型在正常呼吸状态下的变化。

4. 模拟肺水肿：向肺模型内注入肾上腺素，观察肺模型在肺水肿状态下的变化。

5. 模拟肺气肿：向肺模型内注入生理盐水，观察肺模型在肺气肿状态下的变化。

6. 观察指标：观察肺模型的外观、肺泡壁完整性、气体交换功能等。

五、实验结果1. 正常呼吸状态下，肺模型外观正常，肺泡壁完整，气体交换功能良好。

2. 肺水肿状态下，肺模型外观肿胀，肺泡壁破裂，气体交换功能降低。

3. 肺气肿状态下，肺模型外观扩张，肺泡壁变薄，气体交换功能降低。

六、实验分析1. 肺水肿的发生机制：肾上腺素导致肺血管收缩，血液灌注不足，引起肺泡壁损伤和水肿。

2. 肺气肿的发生机制：生理盐水导致肺泡过度膨胀，肺泡壁变薄，气体交换功能降低。

七、实验结论1. 肺模型实验可以模拟肺在不同条件下的生理和病理变化。

2. 肺水肿和肺气肿是常见的肺部疾病，其发生机制与肺血管、肺泡壁和气体交换功能有关。

八、实验讨论1. 肺模型实验为研究肺部疾病提供了实验基础，有助于揭示肺部疾病的发病机制。

2. 肺模型实验可以用于评估肺部疾病的治疗效果，为临床治疗提供参考。

肿瘤动物模型“新宠“——PDTX篇导读近年来，随着“肿瘤精准医疗”概念的提出，一种新的肿瘤模型应运而生，并被称为“目前最接近人类临床实际情况的肿瘤模型”，它对肿瘤新药研发、靶点筛选及个性化治疗起着重大推动作用。

它就是我们本期主角：人源肿瘤组织异种移植模型（PDTX），本文就为大家详细介绍这种PDTX模型的应用和常见PDTX模型的建立。

什么是PDTX模型？PDTX（Patient-derived tumor xenograft）即人源性肿瘤组织异种移植模型，又名PDX。

指将肿瘤患者的新鲜肿瘤组织移植（异位或原位）到免疫缺陷鼠（NOD/SCID、NRG小鼠等）上，在小鼠上培育出人的肿瘤组织。

该模型保持了人源肿瘤的原始多样性，更好地模拟了肿瘤细胞在人体内的生长环境[1]。

PDTX模型与CDTX比较，优势在哪里？CDTX（肿瘤细胞系移植模型）一直是我们往期内容的主角，它因易构建、成瘤率高、周期短等优点而被广泛应用，然而却依然存在一些缺陷而无法接近临床病人肿瘤的实际情况。

最大的缺陷就是CDTX缺乏肿瘤异质性！CDTX也可称为传统的荷瘤模型，即使用传统的体外处理过的永生化肿瘤细胞系移植小鼠，由于这类细胞的同质性，缺少细胞外基质、非肿瘤细胞等肿瘤微环境，使得肿瘤移植后难以有临床组织病理特征。

因此所得出的药物剂量范围、疗效与实际临床会有较大出入[2]。

就在去年，美国国家癌症研究所（NCI）宣布被全世界使用了25年的NCI-60（在培养基中生长的60种人类癌细胞系）从其药物筛选程序中“退休”，并决定将启动一个得到更新的、来源于病人新鲜样本的癌症模型库。

如下表为PDTX与CDTX的比较：PDTX的应用1. 药物筛选：经过近几十年的研究，发现PDTX模型进行药物筛选的结果跟临床的相关性非常高，所以很多研究单位和制药企业都纷纷采用PDTX模型进行肿瘤药物的筛选和评估，得出更加合理有效的治疗方案[3]。

2. 肿瘤个性化治疗：同一肿瘤在不同患者上发展情况不同，加上同一肿瘤还有许多分型，因此选择的治疗方法也不相同。

小细胞肺癌可视化PDOX肿瘤动物模型免疫表型Ki-67表达的研究进展作者：吴柳盛李小强来源：《中国医学创新》2021年第25期【摘要】小细胞肺癌（SCLC）是肺癌所有病理类型中预后最差的一种，患者生存周期极短，死亡率极高。

虽然SCLC对化疗药物敏感，临床上抗肿瘤药物治疗成为主流，但有循证医学研究发现在临床中不同的患癌个体之间对抗肿瘤药物的敏感性和耐受性存在着差异，这给临床治疗带来了困难和挑战。

因此，人们急需要一种能高度模拟体内肿瘤细胞生长微环境，能与患者进行同步化动态观察抗肿瘤药物应答的理想动物模型。

可视化PDOX肿瘤动物模型满足了这些需求，这也是目前国际上最前沿的肿瘤动物模型构建技术，避免了个体差异，为临床治疗提供了个性化思路，同时Ki-67免疫表型表达的监测为早期SCLC的诊断提供了有效帮助。

现对最近国内外SCLC可视化PDOX肿瘤动物模型构建技术和免疫表型Ki-67表达监测的研究进展以及该模型对临床上不同个体之间抗肿瘤药物应答差异做全面综述。

【关键词】小细胞肺癌可视化PDOX肿瘤动物模型 Ki-67[Abstract] Small cell lung cancer （SCLC） has the worst prognosis among all pathological types of lung cancer. The survival cycle of patients is very short and the mortality rate is very high. Although SCLC is sensitive to chemotherapy drugs and anti-tumor drug therapy has become the mainstream in clinical practice， evidence-based medicine studies have found that there are differences in the sensitivity and tolerance of anti-tumor drugs among different cancer patients in clinical practice， which brings difficulties and challenges to clinical treatment. Therefore， there is an urgent need for an ideal animal model that can highly simulate the microenvironment of tumor cell growth in vivo and can dynamically observe the response to antitumor drugs in synchronization with patients. Visualized PDOX tumor animal model meets these needs， which is also the most advanced tumor animal model construction technology in the world at present. It avoids individual differences and provides personalized ideas for clinical treatment. Meanwhile， the monitoring of Ki-67 immunophenotype expression provides effective help for the diagnosis of early SCLC. In this paper，the research progress of visualized PDOX tumor animal model construction technology and immunophenotype Ki-67 expression monitoring of SCLC at home and abroad， as well as the clinical differences of anti-tumor drug response among different individuals in this model are comprehensively reviewed.[Key words] SCLC Visualized PDOX tumor animal model Ki-67First-author’s address： Peking University Shenzhen Hospital， Shenzhen 518036， Chinadoi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.25.042小細胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）占全部肺癌的15%～17%[1]，病情恶化快，可迅速出现远处内脏肿瘤转移，生存寿命短，死亡率极高，同时在临床上不同肿瘤患者个体之间存在着抗肿瘤药物的耐受差异，给临床治疗与疗效评估带来了困难。

PDX模型
PDX模型是一种常用于癌症研究的实验模型，其全称是Patient-Derived Xenograft Model。

这种模型通常通过将患有癌症的患者的癌细胞移植到实验动物
中来研究癌症的发病机制，药物治疗效果等问题。

PDX模型的建立通常包括以下
几个步骤：
1.样本采集：首先，需要从癌症患者身上获取癌细胞或肿瘤组织样本。

这通常需要经过严格的伦理审批，并确保样本的获取方式对患者没有额外的伤害。

2.移植：将采集到的样本移植到实验动物中，常用的实验动物包括小
鼠、裸鼠等，这些动物具有较高的移植成功率。

3.培养维持：移植成功后，需要对动物进行适当的养护与观察，确保
移植的细胞或组织得以生长与扩增。

4.实验研究：建立好PDX模型后，科研人员可以进行各种实验研究，
包括癌症的发病机制研究、药物筛选以及药物疗效评估等。

PDX模型在癌症研究中具有重要的应用价值，因为它能更好地模拟人类体内的
癌症情况，能够更准确地预测药物的疗效以及个体化治疗方案。

此外，PDX模型
还可以为临床医生提供更多信息，帮助他们做出更好的治疗决策，促进精准医疗的发展。

总的来说，PDX模型是当前癌症研究中一种重要的实验模型，其建立需要严谨
的操作与细致的观察，但可以为科研人员提供更多有益的信息，为癌症的治疗与研究带来希望。

一、实验目的本研究旨在探讨某种新型抗肿瘤药物在体外细胞模型中的抗肿瘤活性，为该药物的临床应用提供实验依据。

二、实验材料1. 细胞：人肺癌细胞系A549、人胃癌细胞系SGC-7901、人乳腺癌细胞系MCF-7。

2. 药物：新型抗肿瘤药物，以DMSO溶解，浓度为1000μM。

3. 主要试剂：RPMI-1640培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、MTT试剂、二甲基亚砜（DMSO）、细胞计数试剂盒等。

4. 仪器：CO2培养箱、倒置显微镜、酶标仪、离心机等。

三、实验方法1. 细胞培养：将人肺癌细胞系A549、人胃癌细胞系SGC-7901、人乳腺癌细胞系MCF-7分别接种于培养皿中，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。

2. 药物处理：将培养至对数生长期的细胞以1×104个/孔接种于96孔板，分别加入不同浓度的药物（0μM、10μM、50μM、100μM、200μM、400μM、800μM）处理，每组设6个复孔。

同时设置空白对照组和DMSO对照组。

3. MTT法检测细胞增殖：药物处理48小时后，每孔加入20μl MTT试剂，继续培养4小时。

然后加入150μl DMSO，在酶标仪上测定各孔吸光度（OD）值。

4. 统计分析：采用SPSS 22.0软件进行统计分析，组间比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA），P<0.05为差异具有统计学意义。

四、实验结果1. 不同浓度药物对三种肿瘤细胞增殖的影响：随着药物浓度的增加，三种肿瘤细胞的增殖活性均受到抑制。

其中，在50μM和100μM浓度下，A549、SGC-7901和MCF-7细胞的增殖活性显著降低（P<0.05）。

2. 不同浓度药物对三种肿瘤细胞IC50值的影响：通过计算IC50值，发现该新型抗肿瘤药物对A549、SGC-7901和MCF-7细胞的IC50值分别为46.2μM、35.8μM 和43.1μM。

五、讨论本研究通过体外细胞实验，探讨了新型抗肿瘤药物在三种肿瘤细胞中的抗肿瘤活性。