麻痹性贝类毒素的监测及脱毒方法研究
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贝类中麻痹性贝类毒素的测定编制说明《食品安全国家标准贝类中麻痹性贝类毒素的测定》(征求意见稿)编制说明一、标准起草的基本情况(包括简要的起草过程、主要起草单位、起草人等)根据国卫办食品函〔2014〕386号文件“国家卫生计生委办公厅关于印发食品安全国家标准整合工作方案的通知”中附件4食品安全国家标准整合项目计划,由辽宁出入境检验检疫局负责中华人民共和国国家标准《贝类中麻痹性贝类毒素检验方法》(即本标准)的起草工作。
被修订标准号:GB/T 5009.213-2008《贝类中麻痹性贝类毒素的测定》、GB/T 23215-2008《贝类中多种麻痹性贝类毒素含量的测定液相色谱-荧光检测法》、SC3023-2004《无公害食品麻痹性贝类毒素的测定生物法》、SN/T 0352-95《出口贝类麻痹性贝类毒素检验方法》、SN/T 1735-2006《进出口贝类产品中麻痹性贝类毒素检验方法高效液相色谱法》。
修订根据以被测指标为基础,对相同的被测指标有多个检测方法的,应进行整合的原则,建议整合制定《食品安全国家标准贝类中麻痹性贝类毒素的测定》,其中包含四种检测方法:1.小鼠生物法;2.酶联免疫吸附法;3. 高效液相色谱法;4. 液相色谱-荧光检测法。
标准的制定过程主要分为标准方法整合、标准编写、不同方法之间互相验证等阶段,形成了标准征求意见稿。
标准根据GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写规则》的要求进行编写。
主要起草单位:辽宁出入境检验检疫局、深圳出入境检验检疫局、中国水产科学研究院东海水产研究所。
二、标准的重要内容及主要修改情况本标准适用于贝类及其制品中麻痹性贝类毒素的测定。
第一法适用于小鼠生物法测定麻痹性贝类毒素总量;第二法适用于采用酶联免疫吸附法进行麻痹性贝类毒素筛选检测;第三法为常规检测方法,适用于采用高效液相色谱法测定麻痹性贝类毒素总量(STXeq),以及GTX4、GTX1、dcGTX3、B1、dcGTX2、GTX3、GTX2、neoSTX、dcSTX、STX等组分含量。
麻痹性贝类毒素在海洋食品中的安全性研究概述作者:礼贺来源:《现代食品》 2018年第3期摘要:通过总结当前麻痹性贝类毒素的构效、检测分析方法提出安全监管方案,认为对于麻痹性贝类毒素,既要有效防治,又要加强利用,检测和监管工作也需进一步加强。
关键词:麻痹性贝类毒素;海洋食品;安全Abstract:This paper summarized the research of structure-activity, analyzed methods and thenproposed a security supervision program. It is believed that for paralytic shellfish toxin, it is necessary toprevent and control, and to strengthen the use of the detection and supervision.Key Words:Paralytic Shellfish Toxins; Marine food; Safety中图分类号:R155.3我国拥有丰富的海洋食品资源,扇贝、贻贝、牡蛎、鲍鱼等贝类由于食用价值高且有一定的保健功能而深具市场前景[1]。
然而,在几千万年的自然选择中,由海洋藻类产生的海洋毒素通过食物链传递至贝类体内,不断累积形成的有毒高分子化合物——贝类毒素,给食品安全消费提出新的挑战[2],它严重影响了贝类品质,给渔业养殖及食品加工业进出口造成巨大的经济损失。
本文以麻痹性贝类毒素为研究对象,通过探究其毒性、分析方法、安全监管来对其进行安全性分析。
1 贝类毒素概述贝类毒素是海洋毒素危害较大的一种,全球分布广,由于其毒性大、反应快、无适宜解毒剂,给防治带来了许多困难。
Saomes Maric 根据毒素对人类引发的中毒症状和藻源的不同将其分为5 类,主要包括麻痹性贝类毒素(Paralytical Shellfish Poisoning,PSP)、腹泻性贝类毒素(Diarrhetic Shellfish Poisoning,DSP)、神经性贝类毒素(Ncurotoxic Shellfish Poisoning,NSP)、健忘性贝类毒素(Amnesic Shellfish Poisoning,ASP)、西加鱼毒。
南海海域养殖牡蛎中麻痹性贝类毒素分析作者:暂无来源:《中国食品》 2019年第1期文王媚吴移山广东省湛江市质量计量监督检测所国家海产品质量监督检测(湛江)中心林华娟广东海洋大学食品科技学院摘要:本研究在2013年3月采集湛江、阳江、钦州、北海、汕头、汕尾、深圳、台山等8个位于南海海域的养殖牡蛎,用小鼠生物(MBA)法和高效液相色谱(HPLC)法进行麻痹性贝类毒素检测。
MBA毒性分析结果显示:8个区域养殖牡蛎的毒素含量为0MU/g-2.3MU/g,符合我国贝类食品安全限量要求;HPLC毒素成分分析结果显示:湛江、深圳、汕头、台山和阳江等5个海域的养殖牡蛎体内检测出痕量的麻痹性贝类毒素,湛江、深圳、汕头和阳江海域的养殖牡蛎中检出高毒性的STX和neoSTX。
本次麻痹性贝类毒素测试MBA法的检出率为25%,HPLC法的检出率为62.5%,HPLC法更适合于检测麻痹性贝类毒素含量低的样品。
关键词:南海海域;牡蛎;麻痹性贝类毒素麻痹性贝类毒素(PSP)是一类剧毒的含氮杂环有机物,其基本化学结构是带两个胍基(=NH2)的嘌呤核,目前已经分离出24种毒素,研究得比较多的主要有以下三种类型:(1)氨基甲酸酯类毒素(Carbamoyl toxins),如石房蛤毒素(saxitoxins, STX)、新石房蛤毒素(Neosaxitoxins,neoSTX)、膝沟藻毒素(Gonyautoxin,GTX1~4);(2)N-磺酰胺甲酰基类毒素(N-sulfo carbamoyl toxins),如C1~4、GTX5(B1)、GTX6(B2);(3)脱氨甲酰基类毒素(Decarbamoyltoxins),包括dc STX、dc neo STX、dc GTX1~4等[1,2],PSP的主化学结构如图1所示。
在24种PSP中以氨基甲酸酯类毒素中的STX最为常见,是目前最主要的研究对象[3]。
贝类毒素的形成与海洋中有毒藻类赤潮密切相关。
贝毒有哪些检验方法贝类毒素又称赤潮生物毒素,是由赤潮生物产生的一系列天然活性物质。
对其贝毒需要了解其检验工作,那么贝毒有哪些检验方法?给大家详细的讲解一下。
贝毒一共有4种检验方法,1、生物检测法二十世纪五十年代,小白鼠生物学方法被首先采用于测定PSP 和NSP的毒性。
该方法是经过一系列的前处理过程(针对水溶性或脂溶性的毒素),将确定为有毒性的部分按不同剂量注射到实验用纯品系的小白鼠腹腔内,观察小白鼠的中毒情况,通过半致死浓度等指标,将致死的鼠单位(Mu)换算成毒素含量。
小白鼠生物学检测法在未知贝毒的发现和研究过程中发挥了巨大作用,在化学方法没有建立以前,作为贝毒检测的常规方法而得到了非常广泛的应用,目前世界上大约有81%的国家采用该方法检测DSP 和PSP,对于NSP和ASP 的检测有的国家仍用该方法。
我国目前也采用该方法对贝毒实施检测。
但该方法存在着很多不足和缺陷,例如:仅能指出毒性的大小,无法确定毒素的组成和含量;所测得的毒性和小鼠的品系有关,可比性较差,必须进行标准毒素的校准才有可能相比;毒性测定结果的重复性差;毒性测试所需时间长;需要受过专门训练的操作人员;小鼠维持费用较高;对很多脂溶性毒素来说,过多的干扰基质很容易造成假阳性和假阴性;另外,由于动物保护主义的反对,越来越需要其他的方法来替代它。
2、免疫分析法免疫分析法,如ELISA (酶联免疫吸附检测)、RIA(放射免疫分析)、EIA (竞争性酶免疫分析) 以及S-PIA(固态免疫珠检测),是以抗原-抗体特异性反应原理为基础,将毒素作为抗原注射到兔子等实验动物体内使其产生专一性抗体,然后从其血清中提取抗体,用放射性或荧光物质进行标记,将提取的贝毒或贝类匀浆组织暴露于标记物中,通过检测抗血清-抗原混合物中放射性或荧光强度以测定样品中毒素含量的方法。
通常采用的方法为ELISA,酶联免疫方法便宜、快速,适合处理大批量样品,它不需要非常复杂和昂贵的设备,并能够实现自动化。
水产品中麻痹性贝类毒素的微流体免疫检测技术研究赵涵;孙帅;董益阳;王斌;刘佳蕙;刘锐萍【期刊名称】《北京化工大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2018(045)001【摘要】鉴于我国在贝类毒素检测方面相对薄弱的现状,将微流体免疫芯片技术和化学发光分析法相结合来检测贝类毒素,旨在探索一种快速、高效、低耗以及灵敏的检测手段以弥补方法缺陷.选择研究最为广泛的麻痹性贝类毒素-石房蛤毒素(STX)作为研究对象,利用基于酶联免疫反应(ELISA)为原理的石房蛤毒素检测试剂盒在微流体免疫芯片-化学发光检测平台进行实验,绘制出STX标准曲线并计算出检测限.首先在羧基聚苯乙烯微球表面包被抗体并进行定性分析,然后对底物流速和底物溶液的稀释倍数等进行优化,最后对市场上的贝类进行了实际样品的检测.通过绘制标准曲线得到STX的检测限为0.005675 ng/mL,而传统方法的检测限为5 ng/mL,表明应用微流体芯片技术可以大幅度提高食品安全检测的灵敏度.【总页数】6页(P49-54)【作者】赵涵;孙帅;董益阳;王斌;刘佳蕙;刘锐萍【作者单位】北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029;北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029;北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029;北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029;北京化工大学环渤海生物产业研究院,河北秦皇岛066004;北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029;秦皇岛市食品药品检验中心,河北秦皇岛066004【正文语种】中文【中图分类】R446.62【相关文献】1.水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)的快速检测 [J], 黄玉柳;黄国秋;叶欣宇;黎小正;吴祥庆;庞燕飞;谢宗升;陈静2.水产品中生物毒素免疫检测技术研究进展 [J], 张亮;赵健;付岩;朱勇;章豪;吴银良3.多残留免疫检测技术及其在畜禽水产品质量安全检测中的应用 [J], 梁丹4.多残留免疫检测技术及其在畜禽水产品质量安全检测中的作用探讨 [J], 杨辉5.各国贝类水产品中麻痹性贝类毒素限量标准的比对 [J], 刘智勇;计融因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
食源性麻痹性贝类毒素中毒诊断要点
1 流行病学特点
1.1 中毒季节:在养殖海域出现有毒浮游藻类或赤潮季节为易中毒期,一般多见于 5-8 月。
1.2 中毒原因:因误食被麻痹性贝类毒素毒化了的贝类引起。
引起中毒的贝类主要为双壳贝类,常见的有扇贝、贻贝、牡蛎、杂色蛤、文蛤、赤贝等。
除双壳贝类外,织纹螺、泥螺等螺类及螃蟹引起的麻痹性贝类毒素中毒国内外也有报道。
1.3 易感人群:儿童和老人。
2 临床表现
2.1 潜伏期:起病急,为数分钟至数小时。
食后一般半小时发病。
2.2 主要症状和体征:初始症状为唇、舌、指端麻木及刺痛,继则言语不清、头晕、头痛、肢麻无力、嗜睡、步态不稳,并可出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等消化道症状,甚
至发生昏迷、呼吸困难,以至呼吸肌麻痹而致死。
3 实验室检验
3.1 中毒者食用的可疑食品、呕吐物检出麻痹性贝类毒素。
3.2 参照SC/T 3023 无公害食品麻痹性贝类毒素的测定生物法或SN 0352-95进出口贝类产品中麻痹性贝类毒素检验方法。
4 诊断
4.1 符合流行病学特点和临床表现,可疑食物或患者呕吐物中检出麻痹性贝类毒素进行确诊。
4.2 其他情况,按照 GB 14938.1 执行。
麻痹性贝毒分析技术的研究进展
陈勇;刘洁生
【期刊名称】《卫生研究》
【年(卷),期】1999(28)5
【摘要】至今,麻痹性贝毒已对海洋经济造成了难以估计的损失,对人类健康也构成了潜在的威胁。
鉴于传统的小白鼠生物分析法存在许多难以克服的局限性,近10年来发展了许多新的分析技术,使麻性贝毒的检测能达到灵敏,高效,快速的要求,本文系统介绍了麻痹性贝毒的检测技术及进展。
【总页数】3页(P315-317)
【关键词】麻痹性贝毒;石房蛤毒素;化学分析;分光光度法
【作者】陈勇;刘洁生
【作者单位】暨南大学生物工程学系
【正文语种】中文
【中图分类】R155.32;R991
【相关文献】
1.麻痹性贝毒在生物间的传递过程和贝毒净化的研究进展 [J], 郝佳;石永波;石昌磊;鲁艳莉
2.麻痹性贝毒对海洋贝类的影响及加速贝毒净化的研究进展 [J], 傅萌;颜天;周名江
3.麻痹性贝毒和腹泻性贝毒的性质及检测技术研究探讨 [J], 高丽娜;马丹
4.麻痹性贝毒毒素研究Ⅱ.麻痹性贝毒毒素纯化产品的高效液相色谱和质谱分析 [J],
王云峰;于仁诚;李钧;颜天;周名江;
5.广州市售贝类麻痹性贝毒和腹泻性贝毒污染状况分析 [J], 杨莉;杨维东;刘洁生;江涛
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麻痹性贝类毒素的监测及脱毒方法研究
WTD standardization office【WTD 5AB- WTDK 08- WTD 2C】 同行评议组别 食品(农产品、水产品)加工与储藏
项目编号 Y305282
浙江省自然科学基金
申 请 书
申报类别: 一般项目 项目名称: 麻痹性贝类毒素的监测及脱毒方法研究
申 请 者: 欧昌荣 电 话: 依托单位: 宁波大学
通信地址: 浙江省宁波市江北区风华路818号,宁波大学,生命学院,31#信箱 邮政编码: 315211 E-mail : 申报日期: 2005-5-25
浙江省自然科学基金委员会 二OO五年制 基本信息 申请者信息
姓 名 欧昌荣 性别 男 出生日期 1974年03月21日 最终学位 博士 获学位年份 2003 职称 讲师 主要研究领域 海洋生物活性物质提取、分析、活性研究、水产加工与保鲜,食E-mail
电 话 个人网页 依托单位 宁波大学 证件类型 身份证 证件号码 申请者是否近三年调入在浙单位工作 是 调入时间 2003年07月 申请者曾主持的浙江省自然科学基金资助项目编号: 无
申请者正在主持的国家和省部资助经费在20万元及以上的研究项目名称、来源和研究期限: 无
项目基本信息
项目名称 麻痹性贝类毒素的监测及脱毒方法研究 申报类别 一般项目 研究属性 前瞻性应用基础研究 同行评议组别 农业科学及生物技术/食品(农产品、水产品)加工与储 依托基地名称 预计研究年限 2006年01月-2007年12月 总经费预算 万元 申请经费 万元 项目研究目标、内容和意义简介(限400字) 分析我省赤潮频发地区产毒海藻和毒化贝类中麻痹性贝类毒素(PSP)的组成和毒性,了解我省沿海PSP毒性及其分布情况;利用海洋生活性成分与PSP在建立的体系中作用,采用HPLC、酶联免疫法等方法检测作用后PSP结构和毒性的变化,筛选出能和PSP结合,从而改变其结构,降低甚至脱除其毒性的生物活性成分(根据PSP的作用机理和结构特点,结合申请者科研经历,目标活性成分已明确);利用得到的活性物质以不同的喂养方式处理含毒贝类和中毒的小鼠,检测分析其对贝类、小鼠对PSP的摄入,代谢的影响以及对小鼠中毒症状的缓解效果,从而确定PSP的脱毒方法,并推断其机理。 本项目研究能丰富贝毒相关研究的基础理论,为贝类净化和缓解中毒患者症状提供新思路,对提高水产食品安全性,从而促进水产养殖、水产加工和贸易的发展具有重要意义,能产生潜在的社会效益和经济效益,并能促进我国水产品加工与综合利用2006-2015年分阶段目标的顺利实现。 关键词(不超过4个) 麻痹性贝类毒素(PSP);脱毒;监测;
同行评议分组说明 水产品加工与保鲜技术
重点资助方向 农业资源产业生物技术研究 项目组主要成员 编号 姓名 出生日期 性别 职称 学位 单位名称 电话 项目分工 每年工作
时间(月)1 欧昌荣 1974年
03月21男 讲师 博士 宁波大学 负责人 10
2 杨文鸽 女 副教授 硕士 宁波大学 毒素提取 6 3 徐永健 男 讲师 博士 宁波大学 活性成分筛选 6 4 徐大伦 男 讲师 硕士 宁波大学 毒性分析 8 5 汤海青 女 助教 硕士 宁波大学 仪器分析 8 6 候温甫 女 硕士生 学士 宁波大学 动物试验 8 7 总人数 高级 中级 初级 博士后 博士生 硕士生 参加单位数 6 1 3 1 0 0 1 1
说明:1.个人介绍部分申请者必须填写,其他人员可以不填写; 2.高级、中级、初级、博士后、博士生、硕士生及参加单位数由申请者负责填报,总人数自动生成; 3.第一人必须是申请者,信息从前面自动读入,但每年工作时间必须手工录入。 个人介绍: 欧昌荣:欧昌荣,男,1974年3月出生,博士。 2000年获得中国海洋大学水产品贮藏与加工专业的硕士学位,2003年在同单位获得博士学位后,到宁波大学生命学院从事科研教学工作。在读期间,参与农业部渔业局重点项目“油异味成分分析与脱除方法研究”, 国家863项目“大型海藻―海带综合利用新技术的研究与开发”, 山东省科委项目“海洋农用生物制剂的研究”等项目,以此分别完成硕士、博士论文。同时参与山东省青年科学家基金资助项目“贻贝磷脂成分、活性研究”,“活性甲克质的应用研究”,“海洋底泥多氯联苯等含氯化合物的检测”等项目的研究。通过多年的科研,在海洋生物活性物质的制备、提取分离、分析,微量成分的检测分析方法方面有坚实的基础。目前共发表文章10多篇,获得国家发明专利一项。负责人具有扎实的科研基础和较强的科研创新能力,具有承担和完成重点课题的科研经验和组织管理能力。在本课题中负责实验方法的总体设计与实施。
近期发表的主要论文: 1.欧昌荣,薛长湖,汤海青,徐大伦。微生物发酵-膜分离法制备褐藻胶寡糖及其产物分析.微生物学报,2005:(2):309-311. 2.欧昌荣,汤海青。琼胶酶生产菌的筛选、鉴定及其酶学性质的初步研究.食品科学,2005,(6). 3.欧昌荣,薛长湖,汤海青,徐大伦。鱼油挥发性成分分析和脱除方法研究.中国水产科学,2005(4). Changrong et al。Changes in freshness indices and effects of high pressure processing on the kamaboko-forming ability of Saurida wanieso during ice and frozen storage. 水产学报,2005(2):246-251. 5.薛长湖,欧昌荣,李兆杰,赵雪,蔡跃飘。一种利用化学氧化制备褐藻胶寡糖的方法。专利,公开号:CN 1414002A。
主持项目: 1.褐藻胶寡糖的制备以及分析方法研究;编号:2003496;金额:万;学校人才基金; 2.新型杀菌技术在水产模拟食品加工中的应用;编号:XK200447;金额:万;学校重点学科科研基金; 3.水产品中麻痹性贝类毒素的毒性消除机理的研究;编号:2004A610014;金额:万;宁波市科技局博士基金重点项目;
申请经费预算 万元 计划开支项目名称 计算根据及理由 金额(万元)
1.信息费 资料查询、复印等
2.专题学术活动费
外出调研,参加学术会议差旅费
3.仪器和设备购置费
小型试验仪器、设备,实验耗材
4.能源材料费 实验水电消耗费用、实验原料、实验试剂、标准品
5.计划管理费 学校按照规定比例收取费用
6.人员费 学校规定范围内的临时用工,试验材料的采集等 注:开支范围和标准参见《浙江省省级科技项目经费管理暂行办法》(浙财教字[2002]20号)。 申请者承诺: 我保证: (1)申请书内容是真实的; (2)恪守科学道德,伦理道德的基本原则; (3)项目组成员知晓申请书内容,并自愿参与研究工作; (4)已如实填报申请者正在主持的国家和省部资助经费在20万元及以上的研究项目名称、来源和研究期限; (5)如果获得资助,我将履行项目负责人职责,严格遵守浙江省自然科学基金委员会的有关规定,切实保证研究工作时间,认真开展工作,按时报送有关材料。 若填报失实或违反规定,本人将承担全部责任。 签字: 日期: 项目依托单位承诺: 已按规定对申请人的资格和申请书内容进行了审核。申请项目如获资助,我单位保证对计划实施所需要的人力、物力和工作时间等条件给予保障,严格遵守浙江省自然科学基金委员会有关规定,督促项目组遵守科学道德和伦理道德的基本原则,督促项目负责人和本单位项目管理部门按照规定及时报送有关材料。 依托单位公章 日期 . 麻痹性贝类毒素监测及脱毒方法研究
1、项目研究意义 贝类毒素就是贝体内聚集的有害有机物质,它们是一些毒性很强的非蛋白毒素,是自然界毒性最强的一类物质,加热高温不能使之失活,食用后能使人中毒,甚至死亡。贝类毒素的种类很多,目前发现的主要有麻痹性贝类毒素(PSP)、腹泻性贝类毒素(DSP)、神经性贝类毒素(NSP)和记忆缺失性贝类毒素(ASP),不同种类的毒素,中毒的症状不尽相同。其中对人类危害性较大,世界范围分布最广,研究最多的是麻痹性贝类毒素(PSP:Paralytic shellfish poison)。
自从1888年和1928年Brieger和Meyer等分别从紫贻贝和加州贻贝中提取出了贻贝毒素以来,各国学者对贝毒进行了不同领域和侧面的研究,涉及毒素的种类、化学性质、成分,毒力及来源,贝毒和藻毒素之间以及藻毒素和细菌之间的关系、贝毒致毒的效应及作用机制,以及更为快速的简便有效的分析方法的确立等各个方面。根据近几年国外发表的近100篇关于贝类毒素研究文章来看,大多数主要集中在贝类毒素的监测报告以及能用于此目的的贝类毒素的快速,特异,灵敏的检测分析方法方面。检测分析方法上的进步,不仅能让我们及时检测水体、贝类中毒素的变化以进行安全预警和风险评估,另一方面也促进新毒素的发现毒素的消长、转移,毒素作用机理方面的研究的发展[1-2]。因此在赤潮发生频率越来越高,且难于避免的情况下,用于及时监测水体和贝内毒
素情况的贝类毒素的快速检测技术仍是贝类毒素研究的热点之一。
从发展趋势上看,越来越多的研究者将注意力转移到贝类毒素在贝体类的转化,消长等方面,以期为含毒的贝类脱毒,中毒患者缓解症状提供理论依据[3-4]。目前主要报道的贝体内脱毒的方法有将贝类转移至清洁水体使其自净,并喂养无毒海藻、饥饿处理法、臭氧法、双氧水处理法,以及加热烹调、罐藏、除去贝体内毒素高的部位等加工方法[5-9]。对含毒素水处理有活性炭处理、臭氧法、双氧水处理等方法[10]。目前对PSP中毒没有特效解药,只是对症治疗,采取催吐等方法将毒素排除,也有报道利用服用活性炭