白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子EGFR和TGF&beta1的影响

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畜 牧 兽 医 学 报
4 4卷
动物 腹 泻 是 兽 医 临 床 常 见 的 高 致 死 率 疾 病 之 一, 尤其是 幼 畜 、 幼雏腹泻在中国许多地区普遍流 , 和大肠 行。猪 轮 状 病 毒 ( P o r c i n er o t a v i r u s P R V) 可 杆菌混合感染是引 起 仔 猪 严 重 腹 泻 的 病 原 之 一 , 呕 吐、 脱 水、 酸碱平衡紊乱为特征的 引起仔猪厌食 、 急性肠道传染病 , 严重危害养猪业 。 白头翁是毛 茛 科 植 物 白 头 翁 P u l s a t i l l ac h i n e n ) 性寒 , 味苦 , 《 伤寒蕴要 》 s i s( B e . R e e l的干燥根 , g g 中称白头翁为 “ 热毒下 痢 紫 血 鲜 血 者 宜 之” , 其具有 清热解毒 、 凉血止 痢 的 功 效 , 主 治 热 毒 血 痢、 湿热肠
收稿日期 : 2 0 1 2 0 9 0 3 基金项目 : 河北省科技支撑计划项目 ( ) 0 7 2 2 0 4 0 1 D 0 1 作者简介 : 刘 颖( ) , 女, 河北保定人 , 硕士研究生 , 主要从事畜禽病理生理研究 , : 1 9 8 6 E m a i l s u s a n r e e n 7 8 9 0@1 2 6. c o m g 董世山 , 博士 , 教授 , : E m a i l d o n s h i s h a n@1 6 3. c o m 通信作者 : g
的作用 , 但是对其作用机制
尤其是 对 黏 膜 修 复 因 子 调 控 的 研 究 尚 的研究较少 , 未见报道 , 而黏 膜 修 复 是 腹 泻 治 疗 的 关 键 。 本 试 验 通过猪轮状病毒和大肠杆菌混合感染小鼠建立腹泻 模型 , 对黏膜修复因子 E G F R和T G F 1的表达情 β 以期揭 示 白 头 翁 素 防 治 腹 泻 的 作 用 机 况进行分析 , 制。
畜牧兽医学报 2 ( ) : 0 1 3, 4 4 3 4 7 5 4 8 0
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白头翁素对腹泻小鼠肠黏
刘 颖, 徐倩倩 , 薛晓阳 , 褚 军, 肖静静 , 陈立功 , 董世山
1] 黄[ 。 白头翁素是 白 头 翁 的 主 要 有 效 成 分 , 具有显
肉汤培养基中 , 置于4 ℃冰箱 3 7 ℃振荡培养1 6h, 备用 。 1. 6 白头翁素的制备 取白头翁 生 药 根 1 , 粉碎后加蒸馏水5 0 0g 0 0 于旋转蒸发仪上 减压 蒸馏 , 至无 浓 m L 浸泡 3 0m i n, [ 4] 的刺激 味 。 馏 液冷 却 , 加入1 用 氯仿 分 5% N a C l , 蒸发回收氯 仿 后 得 黄 色 油 状 物 即 原 白 头 翁 次萃取 , 素粗品 。 室温放置数小时 , 结晶形白头翁素 , 收集所 得的原粗制 结 晶 品 , 溶 于 沸 腾 的 酒 精 中, 滤除不溶 物, 于旋转 蒸 发 仪 上 蒸 馏 滤 液 , 白头翁素又结晶析 出, 氯仿中重结 晶 得 白 头 翁 素 纯 品 。 用 蒸 馏 水 将 白 头翁素配成 1m ·m L-1 溶液备用 。 g 1. 7 动物处理及分组 随机选取 1 2 0只2 1 日龄 1 0~1 5g 清 洁 级 I C R 小鼠 , 雌雄各半 , 平均分为预防组 、 治疗组 、 自愈组和
( 河北农业大学动物医学院 , 河北省兽用生物制品工程技术研究中心 , 保定 0 ) 7 1 0 0 1 摘 要 :白头翁素是白头翁的主要成分 , 对腹泻具有显著的 防 治 效 果 。 本 试 验 利 用 猪 轮 状 病 毒 和 大 肠 杆 菌 混 合 感 染建立腹泻模型 , 通过 免 疫 组 织 化 学 方 法 和 R T P C R 方法研究白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子 E G F R和 揭示白头翁素防治腹泻的肠黏膜修 复 机 制 。 结 果 显 示 : 小 鼠 腹 泻 初 期, 自 愈 组、 治疗组和预防 T G F 1 表达的影响 , β 组黏膜修复因子 E 其中预防组较空白对照组差异显著 ( ) , G F R和T G F 1 的蛋白表达量均有所升高 , 犘<0. 0 5 E G F R β 和T 且差异极显著 ( ) 。 腹泻 后 期 , 表达量逐渐下降直至 G F 1 的 mR NA 表达量较空白对照组也显著升高 , 犘<0. 0 1 β 正常 。 试验结果表明 : 白头翁素对轮状病毒和大肠杆菌混合感染性腹泻良好的预 防 效 果 可 能 与 其 调 节 黏 膜 修 复 因 从而促进肠黏膜的修复 。 子E G F R和 T G F 1 的表达有关 , β 关键词 :白头翁素 ; 小鼠 ; 腹泻 ; 黏膜修复 ; 表皮生长因子受体 ; 转化生长因子 β 1 中图分类号 : ( ) S 8 5 3. 7 4 文献标志码 : A 文章编号 : 0 3 6 6 6 9 6 4 2 0 1 3 0 3 0 4 7 5 0 6
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, , , , , L I UY i n X UQ i a n i a n X U EX i a o a n C HUJ u n X I A OJ i n i n g q y g g j g , C H E NL i o n D O N GS h i s h a n g g ( 犎 犲 犫 犲 犻 犈 狀 犻 狀 犲 犲 狉 犻 狀 狀 犱犜 犲 犮 犺 狀 狅 犾 狅 犲 狊 犲 犪 狉 犮 犺犆 犲 狀 狋 犲 狉狅 犲 狋 犲 狉 犻 狀 犪 狉 犻 狅 犾 狅 犻 犮 犪 犾犘 狉 狅 犱 狌 犮 狋 狊, 犵 犵犪 犵 狔犚 犳犞 狔犅 犵 , , , 犆 狅 犾 犾 犲 犲 狅 犲 狋 犲 狉 犻 狀 犪 狉 犲 犱 犻 犮 犻 狀 犲 犎 犲 犫 犲 犻犃 狉 犻 犮 狌 犾 狋 狌 狉 犲犝 狀 犻 狏 犲 狉 狊 犻 狋 犪 狅 犱 犻 狀 7 0 0 0 1 犆 犺 犻 狀 犪) 犵 犳犞 狔犕 犵 狔 犅 犵0 : , 犃 犫 狊 狋 狉 犪 犮 狋 A n e m o n i n i s t h em a i nc o m o n e n to fp u l s a t i l l a i th a sc o n s i c u o u sc o n t r o l e f f i c i e n c n p p yo d i a r r h o e a . T h ea i mo f t h i s s t u d a s t oc l a r i f t h e i n t e s t i n a lm u c o s a r e a i rm e c h a n i s mo f a n e m o yw y p n i no nd i a r r h o e a .T h ee x e r i m e n te s t a b l i s h e dt h ed i a r r h o e am o d e lb o r c i n er o t a v i r u s( P R V) p yp , a n d 犈. 犮 狅 犾 犻 i mm u n o h i s t o c h e m i s t r n dR T P C Rw e r eu s e di nt h es t u d .T h er e s u l t ss h o w e d ya y : , t h a t I nt h ep r e l i m i n a r t a eo fd i a r r h o e a t h ep r o t e i no fT G F 1a n dE G F Ri ns e l f h e a l i n ys g g β , r o u t r e a t m e n tg r o u n dp r e v e n t i o ng r o u e r ea l l h i h e r t h a nt h a to f c o n t r o l r o u a n dt h e g p, pa pw g g p ) r e v e n t i o ng r o u a ss i n i f i c a n t l i h e r t h a nt h a to f c o n t r o lg r o u 犘<0. 0 5 . T h ee x r e s s i o n p pw g yh g p( p o fE G F R mR NAa n dT G F 1mR NAi ns e l f h e a l i n r o u t r e a t m e n tg r o u n dp r e v e n t i o ng r o u gg p, pa p β ( ) w e r ea l l s i n i f i c a n t l i h e r t h a nt h a t o f c o n t r o l r o u 0 1. I nt h e l a t e r s t a eo f d i a r r h o e g yh g g p 犘<0. g , a t h e e x r e s s i o no fE G F Ra n dT G F 1g r a d u a l l e c r e a s e du n t i l t o t h en o r m a l c o n d i t i o n . T h e r e p yd β s u l t ss u e s t et h a tt h em e c h a n i s mo fa n e m o n i nc o u l ds i n i f i c a n t l r e v e n td i a r r h o e ac a u s e db g g g yp y