植物乳杆菌培养、筛选分离与鉴别

耐酸耐胆盐益生乳酸菌的筛选与鉴定吕源玲【摘要】为了筛选出人源性的耐酸、耐胆盐的益生菌,利用含胆盐(0.2%)的5种选择性培养基(TPY、BHI、MRS、SL、乳酸杆菌选择性琼脂培养基),以溴甲酚紫为酸性指示剂,从婴儿粪便中初步筛选出42株耐胆盐的乳酸菌.根据菌株在pH5.0,4.0,3.5的MRS液体培养基中培养时OD值的变化情况,筛选出3株具有较好酸耐受性的菌株.然后通过平板菌落计数方法测定筛选出的3株菌在pH 3.0条件下0~3 h存活率的变化情况,筛选出对酸和胆盐耐受能力最强且最稳定的菌株经16S rDNA分子生物学鉴定为Lactobacillus plantarum.该菌能够作为潜在的益生菌菌株用于后期深入地挖掘其益生功能.%In order to screen human probiotics with the acid and bile resistant abilities, infant stool diluents were spread on five different selective ager plates including TPY, BHI, MRS and SL in this study.42 strains of lactic acid bacteria with certain bile-tolerance were isolated by selective ager media for lactobacilli, supplemented with bile salt (0.2%) and bromcresol purple as an acid indicator.3 strains of lactic acid bacteria with high acid tolerance were further selected from 42 strainsaccording to biomass of their cultured in the MRS liquid medium with pH 5.0, pH 4.0 and pH 3.5 respectively.Then the viability of these 3 strains in MRS medium with pH 3.0 was measured by plate colony count technique, resulting in one of them with the highest acid-and bile salt-tolerance.Then this strain was subsequently identified using 16S rRNA-based molecular biological approaches.The strain was molecularlyidentified to ctobacillus plantarum.The strain could be used as a potential probiotic strain for late digging its probiotic function.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2017(033)006【总页数】4页(P42-45)【关键词】乳酸菌;耐胆盐;耐酸;筛选;鉴定【作者】吕源玲【作者单位】江南大学食品学院, 江苏无锡 214122【正文语种】中文作为人和动物肠道的正常菌群的益生乳酸菌，具有许多益生功效[1]。

植物乳杆菌HW1对大肠杆菌感染肉鸡生长性能和肠道健康的影响目录一、内容概览 (2)1. 研究背景与意义 (2)2. 相关研究进展概述 (3)二、实验材料与方法 (5)1. 实验动物与分组 (6)2. 肉鸡饲养管理 (7)3. 植物乳杆菌HW1的培养与准备 (8)4. 大肠杆菌菌株的培养与准备 (9)5. 实验设计 (10)6. 样品采集与分析方法 (10)三、结果与分析 (11)1. 植物乳杆菌HW1对肉鸡生长性能的影响 (12)生长速度 (13)体重增长 (14)食耗量 (15)2. 植物乳杆菌HW1对肉鸡肠道健康的影响 (15)肠道菌群变化 (17)肠道黏膜形态 (18)免疫器官发育 (19)3. 植物乳杆菌HW1对大肠杆菌感染肉鸡生长性能和肠道健康的影响及交互作用20感染组与对照组比较 (21)植物乳杆菌HW1干预组与感染组比较 (22)植物乳杆菌HW1与大肠杆菌的互作效应 (23)四、讨论 (24)1. 植物乳杆菌HW1的益生特性及其对肉鸡生长性能的改善机制..252. 植物乳杆菌HW1对肉鸡肠道健康的保护作用及其机制 (26)3. 植物乳杆菌HW1与大 (28)4. 植物乳杆菌HW1在肉鸡肠道中的定植与繁殖规律 (29)五、结论与展望 (31)1. 结论总结 (31)2. 研究创新点 (32)3. 展望未来研究方向与应用前景 (33)一、内容概览本文旨在研究植物乳杆菌HW1对大肠杆菌感染肉鸡生长性能和肠道健康的影响。

文章首先介绍了研究背景，包括肉鸡养殖业的重要性、大肠杆菌感染的普遍性以及其对肉鸡产业造成的经济损失。

文章阐述了研究目的，即探讨植物乳杆菌HW1作为一种潜在的生物防控剂，对改善肉鸡生长性能和肠道健康的作用机制。

本文主要内容包括：探究植物乳杆菌HW1对肉鸡肠道健康的积极作用，包括肠道形态、微生物群落、免疫功能等方面的变化。

通过实验数据验证植物乳杆菌HW1在防控大肠杆菌感染方面的实际效果。

乳酸菌的鉴定吲哚试验1）.试管标记：取装有蛋白胨水培养基的试管2支，分别标记乳酸菌和空白对照。

2）.接种培养：以无菌操作分别接种少量菌苔到标记乳酸菌的试管中，标记有空白对照的不接种，置37摄氏度恒温箱中培养24~48小时。

3）.观察记录：在培养基中加入乙醚1~2 ml ,经充分振荡，使吲哚萃取至乙醚中，静置片刻后乙醚层浮于培养液的上面，此时沿管壁缓慢加入5~10滴吲哚试剂，如有吲哚存在，乙醚层呈玫瑰色，此为吲哚试验阳性反应，否则为阴性反应。

糖发酵试验1）.试管标记：取分别装有葡萄糖，蔗糖发酵培养液试管各2支，每种糖发酵试管中分别标记乳酸菌和空白对照。

2）.接种培养：以无菌操作分别接种少量菌苔至以上各相应试管中，每种糖发酵培养液的空白对照均不接菌。

将装有培养液的杜氏小管倒置试管中，置37摄氏度恒温培养箱中培养24小时，观察结果。

3）.观察记录：与对照管比较，若接种培养液保持原由颜色，其反映结果为阴性；如果培养液呈黄色，反映结果为阳性。

培养液中的杜氏小管内有气泡为阳性反应，杜氏小管内没有气泡为阴性反应。

1.2.3 乳酸的检测选用已经分离的菌种做小型发酵实验，取发酵液的上清液约10 ml于试管中，加入10%硫酸1 ml ,再加2%高锰酸钾 1 ml ,此时乳酸转化为乙醛，把事先在含氨的硝酸银溶液中侵泡的滤纸条搭在试管口中，微火加热试管至沸，观察滤纸变化。

1.结果和分析2.1 乳酸菌的分离提纯在平板上出现了圆形稍扁平的黄色菌落，周围培养基变为黄色，初步定为乳酸菌⑴，取出少量在显微镜下观察到了链球状和杆状两种形状（如图一2.2乳酸菌的鉴定该菌种的菌落为圆形稍扁平的黄色菌落，有杆状和链球状两种形状。

在吲哚试验中，加入菌种的试管无任何变化，证明为阴性反应（如图二）。

说明该菌不具有分解色氨酸产生吲哚的能力。

也说明此菌种不是大肠杆菌，因为大肠杆菌的吲哚试验证明为阳性。

在糖发酵试验中，在加入葡萄糖的发酵培养液中加入菌种后，培养液变为黄色，反应结果为阳性，且杜氏小管内无气泡（如图三）；加入蔗糖的发酵培养液中加入菌种后的反应结果也为阳性且杜氏小管内无气泡（如图四）。

猪源乳酸杆菌的分离鉴定及生物学特性分析苗玉和;刘岩;闫艳丽;郭宇;舒秀伟【摘要】Lactobacillus can replace antibiotics for the prevention and treatment of bacterial diarrhea. In order to obtaining the candidate strains of probiotics, 5 Lactobacillus strains were isolated from piglets intestine and were analyzed by antimicrobial activity, pH tolerance, bile -salt resistance, digestive enzyme resistance, etc. One strain named LY7 that can inhibit E. coli, Salmonella, Staphylococcus aureus and other bacteria was identified. The strain was defined eventually as Lactobacillus johnsonnii through PCR assay. The bionomics analysis showed that it was as a candidate strain for probioties.%乳酸杆菌制剂可以替代抗生素，用于预防和治疗细菌性腹泻。

为获取可作为微生态制剂的候选菌株，从健康仔猪肠道分离到5株乳酸杆菌，经抑菌试验、生长曲线测定、耐酸、耐胆盐、耐胰酶试验等，筛选到1株对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌有较好的抑制作用，对低pH值、高胆盐、胰酶均有一定耐受能力的乳酸杆菌，命名为LY7。

经PCR鉴定，该菌株为约氏乳杆菌。

植物乳杆菌分类名-概述说明以及解释1.引言1.1 概述:植物乳杆菌是一种益生菌，广泛存在于自然界中的植物表面、土壤以及人和动物的肠道内。

它具有许多益生作用，能够维持肠道菌群的平衡，增强免疫力，抑制有害菌的生长，促进营养物质的吸收等。

随着人们对健康意识的提高，植物乳杆菌在食品、保健品甚至药品中的应用越来越广泛。

本文将通过对植物乳杆菌的特点、分类以及在人体健康中的作用进行探讨，以期能更全面地了解植物乳杆菌在维持人体健康中的重要性，并展望未来的研究方向。

1.2 文章结构:本文分为引言、正文和结论三个部分。

在引言中，将介绍植物乳杆菌的概述、文章结构和目的；在正文部分，将详细讨论植物乳杆菌的特点、分类以及在人体健康中的作用；最后在结论中，将总结植物乳杆菌的重要性，展望未来研究方向，并得出结论。

通过这样的结构，读者可以全面了解植物乳杆菌的分类名及其在人体健康中的重要性。

1.3 目的本文旨在探讨植物乳杆菌的分类名，通过对其特点、分类和在人体健康中的作用进行深入分析，达到以下目的：1. 探究植物乳杆菌在微生物学领域中的重要性和作用；2. 对植物乳杆菌进行分类，了解其不同种属和特征；3. 探讨植物乳杆菌在人体健康中的作用及机制；4. 为进一步研究植物乳杆菌的作用提供参考和指导；5. 增进对植物乳杆菌的了解，促进其在医学和保健领域的应用。

2.正文2.1 植物乳杆菌的特点植物乳杆菌是一种益生菌，属于乳杆菌的一种。

与一般的益生菌相比，植物乳杆菌具有以下特点：1. 耐受力强：植物乳杆菌具有较强的耐受性，可以在酸性环境中生存并繁殖，因此可以在胃酸的环境下到达肠道发挥功效。

2. 对人体有益：植物乳杆菌可以促进肠道菌群的平衡，增加有益菌的数量，抑制有害菌的生长，从而改善消化系统的健康。

3. 调节免疫系统：植物乳杆菌可以刺激机体的免疫系统，增强免疫力，预防感染疾病的发生。

4. 促进营养吸收：植物乳杆菌可以帮助机体更好地吸收营养物质，提高食物的利用率，增强身体的营养状况。

植物乳杆菌ZJQ的鉴定及其细菌素的生化特性鲁渊;宋达峰;顾青【摘要】从婴儿粪便中分离得到一株能产抑菌物质的乳酸菌菌株.形态学、生理生化和16S rDNA序列分析表明该菌为一株革兰氏阳性植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum ZJQ).胰蛋白酶和蛋白酶K等酶学试验分析证明该菌所产抑菌物质为细菌素,初步纯化表明,该细菌素经100℃处理后仍有80%抑菌活性,具有良好的热稳定性;可抑制藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌等,具有较广的抑菌谱.【期刊名称】《浙江农业学报》【年(卷),期】2010(022)002【总页数】5页(P224-228)【关键词】植物乳杆菌;细菌素;抑菌物质【作者】鲁渊;宋达峰;顾青【作者单位】浙江工商大学,食品与生物工程学院,浙江,杭州,310035;浙江工商大学,食品与生物工程学院,浙江,杭州,310035;浙江工商大学,食品与生物工程学院,浙江,杭州,310035【正文语种】中文【中图分类】Q393.11细菌素是由某些细菌在代谢过程中通过核糖体合成产生的一类具有抑菌生物活性的蛋白质或多肽，其抑菌范围不局限于同源菌，产生菌对其细菌素有自身免疫性。

乳酸菌是一种广泛应用于食品、饲料、医药等工业的益生菌，主要包括乳杆菌（Lactobacillus）、乳球菌（Lactococcus）、明串珠菌（Leuconostoc）、片球菌（Pediococcus）、链球菌（Streptococcus）、肠球菌（Enterococcus）、双歧杆菌（Bifidobacterium）和肉食杆菌（Carnobacterium）等属。

许多乳酸菌代谢可以产生有机酸、细菌素、过氧化氢、双乙酰等多种天然抑菌物质，具有维持肠道内菌群平衡，提高机体免疫力，促进营养物质吸收等多种功能［1］，是FDA认定的食品级安全微生物。

到目前为止，已在8个不同属的乳酸菌中发现了多种细菌素。

加入WTO后，为了满足国际市场对农产品的高品位、高质量、优品种和无毒无害无污染农产品的要求，我们需要研发绿色、天然的饲料添加剂。

Food and Fermentation &Technology第57卷（第2期）Vol.57，No.2收稿日期：2020-11-20基金项目：甘肃农业大学盛彤笙科技创新基金项目（GSAU-STS-1741）作者简介：李爱霞（1989-），女，硕士，讲师。

研究方向：酿酒微生物。

葡萄酒中植物乳杆菌的鉴定及其耐受性分析李爱霞，张文芳，闫金莲（甘肃农业大学食品科学与工程学院，甘肃兰州730070）摘要：本论文对4株分离自甘肃、宁夏产区葡萄酒中的乳杆菌进行鉴定并通过调整改良MRS 培养基分析植物乳杆菌对酒精浓度、pH 和SO 2浓度的耐受性。

结果表明：16S rDNA 鉴定得到3株植物乳杆菌，在单一因素影响下，3株菌在pH 3.0条件下有良好生长，在16%vol 酒精浓度可生长，110mg/L SO 2浓度下可生长。

在综合因素影响下，3株菌在所设置的9组处理下都可生长，其中在酒精浓度10%vol ，pH 3.8，SO 2浓度45mg/L 条件下可良好生长，在酒精浓度14%vol ，pH 3.2，SO 2浓度45mg/L 条件下可生长。

关键词：植物乳杆菌；葡萄酒；耐受性中图分类号：TS261.1文献标识码：A 文章编号：1674-506X （2021）02-0091-0006Identification and Tolerance Analysis of Lactobacillus plantarum of WineLI Ai-xia ，ZHANG Wen-fang ，YAN Jin-lian（College of Food Science and Engineering ，Gansu Agricultural Univercity ，Lanzhou Gansu 730070，China ）Abstract ：In this study ，4Lactobacillus isolated from wine production area of Gansu and Ningxia province were identified.Then ，Lactobacillus plantarum were used as the test strains to investigate the tolerance of pH value ，alcohol and SO 2concentration in modified MRS medium.The 16S rDNA analysis showed that there were 3Lactobacillus plantarum .Analysis of tolerance experiments showed that 3Lactobacillus plantarum were able to grow in modified MRS medium under different conditions （pH 3.0alcohol content 16%vol ，SO 2concentration 110mg/L ）.Under the compound conditions ，all 3strains could grow and proliferate well of pH 3.8，alcohol content 10%vol ，SO 2concentration 45mg/L.All 3strains could be able to grow in the presence of pH 3.2，alcohol content 14%vol ，SO 2concentration 45mg/L.Key words ：Lactobacillus plantarum ；wine ；tolerancedoi ：10.3969/j.issn.1674-506X.2021.02-013苹果酸-乳酸发酵（Malolactic fermentation ，MLF ）是在葡萄酒酿造过程中由乳酸菌启动的继酒精发酵后的二次发酵。

开菲尔粒中一株高加索酸奶乳杆菌的分离及鉴定Identification of a Strain of Lactobacillus Kefiri Isolated from Kefir Grains摘要目的：确从黑龙江民间流传使用的开菲尔粒中分离到一株优势乳酸菌，并命名为 HUCM 101，经形态学及 16SrR NA 序列分析，鉴定为高加索酸奶乳杆菌（Lactobacillus kefiri），其 16S rR NA 基因序列在国际 Genbank 数据库中的序列注册号为 KC845576。

关键词：开菲尔；高加索酸奶乳杆菌；分离；鉴定Abstract:Objective: One predominant lactic acid bacteria named HUCM 101 was isolated from the kefir which was used popularlyamong folk families of Heilongjiang, China. This bacteria was identified to be Lactobacillus kefiri by phenotypical characteristics and 16SrRNA sequences. The Genbank accession number of 16S rRNA sequences of HUCM 101 strain is KC845576.Keywords: Lactobacillus kefiri; isolation; identification开菲尔是原产自高加索地区的一种传统酒精性发酵乳饮料，至今已有数千年的饮用历史。

开菲尔是其英文名称Kefir 的音译，Kefir 源自土耳其语“Kef”，寓有安康、安宁、幸福之意，并有爽快的味道的意思[1]。

由于开菲尔具有多种特殊的保健功效，如抗肿瘤[2]、抗突变[3]、抗氧化[3,4]、抗过敏[5]、降血压[6]、降胆固醇[7]、调节机体免疫力[8]等，且风味和口感独特，因而深受许多国家和地区消费者的喜爱，在我国的东北、内蒙古、新疆和西藏等地区的民间家庭也有饮用 Kefir 的历史，但至今国内仍未有商业化产品上市。