D-半乳糖诱导小鼠原代皮肤成纤维细胞衰老模型的建立

湖 南 中 医 药大 学生 物 化 学 教 研 室 ， 南 长 沙 ４ ０ ０ 湖 １ ２８
摘要 ：目的
观察还 少丹对 Ｄ 半乳糖致衰老模型小 鼠免 疫功能的影响， 一 并探 讨其延缓 衰老的机 制。方法
将 小
鼠随机 分成对照组 、模 型纽和还 少丹低 、高剂量组 。采用皮 下注射 Ｄ 半乳糖溶液制备亚急性衰老模型， 一 还少 丹低 、
ａ ｍｉｉｔｒｄ ｔ ｈ ｒａｍｅ ｔｇ ｏ ｐ ， ｏ ｔｏ ｏ ｐ ａ ｄ ｍｏ ｅ ｏ ｐ ｗｅｅｇｖ ｎ Ｎ ． ｆｅ ｅ ｓ ｔ ｅ ｄ ｎ ｓｅ ｅ ｏｔ ｅｔｅ ｔ ｎ ｕ ｓ ｃ ｎｒ ｌ ｕ ｎ ｄ ｌ ｕ ｒ ｅ Ｓ Ａｔｒ６ｗｅ ｋ ，ｈ ｒ ｒ ｇ ｒ ｇ ｉ ｉｄ ｘｏ ｌｅ ｄｔ ｙ ｓ ｔ ｅｓ ｌｅ ｖ ｌ ｆｎ ｅｌｕ ｉ 一 Ｉ－ ） ｎ ｐ ｏｙ ｅｐ ｏｉ ｒ ｔ ｎａ ｔ ｉ ｎ ｅ ｆ ｐｅ ｎ ａ ｈ ｍｕ ，ｈ ｐｅ ｎ ｌ ｅ ｔｒ ｋｎ ２（ ２ ａ ｄ Ｔｌ ｓ ｎ ｅ ｏｉ ｅ Ｌ ｍ ｙ ｈ ｃ ｔ ｒｌｅａ ｏ ｃ ｖｔ ｆ ｉ ｉ ｙ
・
３ ・ ６
Ｃｈｉ ｓ Ｊ ｕｒ ｎｅ ｅ ｏ ｎａｌ ｏｆ ｎｆ ｒ ａｔｉ ｎ ｎ Ｃ Ｉ ｏ ｍ ｏ ｏ Ｔ Ｍ
Ｍａ ２ １ Ｖｏ１ ９ ｏ ５ ｙ ０２ ．１ Ｎ
．
还少丹对 Ｄ 半乳糖致衰老模 型小 鼠免疫功能 的影 响 一
胡梅， 刘群 良， 张波， 谭峰， 程莉娟
高剂量组给予相应剂量的还 少丹水煎液灌 胃， 照组 和模 型组给 予等量 的蒸馏水灌 胃， 对 连续 ６周。测定各组 小鼠胸腺
指数和脾脏指数 、脾 组织 Ｉ一 水平及 Ｔ 巴细胞 的增殖活性。结果 Ｌ２ 淋 与对 照组 比较 ， 模型组小鼠胸腺和脾脏指教 、

西安源森生物试验室: 复方当归提取物对D-半乳糖衰老模型小鼠皮肤抗氧化作用最新调查结果显示, 在含有抗氧化作用化妆品中, 含复方当归提取物产品显著更受女性消费者欢迎, 其原因在于, 当归本身所含有除皱、祛斑和美白功效在传统中医药领域已深受认同。

然而, 复方当归提取物可用作皮肤抗氧化具体原理是什么呢？此次试验, 西安源森生物试验室将针对此疑问, 选择优质含复方当归提取物乳、面膜等多个类型护肤品, 共同作用于D-半乳糖衰老模型小鼠皮肤, 测定其对小鼠皮肤超氧化物和含水量影响。

一、试验目、材料和方法【试验目】: 含复方当归提取物护肤品对皮肤抗氧化作用。

【试验方法】: 测试含复方当归提取物护肤品对D- 半乳糖衰老模型小鼠皮肤羟脯氨酸（Hyp）、超氧化物歧化酶（SOD）以及皮肤含水量影响。

【试验对象】: ICR 3 月龄小鼠30 只。

【试验仪器】: FA/JA型电子天平, DY89-1 型电动玻璃匀浆机, 752N 型紫外分光光度计。

【试验用试剂】: 超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒, 羟脯氨酸（Hyp）试剂盒, 考马斯亮蓝蛋白测试盒, D- 半乳糖。

【受试药品】: 复方当归提取物由西安源森生物制剂中心制备。

DGCC为清洁乳、按摩霜、成型面膜及滋润霜, 由西安源森广州产品研究中心监制。

【试验步骤】:1. 动物分组、造模及给药:将30只小鼠随即分为三组, 每组10只。

正常对照组: 天天小鼠颈背部皮下注射等容量生理盐水;D-半乳糖组: 天天给小鼠颈背部皮下注射12.5% D- 半乳糖（1 000mg/kg）;DGCC 组: 天天小鼠颈背部皮下注射12.5% D- 半乳糖（1000mg/kg）, 并用剃毛器剃去背部被毛, 暴露大小约2cm×3cm 皮肤, 用DGCC 清洁乳涂抹和清水清洗, 再用DGCC面膜敷贴于暴露部位30min, 然后用DGCC 按摩膏按摩1min, 最终外涂DGCC 滋润霜。

2. 衰老小鼠皮肤SOD 活力和皮肤总羟脯氨酸含量测定:42天后, 将各组小鼠同时处死, 取背部脱毛部位皮肤组织块, 经预冷生理盐水漂洗, 除去皮下脂肪及结缔组织, 用滤纸拭干, 取0.5g置10ml 烧杯, 加预冷生理盐水, 眼科剪剪碎组织块后, 倒入匀浆管中, 加预冷生理盐水至5ml, 用电动玻璃匀浆机制成10%组织匀浆（在冰水中进行）, 然后反复冻融3 次, 其完全破碎, 细胞内容物完全游离液相中。

d半乳糖模型大鼠脑胃肝大肠小肠的线粒体和细胞浆中超氧化物歧化酶sod脂质过氧化物丙二醛mda过氧化氢酶cat黄嘌呤氧化酶xod过氧亚硝基onoo乳糖后模型组大鼠各脏器自由基的含量在细胞浆变化特点如下sod在脑大肠中显著降低胃和肝显著增加小肠变化不大
・２００ｌ・
Ｎｕｔｓ
Ｒｅｓ。１９９２；４１（５）：２８６－９１． Ｓ．研吐仆ｅ Ｍａｎｃｈｅｓｔｅｒ
ｔｉｖｉｔｉｅｓ
ｔｉｏｎ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ
ＳＣ，Ｃａｒｒｉｅｒｉ ＫＶ，Ｊ帅ｓｏｎ ＢＳ．以０２．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ
ｓｔａｔｕｓ
ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ
ａｎｄ ｄｙｓｐｎｅａ
ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆｔｈｅ ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ［Ｊ］．Ｈｅａｒｔ ｈＩｌｇ，
鼠注射Ｄ哔乳糖后，模型组大鼠各脏器自由基的含量在细胞浆
变化特点如下，ＳＯＤ在脑、大肠中显著降低，胃和肝显著增加， 小肠变化不大；ＭＤＡ肝脏中含量降低，脑中升高，胃、大肠、小 肠变化不大；ＣＡＴ在大肠中降低，脑、肝脏、小肠内明显升高，胃
ｌ＿
逋讯作者：魏敏杰（１９６３．），女，教授，博士生导师，主要从事分子药理学
中的含量无太大变化；ＸＯＤ在胃、肝中降低，大肠和小肠中升 高，其中小肠中升高更明显，脑内含量变化不大；过氧亚硝基： 脑和大肠降低，肝脏含量升高，胃、小肠变化不大。在线粒体 中，各自由基的变化归纳如下，ＳＯＤ：脑・、大肠的含量大大降低； 肝升高，胃和小肠变化不大；ＭＤＡ：脑、胃、肝都升高；ＣＡＴ：胃、 大肠升高，其他脏器变化不明显；ＸＯＤ：胃降低，脑、肝、大肠和 小肠均升高；过氧亚硝基：在脑、胃和肝脏的含量都降低，大肠 和小肠无显著变化，线粒体中的变化程度大于细胞浆。同时。 Ｄ・半乳糖处理组大鼠体内多种抗氧化酶活性下降，Ｎａ＋／Ｋ＋． ＡＴＰ酶（钠－钾泵）、Ｃａ“．ＡＴＰ酶（钙泵）、Ｎａ＋一ＡＴＰ酶（钠泵）、 Ｃａ２＋含量、一氧化氯（ＮＯ）、血管紧张素Ⅱ和胰岛素活性与正常 小鼠之间存在显著性差异，Ｚｎ“／Ｃｕ“比值也下降，主要脏器的 脂褐素、脂质过氧化物增多，皮肤羟脯氨酸含量降低。

脐带间充质干细胞对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老实验研究王翔;海泉;郑榆坤;赵令卉;申重阳;冯利娟;王小燕;张蓉【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2012(22)3【摘要】目的研究人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对D-半乳糖所致的亚急性衰老小鼠的抗衰老作用.方法对模型对照组和治疗组连续8周颈部皮下注射D-半乳糖(0.25 mg/10 g)以建立衰老模型,两周之后治疗组注射脐带间充质千细胞.检测脐带间充质干细胞治疗前后衰老相关指标:包括小鼠血清、肝组织、脑组织中的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量的变化.结果模型对照组与治疗组相比,SOD、CAT偏低,MDA含量偏高并且存在显著性差异(P≤0.05),与空白对照组相比,则存在极显著性差异(P≤0.01).结论脐带间充质干细胞能够显著改善D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的相关衰老指标,具有抗衰老作用.【总页数】5页(P21-25)【作者】王翔;海泉;郑榆坤;赵令卉;申重阳;冯利娟;王小燕;张蓉【作者单位】成都清科生物科技(集团)有限公司,四川成都610094;成都清科生物科技(集团)有限公司,四川成都610094;成都清科生物科技(集团)有限公司,四川成都610094;成都清科生物科技(集团)有限公司,四川成都610094;成都清科生物科技(集团)有限公司,四川成都610094;成都清科生物科技(集团)有限公司,四川成都610094;成都清科生物科技(集团)有限公司,四川成都610094;四川大学基础医学与法医学院,四川成都610041【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.茶氨酸对D-半乳糖衰老模型小鼠抗衰老作用的实验研究 [J], 刘显明;李月芬;李国平2.深海鲣鱼鱼油对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗衰老的作用 [J], 郑霖波;白冬;虞舟;张海玲;谢超3.草还丹、人参固本丸和二至丸对D-半乳糖\r致衰老模型小鼠抗衰老作用的研究[J], 方哲;陈素红;方慧;苏洁;吕圭源4.姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的抗衰老作用及其Keap1/Nrf2/ARE信号转导途径机制 [J], 段懿涵; 盛瑜; 徐健; 卢学春; 杜培革; 安丽萍5.富锗金针菇菌丝体对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗衰老作用研究 [J], 朱蕴兰;李亚楠;陈学红;陈宏伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

１ ２ 方 法 ．
实验期 间 各组 小 鼠均 自 由饮 食 。生 长 状 况 良 好， 未发 生意外损伤 和死亡 。实验开 始和结束 时 ， 各
组 小 鼠体重 无显著性 差异 （ ００ ） Ｐ＞ ．５ 。
２ ２ 抗 氧 化 指 标 测 定 ．
１２ １实 验 分组 将 １０只 小 鼠按体 重 随机 分 为 ５ ．． ０ 组， 分别为正 常对照 组 、 衰老模 型 组 、 剂 量 Ｔ 低 Ｐ组 、
１ 材料 和方法
１１ 材料 ．
的其 余 各 组 每 日腹 腔 注 射 Ｄ 一半 乳 糖 １０ｍ ２ ｇ・ ｋ ‘， ｇ 。连续 ８周 ； 常 对 照 组 每 日腹 腔 注 射 生 理盐 正 水 。同时 ， 、 、 Ｔ 低 中 高 Ｐ剂 量 组 每 日分 别 灌 胃 Ｔ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱＰ
１０ ２ ０和 ４ ０ｍ ｋ ～， ０ 、０ ０ ｇ・ ｇ 连续 ８周 ， 常对 照组 和 正 衰老模 型组 每 １ 胃生 理盐 水 ， ３灌 自由进食 、 水 ， 饮 室 温为 ２ ℃左 右 。末 次给 药 后 ， 体 质量 ， 眼球 取 ０ 称 摘 血， 处死 小 鼠。离 心 取血 清 ， 心 、 准 确称 重 ， 将 脑 按 １９体积加入 冰生理盐 水 ， ℃匀浆 ， 心后取 上 清 ， ： ４ 离 按试剂 盒说 明测 定心 组织 匀浆 中 Ｓ Ｄ活力及 Ｍ Ａ Ｏ Ｄ 含量 ， 织匀浆 中 Ｇ Ｈ—Ｐ 脑组 Ｓ ｘ活力及脂褐 质含量 。 １２ ３统 计学处理 数 据 以均数 ±标准差 表示 ， ．． 采用 Ｓ Ｓ １ ５统计学 软件进行方 差分析 ， 小 于０ ０ Ｐ Ｓ１ ． Ｐ值 ．５ 有统计学 差异 。
氨 基酸 和 生 物资 源
２０ ，０ ４ ５ ５ ０ ８３ （ ）：２～ ４

臭氧致衰老的动物模型在行为学、形态学以及LPO、单 胺氧化酶活性、超微结构等方面的指标与自然衰老的动 物极其相似。
实验表明，衰老动物的细胞DNA断裂较多且损伤后修复 能力也明显较青年动物低。臭氧致衰老模型小鼠与自然 衰老小鼠在DNA损伤方面较为接近，与阴性对照组比较， 其差异有显著性。
2. 衰老加速小鼠（SAM）衰老模型
快速老化模型鼠（SAM）是一近交系小鼠群，其特 征为出现快速老化征候，高龄期频繁出现在人类老 年常见的与老化相关的病态。
SAM寿命较短，仅为1年左右。而普通小鼠寿命为 2~2.5年。
快速老化模型鼠的起源
SAM的前身为美国Jackson实验室繁育的AKR/J系小鼠。 1968年日本京都大学竹田俊男教授将此鼠引进日本并进行
SAM系统以老化为主要特征，根据老化的速度分为快速 老化系（senescence accelerated mouse/prone， SAM-P）及抗快速老化系（se-nescence accelerated mouse/resistance，SAM-R）。
SAM-R系统：包括3个亚系SAM-R/1、SAM-R/2、 SAM-R/4。
衰老动物模型
江苏大学基础医学与医学技术学院 姜旭淦
分类
自然老化动物模型：饲养时间长、价格昂贵， 而且通常也未必是同批动物，参差不齐，从 而影响实验结果的可靠性。
依某一衰老学说，制成最接近临床衰老症状 的动物模型 ——主要由啮齿类、鱼类、灵长类等 动物复制而成。
衰老模型
一、啮齿类动物衰老模型 二、鱼类衰老动物模型 三、果蝇属衰老动物模型
大鼠的辐照吸收剂量为3Gy较为理想，辐照面积为25× 25 cm2，辐照源距动物高度为80cm，每次辐照为4min 53s， 连续辐照5d能快速有效的建立衰老动物模型。

2024年注射D―半乳糖致大鼠衰老效应的评价D-半乳糖是一种广泛应用于动物衰老研究的试剂，通过注射D-半乳糖可以诱导实验动物产生类似自然衰老的生理和生化变化。

在本研究中，我们采用了连续注射D-半乳糖的方法，以制造大鼠衰老模型。

具体方法如下：首先，选择健康成年大鼠作为实验对象，并将其随机分为实验组和对照组。

实验组大鼠每天接受一定量的D-半乳糖溶液注射，而对照组则注射等量的生理盐水。

注射时间持续数周至数月不等，以便充分诱导衰老效应。

在注射过程中，我们严格控制了注射剂量和频率，以确保实验结果的可靠性和可重复性。

同时，我们还密切观察了大鼠的生长状况、体重变化以及行为表现，以便及时发现并处理可能出现的异常情况。

二、大鼠衰老指标评估为了评估D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响，我们选取了一系列衰老指标进行测定。

这些指标包括体重、毛发状况、皮肤弹性、肌肉力量、运动能力、记忆力和学习能力等。

通过定期测量大鼠的体重，我们发现实验组大鼠的体重增长速度明显减缓，甚至出现了体重下降的情况。

此外，实验组大鼠的毛发变得稀疏、干燥且失去光泽，皮肤弹性也显著下降。

这些外观上的变化表明D-半乳糖注射对大鼠的衰老产生了明显的影响。

在评估肌肉力量和运动能力方面，我们采用了抓握力测试和跑步机测试等方法。

结果显示，实验组大鼠的抓握力和运动能力均较对照组明显降低，表明其肌肉力量和运动能力受到了损害。

在记忆力和学习能力方面，我们使用了迷宫测试和条件性反射等方法进行测定。

实验组大鼠在迷宫测试中的表现较差，需要更长的时间才能完成任务；而在条件性反射测试中，实验组大鼠的反应速度和准确性也低于对照组。

这些结果表明D-半乳糖注射对大鼠的神经系统功能产生了负面影响。

三、组织病理学检查为了更深入地了解D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响，我们进行了组织病理学检查。

通过采集大鼠的肝脏、肾脏、心脏和脑组织等样本，我们观察了这些器官的组织结构和细胞形态变化。

结果显示，实验组大鼠的肝脏和肾脏出现了明显的病理变化，如肝细胞脂肪变性、肾小球硬化等。

D-半乳糖动物模型构建技术原理
转基因动物指的是转基因工程培育的动物。

遗传的基本物质是DNA，基因则是位于染色体上有遗传效应的DNA片段，对于储存在生物全套染色体中的全部遗传信息，可称其为基因组。

由于不同种类、不同个体的生物基因组成是不同的，因此对动物个体来说，非自身的基因成分属于外源基因，如果把外源基因整合或导入动物染色体基因中，那么这个外源基因就被称为转基因(transgene)（即转移来的基因），这种动物就是转基因动物（transgenic animals）。

转基因动物表达系统，包括外源基因、表达载体和受体细胞等，基因组的转移则是细胞核移植和动物克隆技术，人工合成与设计基因、全基因乃至基因组的转基因技术是合成生物学。

D-半乳糖模型
D-半乳糖（D-galactose，D-gal）是一种还原单糖，使组织渗透压升高、产生氧化应激和炎症反应，促进神经衰老的发生和发展。

通过皮下连续注射D-gal 建立亚急性衰老动物模型，导致认知功能和胆碱能功能障碍，产生氧化应激和神经炎症反应，海马区 tau 蛋白过度磷酸化。

D-gal 衰老模型与自然衰老模型相比造模时间短、与SAM 模型相比具有价格低、结果可靠稳定，有自然衰老动物模型在氧化损伤、神经行为学以及病理形态方面的病理特征等的优点，在实验研究中应用较多。

但其缺点是在生化分析中与自然衰老动物模型具有一定的差异，现在多与铝中毒诱导模型联合应用。

益气聪明汤对D-半乳糖衰老小鼠免疫功能影响的实验研究肖政华;张光奇
【期刊名称】《贵阳中医学院学报》
【年(卷),期】2011(033)004
【摘要】目的:观察益气聪明汤对老小鼠D-半乳糖鼠免疫功能的影响.方法:采用D-半乳糖皮下注射建立小鼠衰老模型.观察益气聪明汤其IL -2量,胸腺、脾脏指数,脾T、B淋巴细胞增值活性的影响.结果:益气聪明汤三个治疗组均不同程度升高小鼠免疫器官指数、IL-2量、脾淋巴细胞增值活性,升高与其剂量基本呈正相关.结论:益气聪明汤有良好的延缓衰老作用,其机理可能与增强机体的免疫功能有关.
【总页数】3页(P154-156)
【作者】肖政华;张光奇
【作者单位】贵阳中医学院第一附属医院消化内科,贵州贵阳550001;贵州省毕节地区行署,贵州毕节551000
【正文语种】中文
【中图分类】R965.1
【相关文献】
1.苦荞茶对D-半乳糖所致衰老小鼠MDA和MAO影响的实验研究 [J], 邓洋;张利霞
2.人参茎叶总皂苷对D-半乳糖致衰老小鼠免疫功能的影响 [J], 刘佳;张敬敬;李明阳;石高星;曾志能;魏珊珊
3.益气聪明汤对D-半乳糖衰老小鼠抗自由基作用的实验研究 [J], 肖政华;张光奇
4.大黄(庶虫)虫丸、当归补血汤对D-半乳糖致衰老小鼠血清中SOD和MDA影响的实验研究 [J], 郭晓峰;冯玉华;赵延龙;张晓薇;周志强;李艳彦;李俊莲
5.桑葚提取液对D-半乳糖致衰老小鼠血液生化指标影响的实验研究 [J], 罗姮;邓秀婷;李彦彬;徐远超;杨高群;林秀澄;李朝敢
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D-半乳糖剂量及小鼠性别对衰老模型的影响林映雪;庄朋伟;张金保;张凤奇;张艳军【期刊名称】《天津中医药大学学报》【年(卷),期】2013(32)3【摘要】[目的]考察D-半乳糖剂量以及实验小鼠性别对衰老模型形成的影响。

[方法]实验选用不同性别的ICR小鼠,分别采用随机数字表法分为正常对照组、D-半乳糖低(100 mg/kg)、中(300 mg/kg)、高(1 000 mg/kg)剂量组。

每日将D-半乳糖于颈背部皮下注射,对照组注射等量生理盐水,连续注射10周,采用Morris水迷宫考察模型小鼠学习记忆能力,取血检测血中生长因子及氧化相关指标,取脑组织进行苏木-伊红(HE)染色,考察脑组织病理形态变化。

[结果]与正常对照组比较,不同剂量D-半乳糖对小鼠学习记忆能力均有不同程度的损伤,但雌雄小鼠无明显差别,尤其高剂量组平均潜伏时间明显延长(P<0.05);D-半乳糖中、高剂量组小鼠血中血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)均呈不同程度降低(P<0.05或P<0.01),雌雄间无明显差异;D-半乳糖中、高剂量组小鼠血中丙二醛(MDA)浓度较正常对照组明显升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活力较正常对照组明显下降(P<0.05或P<0.01)。

[结论]ICR小鼠皮下注射300-1 000 mg/kg剂量的D-半乳糖连续10周可以不同程度的引起小鼠学习记忆能力明显下降,并且可能与氧化反应升高和血中生长因子水平降低有关,实验小鼠性别对D-半乳糖致衰老模型无明显影响。

【总页数】4页(P144-147)【关键词】D-半乳糖;衰老;学习记忆能力;性别;生长因子【作者】林映雪;庄朋伟;张金保;张凤奇;张艳军【作者单位】天津中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.鲣鱼内脏中鱼油对D-半乳糖制衰老模型小鼠抗衰老的影响 [J], 虞舟;白冬;张海玲;谢超2.实验性铅中毒对大鼠海马p75基因表达的影响/神经生长液对D-半乳糖致衰老模型小鼠的影响/周围神经损伤后相关结构组织学变化的实验研究/神经再生素对PC12细胞凋亡的影响 [J],3.二苯乙烯苷对D-半乳糖衰老模型小鼠衰老指征的影响 [J], 宋士军;李欣;刘纪钊;李芳芳4.鲣鱼内脏中鱼油对D-半乳糖制衰老模型小鼠抗衰老的影响 [J], 虞舟;白冬;张海玲;谢超;;;;5.高剂量D-半乳糖复制C57BL/6J衰老小鼠模型的研究 [J], 赵焕东; 胥洪鹃; 李坚; 任彩萍; 陈玉祥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｃｌａｓｓｉｃａｌ Ｓｗｉｎｅ Ｆｅｖｅｒ Ｖｉｒｕｓ ｉｎ Ａｌｉｖｅ Ｓｗｉｎｅ
ＨＵ Ｊｉｅ，ＬＩＡＮＧ Ｙｕａｎ１，ＭＯ Ｓｈｅｎｇ－ｌａｎ，ＺＨＡＮＧ Ｂｕ－ｘｉａｎ，ＳＨＩ Ｋａｉ－ｃｈｕａｎｇ， ＱＵ Ｓｕ－ｊｉｅ，ＳＵ Ｙａｎ－ｑｉｏｎｇ，ＬＵ Ｗｅｎ－ｊｕｎ，ＳＵ Ｋａｉ，ＬＩ Ｊｕｎ
７２
动 物 医 学 进 展 ２０１３ 年 第 ３４ 卷 第 １ 期 （总 第 ２３５ 期 ）
１ 材料与方法
１．１ 材料 １．１．１ 实验动物 ８０日龄～８２日龄昆明种 ＳＰＦ 级 小鼠２４０只，购自中国医科大学实验动物中心。 １．１．２ 试剂 Ｄ－ｇａｌ，１２０ｇ／Ｌ ＫＣｌ溶 液，５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ＰＢＳ（ｐＨ ８．３），０．０５ ｍｏｌ／Ｌ 邻 苯 三 酚 溶 液 ，盐 酸 等 。 １．１．３ 仪 器 与 用 具 可 见 分 光 光 度 计 ，高 速 离 心 机 ， 组织匀浆器 ，恒 温 水 浴 锅 ，微 量 取 样 器 ，电 子 天 平 ，解 剖 器 具 ，１ ｍＬ 注 射 器 等 。 １．２ 方法 １．２．１ 小 鼠 肝 脏 超 氧 化 物 歧 化 酶 （ＳＯＤ）活 性 的 测 定 试验前 ２４ｈ 对 小 鼠 停 止 供 食 ，６ｈ 停 止 供 水 ，脱 臼 法 处 死 小 鼠 ，迅 速 取 其 肝 脏 组 织 称 重 后 备 用 。 参 照 邹 国林的方法制备粗酶液并应用改进的邻苯三酚自氧 化法测定自氧化速率并应用下列公式计算 ＳＯＤ 总活 力［１０］：
酶活 性 （Ｕ· ｍＬ－１）＝ ［（０．０７０－ 样 液 速 率 ）／ ０．０７０×１００％］／５０％ × 反 应 液 总 体 积 × （样 液 稀 释 倍 数／样液体积）

时珍国医国药 ２ １ ０ ０年第 ２ １卷第 ４期
Ｌ ＨＺ Ｅ Ｅ ＩＩＥＡ ＤＭ Ｔ ＲＡＭ ＤＣ Ｅ Ｅ Ｒ Ｈ２１Ｖ Ｌ２ Ｎ ． Ｉ ＩＨ ＮＭ ＤＣＮ Ｎ Ａ Ｅ Ｉ Ｅ ＩＡＲ Ｓ Ａ Ｃ ０ Ｏ ．１ Ｏ ４ Ｓ ０
４ 小 结
参 考文献 ：
驳骨 丹 显 微 的 结构 特点 有 ： 根次 生 构 造 不 明 显 ， 层 有 气 室 ； 皮 １ 中华本草 ， ７ ［ ］ 上海 ： 第 册 Ｍ． 茎 表 皮 细 胞 处 晶细 胞 常 见 ， 内含 大 型 螺 状 钟 乳 体 ； 见 皮 孔 。叶 ［ ］ 国家 中医药管理局 中华本草编委会． 可 上 海 科 学技 术 出版 社 ，９９：５ ． １９ ４ ９ 主脉维管束呈浅槽 型 ， 上表皮外被角质层 ， Ｌ腺鳞常见 ， 、 气孑 、 上 下 ［ 陈 昭 勇 ． 骨草 酒 的 实 验 研 究 及 ｌ 应 用 ［ ］ 广 东 医 学 ，９ ４， ２］ 接 临床 Ｊ． １８ ５ 表皮均含有长圆形或棒状钟 乳体 的晶细胞 ； 粉末 可见腺鳞 、 钟乳 （）２． ４ ：８ 体、 石细胞 、 纤维柬 、 厚壁细胞 、 螺纹导管和 具缘纹孔导管 等。 ［ ３］ 李永 涛， 郭丽荣 ， 张应林 ， 秋季对小驳骨扦插的初步尝试 ［ ］ 中 等． Ｊ． 薄层色谱中可见 ６个斑 点 ， 紫外灯 （６ ｍ） ３ ５ｎ 下除 １ 个斑点是黄 学 生 物学 ，０ ６ ２ （ ） ３ ． ２０ ，２ ３ ：７ 色荧光外 ， 其他均为鲜红色荧光斑点 。 ［ ４］ 周传明， 邓永青 ， 熊 英 ， 小驳骨锈 病 的发 生与 防治研究初 报 等． 驳骨丹共检测 出 ３ ７个色谱峰 ， 初步鉴定 了其 中的 ２ 化合 ６个 ［］ 广西植保 ，０２，５ ２ ：． Ｊ． ２０ １ （ ） １ 物， 鉴定 率为 ７ ．７ ０ ２ ％。在已鉴定 出的驳骨丹挥发 油成分各组 分 ［ ５］ 刘文粱 ， 黄爱东 ， 熊 飞． 小驳骨丹无机元 素的含量测定 ［ ］ 广东 Ｊ． 微量 元 素 科 学 ，０ ２９ ８ ：７ ２ ０ ，（ ）５ ． 中， 相对含量较 高 的成 分 主要有 ： 物醇 （ ３ ．０ ） 植 物 酮 植 含 ９７％ 、 ６］ 周家 驹 ， 桂 荣 ， 谢 严新 建 ． 药 原 植 物 化 学成 分 手 册 ［ ． 京 ： 中 Ｍ］ 北 化 （ ４ ７ ％ ） １一辛 烯 一３一醇 （ ２ ８ ％ ） 广 藿 香 醇 （ 含 ．５ 、 含 ．４ 、 含 ［ 学工业出社 ， 化学 与 应 用 化 学 出版 中心 ，０４ ２０ ． ２７ ％ ） 。 ．４ 等

科 学仪 器有 限公 司 ），ＤＹ８９—１型 电动 ＴＢＡ 比 色法 。
的变化 。脑 ＳＯＤ活性 以低 剂量 组最高 ，
玻 璃 匀浆 机 （宁 波新 芝 生 物科 技 股份
脑 匀浆 中ＭＡＯ活性的测定原理为： 高剂量组最低 。与对 照组 比较 ，模 型组
有 限公 司 ），ＧＬ一１６Ｇ—ＩＩ型 高速 冷 冻 以苄胺 为底物 ，在 ＭＡＯ作用下 ，生成 无 明显变化 （Ｐ＞０．０５），低剂量组脑 中
低剂量组和 高剂量组 为试 验组 ，腹腔注 日对 每 组 小 鼠抽 取 ６只 （剔 弱 ），摘 低剂 量组 差异 极显 著 （Ｐ＜０．０１），高剂 射 １５０ｍｇ·ｋｇ一１…ｄ １Ｄ 半 乳 糖 ， 提 除 眼球 采 血 处死 、取 出肝脏 和脑 。血 量组显著差异 （Ｐ＜０．０５ ）。与模型组 比较 ， 供添加大枣提取物 的饮用水 ，剂量分别 液 凝 固 后 ，４℃ 离 心 （３０００ ｒ／ｍｉｎ，１０ 低剂量组 ＳＯＤ潘 胜升高不明显 （Ｐ＞ｏ．０５ ）， 为 ２５０、５００ｍｇ·ｋｇ一１ ·ｄ一１试 验 前 预 ｍｉｎ），分离血 清 ，一２０￣Ｃ保存 备用 。肝 但高剂量组极显著升高 （Ｐ＜Ｏ．０１）。
１．２ 试 验 仪 器 。ＹＰ６００型 电子 天 最 大吸 收 峰 ，因底物 为 硫 代 巴 比妥酸 量 的作 用优 于血清。
平 ，ＦＡ１００４Ｎ型 电子 天 平 （上 海 精 密 （Ｔｈｉｂａｂｉｔｕｒｉｃ Ａｃｉｄ），所 以 也 称 其 为
２．３ 脑 组 织 中 ＳＯＤ和 ＭＡＯ活 性
大枣对 Ｄ一半 乳糖 致衰 老小 鼠抗 氧化 作 用 的研 究
羊 小胜 胡春威
目前关于大枣在抗衰老模型方面 的 工 贸 有 限 公 司 ），规 格 １０： １。 ＳＯＤ、 高剂量组最低 。与对照组 比较，模型组 、

自然衰老小鼠皮肤检测指标一、前言自然衰老小鼠皮肤检测指标是一项重要的科研工作，它可以帮助我们更好地了解小鼠皮肤老化的过程和机制。

本文将介绍自然衰老小鼠皮肤检测指标的相关内容。

二、实验设计1.实验对象：12只C57BL/6J雄性小鼠，年龄为12个月。

2.实验方法：将小鼠分为两组，每组6只。

其中一组为实验组，另一组为对照组。

实验组小鼠在正常喂养的基础上，每天额外喂食0.5g/kg的D-半乳糖（D-Gal）。

对照组小鼠仅接受正常喂养。

3.实验时间：持续6个月。

4.检测指标：采用多种方法检测小鼠皮肤老化程度。

三、检测指标1.体重变化随着年龄增长和皮肤老化，小鼠体重会逐渐减轻。

因此，在进行自然衰老小鼠皮肤检测时，需要记录小鼠体重变化情况。

实验期间每周称量一次体重，并将数据记录下来。

2.皮肤厚度皮肤厚度是反映皮肤老化程度的重要指标之一。

实验结束后，对小鼠背部进行皮肤切片，使用显微镜观察并测量皮肤厚度。

3.毛发生长随着年龄增长和皮肤老化，小鼠毛发生长能力会逐渐减弱。

因此，在进行自然衰老小鼠皮肤检测时，需要记录小鼠毛发生长情况。

实验期间每周观察一次小鼠背部毛发的生长情况，并将数据记录下来。

4.表皮细胞数量表皮细胞数量是反映皮肤老化程度的重要指标之一。

实验结束后，对小鼠背部进行皮肤切片，使用显微镜观察并计算表皮细胞数量。

5.氧化应激指标氧化应激是导致细胞老化和死亡的主要原因之一。

在进行自然衰老小鼠皮肤检测时，需要检测氧化应激指标。

实验结束后，采用光谱法检测小鼠背部组织中SOD、CAT、GSH-Px等抗氧化酶的活性。

6.炎症指标炎症反应是导致细胞老化和死亡的主要原因之一。

在进行自然衰老小鼠皮肤检测时，需要检测炎症指标。

实验结束后，采用光谱法检测小鼠背部组织中IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的含量。

7.基因表达谱分析基因表达谱分析可以帮助我们更好地了解小鼠皮肤老化的机制。

在进行自然衰老小鼠皮肤检测时，需要对小鼠背部组织进行基因表达谱分析。

补益营卫方对衰老皮肤弹力纤维的影响袁淑苹;马生吉;周小平【期刊名称】《宁夏医科大学学报》【年(卷),期】2013(35)4【摘要】目的观察补益营卫方对D-半乳糖衰老模型小鼠皮肤弹力纤维的影响.方法小鼠每日背部皮下注射10%D-半乳糖(1000mg·kg-1),建立亚急性衰老模型.补益营卫方高﹑中﹑低剂量组分别按8、4、2g·kg-1灌胃给药,阳性对照组(维生素E)50mg·kg-1灌胃给药,连续6周.6周后,制作皮肤组织切片,应用计算机图像分析系统对弹力纤维的含量进行分析.结果模型组小鼠皮肤中弹力纤维含量减少,与正常组相比差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组相比,补益营卫方高、中、低剂量组均使小鼠皮肤弹力纤维的含量提升,其中高剂量组与模型组相比差异有统计学意义(P ＜0.01).结论补益营卫方通过影响皮肤弹力纤维来改善皮肤衰老状况.%Objective To investigate the effect of recipe Buyiyingwei on elastic fibers in aged mice resulting from D - galactose. Methods With the dose of D - galactose1000mg · ( kg · d )-1 by sc administration to mice for 42 days, the aging model was established. The mice received recipe Buyiyingwei( 8,4,2g · kg-1 ) and vitamin E( 50mg · kg-1) by ig administration. Six weeks later, the skin was made into histological section. The content of elastic fibers was determined quantitatively with imaging analysis system. Results Compared with the normal group, dermis thickness and elastic fibers were significantly reduced in model group ( P < 0. 05 ). Compared with the model group, the content of mice elastic fibers were significant rised inrecipe Buyi yingwei group, especially in the high dose group( P <0. 01 ). Conclution Recipe Buyiyingwei has ab-vious anti - aging effect on aging skin through improving the elastic fibers content.【总页数】4页(P371-373,封2)【作者】袁淑苹;马生吉;周小平【作者单位】宁夏医科大学中医学院,银川,750004;宁夏医科大学中医学院,银川,750004;宁夏医科大学中医学院,银川,750004【正文语种】中文【中图分类】R751【相关文献】1.补益营卫对衰老小鼠皮肤组织bFGF表达的影响 [J], 周小平;马艳红;傅延龄2.补益营卫方对衰老小鼠皮肤端粒酶表达的影响 [J], 司晓伟;周小平3.补益营卫方、TGFβ1及bFGF对衰老人皮肤成纤维细胞c-Jun基因表达的影响[J], 周小平;司晓伟;徐武清;俞洋4.补益营卫方对衰老人皮肤成纤维细胞数量及细胞周期的影响 [J], 何多谊;周小平;刘韬;徐武清5.补益营卫方对衰老皮肤表皮角蛋白18的影响 [J], 王浩; 周小平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

责 任公 司
基金 项 目 ： 国家 自然 科 学基 金 项 目（ 项 目编 号 ： ３ １ ２ ７ ０ ７ ３ ５ ） ；
数显 恒温水 浴锅
国华 电器 有限公 司
福 州 市科 技计 划项 目 （ 项 目编 号 ： ２ ０ １ ２ 一 Ｇ一 １ １ ５ ） ；福 建 省 教 育 厅 高 校 服 务 海 西 重 点 项 目 （ 项 目编 号 ： Ａ ０ ９ ６ ） ；福 建农 林 大 学 园 艺 植 物 种 质 与 高优 生 产技 术 创 新 团 队项 目 （ 项 目编 号 ： ｃ ｘ ｔ ｄ １ ２ ０ １ ３ ） ； 南 平 市 科 技 计划 专 项 重 大 项 目『 项
要研 究 方 向 ： 食 品 营养 与 加 工 。
茶叶、 竹子、 水按照 ３ ： ７ ： １ ０ ０的 比例 混合 ， 置 于 锥 形瓶 中， 沸水浴 ４ ５ ｍ ｉ ｎ ， 每隔 １ ０ ｍｉ ｎ摇 一 次 ， 过 滤 后 冷
李昱鼎 叶小辉 叶乃兴等 ： 竹茶酒对 Ｄ 一 半乳糖衰老模型小 鼠抗 衰老作用 的研究
化酶 （ Ｔ － Ｓ Ｏ Ｄ） 测试 盒 、 谷胱甘 肽过 氧化物酶 （ Ｇ Ｓ Ｈ— Ｐ ｘ ） 测试 盒 ， 均 由南 京建成 生物工 程研 究所 提供 。
１ ． ２ 主 要仪器 和设备
具 有 良好 的 抗 氧化 抗 衰 老 ， 降 低胆 固醇 ， 降低 心 脑 血
管疾 病 的发病 率 ， 增 强 免疫 功 能等 作用 。本 实验 观 测 了竹 茶酒 对 Ｄ一 半 乳 糖所 致亚 急 性衰 老模 型小 鼠肝脏
第３ ２卷 第 ２期
２ ０ １ ３年 ４月
武 夷 学 院 学报
Ｊ ＯＵＲＮ ＡＬ ＯＦ ＷＵⅥ ＵＮＩ Ｖ ＥＲＳ ⅡＹ

还少丹对D-半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用程莉娟;刘群良;谭峰;张波;陈伶利【摘要】目的探讨还少丹对D-半乳糖(Dgalactose,D-gal)诱导的衰老模型小鼠的抗衰老作用.方法采用D-gal建立小鼠衰老模型,用还少丹水煎剂灌胃6周；分光光度法检测小鼠脑、肝脏组织谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)活性；观察小鼠肝脏、脾脏指数的改变.结果衰老模型组小鼠肝脏指数、脾脏指数以及脑和肝脏组织的SOD、GSH-Px活性均明显降低.还少丹能显著提高衰老模型小鼠的肝脏指数和脾脏指数；显著升高脑和肝组织的SOD、GSH-Px活性.结论还少丹的抗衰老作用与其影响器官指数、升高GSH-Px和SOD活性有关,其作用机制可能通过清除体内自由基,提高免疫功能以实现延缓衰老的进程.%Objective To investigate the effect and mechanism of huanshaodan on anti-aging in aged mice induced by D-galactose(D-gal). Methods The aged model was established by injecting D-gal. After feeding with huanshaodan for 6 weeks, spectrophotometry was used to detect the activity of glutathione peroxidase and superoxidase dismutase in the brain and liver of mice. Meanwhile the liver index and spleen index of mice were also detected. Results The liver index, spleen index, and the activity of glutathione peroxidase and superoxidase dismutase of brain and liver in the aged model group were significantly reduced, whereas the liver index, spleen index.the activity of superoxidase dismutase and glutathione peroxidase in the brain and liver were elevated remarkably. Conclusion The activity of glutathione peroxidase and superoxidase dismutase in the brain and liverof aged mice can be elevated by huanshaodan, and so do the liver index and spleen index, which suggest that huanshaodan has an anti-aging effect through eliminating free radicals and improving the immunity.【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2012(032)012【总页数】3页(P11-12,14)【关键词】还少丹;D-半乳糖诱导致衰模型;抗氧化【作者】程莉娟;刘群良;谭峰;张波;陈伶利【作者单位】湖南中医药大学医学院,湖南长沙410208;湖南中医药大学医学院,湖南长沙410208;湖南中医药大学医学院,湖南长沙410208;湖南中医药大学医学院,湖南长沙410208;湖南中医药大学医学院,湖南长沙410208【正文语种】中文【中图分类】R285.5随着年龄的增加，机体的氧化和抗氧化系统之间平衡发生变化，机体清除氧自由基的能力逐渐减弱，导致氧自由基的增加并积累，造成氧化应激。