ELISA法检测梅毒抗体假阳性原因分析及其对策

5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的评价摘要目的评价分析5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的效果。

方法基于本次研究需求，分别采取梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、化学发光法（CLIA）、甲苯胺红不加热血清试验（Trust）、酶联免疫吸附试验（ELISA）以及免疫印迹法（WB）对120例标本实施梅毒螺旋体抗体检测，对比分析5种检测法阳性率，将WB作为参照分析其他4种检测法的总符合率、特异度以及敏感度。

结果经分析，TPPA法、CLIA法、ELISA法以及Trust法和WB法阳性率对比差异无统计学意义（P>0.05）；将WB检测法当作确认试验，TPPA 法、CLIA法、ELISA法特异度、敏感度和总符合率均比较高。

结论经研究结果分析可知，TPPA法、CLIA法、ELISA法不管是敏感度，还是特异度均比较高，实际应用中可根据梅毒螺旋体抗体实际情况合理选用检测法。

关键词血清学；梅毒螺旋体抗体；检测在临床中梅毒作为常见性传播疾病之一，传染性非常高，目前在献血员以及临床患者输血之前、各种创伤性检验中梅毒血清学检验已成为常规检测中一项基本项目，基于该形势下，选用快捷、灵敏度和特异度均比较高以及操作便捷的检测法对于正确筛查与诊断梅毒也变得尤为重要[1，2]。

本次研究就5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的效果进行评价。

现报告如下。

1 资料与方法1. 1 一般资料本次研究所用标本来自2012年7月～2015年5月到本院诊治患者120例，全部标本均实施梅毒螺旋体抗体检测，其中男50例，女70例，年龄32～56岁，平均年龄（45.26±4.9）岁。

1. 2 方法于空腹状态下采集3 ml静脉血，以3000 r/min进行离心，离心时间一般为10 min，经血清分离实施检测。

5种血清检测法所用仪器如下：洗板机、水浴箱、Clem Clin化学发光免疫分析仪、振荡器、Roto-2600c酶标仪以及离心器等；所用试剂有CLIA试剂、ELISA试剂、TPPA试剂、WB试剂以及Trust试剂。

酶联免疫法与金标法对梅毒的检测效果对比分析摘要】目的分析和对比酶联免疫法与金标法检测梅毒的效果。

方法选取2017年5月-2018年3月我院住院患者术前和输血前抽取的血清标本2327例，均行酶联免疫法和金标法进行初步筛查，再行梅毒螺旋体胶体试验进行确证。

观察检测结果。

结果 ELIEA法和金标法梅毒阳性的检出率分别为1.07%和0.73%，差异不显著（p＞0.05），且ELIEA法检测梅毒的准确度为96%，显著高于金标法（p＜0.01）。

结论 ELIEA法检测梅毒的准确度较高，且具有自动化的优势，在术前和输血前血清样本的筛查中具有较高的价值，而金标法具有检测迅速的优势，在大量血清样本初筛中的适用性较强。

【关键词】：梅毒；酶联免疫法；金标法；梅毒螺旋体胶体试验[ 中图分类号 ]R2[ 文献标号 ]A[ 文章编号 ]2095-7165（2018）18-0344-01梅毒是感染苍白螺旋体引起的传染病，是《中华人民共和国传染病防治法》中的乙类传染病。

世界卫生组织的统计资料显示，全球每年新增的梅毒病例约为1200万，梅毒螺旋体的感染可持续多年，且随着感染时间的推移，患者的症状也会由软性下疳发展为心脏、脑等多种组织和器官和神经的损害，对患者的生命安全造成严重的威胁，故有效的检测方法在梅毒的诊断和治疗中极为重要[1]。

酶联免疫法（ELISA）和金标法是临床上常用的检测梅毒的方法，为了比较两种方法的检测结果，分析其临床适用性，笔者选取2327例血清样本进行了如下研究：1.资料和方法1.1一般资料选取2017年5月-2018年3月我院住院患者中术前和输血前抽取的血清标本2327例，来自于2327例患者，其中男性和女性患者分别为1178例和1149例，最小年龄和最大年龄分别为19岁和75岁，平均年龄（42.38±4.61）岁。

1.2检测方法所有血液标本应用常规剂量的肝素进行抗凝处理，置于半径为15cm的离心机上，以3000r/min的速度进行5min的离心，分离出血清，并置于2～8℃的冰箱中保存。

TPPA、TP—AbELISA、TRUST三种方法检测血清梅毒结果分析目的分析TPPA、TP-Ab（ELISA）、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果。

方法采用梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、酶联免疫吸附试验（TP-Ab）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）来对比检测150例临床确诊的梅毒阳性血清标本和70例正常血清标本。

结果TP-Ab、TPPA检测方面的灵敏性、特异性显著高于TRUST检测方法，P＜0.05。

结论TPPA具有较高的特异性，可以将其作为梅毒确证实验；TP-Ab（ELISA）法的灵敏度、特异性与TPPA法比较接近，是现阶段对梅毒抗体进行检测的首选方法；TRUST法的特异性较差，可以将其当成TP-Ab（ELISA）法的补充。

标签：TPPA；TP-Ab（ELISA）；TRUST；检测；血清梅毒梅毒作为慢性全身性性传播疾病，主要是因为梅毒螺旋体感染导致的，梅毒的病程较长，临床表现复杂，表现为多样性，会对患者的全身各个器官造成损害；疾病早期主要对黏膜和皮肤造成侵犯，疾病后期则会对中枢神经系统、心血管系统等器官造成侵犯。

现阶段因为人们滥用抗生素药物，导致部分梅毒患者表现为隐性感染，缺乏临床表现，因此在临床诊断中容易出现误诊和漏诊的情况[1]。

世界卫生组织认为，全球输血不安全是导致没有有效筛选传染性因子的主要原因。

所以采用高灵敏度、强特异性的筛选方式，对安全输血非常重要。

本研究主要分析了TPPA、TP-Ab（ELISA）、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果，现将情况做如下分析。

1 资料与方法1.1一般资料1.1.1标本选择选择2014年1月～2016年1月经我院临床确诊的梅毒感染输血患者输血前的标本150例，并选择同期非梅毒感染输血患者的血清标本70例，对血清进行分离后再进行检测。

1.1.2试剂和方法TPPA试剂盒选择富士瑞必欧株式会社所提供的；TP-Ab 试剂盒则是由珠海丽珠试剂有限公司提供；TRUST试剂盒则是由上海荣盛生物技术有限公司所提供；选择SUNRISE酶标仪、新康医疗器械有限公司提供的XK-96型梅毒旋转振荡器和HydroFLex洗板机。

化学发光法检测老年人梅毒螺旋体抗体假阳性率偏高原因分析【摘要】目的：探讨应用微粒子化学发光法检测老年人梅毒螺旋体特异性抗体易产生假阳性结果的原因。

方法：采用化学发光法检测来自本院门诊及住院患者共1890例。

其中老年患者670例，中青年患者1220例。

血清中的梅毒特异性抗体含量，测定结果为阳性者再用TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验）进行确诊。

结果：用微粒子化学发光法检测老年组梅毒特异性抗体有着较高的假阳性率，两组间存在差异具有统计学意义（P＜0.05）。

结论：老年人本身是多种疾病的高发群体,而其本身的生理特征亦发生变化,从而导致化学发光法检测老年人梅毒特异性抗体易发生假阳性。

【关键词】梅毒螺旋体；微粒子化学发光法；老年人；假阳性；性传播疾病【中图分类号】R446.6 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）5-0204-02梅毒是一种有较强传染性及复杂病程的性传播疾病，其病原体为梅毒螺旋体（TP), 因其透明不易染色，又称为苍白螺旋体。

梅毒主要通过性接触进行传播，占95%以上[1]，此外还可通过垂直传播、输血和注射药品、吸毒等方式传播。

梅毒临床表现多样，病程复杂，其发病率在我国也呈现出上升趋势。

2005年国家卫生部公布，在全国27种法定报告的甲、乙类传染病中，梅毒的发病人数高居于第五位（2002年是第七位），仅次于肺结核、乙型肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、淋病。

由此可见，梅毒在现代生活中依旧对我国人民的生命健康有着严重的影响作用。

梅毒的诊断主要依赖于患者的患病史、接触史、临床表现及实验室诊断等。

其中，实验室检查项目包括血清学检测、梅毒螺旋体核酸测定(PCR法)和直接查梅毒螺旋体（暗视野显微镜、直接荧光抗体法）。

其中血清学检测是最传统的也是目前常规开展的项目[2]。

目前我院常规使用的项目包括胶体金法、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）及化学发光法。

血培养假阳性的原因及对策色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理，监测溶于培养基中的二氧化碳(CO2)的产生和存在状况。

样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO22导致培养基酸碱度(PH)改变，从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料(Liquid EmulsionSensor ， LES)颜色变浅，通过照射感应器连续采集信号后形成反应曲线进行分析，采用初始阈值法、斜率法及加速度法三种运算法则及时得到阳性信号。

临床工作中仪器显示阳性报警，而涂片染色未见细菌，转种平板无菌生长为假阳性。

导致假阳性出现的原因可能有：一.环境因素：1.温度：实验室室温的变化(如开关空调导致的温度骤然变化、空调直对仪器吹风等)导致反应曲线下滑或上升引起仪器报阳。

2.供电：仪器连接的电源电压不稳定或同一电源下连接其它频繁使用的大功率仪器会导致反应曲线波动，引起仪器报阳。

3.位置：放置在长期开窗旁边的仪器，由于孵育孔内容易吸附大量粉尘遮蔽测试光源，导致采集信号变化出现假阳性。

二.仪器或培养瓶因素：1.仪器：定期保养仪器，校正孵育孔的本底信号值(difference值)保证仪器稳定的工作状态，减小假阳性瓶出现的概率。

2.血培养瓶：使用前检测血培养瓶是否出现损坏、培养基或底部变色等，查看新的血培养瓶是否常温避光保存，阳光直射会导致瓶底颜色的变化。

三.标本因素：1.细胞本身也能发酵产生CO2，在抽血量超过推荐采血量或推荐采血量下含有大量的细胞(如白血病、真红细胞增多症等疾病)的情况下会导致假阳性的出现。

2.某些少见的苛养微生物可能在血培养瓶生长培养基中难以生长。

3.当仪器信号显示阳性时，需快速取出阳性瓶，以避免某些细菌(如肺炎链球菌)由于自我分解或其它原因引起无活性培养。

4.某些原因(酸中毒、输入大量液体)导致标本本身PH值偏酸性导致出现假阳性。

四.操作原因：1.匿名瓶上机：不同种类的培养瓶的初始阈值不同，而仪器在处理匿名瓶时采用的是最低的阈值开始计算，触动初始阈值的运算法则导致仪器报阳。