新生小鼠皮肤成纤维细胞的分离培养与鉴定

度分 别 为 １ ．３ ３３ ％和 ９８ ， Ｎ Ｈ３ ３细 胞 波形 蛋 白阳性 率 和平 均 荧 光 密度 分别 为 ２ ．１ ．９ 而 Ｉ Ｔ ８１ ％和 １ ．６ ４１ 。结 论 ： 分离 培 养 的细 胞 具有 成纤 维 细胞 的形态 学特 征 ， 表 达成 纤 维 细胞 的 特征 分子 波 形蛋 白。 并 以组 织块 直 接培 养法 成 功 自新 生小
鼠皮 肤分 离 培养 成 纤维 细胞 ， 建立 肿瘤 体 外模 拟 微环 境 提供 实 验材 料 和研 究基 础 。 为
【 键 词１ 生 小 鼠 ； 纤维 细胞 ； 外 培 养 ； 形蛋 白 关 新 成 体 波
【 中图分 类 号１ ３ ２ １ ９． Ｒ 【 文献 标 识码 】Ａ 【 章编 号】 １ ３ ７ １ ２ １ ）０（ 一 ０ — ４
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２１ １ 第 卷 ２ ０年Ｏ ８第９ １ 月 期
・专 家 论 坛 ・
新 生小 鼠皮肤成 纤维细胞 的分 离培 养与鉴定
胡素 贤 ， 晓妍 ， 嘉逊 ， 倪 王 高丰 光 １厦 门大 学 附属 第 一 医院 呼吸 内科 ， ． 福建 厦 门 ３ １０ ２厦 门 大学 医 学院 基础 医 学部 免疫 学 实验 室 ， 建厦 门 ６ ０ ３；． 福 ３ １０ ６０５
【 要】目的 ： 立 一种 简单 易 行 的 自新生 小 鼠皮 肤分 离 培养 成 纤维 细 胞 的方 法 ， 摘 建 并对 分 离 细胞 进行 鉴定 。 法 ： 菌 方 无 取 新 生 Ｂ ｌ／ 鼠背部 皮肤 ， 碎呈 １ｍｍ 大小 ， 织 块均 匀 放置 于 培养 皿并 以 Ｄ Ｍ（ １ ％胎 牛血 清 ） 养基 对 ａｂｃ小 剪 组 ＭＥ 含 ０ 培 组织 块进 行 培养 ； 以胰 蛋 白酶 消 化分 离 细胞 一 新 贴壁 法 对 分 离培 养 细胞 进 行纯 化 ； Ｎ Ｈ３ ３细 胞 为对 照 ， 重 以 Ｉ Ｔ 免疫 荧 光、 流式 细 胞术 、 ｓ ｒ ｌｔ 测 波形 蛋 白表 达 情 况 以对 培养 的成纤 维 细 胞进 行 鉴 定 。结 果 ： 生小 鼠背 部皮 肤 组 Ｗｅｔ ｎｂｏ 检 ｅ 新 织培 养 ３ｄ时可 见 细胞 呈 细 长梭 形 或呈 多 角形 ， 织 培养 ５ｄ后 可见 大 量细 胞 自组 织块 游 离 生 长 ． 织 培养 ７ ｄ后 组 组 可见 细胞 呈 单层 漩 涡状 排列 或 纵横 交 错 。 壁 细 胞 团呈 放射 状 生 长 。免 疫荧 光 、 式 细胞 术 、 ｓ ｒ ｌ 检测 发 现 贴 流 Ｗｅｔｎ ｂｏ ｅ ｔ 分 离 细胞 和 Ｎ Ｈ３ ３细胞 均表 达 波形 蛋 白 ：流 式 细胞 术 证 实分 离 的成 纤 维 细胞 波 形 蛋 白表 达 阳性 率 和平 均 荧光 密 Ｉ Ｔ
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