高中生物 第2章 酶技术 第5课时 果胶酶的制作方法及作用同步备课教学案 北师大版选修1

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1 第5课时 果胶酶的制作方法及作用

[学习导航] 1.阅读教材P28~29内容,认识果胶、果胶酶,掌握果胶酶的制作。2.结合教材P30~31内容,观察果胶酶对苹果匀浆的作用。

[重难点击] 1.概述果胶酶和果胶的概念。2.尝试果胶酶的制作。3.观察果胶酶对苹果匀浆的作用。

一、果胶、果胶酶及其应用

在生产中,制作果汁时往往出汁率低、耗时长,而且果汁浑浊、易沉淀,人们常使用果胶酶来解决这些问题。

1.果胶

果胶广泛存在于高等植物特别是水果和蔬菜的组织中,是植物细胞胞间层和初生壁的重要成分,在植物的细胞组织中起着黏合的作用,它的分解会引起细胞的离散。

2.果胶酶

(1)概念:是能够分解果胶的多种酶的总称,除了含有果胶分解酶外,还含有少量的纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶等。工业上生产的果胶酶全部是复合酶。国产的果胶酶多是利用黑曲霉菌种,经深层液体培养发酵后制得,含有酯酶、水解酶和裂解酶3个组分。

(2)分布:广泛存在于植物果实和微生物中。

(3)应用:在果蔬汁生产中,使用果胶酶的主要目的是提高果汁产量,降低果汁的黏度,有利于果汁的浓缩,同时还可改进果汁的透明度、可过滤性和稳定性。

3.酶技术

(1)酶技术中的重要内容包括酶的分离提纯及大批量生产。酶的提取及分离纯化的基本任务是把酶从生物体中提取出来,并使之达到与使用目的相适应的纯度。

(2)由于使用的目的、环境不同,对酶的纯度要求差异很大。

①工业上用的酶制剂,用量大,要求纯度不高,如纺织业上的织物退浆、皮革业中的动物皮脱毛等使用粗酶制剂即可。

②食品工业对酶制剂纯度有一定的特殊要求。

③在一些特定情况下,如鉴定酶、研究用酶和静脉注射用酶等,需要用纯化的酶。

1.果胶、果胶酶

(1)从果胶是植物细胞胞间层和初生壁的重要成分方面思考,果胶对果汁生产有哪些不利影 2 响?

答案 ①果胶会影响出汁率;②果胶还会使果汁浑浊。

(2)果胶酶是否特指分解果胶的一种酶?该酶的化学本质是什么?

答案 ①否,果胶酶是分解果胶的多种酶的总称;②果胶酶的化学本质是蛋白质。

(3)分析下图,回答果胶酶的作用原理。

答案 果胶酶能分解果胶,瓦解植物细胞胞间层和初生壁,使得浑浊的果汁变得澄清,而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。

2.产生果胶酶的生物

(1)能够产生果胶酶的生物有哪些?

答案 能够产生果胶酶的生物包括植物、霉菌、酵母菌和细菌等。

(2)食品工业生产中需要的果胶酶主要来自什么生物?

答案 食品工业生产中需要的果胶酶主要来自霉菌发酵。可生成果胶酶的霉菌有黑曲霉、米曲霉和文氏曲霉等。

归纳总结 (1)纤维素与果胶的比较

相同点 不同点

纤维素

①都是高分子化合物

②都不溶于水

③都参与细胞壁的组成 ①组成的基本单位:葡萄糖

②分解所需的酶:纤维素酶,将纤维素分解为葡萄糖

果胶 ①组成的基本单位:半乳糖醛酸

②分解所需的酶:果胶酶,将果胶分解为可溶性半乳糖醛酸

(2)果胶与果胶酶的比较

项目 基本单位 组成

果胶 半乳糖醛酸 半乳糖醛酸聚合而成的高分子化合物

果胶酶 氨基酸 果胶分解酶、纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶等

3

1.果胶酶是分解果胶的一类酶的总称,它不包括( )

A.纤维素酶 B.果胶分解酶

C.乳糖分解酶 D.淀粉酶

答案 C

解析 果胶酶是分解果胶的一类酶的总称,包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶分解酶、淀粉酶,不含有乳糖分解酶。

2.蒸熟的苹果具有很好的止泻作用,这是因为苹果中果胶的“立场”不太坚定,未经加热的生果胶可软化大便,与膳食纤维共同起着通便的作用,而煮过的果胶则摇身一变,不仅具有吸收细菌和毒素的作用,而且还有收敛、止泻的功效。下列有关果胶的叙述,不正确的是( )

A.果胶是植物细胞壁的主要成分之一

B.酵母菌可产生果胶酶,是因为酵母菌的细胞壁中也含有果胶

C.果胶酶能够分解果胶

D.果胶影响出汁率

答案 B

解析 果胶是植物细胞壁的组成成分。细菌、真菌等虽然有细胞壁,但其细胞壁中不含果胶成分。

一题多变

(1)两位同学用足量的果肉制作果汁,甲同学使用了果胶酶而乙同学没有使用,过了相同的时间后,二位同学制作的果汁有何区别?

答案 在果汁量和果汁澄清度两个方面均有区别,甲同学由于使用了果胶酶,所以果汁量较多且澄清度也较高。

(2)果胶酶可以催化果胶的水解,而纤维素酶不能催化果胶的水解,这体现了酶的何种特性?

答案 酶的专一性。

二、果胶酶的制作及对苹果匀浆的作用

果胶酶有着重要的工业用途,我们可以通过下面的实验来提取果胶酶并验证它在果汁生产中的作用。

1.实验原理

(1)在低温下用水或低盐缓冲液从破碎组织匀浆中抽提酶,即让酶溶解在低盐缓冲液中,这样得到的酶液叫做酶的粗提液。果胶酶可被NaCl溶液抽提并激活。由于酶是有活性的蛋白质,其活性受许多因素的影响,所以酶的提取要在低温、合适的pH下进行。为了提高酶的活性有时还要加入酶的激活剂。 4 (2)果胶溶于水形成黏稠状液体,新鲜苹果汁由于含果胶而混浊,在果胶酶的作用下,苹果汁中的果胶会被分解而使果汁变得澄清。

2.果胶酶制作的基本步骤

步骤 操作 操作提示

①制匀浆 取材→洗净→剪碎→研磨,边研磨边加入质量分数为10%的NaCl溶液 不要一次加够,如果一次全部加入,材料易漂浮,不易研磨碎,抽提效果不好

②过滤 用滤纸或5层纱布过滤,取滤液 此操作的目的是为了除去不溶物

③离心 将滤液倒入离心管中,4 000 rpm下离心15 min 离心前要将盛有样品的离心管等重对称放置。此操作的目的也是为了除去不溶物

④保存 取上清液,用0.1 mol/L的冰乙酸调节pH为3~4,0~4℃保存备用 果胶酶的最适pH在3~4的范围之间,调pH为3~4的目的是保证酶的最大活性。低温可以抑制酶的活性,便于酶的保存

3.观察果胶酶对苹果匀浆的作用

(1)制作苹果滤液:制匀浆→90 ℃保温→冷却→过滤→滤液。制作的苹果匀浆要在90 ℃水浴条件下保温4 min,目的是把苹果匀浆本身的果胶酶灭活。

(2)分组编号:取两支试管,编号为试管1和试管2,各加入40 mL滤液。

(3)自变量处理:试管1加入适量的酶液,试管2加入煮沸的等量酶液,振荡摇匀。

(4)观察结果:一段时间后,观察并记录苹果匀浆的澄清度。

5 1.观察果胶酶对苹果匀浆的作用实验中,如果提取的酶浓度较低,而对样品的澄清效果用肉眼观察不明显或澄清时间过长,应如何处理?

答案 可用721分光光度计测波长为660 nm时的透光率,透光率越大,表明澄清度越高。

2.观察果胶酶对苹果匀浆作用时,为什么要设置对照管?对照管与样品管有何区别?

答案 在观察果胶酶对苹果匀浆的作用时,反应体系中除了酶以外,还有许多其他的成分,为了检测苹果匀浆澄清的原因只是由于酶的存在而不是由于其他成分的作用引起的,必须设置对照实验,样品管和对照管除了酶的成分(对照管中的酶是灭活的)以外,其他成分是一样的。

归纳总结 果胶酶的制作的实验操作要点

1选材:选用不含色素或含色素少的新鲜水果蔬菜为材料,因为色素含量多会影响肉眼对经果胶酶处理后的样品透明度的观察。

2抽提:取适量的新鲜水果、蔬菜,量的多少关系着酶浓度大小,用剪刀剪碎后,边研磨,边逐次加入抽提液,使酶液溶到抽提液中。

3过滤和离心:这两个过程的操作都是为了除去不溶物。

4制作的苹果匀浆要在90 ℃水浴条件下保温的目的是把苹果匀浆本身的果胶酶灭活,防止对实验结果的干扰。

3.果胶酶的作用底物是果胶,下列有关叙述正确的是( )

A.果胶是植物细胞胞间层和初生壁的主要组成成分之一

B.果胶酶可催化果胶分解成可溶性的半乳糖,使得混浊的果汁变澄清

C.果胶是由半乳糖聚合而成的一种高分子化合物

D.果胶酶就是果胶分解酶的简称

答案 A

解析 果胶是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物;果胶被果胶酶分解后的产物是半乳糖醛酸;果胶酶是一类酶的总称,是一种复合酶制剂,包括果胶分解酶、纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶等。

4.观察果胶酶对苹果匀浆的作用时,关于对照组的设计不正确的是( )

A.必须设置对照实验

B.对照组和实验组除了酶的成分以外,其他成分是一样的

C.对照管中的灭活的酶也可以用蒸馏水代替

D.对照管中的灭活的酶不能用蒸馏水代替 6 答案 D

解析 为了检测苹果匀浆澄清的原因只是由于酶的存在而不是由于其他成分的作用引起的,必须设置对照实验,样品管和对照管除了酶的成分(对照管中的酶是灭活的)以外,其他成分都是一样的,对照管中的灭活的酶也可以用蒸馏水代替。

技巧提炼 对照实验中的变量

(1)变量:实验过程中可以变化的因素称为变量。

(2)自变量:人为改变的变量称做自变量。

(3)因变量:随着自变量的变化而变化的变量称做因变量。

(4)无关变量:除自变量外,实验过程中可能还会存在一些可变因素,对实验结果造成影响,这些变量称为无关变量。

果胶酶的制作方法及作用 果胶酶 成分:包括果胶分解酶、纤维素酶、半纤维

素酶、淀粉酶和蛋白酶等作用:提高果汁产量,降低果汁黏度,增加

果汁的透明度、可过滤性和稳定性果胶酶的制作:制匀浆→过滤→离心→保存观察果胶酶的作用:制匀浆→90℃处理→分组处 理→观察澄清度

1.在不损伤高等植物细胞内部结构的情况下,下列哪种物质适于除去细胞壁( )

A.蛋白酶 B.盐酸

C.果胶酶 D.淀粉酶

答案 C

解析 细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,根据酶的专一性,用果胶酶和纤维素酶可达到目的。

2.酶的水解产物是( )

A.氨基酸

B.葡萄糖

C.核糖核苷酸

D.氨基酸或核糖核苷酸

答案 D