机能实验学 实验性缺氧

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《实验性缺氧》姓名:班级:组别:学号:

主刀:注射:助手:记录人:

(一)实验目的:

1.复制低张性、血液性和组织中毒性缺氧动物模型,了解缺氧的原因及发病机制。

2.观察不同类型缺氧的实验动物,注意其呼吸、皮肤黏膜、血液及肝颜色等变化。

(二)实验原理:

1.由于组织细胞供氧不足或用氧障碍导致机体代谢、功能甚至形态结构等发生异常变

化的病理过程,称为缺氧。

2.根据原因和发病机制,缺氧可分为4类。①低张性缺氧:其特点是动脉血氧分压明

显下降,主要是由于动脉血的氧气供给不足引起;②血液性缺氧:多见于血红蛋白量的减

少或者质的改变,从而引起运氧能力下降并伴有动脉血氧含量的降低;③循环性缺氧:由

于血液循环障碍,含氧丰富的动脉血不能顺利、及时送达组织细胞;④组织性缺氧:组织

细胞利用氧的能力下降引起的缺氧。

3.不同类型的缺氧,机体的血氧指标、循环系统、呼吸系统及皮肤与黏膜的颜色等均

有不同的表现,而不同的内外因素也可以影响机体对缺氧的耐受性。

(三)实验方法:

(1)实验准备:取小白鼠5只,准备实验装置与器材。

(2)实验模型:

1.乏氧性缺氧:①取钠石灰少许及小白鼠1只放入缺氧瓶内。观察、记录小白鼠的呼

吸频率、深度,口唇的颜色,同时用测氧仪测定瓶中的氧浓度(海平面空气氧浓度约21%)②塞紧瓶塞,记录时间,每隔5min重复观察上述指标一次直到动物死亡,记录死亡时间,并测定死亡时瓶中的氧浓度。③尸检。小白鼠死亡后尽快打开腹腔,观察血液和肝颜色。

2.一氧化碳中毒性缺氧:①将小白鼠1只放入广口瓶中,观察其正常表现。②取甲酸

9ml放入烧瓶内,缓慢加入浓硫酸6ml,塞紧后与装有小白鼠的广口瓶相连。③尸检。方式同1。

3.亚硝酸钠中毒性缺氧:①取体重相近的小白鼠2只,观察正常表现后,向腹腔注射5%亚硝酸钠0.3ml。其中一只注入亚硝酸钠后,立即再向腹腔注入0.5%亚甲蓝

0.15~0.30ml,另一只注入等量生理盐水。②观察指标同实验2,比较两只小白鼠表现及死

亡时间有无差异。

(四)实验结果:

1.

不同时间瓶中的氧浓度记录10min 死亡时(45min)

瓶中的氧浓度(%)20.6% 19.7%

2.

实验2和实验3小鼠死亡时间对比CO中毒性缺氧亚硝酸钠中毒性缺氧时间(min)10min 4min

3.实验1、实验2、实验3四只小白鼠及对照组小白鼠腹腔解剖后的内部观察:

(五)实验讨论:

1.乏氧性缺氧:

实验1缺氧而死的小鼠初始较活跃,行动正常。5min后观察其活跃度稍有下降,面色

观察无变化。15min后活跃度明显下降,行为安静,停留原地,观其外表稍有发紫。25min

后小鼠完全安静,陷入无自觉状态,眼睛微合,面容发绀。35min后小鼠肌肉抽搐,出现

幻觉。45min后小鼠呼吸消失,四肢逐渐僵硬,完全死亡。

由于吸入气体氧分压降低而使肺泡氧分压降低,导致血液从肺摄取的氧减少而引起的供氧

不足,称为乏氧性缺氧。乏氧性缺氧时,动脉血的氧分压、氧含量和氧饱和度均降低,皮肤、粘膜呈现青紫色,称为发绀。

血红蛋白中的二价铁(Fe2+)可在亚硝酸盐等氧化剂作用下被氧化而形成高铁血红蛋白。二价铁变成三价铁因与羟基牢固结合而失去携氧能力,加上血红蛋白分子的四个二价

铁中有一部分氧化为三价铁后还能使剩余的Fe2+与氧的亲和力增高,即通过变构效应使

氧离曲线左移,血红蛋白结合和释放的氧量都减少,导致组织缺氧。高铁血红蛋白呈棕褐色,故亚硝酸盐中毒时皮肤、粘膜呈现类似发绀的青紫色,称为肠源性发绀。

2.一氧化碳中毒性缺氧:

实验2一氧化碳小鼠死亡较快。小鼠刚放入瓶内时较安静,量筒内有气泡冒出时表明已有CO通入瓶内,此时计时。1min30s后,开始剧烈跳跃挣扎,3min30s后,趴在瓶底四肢抽搐,仍在呼吸,4min时死亡。尸体全身发红,解剖后肝脏,黏膜等呈樱桃红色。

一氧化碳与血红蛋白的亲和力远远大于氧与血红蛋白的亲和力,因此当大量血红蛋白与CO

结合形成碳氧血红蛋白时,血红蛋白便失去了携带氧的能力。另一方面CO和血红蛋白的结合可使氧离曲线左移,导致HbO2释放氧减少,加重组织缺氧。因为碳氧血红蛋白为鲜红色,所以CO中毒时皮肤,粘膜呈现樱桃红色。

3.亚硝酸钠中毒性缺氧:

实验3中分别给两只小鼠注射亚硝酸钠溶液及生理盐水与解药亚甲蓝,注射亚硝酸钠

的小鼠开始无明显中毒迹象,行为活跃,5min后活动逐渐减少,呼吸开始微弱,8min钟后静止于笼中,四肢及面部变青,10min后完全死亡。注射解药的小鼠无中毒迹象,活动自

如且正常。尸检后,亚硝酸钠中毒小鼠全身皮肤黏膜青紫,肝脏呈深咖啡色。注射亚甲蓝

的小鼠腹部青蓝色,内部器官均被染蓝,肝脏呈咖啡色。

血红蛋白所含的铁是亚铁,它能跟氧结合随着血液循环,将氧输送到身体各部。当亚

硝酸钠进入机体后,在血液中发生了化学反应,使血红蛋白中的二价铁转变成三价铁,而

三价铁的血红蛋白不能携带氧,因此造成小鼠缺氧中毒。注射了亚甲蓝的小鼠则没有明显

中毒症状,因为亚甲蓝将血红蛋白中的三价铁还原为二价铁,使血红蛋白重新与氧结合,

缓解了亚硝酸钠造成的中毒症状。