血清胱抑素c测定的临床意义及方法学进展

胱抑素C的临床应用及研究进展2楚雄彝族自治州人民医院 675000摘要：血清胱抑素C(cystatin C，CysC)因其具有稳定的内源性标志物特性，越来越受到研究人员和临床关注。

除了已成熟应用于肾脏功能损害评估外，研究发现其在心血管病、糖尿病、甲状腺疾病以及Alzheimer病等多种疾病的诊断、疗效监测及预后评估中，同样具有较好应用前景。

本文就CysC与上述疾病的临床应用及研究进展综述如下。

关键词：胱抑素C；临床应用；研究进展1CysC的生物学特征CysC由有核细胞恒速合成，它在人体组织和体液中广泛分布，是一种由人有核细胞产生的低分子的非糖基化蛋白。

CysC对包括组织蛋白酶家族在内的半胱氨酸肽酶具有主要的保护作用，在参与多种生理和病理生理过程，如抗原的加工和呈递，以及炎症和癌变过程[1]。

在调节细胞外蛋白分解中过程中，血清CysC浓度的异常可能提示有病理学意义。

CysC作为反映早期肾功能不全的敏感指标已得到普遍应用，近年来，在糖尿病肾病早期，高血压肾病，心血管疾病和甲状腺疾病等疾病中作为相关标记物不断得到深入研究。

2 CysC与肾脏疾病肾脏功能对机体内环境平衡十分重要，如肾功能损伤会对机体产生严重影响。

临床早期肾功能损害若能够及时进行治疗，可逆转发生细胞外基质增生、肾小球基底膜增厚等病理变化从而避免损伤肾小球血管。

如未能及早治疗会发展为终末期肾脏疾病。

CysC是肾功能辅助诊断理想的生物标志物，它恒速产生，自由过滤，并最终分解代谢。

患者肾功能损伤后CysC在血液中的含量会随肾小球滤过功能变化而变化。

在发展成肾衰竭时，血清CysC含量可高于正常水平的10倍。

最新研究表明，CysC不仅可以评估肾小球滤过率(GFR，glomerular filtrationrate)，还可以预测肾损伤。

Herget-Rosenthal等人研究发现，血清 CysC作为一种有用的急性肾损伤检测标志物优于肌酐和肾小球滤过率来评估肾功能的有效性[1]。

血清胱抑素C在肾脏疾病中的检测及其意义【关键词】肾功能损害；胱抑素C；肾小球滤过［摘要］目的：进一步证明血清胱抑素C(Cystain C)是反映肾功能损害及肾损伤的初期灵敏标志物。

方式：用颗粒增强散射免疫比浊法检测血清胱抑素C的浓度，同时检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肌酐清除率(Ccr)。

结果：血清胱抑素C在对照组、肾功能不全组、肾衰组的值别离为±mg/L、±mg/L、±mg/L。

结论：血清胱抑素C是反映肾脏损伤的灵敏指标，能够替代操作繁琐的内生Ccr来判定肾小球滤过功能。

［关键词］肾功能损害；胱抑素C；肾小球滤过肾脏疾病是临床上一种常见的疾病，各类缘故致使的肾功能损害是进展为终末性肾病及心血管疾病的危险因素。

唯一能阻止肾脏疾病恶化的方式确实是早诊断、早医治以逆转损伤的肾功能。

肾脏疾病的初期诊断目前有了新发觉，较多研究发觉胱抑素C是反映肾功能损害的灵敏指标。

对此咱们利用颗粒增强散射免疫比浊法检测血清胱抑素C(Cystain C)的浓度，进一步探讨其在各类肾病中的转变情形，并同血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和肌酐清除率(Ccr)进行比较。

现报告如下。

1 材料与方式研究对象148例肾脏疾病患者血清和尿液标本来自我院肾内科，其中男性82例，女性66例。

年龄为12岁~68岁，平均年龄54岁。

其中肾功能不全患者115例，肾衰患者33例。

并对148例肾脏疾病患者依照Ccr的范围不同将其分为以下四组:Ⅰ组Ccr(60～80) ml/(min・ m2)；Ⅱ组Ccr(40～59)ml/(min・ m2)；Ⅲ组Ccr(20～39)ml/(min・；Ⅳ组Ccr<20 ml/(min・ m2)；正常对照50例，均来自我院健康体检人员，无肾病史和其他慢性病史。

仪器Cystain C浓度的检测利用美国德灵公司生产的BN Ⅱ全自动免疫分析BUN仪，Scr、BUN、尿肌酐的检测利用美国Abbott 公司生产的Aeroset2000全自动生化分析仪。

血清胱抑素C测定的临床意义及方法学进展在肾小球滤过功能试验中，血清肌酐、尿素及内生肌酐清除率是最常用的指标。

由于以上指标尚存诸多不足，故人们一直在寻找新的反映肾小球滤过率变化的指标。

胱抑素C是一种低分子量蛋白质，是半胱氨酸蛋白酶抑制物超家族的成员之一，可由机体所有有核细胞产生，产生率恒定。

循环中的胱抑素C仅经肾小球滤过而被清除，是一种反映肾小球滤过率变化的理想的内源性标志物。

血清胱抑素C浓度在作为肾功能试验时优于血清肌酐浓度。

至于胱抑素C测定的方法学，已有快速、简便且可自动化的“颗粒加强免疫比浊法”的最新报道，使血清胱抑素C测定的广泛临床应用成为可能。

胱抑素C（Cystatin c）由Grubb等首先报道其血清浓度与GFR密切相关，可作为肾小球滤过功能指标[1]。

近年来有关胱抑素C测定的临床应用及方法报道日渐增多，本文就胱抑素C的结构与功能，作为反映肾小球滤过功能的内源性标志物及方法学进展作一综述。

1 胱抑素C的结构与功能胱抑素C，以前也被称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白，是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质，分子量为13KDa,由120个氨基酸残基组成，是一种分泌性蛋白质。

细胞先合成一个带信号肽的前体蛋白，编码胱抑素C的基因位于人类第20号染色体，大约为4.3Kb，包含3个外显子，基因上游45-50核苷酸处为“TATA盒样”序列（ATAAAA）。

胱抑素C 基因5′-侧翼区GC含量较高，转录起始位点上游400bp序列的G+C＞70%，富含GC 的“岛”也包括外显子1及内含子1、5′侧的一部分，整个富含GC“岛”约900bp，G+C 含量为73%。

此区域CpG/GpC比值接近于1，因此此区CpG是非甲基化的。

在胱抑素C基因5′侧翼1Kb序列中发现了2个“GC盒”（GGGCGG），此区也发现了增强子核心样序列（GTGGAAGG）。

由以上可见，胱抑素C基因5′侧翼序列与“看家基因”的启动子区具有相同的特性，即缺乏典型的“CAAT盒”、富含GC、有与转录因子Spl结合的“GC 盒”。

胱抑素C临床检验及在肾脏疾病应用中的研究进展【摘要】胱抑素 C 也被称为y-微量蛋白y -后球蛋白，由人体核细胞产生，肾小球滤过而被清除，正常生理状态下血清胱抑素 C 水平恒定。

胱抑素 C 的临床检测实现了自动化、标准化、检验结果的可比性，所以目前它是一个最好、最有效反映肾小球滤过功能的标志物。

本文对胱抑素 C 临床检验及在肾脏疾病中的研究进展进行综述。

【关键词】胱抑素；临床检验；肾脏疾病；胱抑素 C(cystatinC，CysC)是一种非糖化蛋白,由个氨基酸组成，相对分子量 130kd，产生于人体所有有核细胞,不受年龄、性别、饮食、肌肉量和运动的影响，生成量非常稳定，仅在使用大剂量糖皮质激素或甲状腺功能异常时影响 CysC的产生。

CysC可以自由通过肾小球滤过膜的机械屏障与电荷屏障，并几乎全部在近曲小管重吸收，不被肾小管分泌。

Cys C 的临床检测实现了自动化、标准化、检验结果的可比性，是目前最好、最有效反映肾小球滤过功能的一个标志物，评价肾小球滤过率（GFR）敏感性和特异性可达到 89%~97%。

1 CysC在临床检验中研究进展1．1 检验方法及参考品研究进展检测CysC的方法可概括为均相法和非均相法。

因非均相法具有耗时长、线性范围窄、难以自动化等缺点，而被均相法替代。

目前，检测 CysC的均相法主要包括颗粒增强透射免疫比浊法 (particle—enhanced PETIA)、颗粒增强散射比浊法 (particle—enhancedBe—pholemetryimmunoassay，PENIA)。

PETIA法可实现自动化、高通量、检测周期短等优点而更被广泛应用，以Roch和丹麦 DAKO公司为代表；以 Siemens公司为代表 PENIA法因其准确度高、线性范围宽、不精密度低等特点而常被作为比对方法进行性能评价。

自2010年 CysC参考品 ERM—DA471上市后，使得CysC检测结果在不同检测方法间的一致性得到提高。

多发性骨髓瘤患者血清胱抑素C的检测及其临床意义摘要目的探讨多发性骨髓瘤患者血清胱抑素C水平变化的临床意义。

方法92例初治多发性骨髓瘤患者作为观察组，92例健康体检者作为对照组，比较未治疗前两组血清胱抑素C、β2-微球蛋白、白蛋白水平及其中28例多发性骨髓瘤患者治疗达完全缓解后血清胱抑素C、β2-微球蛋白的水平变化。

结果未治疗前观察组血清胱抑素C、β2-微球蛋白水平显著高于对照组（P＜0.05），白蛋白水平显著低于对照组（P＜0.05）；治疗后达到完全缓解的28例患者血清胱抑素C、β2-微球蛋白水平较治疗前均显著下降（P＜0.05）。

结论血清胱抑素C与多发性骨髓瘤肿瘤负荷密切相关，其检测水平高低对多发性骨髓瘤临床治疗的疗效评价及预后判断具备很好的参考价值。

关键词多发性骨髓瘤；血清胱抑素C；β2-微球蛋白【Abstract】Objective To investigate clinical significance of changed serum cystatin C in multiple myeloma patients. Methods There were 92 early multiple myeloma patients as observation group and 92 healthy people as control group. Comparison was made on serum cystatin C，β2-microglobulin，albumin level in both groups before treatment，and changed serum cystatin C and β2-microglobulin levels in 28 complete remission cases after treatment. Results Before treatment，the observation group had obviously higher serum cystatin C and β2-microglobulin levels （P＜0.05），and lower albumin level than the control group （P＜0.05）. All 28 complete remission cases after treatment had much lower serum cystatin C and β2-microglobulin levels than those before treatment （P＜0.05）. Conclusion Due to its close correlation with multiple myeloma load，detection of serum cystatin C contains highly referring value for curative effect evaluation and prognosis judgment for multiple myeloma.【Key words】Multiple myeloma；Serum cystatin C；β2-microglobulin多发性骨髓瘤是一种浆细胞克隆性恶性肿瘤，骨髓瘤细胞分泌大量异常的单克隆免疫球蛋白，引起高粘滞综合征、肾脏损害、继发感染等一系列症状。

胱抑素Ｃ临床意义自从19８5年以来,半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(ｃｙstatin Ｃ)已被视为检测肾功能得良好标志物,由于其不受许多生理病理因素得影响,同肾小球滤过率(GＦＲ)得其她标志物相比具有众多优越性。

cyｓｔatin C在一系列生理病理过程中也发挥着作用,有重要得临床意义。

一、肾功能评价与肾功能标志物临床评价肾脏疾病进展与严重程度,一般以肾功能为参考,肾功能一般以肾小球滤过率(GFR)反映。

它就是反映肾功能最重要得指标、GFR指在一定时间内通过肾小球得血浆量(定义为在单位时间内肾脏将若干容积血浆内得物质从体内清除,其单位一般为ml/ｍin物质)。

它不能直接测定,必须借助某物质得肾清除率来反映。

根据GFＲ标志物来源,分外源性与内源性。

外源性标志物包括菊粉(ｉnｕｌin)、碘海醇(iohexｏl)、５1Cｒ—EDＴA、99mTc－DTＰA等。

内源性标志物包括血清肌酐(Ｓcr)、尿素(Ureａ)、β2—微球蛋白(β2-M)、β—痕迹蛋白(BTP)以及血清胱抑素Ｃ(Cysｔaｔｉn C,Ｃys C)。

二、肾小球滤过率检测现状1、外源性标志物肾清除率测定方法被视为GFR评判得“金标准”;但存在许多不足、首先这些物质费用昂贵;其次同位素标记得物质涉及放射暴露问题;另外标本采集、实验操作烦琐;碘海醇测定需要特殊仪器设备(射线荧光光谱仪);加之受年龄、性别与体表面积得影响,尤其就是无法实现危急患者检测得及时性,从而限制其在临床得应用、2、内源性标志物就是在评价肾小球滤过功能实验中最常用得指标、理想内源性标志物应具备:⑴稳定得生成率;⑵稳定得血浓度,不受其她病理变化得影响,不与蛋白结合;⑶肾小球自由滤过;⑷肾小管不分泌、不重吸收;⑸无肾外清除。

目前常用得指标为血清肌酐(Scr)、尿素(Ｕrea)、内生肌酐清除率(Ｃcr),但由于受许多肾外因素,如年龄、性别、身高、肌肉量、膳食结构、机体疾病状况、药物等,以及肾小管对肌酐得分泌等影响,使这些指标不能满足内源性标志物得要求。

胱抑素C的临床应用研究与进展胱抑素C(CysC)是近年研究发现的一种特异性高、准确性好,较肌酐清除率(CCr)更为敏感的评价肾小球滤过率(GFR)的新指标。

CysC能自由通过肾小球滤过膜,在近曲小管几乎全部被重吸收，在血液中的浓度较为恒定,是反映GFR的灵敏指标。

随着分子生物学技术的发展,CysC的检测技术不断提高,为临床的研究和应用提供了支持,现已成为国内外研究热点。

目前CysC临床检测使用颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)或颗粒增强散射免疫比浊法(PENIA),全自动化,操作简单速度快,具有较好的灵敏度和准确性。

在儿科疾病、心血管疾病、肿瘤化疗及肾移植等方面的应用具有很高的临床价值。

肾脏的主要功能是排泄代谢废物及调节水、电解质、酸碱平衡,以维护机体内环境的稳定。

GFR是评价肾功能的重要指标。

20世纪80年代中期瑞典的Simonsen等[1]通过一系列研究发现CysC是一种特异性高、准确性好、较CCr更为敏感的反映GFR的新指标。

由于CysC分子量小,携带正电荷,能够自由通过肾小球滤过膜,并在近曲小管几乎被完全重吸收,重吸收后被完全分解代谢,同时肾小管也不分泌,在组织中产生的速率恒定[2],而且在炎性反应状态下其产生率不会改变,不受其他因素如年龄、性别、饮食、炎症、感染、血脂、肝脏疾病等干扰。

肾脏是清除循环中CysC的唯一器官,血中浓度由肾小球滤过决定,因此,CysC被临床作为理想反映GFR变化的内源性标志物而日渐受到重视。

随着CysC商品化试剂盒的出现,该项目已逐渐广泛应用于临床。

1 CysC的结构和生物学特性CysC是相对分子质量为13×103,由122个氨基酸组成的低分子量非糖基碱性蛋白质,等电点为9.3。

所有的有核细胞均可产生,生成速度稳定,不受炎症、胆红素、溶血、三酰甘油的影响,且与性别、年龄、肌肉量无关[3]。

它主要分布于细胞外液,如精液、脑脊液、血液、尿液、胸水、唾液等。

光抑素C(Cystatin C)的临床意义一、光抑素C(Cystatin C)具有如下特性：1、Cystatin C 是简单、快速估算肾小球滤过功能的好标记物⏹没有性别差异⏹不受肌肉的量干扰⏹精确、准确的方法学2、精确、准确的计算GFR（GFR全称：Glomerular Filtration Rate，又称为肾小球滤过率，是肾功能指标，正常成年人的肾小球滤过率平均值为125ml/min。

）⏹测定Cystatin C 可以早期计算患者GFR⏹避免了51Cr-EDTA, 碘海醇清除率方法的昂贵、侵入性、缓慢的缺点3、作为GFR标记物Cystatin C：⏹低分子量蛋白⏹在所有有核细胞中产量恒定⏹肾脏是唯一排泄途径⏹不受年龄、性别、肌肉的量影响4、作为GFR标记物血，Cystatin C优于血肌酐，可以快速、简便并且可靠地评价肾脏功能5、对于肾脏疾病有较广泛的应用前途，是较好的临床指标二、目前，临床上常用的一些内源性指标（如BUN、SCr、CCr等）都有一定的局限性，且不同程度的受一些肾性或肾外因素的干扰。

BUN是蛋白质代谢产生的氨在肝脏经鸟氨酸循环生成的终产物。

由肾小球滤过，大部分被排泄，小部分被肾小管重吸收而返回血液。

当肾功能轻度受损时BUN可无变化，当高于正常时，说明有效肾单位的60-70%已经受到损害，因此BUN不能作为肾脏早期功能受损的测定指标。

BUN还受到蛋白摄入量，体内蛋白质分解水平（急性传染病、上消化道出血、烧伤、大手术后等使其升高），肾血流量等因素的影响。

一些物质如氨基水杨酸、胆红素、血红蛋白、磺胺等可使其测定升高；而维生素C、左旋多巴、链霉素等使其测定值降低。

SCr（肌酐）是肌酸的代谢产物，主要由肾小球滤过排出，肾小管有少量分泌。

由于肾脏有强大的储备能力和代偿能力，肾小球受损的早期或轻度损害时，血中浓度可正常，只有当肾小球滤过功能下降到正常的1/3时，SCr才明显上升。

SCr主要受肌肉量，肉的摄入量及体内代谢水平的影响。