迟钝爱德华氏菌的分离鉴定及体外抑菌效果研究

体外抑菌实验方案一、实验目的1.探究不同抑菌剂对特定细菌的抑制效果。

2.优化抑菌剂的配方，提高抑菌效率。

3.为临床应用提供理论依据。

二、实验材料1.实验菌株：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌等。

2.抑菌剂：酒精、碘伏、过氧化氢等。

3.实验器材：培养皿、移液器、酒精灯、生物安全柜等。

三、实验方法1.菌株活化：将实验菌株从冻存管中取出，接种至斜面培养基，37℃培养24小时。

2.制备菌液：将活化后的菌株用无菌生理盐水洗涤，调整菌液浓度为10^6CFU/mL。

3.抑菌剂配制：按照实验设计，配制不同浓度和配比的抑菌剂。

4.抑菌实验：在生物安全柜中，将菌液均匀涂布于培养皿，加入不同抑菌剂，置于37℃培养箱培养24小时。

5.观察结果：观察各培养皿中细菌生长情况，记录抑菌效果。

6.数据处理：统计分析各抑菌剂的抑菌效果，计算抑菌率。

四、实验步骤1.活化菌株：从冰箱取出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌等菌株，接种至斜面培养基，放入37℃培养箱培养24小时。

2.制备菌液：将活化后的菌株用无菌生理盐水洗涤，调整菌液浓度为10^6CFU/mL。

3.配制抑菌剂：按照实验设计，配制酒精、碘伏、过氧化氢等抑菌剂的不同浓度和配比。

4.抑菌实验：在生物安全柜中，将菌液均匀涂布于培养皿，加入不同抑菌剂，放入37℃培养箱培养24小时。

5.观察结果：观察各培养皿中细菌生长情况，记录抑菌效果。

6.数据处理：统计分析各抑菌剂的抑菌效果，计算抑菌率。

五、实验结果1.不同抑菌剂对金黄色葡萄球菌的抑制效果：酒精浓度为75%时，抑菌效果最佳，抑菌率为99.99%；碘伏浓度为5%时，抑菌率为99.95%。

2.不同抑菌剂对大肠杆菌的抑制效果：过氧化氢浓度为3%时，抑菌效果最佳，抑菌率为99.99%；酒精浓度为75%时，抑菌率为99.90%。

3.不同抑菌剂对白色念珠菌的抑制效果：碘伏浓度为5%时，抑菌效果最佳，抑菌率为99.99%；过氧化氢浓度为3%时，抑菌率为99.95%。

大鲵的迟钝爱德华菌感染
吴中明;王欢;敖弟书;王玉;王美丽
【期刊名称】《遵义医学院学报》
【年(卷),期】2007(30)4
【摘要】目的对大鲵不明原因死亡进行病原学鉴定,并根据药物敏感实验结果选用抗生素治疗.方法从患病死亡大鲵足部溃烂病变部位及心脏取血采样,分别用液体培养基、普通琼脂平板、血平板进行增菌和画线培养分离,经法国BiomeriruxVITEK(R)2全自动微生物分析系统检测.结果与结论引起感染是迟钝爱德华菌(E.tarda),该病原体对庆大霉素、头孢曲松钠和环丙沙星等抗菌药物敏感,用敏感的庆大霉素和头孢曲松钠处理,控制了感染的流行.
【总页数】3页(P464-466)
【作者】吴中明;王欢;敖弟书;王玉;王美丽
【作者单位】遵义医学院微生物学教研室,贵州,遵义,563003;遵义医学院微生物学教研室,贵州,遵义,563003;遵义医学院微生物学教研室,贵州,遵义,563003;遵义医学院微生物学教研室,贵州,遵义,563003;遵义医学院微生物学教研室,贵州,遵
义,563003
【正文语种】中文
【中图分类】Q959.5
【相关文献】
1.牙鲆迟钝爱德华氏菌吲哚阴性变异株感染症及其病原特性研究 [J], 张晓君;陈翠珍;房海;战文斌;葛慕湘;巩元芳
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大菱鲆源杀鱼爱德华氏菌的分离鉴定及其毒力和耐药基因检测分析黄华;于广磊;王力勇;高雁;张岚;孙佰鸣;庄焱文;王鹤【期刊名称】《大连海洋大学学报》【年(卷),期】2022(37)6【摘要】为探究2019年山东省烟台市某大菱鲆Scophthalmus maximus养殖场出现的以腹水、体表及内脏出血为主要症状的疾病发病原因,通过平板划线法从患病濒死大菱鲆(体质量为350 g±5 g)肝、肾、脾和心等组织中分离获得1株优势菌,采用形态学观察,16S rRNA、gyrB基因和rpoB基因序列分析,PCR特异性引物扩增,以及人工回归感染试验等方法对优势菌进行鉴定,检测其毒力基因、耐药基因携带情况,并采用纸片扩增法(K-B)检测分离株对10类23种抗生素的敏感性。

结果表明:从患病鱼分离获得的菌株,生理生化特征为革兰氏阴性杆菌,赖氨酸、鸟氨酸和葡萄糖产酸等试验呈阳性,枸橼酸、精氨酸、蔗糖、甘露醇、苦杏仁苷、尿素、硝酸盐还原和氧化酶等试验呈阴性;经16S rRNA、gyrB基因、rpoB基因序列比对,以及爱德华氏菌特异性引物扩增等鉴定,确定其为杀鱼爱德华氏菌Edwardsiella piscicida;该菌的毒力基因型为fimA+-fimB+-fimC+-fimD+-esrB+-mukF+-katB+-sodB+-citC+-gadB+,耐药基因型为TEM+-ant(3″)-Ⅰ+-tet(A)+-mcr-1+-Sul2+-Sul3--oqxA-;将分离菌株制备成7.8×1010、7.8×109、7.8×108、7.8×107CFU/mL 4个浓度的菌悬液,腹腔注射健康大菱鲆,得到菌株对受试鱼的半致死浓度(LD50)为1.2×108CFU/mL;药敏试验显示,该菌株对磺胺类2种、多肽类2种和利福霉素类1种在内的5种抗生素类药物耐药;对β-内酰胺类5种、氨基糖苷类3种、喹诺酮类5种、大环内酯类1种、氯霉素类1种、四环素类2种和呋喃类1种在内的18种抗生素敏感。

鱼类迟缓爱德华氏菌肠溶口服疫苗的制备及免疫保护效应研究魏俊利;薛淑霞;孙妍;王雪惠;董学旺;孙金生【期刊名称】《天津农学院学报》【年(卷),期】2024(31)2【摘要】本文采用海藻酸钠作为载体,采用乳化复沉淀方法包裹迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)全菌制备疫苗微球。

制备工艺研究结果表明:3%(m/v)海藻酸钠溶液,4%(m/v)CaCl_(2)溶液,水油相比1∶2,乳化剂Span801%,搅拌速度1200 r/min为最佳制备工艺,微球包埋率达91.04%,微球平均粒径(16.51±11.87)μm。

通过人工胃肠液对疫苗微球的耐受性进行分析,微球在体外人工模拟胃液和肠液中16h释放率分别为0.8%和98.1%。

用表达有绿色荧光蛋白的大肠杆菌做示踪标记,口灌免疫半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Gunther),疫苗能耐受胃的酸性环境影响,通过前消化道到达后肠。

免疫保护效应研究表明,口腔灌注疫苗后,出现特异性和非特异性免疫应答,疫苗组在初免后第14天血清效价达到峰值1∶322;外周血白细胞吞噬率在初免后第14天达到峰值27.06%,吞噬指数在初免后第14天达到峰值1.65。

初免后第28天用迟缓爱德华氏菌活菌攻毒,对照组死亡率58.82%,疫苗组死亡率13.33%,免疫保护率为77.33%。

本研究优化了鱼类肠溶口服疫苗的制备工艺,疫苗免疫评价结果表明,该口服疫苗可以有效激活鱼体免疫反应,预防鱼类疾病发生。

【总页数】5页(P51-55)【作者】魏俊利;薛淑霞;孙妍;王雪惠;董学旺;孙金生【作者单位】天津市动物疫病预防控制中心;天津师范大学生命科学学院;天津市水产研究所【正文语种】中文【中图分类】S942.5【相关文献】1.以减毒沙门氏菌为载体的抗贾第虫肠溶疫苗制备及免疫效果检测2.迟缓爱德华菌菌蜕疫苗对罗非鱼注射和口服免疫的效果分析3.3种免疫途径下迟缓爱德华菌菌蜕疫苗对欧洲鳗的免疫保护效果4.迟缓爱德华氏菌及鱼类迟缓爱德华氏菌病研究进展5.肠型点状产气单胞菌口服疫苗对草鱼的免疫保护效应研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

几种常见淡水鱼致病菌的药敏试验摘要研究了强力霉素、盐酸左氧氟沙星、诺氟沙星、红霉素、甲硝唑、土霉素、氟苯尼考、氟强先锋、呋喃妥因9种抗生素和五倍子、大黄、金银花、黄芩、陈皮、黄连、板蓝根、黄柏、连翘、黄梅10种中草药对迟缓爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、金黄色葡萄球菌、嗜麦芽寡养单胞菌和藤黄微球菌5种常见淡水鱼类致病菌的体外抑菌效果。

结果显示：抗生素中氟苯尼考、诺氟沙星、红霉素、呋喃妥因对这几种致病菌抑菌效果明显；中草药中五倍子、大黄、黄芩的抑菌效果较好。

关键词淡水鱼致病菌；中草药；抗生素；药敏试验近年来，随着水产养殖规模的扩大和集约化程度的提高，养殖环境日益恶化，近年来水产养殖病害发病率越来越高。

细菌性疾病是水产养殖动物最重要的疾病之一，2005年以来暴发的生物源性疾病中，细菌性疾病所占比例超过55%，严重制约了水产业的发展[1]。

由于渔民缺乏基本的药理知识，存在滥用抗生素类药物的现象，导致耐药菌株的产生，给细菌病的防治带来了很大的困难。

选取了迟缓爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、金黄色葡萄球菌、嗜麦芽寡养单胞菌和藤黄微球菌5种常见淡水鱼的致病菌进行体外中西药抑菌试验，旨在为淡水鱼细菌病防治提供依据，减少致病菌耐药菌株的产生。

金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌、迟缓爱德华氏菌、嗜麦芽寡养单胞菌和藤黄微球菌，均是淡水养殖动物最常见的致病菌，它们的大量繁殖给淡水鱼类养殖业带来巨大威胁。

其中金黄色葡萄球菌是毒力最强的引起化脓性疾病的化脓菌，可以产生溶血毒素、肠毒素、血浆凝固酶等毒素和酶，引起水生动物外伤化脓死亡[2]。

嗜水气单胞菌通常能够引起的疾病多为暴发性传染病，患病水生动物死亡率较高，通常导致鱼、鳖、鳗、牛蛙及蚌等水生动物的败血症及局部感染[3]。

藤黄微球菌是黄鳝出血病的主要病原，黄鳝感染后出现体表弥散性出血、肛门红肿外翻、肝脏肿大出血等症状并造成高死亡率[4]。

嗜麦芽寡养单胞菌是近年来引起斑点叉尾鮰高致死性、传染性疾病的主要病原之一，发病鱼主要出现体表褪色斑、脱肛、严重肠炎和腹水等病征，并以肠套叠为主要病理特征，其发病率和死亡率均在90%以上，造成的经济损失极其严重[5]。

致病性鮰爱德华氏菌药敏及中草药提取液体外抑菌试验张彬;黄婷;陈明;陈福艳;雷爱莹;梁万文【期刊名称】《广西水产科技》【年(卷),期】2010(000)002【摘要】采用琼脂扩散法和二倍稀释法测定了31种抗生素和10味中草药及组合对致病性细爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)的抑菌作用.结果表明:31种抗菌类药物中,病原菌对头孢克洛、复达欣、头孢噻吩、先锋必、氟哌酸、环丙沙星、氨曲南、恩诺沙星、头孢拉定、头孢克肟、阿莫西林、新生霉素、先锋V、氧氟沙星、呋喃妥因、头孢呋肟、头孢氨苄和羧苄青霉素18种药物敏感,对克拉霉素、菌必治、红霉素、林可霉素、多粘菌素B、罗红霉素6种药物表现耐药性.10种中草药水提取物对鮰爱德华氏菌均有不同程度的押菌作用,其中黄芩水提物的抑菌作用最强,其对鮰爱德华氏菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为3.75 mg/mL和7.50mg/mL.抑茵圈平均直径达29.17±1.60 mm;连翘、大黄、蒲公英、金银花、黄柏有较强的抑菌作用,MIC为7.50～15.0 mg/mL,抑菌圈平均直径均在20 mm以上;而龙胆草表现出较弱的抑菌作用.【总页数】10页(P1-10)【作者】张彬;黄婷;陈明;陈福艳;雷爱莹;梁万文【作者单位】广西水产研究所,南宁,530021;广西水产研究所,南宁,530021;广西水产研究所,南宁,530021;广西水产研究所,南宁,530021;广西水产研究所,南宁,530021;广西水产研究所,南宁,530021【正文语种】中文【相关文献】1.7种常用渔药及组合对致病性鮰爱德华氏菌的体外抗菌试验 [J], 张彬;黄婷;陈福艳;陈明;余晓丽;梁万文2.致病性(鱼回)爱德华氏菌药敏及中草药体外抑菌作用研究 [J], 张彬;黄婷;陈明;陈福艳;雷爱莹;梁万文3.鮰爱德华氏菌与鮰爱德华氏菌病 [J], 耿毅;汪开毓;陈德芳;黄锦炉4.20种中草药对迟缓爱德华氏菌的体外抑菌试验 [J], 陈言峰;邹记兴5.9种中草药及17种组方对迟钝爱德华氏菌的体外抑菌试验 [J], 李瑞;白东清;郭永军;朱国霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

迟缓爱德华氏菌可视化核酸试纸条检测方法的研究房敬真;房保海;徐守振【期刊名称】《青岛农业大学学报：自然科学版》【年(卷),期】2018(35)3【摘要】为建立迟缓爱德华氏菌的快速检测方法,本研究根据迟缓爱德华氏菌溶血相关基因eha设计保守引物,建立迟缓爱德华氏菌快速、可视化核酸试纸条检测技术。

试验结果显示,该技术快速、灵敏、具有良好的特异性,灵敏度可达到30CFU/mL,比琼脂糖凝胶成像检测技术灵敏度要高近10倍。

迟缓爱德华氏菌可视化核酸试纸条检测方法的成功建立对水产养殖过程中迟缓爱德华氏菌病防治具有重要的意义。

【总页数】4页(P220-223)【关键词】迟缓爱德华氏菌;核酸试纸条;可视化检测【作者】房敬真;房保海;徐守振【作者单位】青岛农业大学动物医学院;山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心【正文语种】中文【中图分类】S941.42【相关文献】1.检测鲆鱼腹水病病原菌迟缓爱德华氏菌和溶藻弧菌的嵌套PCR方法 [J], 薛淑霞;孙金生2.环介导等温扩增联合横向流动试纸条可视化检测志贺氏菌 [J], 李尚阳;周前进;张严峻;潘军航;陈炯3.基于核酸横流生物传感器的沙门氏菌快速、可视化检测方法 [J], Wang Yue;Wu Haiyan;Sun Xiuwei;Fu Bing;Wang Kuiyu;Chang Hongbiao;Wan Jiayu;Chen Zhibao;Wu Zhimin4.量子点标记荧光免疫试纸条可视化检测肉品中志贺氏菌研究 [J], 朱芳茜;何扩;张秀媛;魏东;王硕;李育峰;陈一;赵瑞平5.“大菱鲆迟缓爱德华氏菌抗体快速检测试纸条的研制和应用”项目通过验收 [J],因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。