X射线对体外培养乳鼠心肌细胞损伤的初步实验研究
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定 不 同剂 量 ｘ 射 线照射 后 第 ２ 时心肌 细 胞培 养基 乳酸 脱 氢酶 （ ｃａｅｄｈｄｏｅ ａｅＬ ４小 １ ｔｔ ｅｙ ｒｇｎｓ ，ＤＨ） ａ 的含 量 ； 激
光扫描共 聚 焦显微 镜观 察心肌 细胞 经 ４ ＧｙＸ射 线照射 后 第 ２ ｈ的形 态学 改变。结果 ： ０ ４ 心肌 细胞 有较 高的辐
脏 的生理 、 理发 展过程 中起 着 重要作用 ， 病 被认 为是
１３ ４ Ｌ ｉ Ｃ Ｐ 激光 扫描共 聚焦显微镜 系统 ． ． ｅ ａＴ ＳＳ ｃ
Ｍ ＲＣ一 １ ２ ０ ４型 ： ｏ Ｒａ Ｂｉ— ｄ公 司 。
１ ４ 方 法 ．
１ ４ １ 心肌 细胞 培养 出生 １ ～３天 的乳 鼠 （ ． ． 天 雌
织 剪成 １ ｍｍ～３ ｍｍ 碎 片后 ， ０ ２ 胰 酶 ３ ℃水 用 ．５ ７
步 研究放 射 对心 肌细 胞 的影 响 ， 本文 利用 体 外培 养 乳 鼠心肌 细胞 为实验 模型 ， 过不 同放 射剂 量 Ｘ射 通 线 照射心 肌 细胞 ， 利用 全 自动 生 化分 析仪 定 量测 定 心 肌细胞 培 养上 清液 中的乳 酸脱 氢 酶 的含 量变 化 ， 来评 价放 射诱 发 心肌 细胞 损 伤程 度 ， 并从 细胞 形 态 学 的改变进 一步 评价 ｘ射 线对 心 肌细胞 的损伤 ， 从 而 为探 讨 Ｘ射 线 对 心脏 损 伤 及其 防护 提供 新 的实 验依据 。
１ ３ ３ ＯＩ ． ． ＹＭＰ ２ ０ Ｕ￥ ７ ０全 自动 血生 化 分 析 仪 ： 日
本 ｏＩ Ｐ ＹＭ ＵＳ公 司 。
亡 ［。 １ 有学 者认 为 ， ］ 尽管辐 射诱发 细胞损 伤无论 在体
内或体外 均 不是 细胞 杀 伤 的主 要模 式 ， 射 线诱 发 但 的细胞损伤 在体 内仍 有一 定作 用乜 。细胞 损伤 在心 ］
成 细胞 悬 液 ， 于培养 瓶 中培 养 ， 细胞 贴壁 后 ， 置 待 用
差 速 贴 壁 法 ， ５ Ｏ。３ ℃细胞 培 养箱 中 ， 育 于 ％Ｃ ， ７ 孵 ９ ｍｉ ， ０ ｎ 由于纤 维 细胞 较心 肌细 胞更 易 于贴壁 ， 此 用 法 可使 大 部分 纤 维 细胞 贴壁 ［ ， 富 含心 肌 细胞 的 ４取 ］ 培养 液 。转 移 至另一 培养瓶 中继续培 养 。
工企 医刊 ２ １ 年 第 ２ ００ ３卷 第 １ 期
・
论著 ・
Ｘ射线对体外培养乳鼠心肌细胞损伤的初步实验研究
周 锋
张 三 典
２ ５０ ） （ 江苏 省江 阴市 中医院检 验科 ， １ ４ ０ （ ２ ４ ０ ） 江苏 苏州 大学 附属 第一 医 院， １ ０ ０
摘 要 目的 ： 步探讨 一定 剂量 的 Ｘ射 线对 体外培量测 初 全
１ 材 料 和 方 法
浴 消 化 ２ ｍ ｎ 收 集 细胞 ， 匀后 吸 出上 层 ， 复 ５ ０ ｉ， 打 反 次～ ６ 。 悬液 ２ ０ ｒｍｉ， 心 ｌ ｍｉ 。 次 混 ０ ０／ ｎ 离 Ｏ ｎ 弃上 清液 后用 ＤＭＥ 洗涤 ， Ｍ 混悬 液 ２ ０ ｒｍｉ ， ０ ０／ ｎ 离心 １ｍｉ ， ０ ｎ 弃 上 清 液 ， ＤＭＥ 培 养液 （ ２ 小 牛血 清 ） 加 Ｍ 含 ０ 制
心 脏 由代 偿 性 变 化 向病 理 性 变 化 发展 的 细胞 学 基 础。 由于心 肌细胞 的损伤 ， 从而诱 发 了多种心 血管系 统疾 病及 临床综合 症的发 生发展 。国内外许 多文献
报 道 了放 射 与心 肌细 胞损 伤 的相 关 性研 究 ， 为进 一
雄 兼用 ）参 照 Ｓ ｄ ｓ ｉ ［ 等介 绍 的方法 。常 规 以 ， ａ ｏ ｈｍａ３ ］ 碘酒 、 酒精 消毒 ， 剪开 胸腔 ， 菌条件取 出心脏 ， 无 放入 无 钙 镁 Ｐ Ｓ溶 液 中 ， 去 心‘ 及 主动 脉 ， 心 室组 Ｂ 剪 房 将
射 抗 性 ， ０ ～３ Ｇ 在 Ｇｙ Ｏ ｙ的放 射 剂量 下心 肌 细胞培 养基 乳 酸脱 氢酶 的 含量 变化不 是很 明显 （ ＞０ ０ ） 当放 Ｐ ．５ ；
射 剂量≥４ Ｇｙ时培 养基 乳酸 脱 氢酶 的含 量显 著升 高 （ ＜０ ０ ） 激 光扫描 共 聚 焦显微 镜 观 察到 经 ４ＧｙＸ ０ Ｐ ．５ ； Ｏ
１ １ 实验动物 ．
供。
选用 出生 １ ～３天 的 Ｓ ｒｑ ｅ 天 ｐａ ｕ －
按此 法 培养 的心肌 细胞 ， 培养 后 ２ ｈ即 可见 于 ４
部 分 细胞 收缩 ， 更换 含 １ 小 牛血 清 的 ＤＭＥ 培 ５ Ｍ 养液 继续 培养 ， ３ 每 天换 培养 液 １次 ， 第 ４ 的细 取 天 胞进 行实 验研究 。
Ｄ ｗｅ ａ ｌｙ乳 鼠 ， 苏州 大 学 医 学 院 实 验 动 物 中心 提 由 １ ２ 主 要试 剂 乳酸 脱氢 酶 （ Ｄ 试 剂盒 由 日本 ． Ｌ Ｈ）
一
化公 司提 供 ； 吖啶橙 （ Ａ０） 碘 化丙 啶 （ Ｉ试 剂 盒 、 Ｐ）
１ ４ ２ 心肌 细胞 的 Ｘ射 线 照射 ．．
取 对数生 长期 的
均为 Ｓｇ 公 司产 品 。 ｉｍａ
１ ３ 仪 器 ．
心肌细胞， 将贴 壁 心肌 细 胞 消 化 制成 细 胞 悬 液 ， 用
Ｄ Ｍ 培 养基 将 细胞 调至 ３ ０／ ， 据 实验 设 ＭＥ ×１ ｍｌ根
射 线照射后 第 ２ ｈ的典型 的心肌 细胞形 态学 改变 。结论 ： 定剂 量的 ｘ 射线 对心肌 细胞有 直接 损伤作 用 。 ４ 一
关键词 Ｘ 射 线 乳 鼠心 肌 细 胞 乳 酸 脱 氢 酶
司。
近年来 ， 放射诱 发 的心脏操 作性病 变 Ｅ益 增多 ， ｌ
逐 渐成为影 响放射 治疗疗 效 的重 要 因素之一 。研究 表 明 ： 类 心 脏 受 照 小 部 分 ， 肌 细 胞 可 发 生 凋 人 心
