HPLC法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量
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HPLC法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量
目的 建立测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚含量的方法。 方法 采用HPLC法，C18柱（6.0 mm×200 mm，5μm）；流动相为磷酸盐缓冲液（0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH至3.4）-甲醇-三乙胺（80︰20︰0.02）；检测波长为254 nm。 结果 对乙酰氨基酚在11.43～114.30μg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0.999 7），平均回收率99.21%，RSD=0.87%。 结论 本方法简便、准确，重现性好，可用于复方氨酚烷胺片的质量控制。
标签： 高效液相色谱法；复方氨酚烷胺片；对乙酰氨基酚；含量
复方氨酚烷胺片为复方制剂，为感冒用药类非处方药药品。适用于缓解普通感冒及流行性感冒引起的发热、头痛、四肢酸痛、打喷嚏、流鼻涕、鼻塞、咽痛等症状。本品不宜与氯霉素类、巴比妥类等并用。国家药品标准WS1-XG-015-2002所记载的复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚含量方法为永停滴定法。容量分析最大缺点是误差较大，结果不准确。作者通过筛选多种色谱体系，建立了HPLC法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量，方法简单可靠，可用于复方氨酚烷胺片的质量控制。
1 仪器与试药
UVIKON紫外分光光度计（法国），METTLER电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司），HP1100高效液相色谱仪（美国安捷伦）；HP1100化学工作站，Agilent G1313ALS自动进样器；对乙酰氨基酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号100018-200408，供HPLC含量测定、比色检查用，使用前不需干燥处理）；复方氨酚烷胺片（长春海外制药集团有限公司，批号：20120403；吉林省吴太感康药业有限公司，批号：1112039；安徽三精万森制药有限公司，批号：20120502）；三乙胺为分析纯，水为纯净水，甲醇为一级色谱纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱Diamonsil-C18柱（6.0 mm×200 mm，5 μm）；流动相：磷酸盐缓冲液（0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH至3.4）-甲醇-三乙胺（80︰20︰0.02）；检测波长254 nm；流速为1.0 mL/min；进样量：20μL；柱温：30℃[1]。
2.2 对照品溶液的制备
用天平精密称取对乙酰氨基酚对照品0.114 3 g，置500 mL容量瓶中，加流动相适量溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品储备液，浓度为228.60μg/mL的溶液。量取上述溶液25 mL，置50 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀即得对照品溶液[2]，浓度为114.30μg/mL。
2.3 供试品溶液的制备
取样品10片，称定，计算平均片重，研细，精取细粉（约相当于对乙酰氨基酚300 mg），置100 mL容量瓶中，加流动相适量溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精取续滤液，用流动相定量稀释成约含对乙酰氨基酚约100μg/mL，即得供试品溶液[3-4]。
2.4 阴性对照试验
分别取已经制备好的对乙酰氨基酚对照溶液、供试品溶液和阴性溶液，按照2.1项下的色谱条件，分别准确进样20μL，考察本系统的适用性。见图1。
2.5 线性关系的考察
精密量取对照品储备液5.0、10.0、15.0、20.0、25.0 mL，分别置25 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按照2.1的色谱条件进样，结果对乙酰氨基酚在11.43～114.30μg/mL范围内线性关系良好。以对照品进样量（μg）为横坐标，以峰面积为纵坐标，计算线性回归，得回归方程：Y=45 039.13X+2
013.5，r=0.999 7（n=5）。
2.6 精密度试验
精密吸取线性关系考察项下中间浓度的对照品溶液，重复5次进样，分别测定色谱峰的峰面积，RSD为0.91%，本法精密度良好[5-6]。
2.7 重复性试验
取同一批次的样品，按照“2.3”项下方法制成供试品溶液后，重复进样6次，按照上述色谱条件测定峰面积，RSD为0.95%。该方法的重现性良好。
2.8 稳定性试验
取重复性试验所用的供试品溶液，分别于放置0、4、8、12、16、20、24 h之后，取20μL进样，然后测定色谱峰的峰面积，RSD为0.87%。说明供试品溶液在24h内基本稳定。
2.9 加样回收率试验
取长春海外制药集团有限公司（批号：20120403，含量252.18mg/片）6份，精密称定后，分别加入对照品28.18 mg，按照上述色谱条件测定，结果本法平均回收率为99.21%，RSD为0.87%，表明本法回收率的重现性较好。见表1。
2.10 测定样品中对乙酰氨基酚的含量
分取实验用样品各10片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚300mg），按照2.3项下的方法制备样品溶液，分别准确吸取20 μL，按照2.1项下色谱条件，以峰面积计算，结果见表2。
3 讨论
当选用浓度较高的磷酸二氢钾溶液时，与甲醇混合易产生浑浊，经多次试验，选用0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液时，出峰时间和峰形均满意。
对照品溶液在200～400 nm范围内，作扫描图谱，进行峰检测，分析图谱，发现对乙酰氨基酚在254 nm波长处有最大吸收，故选用该波长为检测波长。
该方法实验结果证明，杂质和辅料对复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量测定几乎无影响，阴性对照无干扰，结果准确，可用于复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量测定。
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[2] 苏彦文，张凤荣，苏彦斌.HPLC法对二种复方氨酚烷胺制剂中对乙酰氨基酚含量测定[J].吉林化工学院学报，2012，7（29）：27-30.
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