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大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用大鼠血清，血浆及相关液体样本中脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)的含量。
试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：请来电咨询保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)水平。
用纯化的大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)，再与HRP标记的脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)呈正相关。
抗磷脂酶a2抗体参考范围
抗磷脂酶A2（aPLA2）是一种酸性磷脂酶，在人体内担任多种生理活动。
aPLA2抗体是一种自身免疫抗体，可针对该酶进行攻击。
近年来，aPLA2抗体与许多自身免疫性疾病的发生和进展有关。
因此，检测aPLA2抗体可以帮助医生诊断和治疗相应的疾病。
aPLA2抗体通常采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测，其结果
会被报告为单位/ml。
以下是aPLA2抗体参考范围:
1. IgG类aPLA2抗体参考范围:
- 阴性：≤ 5单位/mL
- 弱阳性： 6-20单位/mL
- 阳性： >20单位/mL
2. IgM类aPLA2抗体参考范围:
- 阴性：≤ 5单位/mL
- 弱阳性： 6-10单位/mL
- 阳性： >10单位/mL
注意：不同实验室可能使用不同的检测方法和不同的单位，因此结果可能略有不同。
始终应该参考所用实验室的参考范围，以避免误解结果。
如果您的、PLA2抗体结果阳性，可能需要进行进一步测试以确定与自身免疫性疾病的关联。
一些自身免疫性疾病与aPLA2抗体阳性相关，如系统性红斑狼疮（SLE）、抗磷脂综合症（APS）和类风湿性关节炎（RA）等。
总之，aPLA2抗体参考范围是指ELISA测定的IgG类和IgM类aPLA2抗体单位/mL的正常范围。
如果测试结果超出正常范围，可能需要进行进一步测试以确定可能存在的疾病。
SEA867Hu96T脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)适用生物：人使用说明书仅供研究使用，不用于临床诊断!第12版[预期应用]本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中LpPLA2含量。
[试剂盒内容]试剂名称数量试剂名称数量96孔板（预包被）196孔板覆膜4标准品2标准品稀释液1×20mL检测溶液A1×120μL检测溶液A稀释液1×12mL检测溶液B1×120μL检测溶液B稀释液1×12mLTMB底物1×9mL终止液1×6mL洗涤液（30×）1×20mL使用说明书1[需自备的设备及试剂]1、450±10nm滤光片的酶标仪（建议仪器使用前提前预热）2、单道或多道微量移液器及吸头3、稀释样品的EP管4、蒸馏水或去离子水5、吸水纸6、盛放洗液的容器7、0.01mol/L（或1×）磷酸缓冲盐(PBS)，pH=7.0-7.2[试剂盒的储存及有效期]1、未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20o C，其余试剂请置于4o C保存备用。
2、使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，此外，请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝箔袋装好，并拉紧密封铝箔袋，置于-20o C保存。
注意：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。
产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。
[标本的采集与保存]1、血清：将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4o C过夜，然后1,000×g离心20分钟，取上清即可，将上清置于-20o C或-80o C保存，避免反复冻融。
磷脂酶a2受体抗体检测方法宝子，今天咱们来唠唠磷脂酶A2受体抗体检测方法。
一种常见的检测方法是酶联免疫吸附测定法，也就是ELISA啦。
这个方法就像是给抗体设了一个小陷阱。
把可能含有磷脂酶A2受体抗体的样本放到一个特殊的板子上，这个板子上早就准备好了和磷脂酶A2受体相关的东西。
如果样本里有抗体，就会像小磁铁吸铁屑一样，紧紧地结合上去。
然后再通过加入一些特殊的试剂，让这种结合能够被我们看到，就像给它们打上一个小标记一样，最后通过仪器来检测这个标记的多少，就能知道抗体的量啦。
还有免疫荧光法呢。
想象一下，我们把细胞或者组织当作一个小舞台，磷脂酶A2受体就在这个舞台上。
我们把样本和它们放在一起，如果有磷脂酶A2受体抗体，就会像小粉丝找到偶像一样，扑上去结合。
然后我们再加入一些能发出荧光的小助手，这些小助手会紧紧地贴在抗体上，在特殊的光线下，就会看到荧光啦，哪里有荧光，哪里就有抗体在和受体结合呢。
另外，免疫印迹法也很厉害哦。
这个方法就像是把蛋白质们拉出来排队。
先把样本里的蛋白质按照大小分开，就像把不同身高的小朋友排好队。
然后把它们转移到一个膜上，再用和磷脂酶A2受体相关的东西去检测，如果有对应的抗体，就会出现特殊的条带，就像小朋友头上戴了个特殊的帽子，我们通过看这个帽子就能知道抗体的存在啦。
不同的检测方法都有自己的优缺点呢。
ELISA比较简单、快速，能检测大量的样本，就像一个高效的小机器。
免疫荧光法可以直接看到抗体在细胞或者组织里的位置，就像给抗体拍个小照片。
免疫印迹法对抗体的检测很特异，就像一把精准的小尺子。
宝子，这些检测方法在医学研究和疾病诊断里都超级重要呢。
比如说在一些肾脏疾病的诊断中，如果能检测到磷脂酶A2受体抗体，就像找到了一把解开疾病谜团的小钥匙，医生就能更好地了解病情，制定治疗方案啦。
希望你现在对磷脂酶A2受体抗体检测方法有了一点小了解哦。
。
脂蛋白磷脂酶a2参考范围脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）是一种与心血管疾病相关的生物标志物，其参考范围在临床诊断中起着重要的作用。
本文将详细介绍Lp-PLA2的参考范围以及其在心血管疾病中的意义。
Lp-PLA2是一种由肝脏合成的酶，在循环系统中主要与低密度脂蛋白（LDL）结合。
它的主要功能是水解氧化磷脂，产生一系列的生物活性分子，如磷脂酸和溶菌酶。
这些分子可导致血管壁的炎症反应和动脉粥样硬化的发展。
正常情况下，Lp-PLA2的参考范围为1.5-5.5 ng/mL。
这个范围是根据大量的临床研究得出的，可以作为判断心血管疾病风险的重要指标之一。
这意味着当一个人的Lp-PLA2水平在这个范围内时，他们的心血管疾病的风险相对较低。
然而，当Lp-PLA2水平超过5.5 ng/mL时，就意味着存在心血管疾病的风险。
高水平的Lp-PLA2与动脉粥样硬化的发展、心脏病发作和中风等心血管疾病密切相关。
因此，测量Lp-PLA2水平对于评估患者的心血管疾病风险以及制定相应的预防和治疗策略非常重要。
Lp-PLA2的测量通常是通过血液样本进行的。
在临床实践中，常用的方法是酶联免疫吸附试验（ELISA）。
这种方法可以准确地测量血液中Lp-PLA2的浓度，并与心血管疾病的发展风险相关。
除了作为心血管疾病的风险指标外，Lp-PLA2还可以帮助评估药物治疗的效果。
一些研究表明，某些降血脂药物和抗炎药物可以显著降低Lp-PLA2的水平，从而减少心血管事件的发生。
因此，对于患有心血管疾病的患者，监测Lp-PLA2的水平可以指导药物治疗的选择和调整。
Lp-PLA2还可以作为其他疾病的生物标志物。
一些研究发现，Lp-PLA2的水平与炎症性疾病、代谢综合征和肾功能损害等疾病有关。
因此，通过测量Lp-PLA2的水平，可以为这些疾病的诊断和治疗提供一定的参考。
Lp-PLA2是一种重要的心血管疾病生物标志物，其参考范围为1.5-5.5 ng/mL。
脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）测定试剂盒（酶联免疫吸附法）
适用范围：用于体外定量测定人血浆中脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）的浓度。
1.1 包装规格
24人份/盒、48人份/盒、96人份/盒
1.2主要组成成分
注：校准品靶值具有批特异性，详见瓶签；质控品质控范围及靶值具有批特异性，详见瓶签。
不同批号试剂盒中各组分不可以互换使用。
2.1外观
试剂盒各组分齐全、完整，液体组分无渗漏，标识清晰易识别。
2.2空白限
不大于20ng/ml。
2.3准确度
回收率为85%～115％。
2.4线性
试剂盒的线性范围为（20,450）ng/ml，相关系数r不小于0.9900。
2.5重复性
用高低两个浓度水平的样本各重复检测10次，其变异系数（CV）不大于15%。
2.6特异性
与白蛋白（ALB ）50g/L、髓过氧化物酶（MPO）800ng/ml做交叉反应，Lp-PLA2检测浓度应不大于20ng/ml。
2.7校准品溯源性
根据GB/T21415-2008及有关规定提供所用校准品的来源、赋值过程以及不确定度等内容，溯源至企业工作校准品，并与已上市产品比对赋值。
2.8质控品赋值有效性
分别取高、低两个浓度质控品，检测其浓度值，每个测试值均应在所示的质控范围内。
2.9批间差
用3个批号试剂盒检测同一份样本，变异系数（CV）不大于15%。
2.10稳定性
2℃～8℃储存，有效期为12个月，取到效期后产品进行检测，检测结果应符合2.1～2.6、2.8项要求。
脂蛋白相关磷脂酶a2和磷脂酶a2
脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）和磷脂酶A2（PLA2）都是与
脂质代谢和炎症相关的酶。
首先，让我们从生物学角度来看这两种酶。
磷脂酶A2是一类酶的总称，它在细胞膜中催化磷脂酰胆碱的水解，产生游离的脂肪酸和溶血磷脂酰胆碱。
这些游离脂肪酸和溶血
磷脂酰胆碱在炎症和动脉粥样硬化等疾病中起着重要作用。
而脂蛋
白相关磷脂酶A2是一种血浆酶，主要与低密度脂蛋白（LDL）结合，它在动脉粥样硬化的形成和斑块不稳定性中发挥重要作用。
接下来，我们从临床角度来看这两种酶。
磷脂酶A2的活性与心
血管疾病的发生和发展密切相关。
高水平的磷脂酶A2活性与动脉粥
样硬化斑块的不稳定性和心脑血管事件的发生风险增加有关。
因此，磷脂酶A2活性已成为心血管疾病的生物标志物之一。
而脂蛋白相关
磷脂酶A2作为一种血清标志物，也被广泛用于心血管疾病的风险评
估和预后判断。
此外，从药物研发角度来看，这两种酶也成为潜在的药物靶点。
针对磷脂酶A2的抑制剂已被研究用于治疗动脉粥样硬化等疾病，而
针对脂蛋白相关磷脂酶A2的抑制剂也被认为具有潜在的治疗作用。
总的来说，磷脂酶A2和脂蛋白相关磷脂酶A2在生物学、临床和药物研发等方面都具有重要意义，对于疾病的发生发展以及治疗具有重要的指导意义。
希望这些信息能够全面回答你的问题。
人脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2)水平。
用纯化的人脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2)，再与HRP标记的Lp-PLA2抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2)浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为540μg/mL，360μg/mL ，180μg/mL，90μg/mL，45μg/mL）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
计算：在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：0μg/mL -800μg/mL保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月Human lipoprotein-associated phospholipase A2Drug NamesGeneric Name：Human lipoprotein-associated phospholipase A2 (Lp-PLA2) ELISA Kit. PurposeThis kit allows for the determination of Lp-PLA2 concentrations in Human serum, blood plasma, and other biological fluids.Principle of the assayT he kit assay Human Lp-PLA2 level in the sample, use Purified Human Lp-PLA2 antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add Lp-PLA2 to wells, Combined Lp-PLA2 antibody which With HRP labeled, become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of Lp-PLA2 in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Materials provided with the kitSpecimen requirements1.serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.2.plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.3.Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.4.cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release ofintracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.5.Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidlyfrozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.remove supernatant.6.extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevantliterature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.7.Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active. Assay procedure1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separately. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 540μg/mL，360μg/mL ，180μg/mL，90μg/mL，45μg/mL)2.add sample：Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testin g sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except blank well.7.incubate：Operation with 3.8.washing：Operation with 5.9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.Important notes1.The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes inthe room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.2.washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolvewhen dilute . Washing does not affect the result.3.add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids theexperimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .4.if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the firststandard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.5.Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.6.The substrate evade the light preservation.7.Please according to use instruction strictly, The test result determination must take themicrotiter plate reader as a standard.8.All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective materialprocess.9. Do not mix reagents with those from other lots.CalculateAssay range0μg/mL -800μg/mLStorage and validity1．Storage ： 2-8℃. 2．validity ： six months.Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.This chartis for reference only。
