禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究

目前，用于禽流感强制免疫的疫苗主要有三种：禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rl-H5)、重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1，Re-5+Re-4株)、禽流感H5-H9二价灭活疫苗。

不论是活疫苗还是灭活苗，影响禽流感免疫效果的因素很多，实践中应对疫苗种类的选择、防疫程序的制订、接种途径、操作方法给予充分的重视，才能尽量减少免疫失败或不良反应。

1、禽流感疫苗使用前的准备工作1.1制定合理的免疫程序一般在制订禽流感免疫程序时应考虑以下几方面的因素：①当地禽流感疫病的流行情况；②雏鸡的母源抗体水平；③免疫间隔时间；④鸡的免疫应答能力；疫苗的种类；免疫接种的方法；⑤免疫对鸡健康及生产性能的影响等。

鸡禽流感疫苗首免日龄在12~15d，如果日龄太小，鸡免疫系统尚未完全建立，会造成免疫系统损伤，影响免疫效果。

另一方面，母源抗体高滴度时，免疫不仅不能刺激机体产生应有的免疫应答，抗体反而会被中和，结果免疫失败。

最好通过实验室检测禽流感母源抗体水平来确定首免日龄。

说明书中禽流感油乳剂灭活苗免疫保护期为4个月，这是在实验室条件下采用SPF鸡检测得出的数据，而实际生产中影响禽流感疫苗免疫效果的因素很多，如饲养管理、营养水平、日龄大小、健康状况等，导致疫苗的保护期长短不一。

所以，不能机械地照搬说明书中的保护期来推测免疫时间，有条件的，应根据HI抗体检测结果来指导何时免疫。

1.2了解禽流感疫苗要选择合适的疫苗对鸡群免疫接种，由于禽流感病毒血清型众多，不同亚型之间不能完全保护。

在生产实践中应针对当前和本地流行的疫情来选择血清型、病毒株相同的疫苗。

如果疫苗毒株的抗原性与感染病原的差异较大，很难取得良好的防疫效果。

疫苗要妥善保存，禽流感疫苗是生物制品，对温度要求很严格，切忌随便存放，否则对疫苗有直接影响。

灭活疫苗要保存在低温、干燥、阴暗的地方，适宜温度为2~8℃，活疫苗为冻干苗，则在冰箱冷冻室-15℃以下保存，切忌反复冻融。

CHINA PORT SCIENCE AND TECHNOLOGY禽流感病毒H5N4的重组酶介导检测方法学研究陈淑丹I廖静I王玲I罗鹏I郭利川2郑伟广吴忠华I应清界2摘要采用逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(Reverse Transcription Recombinase-aided amplification,RT-RAA)建立检测禽流感病毒H5N1的快速方法，根据禽流感病毒H5N1保守序列设计引物及探针，将H5N1RNA逆转录为cDNA,然后以cDNA作模板.扩增检测病毒核酸序列本研究构建了带有H5N1核酸序列的质粒，以此为模板检测不同浓度的质粒.分析该方法的灵敏度，对已知样本进行检测来验证方法的特异性.设计的H5N1特异性引物和探针，能在3『C恒温下，10-30min可有效扩增岀相应病毒的核酸.与其他流感病毒无交叉反应；对质粒的检测灵敏度可达10拷贝建立的RT-RAA检测禽流感病毒H5N1方法灵敏度和特异性均较髙.且该方法操作简单，适用于禽流感病毒H5N1的快速检测关键词禽流感病毒H5N1；逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA)；分子检测Rapid Detection of H5N1Avian Influenza Virus Based onRAA Fluoresce n ee AssayCHEN Shu-Dan1LIAO Jing1WANG Ling1LUO Peng1GUO Li-Chuan*12ZHENG Wei1,WU Zhong-Hua1YING Qing-Jie2Abstract A quick assay of detecting H5N1avian influenza virus was established through reverse transcription recombinase-aided amplification assay(RT-RAA).H5N1avian influenza virus RNA was transcribed into the cDNA by a reverse-transcription reaction,which served as template for RAA amplification.We design universal primer and probe according to the conserved nucleic acid sequence of H5N1virus.Then constructed plasmid and clinical samples were used to evaluate the specificity and sensitivity of the method.The results showed that nucleic acids of H5N1could be well amplified with specific primer and probe,while nucleic acids of other viruses had negative amplification results.The whole reaction was completed within30minutes under constant temperature of 39°C.The study indicates that the RT-RAA method is very sensitive and able to detect10copies.The established RT-RAA assay had high sensitivity and specificity,ready-to-hand for rapid detection of H5N1avian influenza virus.Keywords H5N1avian influenza virus；reverse transcription recombinase-aided amplification(RT-RAA)；molecular detectio n基金项目:海关总署科研项目(2019HK139)通讯作者：郑伟(1979-),男，汉族，杭州人，博士，主任医师.主要从事口岸病原体检测工作，E-mail：*************** 1•杭州国际旅行卫生保健中心(杭州海关口岸门诊部)杭州3100122.江苏奇天基因生物科技有限公司无锡2141351.Hangzhou Intemationai Travel Healthcare Center(Hangzhou Customs Port Outpatient Departments),Hangzhou3100122.Jiangsu Qitian Gene Bio-Sci&Tech Co.Ltd,Wuxi2141354中国口岸科学技术禽流感病毒可通过空气传播，引起急性呼吸道感染高致病性禽流感H5N1曾在亚洲、欧洲和非洲引起大量家禽的流感暴发野生鸟类包括海鸟、海鸥和家鸭被认为是病毒的天然宿主。

夏季如何做好动物疫病预防作者：王飞龙孙华来源：《新农村》2012年第20期夏季是动物疫病的高发季节，也是消灭传染源的最佳时机，科学规范地做好规模场、散养户畜禽防疫工作，确保畜牧业健康发展。

下面从两方面谈谈如何做好夏季动物疫病预防。

一、夏季动物免疫1.免疫病种有国家强制免疫的和江苏省新增加的，如：猪瘟、高致病性猪蓝耳病、口蹄疫、高致病性禽流感、新城疫、猪链球菌病、羊痘、狂犬病等。

2.免疫对象指辖区内所有新补栏的或超过免疫保护期的健康畜禽。

3.免疫程序与方法（1）高致病性禽流感a.对辖区内所有鸡全部用重组禽流感H5N1亚型，Re-4株+Re-6株二价苗，胸部肌注。

对首次免疫的种（蛋）鸡3～4周后再进行一次加强免疫。

b.肉鸡7～14日龄时，用重组禽流感H5N1亚型，Re-4株+Re-6株二价苗免疫一次，每只0.3ml。

c.对种（蛋）鸭、种（蛋）鹅，用H5N1亚型（Re-6株）禽流感灭活苗免疫。

对新生雏鸭或雏鹅14～21日龄时初免，每只0.5ml，间隔3～4周，再进行一次加强免疫，每只1ml.d.肉鸭（鹅），7～10日龄用H5N1亚型（Re-6株）禽流感灭活苗进行免疫，肉鸭免疫一次即可，每只0.5ml，肉鹅须间隔3～4周，再进行一次加强免疫，每只1ml。

e.对辖区内所有鸡只全部集免疫，其它禽参照鸡的免疫程序进行。

（2）牲畜口蹄疫：猪用O型口蹄疫灭活苗强制免疫，牛、羊用O型-亚洲I型口蹄疫二价苗强制免疫，对奶牛、种公牛还要使用A型口蹄疫疫苗强制免疫。

a.猪用O型口蹄疫灭活苗，对新生仔猪以及虽已免疫但已过保护期（一般4个月左右）的猪进行免疫，新生仔猪一般在28～35日龄时首次免疫，每头肌注1ml，间隔1个月后进行一次强化免疫。

每头肌注2ml。

b.对新生羔羊、犊牛以及虽已免疫但已过保护期（一般4个月左右）的羊、牛，使用O型-亚洲I 型口蹄疫二价灭活疫苗进行免疫，对新生羔羊在28～35日龄、新生犊牛在90日龄左右进行初免，每头肌注1ml，间隔1个月后进行一次强化免疫，每头肌注1ml。

281 制定适合自己鸡场的 免疫程序 根据本地流行病学的 情况， 雏鸡母源抗体的水 平 ，制 定 出 适 合 自 己 鸡 场 的 免 疫 程 序 ，适 合 的 免 疫 程 序 是成功的关键 。

我国区域广 大 ，气 候 差 异 大 ，各 地 流 行 病 的 发 生 有 所 区 别 ，免 疫 程 序不能千篇一律 。

一般认为 以下几种疾病在我国各地 均 有 发 生 ，比 如:马 立 克 、新 城 疫 、 支 气 管 、 法 氏 囊 、鸡 痘 、减 蛋 综 合 症 、低 致 病 性 禽流感、 高致病性禽流感， 这些病的预防在各地免疫 程序制定时都必须考虑 。

其 他疾病如： 传染性喉气管 炎 、传 染 性 脑 脊 髓 炎 、传 染 性 鼻 炎 、支 原 体 等 在 不 同 季 节、 不同区域流行区别较 大 ， 可根据情况加以选择 。

2 选择质量可靠的疫苗 建 议 ，有 条 件 的 鸡 场 在 使用疫苗时首先将疫苗检 测 ，不 但 检 测 疫 苗 本 身 的 抗 原 效 价 ，还 要 检 测 疫 苗 中 是 有网状内皮增生和白血病 病毒等疫苗容易携带的免 疫抑制病病毒 。

尽量杜绝苗 源 性 污 染 ，避 免 疫 苗 免 疫 同 时 接 种 其 他 疾 病 ，造 成 鸡 群 发病 。

油苗的选择根据饲养 鸡群的代次选择不同疫苗， 种 鸡 尽 量 选 择 进 口 疫 苗 ，商 品鸡一般选择国内大公司 生产的疫苗就可以 。

3 疫苗的保存 疫苗在运输和保存过 程 中 ，要 避 免 温 度 过 高 和 直 接 暴 晒 ，通 常 冻 干 活 疫 苗 保 存在 -15℃ 条 件 下 , 保 存 期 为 1~2 年 ; 保 存 在 0℃ ~4℃ 条 件 下 , 保存期为 8 个月 ， 活苗一 定避免反复冻融 。

4 疫苗的使用兽药大观目前在高致病性禽流感的强 制免疫中 ， 主要使用的是重组禽流 感 病 毒 H5 亚 型 二 价 灭 活 苗 （H5N1 ，Re-5+Re-4 株 ）（ 以下简称 灭活苗 ） 和禽流感 - 新城疫重组二 联 活 疫 苗 （rl-H5 型 ）（ 以 下 简 称 活 疫苗 ）。

H5N1Re-5株和H9亚型SS株对土三黄鸡的免疫效果对比路彩霞;李军成;何殷娥【摘要】[目的]探究HSN1 Re -5株和H9亚型SS株对土三黄鸡不同的免疫效果.[方法]选用广西桂林市某种鸡场土三黄鸡180只,试验组注射禽流感H5和H9疫苗,对照组不注射疫苗,检测145日龄注射H5和H9疫苗后的抗体水平.[结果]禽流感H5疫苗145日龄注射后第170日龄抗体检测:试验1、2组分别比各自对照组的平均抗体值比较差异达0.01极显著水平;禽流感H9疫苗145日龄注射后第170日龄抗体检测:试验1、2组分别比各自对照组的平均抗体值比较差异不显著.[结论]禽流感H5疫苗145日龄注射后能显著地提高抗体水平;禽流感H9疫苗145日龄注射后不能显著地提高抗体水平.%[Objective] To compare immune efficacy of avian influenza virus (AIV) Re-5 strain (H5N1 subtype) and SS strain (H9 subtype) in Guangxi Sanhuang chickens. [ Method] Oa total of 180 Sanhuang chickens were selected from a breeding chicken farm in Guilin City of Guangxi and assigned into four groups (n =45). At 145 days old, the chickens in the group I and II were inoculated with AIV Re-5 strain and AIV SS strain, but they were kept in cages separately. The two control groups were not inoculated. Antibody levels were determined at 170 days old. [ Result ] The level of antibodies against AIV Re-5 strain was significantly higher in the chickens of the group 1 and group II than in the corresponding control groups, respectively (P <0.01). The level of antibodies against AIV SS strain was not significantly different between the group I and its control group or between the group II and its controlgroup. [ Conclusion] The antibody level of chickens can be increased bythe AIV Re-5 strain but not by the AIV SS strain.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)021【总页数】3页(P12871-12873)【关键词】土三黄鸡;H5疫苗;H9疫苗;免疫效果【作者】路彩霞;李军成;何殷娥【作者单位】广西农业职业技术学院,广西南宁530007;广西农业职业技术学院,广西南宁530007;广西农业职业技术学院,广西南宁530007【正文语种】中文【中图分类】S858.31高致病性禽流感是一种世界范围的禽类疫病，给养禽生产造成了巨大的经济损失，是目前严重危害养鸡业的疾病之一。