禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究

目前，用于禽流感强制免疫的疫苗主要有三种：禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rl-H5)、重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1，Re-5+Re-4株)、禽流感H5-H9二价灭活疫苗。

不论是活疫苗还是灭活苗，影响禽流感免疫效果的因素很多，实践中应对疫苗种类的选择、防疫程序的制订、接种途径、操作方法给予充分的重视，才能尽量减少免疫失败或不良反应。

1、禽流感疫苗使用前的准备工作1.1制定合理的免疫程序一般在制订禽流感免疫程序时应考虑以下几方面的因素：①当地禽流感疫病的流行情况；②雏鸡的母源抗体水平；③免疫间隔时间；④鸡的免疫应答能力；疫苗的种类；免疫接种的方法；⑤免疫对鸡健康及生产性能的影响等。

鸡禽流感疫苗首免日龄在12~15d，如果日龄太小，鸡免疫系统尚未完全建立，会造成免疫系统损伤，影响免疫效果。

另一方面，母源抗体高滴度时，免疫不仅不能刺激机体产生应有的免疫应答，抗体反而会被中和，结果免疫失败。

最好通过实验室检测禽流感母源抗体水平来确定首免日龄。

说明书中禽流感油乳剂灭活苗免疫保护期为4个月，这是在实验室条件下采用SPF鸡检测得出的数据，而实际生产中影响禽流感疫苗免疫效果的因素很多，如饲养管理、营养水平、日龄大小、健康状况等，导致疫苗的保护期长短不一。

所以，不能机械地照搬说明书中的保护期来推测免疫时间，有条件的，应根据HI抗体检测结果来指导何时免疫。

1.2了解禽流感疫苗要选择合适的疫苗对鸡群免疫接种，由于禽流感病毒血清型众多，不同亚型之间不能完全保护。

在生产实践中应针对当前和本地流行的疫情来选择血清型、病毒株相同的疫苗。

如果疫苗毒株的抗原性与感染病原的差异较大，很难取得良好的防疫效果。

疫苗要妥善保存，禽流感疫苗是生物制品，对温度要求很严格，切忌随便存放，否则对疫苗有直接影响。

灭活疫苗要保存在低温、干燥、阴暗的地方，适宜温度为2~8℃，活疫苗为冻干苗，则在冰箱冷冻室-15℃以下保存，切忌反复冻融。

10.8
10.4
8.9
4.8
2.7
2.8
1.6
表3
组别 新支流（Re-9） A 疫苗 B 疫苗 空白对照 1d 7.8 7.8 7.8
免疫新支流油苗组H9抗体滴度比较
3d 7.6 6.8 6.4 7d 5.6 5 5.6 14d 3.3 2.3 2.1 21d 5.1 3.2 2.8 28d 6.2 5.5 5 35d 7.3 6 5.8
7.8
7.8
5.6
3
1.8
1.1
0.5
表4
组别 新支流（ Re-9 ） A 疫苗 B 疫苗 空白对照 1d 1118 1118 1118 1118
免疫新支流油苗组IB抗体滴度比较
3d 519 942 978 1169 7d 447 246 556 636 14d 397 281 358 236 21d 330 123 78 66 28d 883 233 289 102 35d 1838 1039 1227 154
1毒株优势--基因重组技术
Re-9株： 2个表面基因HA、NA基因来自禽流感（H9N2）病 毒,6个内部基因PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因来自流感（ H1N1）病毒。
H1N1 H9N2 H1N1
H9N2
H1N1
H1N1
1.1毒株优势---强大研发技术
普莱柯：国家兽用药品工程技术研究中心，国家级企业 技术中心。新支流（HL株）三联灭活疫苗，国内首创。 国家禽流感参考实验室（OIE禽流感参考实验室），成熟 的流感病毒基因工程重组技术。
2.国家“863”最新科研成果----新型复合 佐剂
新型复合佐剂：由可降解的多聚物构成 ; 抗原被包 裹在微粒中; 是新一代的佐剂 ; 有发展为单次剂量疫苗 的潜力，可降低疫苗接种量。 作用机制：长期的储存库效应， 长达数周至数月; 脉冲式的释放抗原; 靶向APC；可以模拟传统疫苗的初次 免疫和加强免疫效应。

CHINA PORT SCIENCE AND TECHNOLOGY禽流感病毒H5N4的重组酶介导检测方法学研究陈淑丹I廖静I王玲I罗鹏I郭利川2郑伟广吴忠华I应清界2摘要采用逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(Reverse Transcription Recombinase-aided amplification,RT-RAA)建立检测禽流感病毒H5N1的快速方法，根据禽流感病毒H5N1保守序列设计引物及探针，将H5N1RNA逆转录为cDNA,然后以cDNA作模板.扩增检测病毒核酸序列本研究构建了带有H5N1核酸序列的质粒，以此为模板检测不同浓度的质粒.分析该方法的灵敏度，对已知样本进行检测来验证方法的特异性.设计的H5N1特异性引物和探针，能在3『C恒温下，10-30min可有效扩增岀相应病毒的核酸.与其他流感病毒无交叉反应；对质粒的检测灵敏度可达10拷贝建立的RT-RAA检测禽流感病毒H5N1方法灵敏度和特异性均较髙.且该方法操作简单，适用于禽流感病毒H5N1的快速检测关键词禽流感病毒H5N1；逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA)；分子检测Rapid Detection of H5N1Avian Influenza Virus Based onRAA Fluoresce n ee AssayCHEN Shu-Dan1LIAO Jing1WANG Ling1LUO Peng1GUO Li-Chuan*12ZHENG Wei1,WU Zhong-Hua1YING Qing-Jie2Abstract A quick assay of detecting H5N1avian influenza virus was established through reverse transcription recombinase-aided amplification assay(RT-RAA).H5N1avian influenza virus RNA was transcribed into the cDNA by a reverse-transcription reaction,which served as template for RAA amplification.We design universal primer and probe according to the conserved nucleic acid sequence of H5N1virus.Then constructed plasmid and clinical samples were used to evaluate the specificity and sensitivity of the method.The results showed that nucleic acids of H5N1could be well amplified with specific primer and probe,while nucleic acids of other viruses had negative amplification results.The whole reaction was completed within30minutes under constant temperature of 39°C.The study indicates that the RT-RAA method is very sensitive and able to detect10copies.The established RT-RAA assay had high sensitivity and specificity,ready-to-hand for rapid detection of H5N1avian influenza virus.Keywords H5N1avian influenza virus；reverse transcription recombinase-aided amplification(RT-RAA)；molecular detectio n基金项目:海关总署科研项目(2019HK139)通讯作者：郑伟(1979-),男，汉族，杭州人，博士，主任医师.主要从事口岸病原体检测工作，E-mail：*************** 1•杭州国际旅行卫生保健中心(杭州海关口岸门诊部)杭州3100122.江苏奇天基因生物科技有限公司无锡2141351.Hangzhou Intemationai Travel Healthcare Center(Hangzhou Customs Port Outpatient Departments),Hangzhou3100122.Jiangsu Qitian Gene Bio-Sci&Tech Co.Ltd,Wuxi2141354中国口岸科学技术禽流感病毒可通过空气传播，引起急性呼吸道感染高致病性禽流感H5N1曾在亚洲、欧洲和非洲引起大量家禽的流感暴发野生鸟类包括海鸟、海鸥和家鸭被认为是病毒的天然宿主。

用于预防雏鸡传染性法氏囊病
颈背部皮下注射。18～20周龄鸡1.2ml/只
休药期28d
2℃～8℃保存，有效期为6个月
21
鸡传染性支气管炎疫苗
鸡传染性支气管炎活疫苗（H120株）
滴鼻或饮水接种。用于初生雏鸡的首免，不同品种鸡均可使用，至1～2 月龄时，须用H52 疫苗
21
鸡传染性支气管炎疫苗
鸡传染性支气管炎活疫苗（H120株）
9
鸡新城疫活疫苗（CS2株）
用于预防鸡新城疫，专供已经鸡新城疫低毒力活疫苗接种过的鸡使用，免疫期为1年
按瓶签注明的羽份，用灭菌生理盐水或其他适宜的稀释液稀释，皮下或胸部肌肉注射1ml（应在在产蛋前或休产期进行接种）
①本疫苗系用中等毒力株制成，专供已经鸡新城疫低毒力活疫苗接种过的1月龄以上的鸡使用，不得用于初生雏鸡。②(-15)℃以下保存，有效期为75株）
用于预防鸡传染性法氏囊病
用于14日龄鸡饮水接种。将1000羽份疫苗稀释于15升饮水中，持续搅拌直至溶解后，用于接种1000只雏鸡。雏鸡可在7日龄时进行接种，但一般情况下应在14日龄时首免，可在4周龄时加强接种
2℃～8℃保存，有效期为36个月
20
鸡传染性法氏囊病活疫苗（CJ-801-BKF株）
①疫苗稀释后应放冷暗处，限4h内用完。②饮水接种时，忌用金属容器，饮水前应停止2h～4h。③用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应进行无害化处理
23
鸡传染性支气管炎活疫苗（W93株）
用于预防嗜肾性鸡传染性支气管炎病毒感染。接种后5日产生免疫力，一次接种的免疫期为3个月，两次接种的免疫期为5个月
按瓶签注明羽份，用生理盐水稀释，每1000羽份加生理盐水30～50 ml，每只鸡滴鼻0.03～0.05 m1，饮水接种或在发病初期(越早越好)紧急接种时，接种量应加倍。饮水接种时，饮水量视鸡龄大小、品种、季节而定，5～10日龄5～10 m1；20～30日龄10～20 m1；成鸡，20～30 ml。炎热季节的饮水量应适当增加

夏季如何做好动物疫病预防作者：王飞龙孙华来源：《新农村》2012年第20期夏季是动物疫病的高发季节，也是消灭传染源的最佳时机，科学规范地做好规模场、散养户畜禽防疫工作，确保畜牧业健康发展。

下面从两方面谈谈如何做好夏季动物疫病预防。

一、夏季动物免疫1.免疫病种有国家强制免疫的和江苏省新增加的，如：猪瘟、高致病性猪蓝耳病、口蹄疫、高致病性禽流感、新城疫、猪链球菌病、羊痘、狂犬病等。

2.免疫对象指辖区内所有新补栏的或超过免疫保护期的健康畜禽。

3.免疫程序与方法（1）高致病性禽流感a.对辖区内所有鸡全部用重组禽流感H5N1亚型，Re-4株+Re-6株二价苗，胸部肌注。

对首次免疫的种（蛋）鸡3～4周后再进行一次加强免疫。

b.肉鸡7～14日龄时，用重组禽流感H5N1亚型，Re-4株+Re-6株二价苗免疫一次，每只0.3ml。

c.对种（蛋）鸭、种（蛋）鹅，用H5N1亚型（Re-6株）禽流感灭活苗免疫。

对新生雏鸭或雏鹅14～21日龄时初免，每只0.5ml，间隔3～4周，再进行一次加强免疫，每只1ml.d.肉鸭（鹅），7～10日龄用H5N1亚型（Re-6株）禽流感灭活苗进行免疫，肉鸭免疫一次即可，每只0.5ml，肉鹅须间隔3～4周，再进行一次加强免疫，每只1ml。

e.对辖区内所有鸡只全部集免疫，其它禽参照鸡的免疫程序进行。

（2）牲畜口蹄疫：猪用O型口蹄疫灭活苗强制免疫，牛、羊用O型-亚洲I型口蹄疫二价苗强制免疫，对奶牛、种公牛还要使用A型口蹄疫疫苗强制免疫。

a.猪用O型口蹄疫灭活苗，对新生仔猪以及虽已免疫但已过保护期（一般4个月左右）的猪进行免疫，新生仔猪一般在28～35日龄时首次免疫，每头肌注1ml，间隔1个月后进行一次强化免疫。

每头肌注2ml。

b.对新生羔羊、犊牛以及虽已免疫但已过保护期（一般4个月左右）的羊、牛，使用O型-亚洲I 型口蹄疫二价灭活疫苗进行免疫，对新生羔羊在28～35日龄、新生犊牛在90日龄左右进行初免，每头肌注1ml，间隔1个月后进行一次强化免疫，每头肌注1ml。

29
第五节 人感染高致病性禽流感
二、流行概况
全球概况 1997年5月 香港3个农场发生家禽H5N1流感，该 月在当地从3岁男孩体内分离到H5N1病毒 2003年2月 H5N1病毒开始在部分东南亚国家禽 类中广泛循环，数月内迅速波及8个国家 截至2006年8月23日 全球共报道241例确诊人 禽流感病例，死亡141例
第 二 十 二 章
流行性感冒是一个古老的、第一个实行全球 性监测的、病毒性急性呼吸道传染病。
今后相当长一段时期仍然无法完全控制它的 传播和流行。
随着近年来禽流感疫情的爆发和蔓延，流行 性感冒已越来越成为人们关注的焦点。
2
第一节 病原学 第二节 流行特征 第三节 流行过程 第四节 预防策略与措施 第五节 人感染高致病性禽流感
3
第一节 病原学
流感病毒的基本结构 抗原变异 分类 致病力 免疫力
4
第一节 病原学
一、流感病毒的基本结构
流感病毒属正粘病毒
科，是多形性有包膜病
毒，多为球形，直径80 ～120nm
核糖包膜 : 核糖蛋白 (NP) -RNA (7 or 8 片 断 ) 基质蛋白 (M)
脂质双分子层 血凝素 (HA) 神经氨酸酶 (NA)
21
第四节 预防策略与措施
一、流感的流行病学调查
调查原则 注意研究样本
对从不同地区不同研究样本得来的资料进行综合分析时应特 别注意，差异较大时应分别描述，研究单位宜小不宜大。
临床病例的确诊
无论在平时对流感的监测，还是对流感流行的诊断均须注意 要有明确的诊断依据。
减少错误分类
22
第四节 预防策略与措施
病原上表现出乙型病毒株活动增强，而甲型病 毒株活力相对减弱的趋势

281 制定适合自己鸡场的 免疫程序 根据本地流行病学的 情况， 雏鸡母源抗体的水 平 ，制 定 出 适 合 自 己 鸡 场 的 免 疫 程 序 ，适 合 的 免 疫 程 序 是成功的关键 。

我国区域广 大 ，气 候 差 异 大 ，各 地 流 行 病 的 发 生 有 所 区 别 ，免 疫 程 序不能千篇一律 。

一般认为 以下几种疾病在我国各地 均 有 发 生 ，比 如:马 立 克 、新 城 疫 、 支 气 管 、 法 氏 囊 、鸡 痘 、减 蛋 综 合 症 、低 致 病 性 禽流感、 高致病性禽流感， 这些病的预防在各地免疫 程序制定时都必须考虑 。

其 他疾病如： 传染性喉气管 炎 、传 染 性 脑 脊 髓 炎 、传 染 性 鼻 炎 、支 原 体 等 在 不 同 季 节、 不同区域流行区别较 大 ， 可根据情况加以选择 。

2 选择质量可靠的疫苗 建 议 ，有 条 件 的 鸡 场 在 使用疫苗时首先将疫苗检 测 ，不 但 检 测 疫 苗 本 身 的 抗 原 效 价 ，还 要 检 测 疫 苗 中 是 有网状内皮增生和白血病 病毒等疫苗容易携带的免 疫抑制病病毒 。

尽量杜绝苗 源 性 污 染 ，避 免 疫 苗 免 疫 同 时 接 种 其 他 疾 病 ，造 成 鸡 群 发病 。

油苗的选择根据饲养 鸡群的代次选择不同疫苗， 种 鸡 尽 量 选 择 进 口 疫 苗 ，商 品鸡一般选择国内大公司 生产的疫苗就可以 。

3 疫苗的保存 疫苗在运输和保存过 程 中 ，要 避 免 温 度 过 高 和 直 接 暴 晒 ，通 常 冻 干 活 疫 苗 保 存在 -15℃ 条 件 下 , 保 存 期 为 1~2 年 ; 保 存 在 0℃ ~4℃ 条 件 下 , 保存期为 8 个月 ， 活苗一 定避免反复冻融 。

4 疫苗的使用兽药大观目前在高致病性禽流感的强 制免疫中 ， 主要使用的是重组禽流 感 病 毒 H5 亚 型 二 价 灭 活 苗 （H5N1 ，Re-5+Re-4 株 ）（ 以下简称 灭活苗 ） 和禽流感 - 新城疫重组二 联 活 疫 苗 （rl-H5 型 ）（ 以 下 简 称 活 疫苗 ）。

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2．流感肺炎型
➢患者高热持续不退，迅速出现呼吸困难、发 绀、剧咳、有少量泡沫痰或泡沫黏液痰、或 痰中带血。 胸片见肺部双侧呈散在性絮状阴影， 由肺门向四周扩散。
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3．胃肠型
患者多为儿童，以恶心、呕吐、腹泻、 腹痛为主要症状，一般2～3d即可恢复。
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4．脑膜脑炎型
极少见。病毒侵入神经系统，引起病毒 性脑炎的表现，如高热、昏迷，谵妄，抽 搐等，并出现脑膜刺激征，脑脊液细胞数 可轻度增加。
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甲型流感病毒
甲型流感病毒大多呈球形，直径80～120nm，有囊 膜。基因组为单股负链RNA，在丙烯酰胺-琼脂糖-
尿素凝胶上电泳可得到8个基因片断。
依其外膜血凝素（H）和神 经氨酸酶（N）蛋白的抗原 性，目前可分为16个H亚型 （ H1 ～ H16 ） 和 9 个 N 亚 型 （N1～N9）。
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HA及NA的各自变异不断组合成新的变异株，足 够大的变异使人群中对原有流行株所建立的免疫 屏障不再能发挥有效的保护作用。 当人群充分易感时，变异株的攻击就引起疫情暴 发，这是导致流感大流行反复发生的重要原因。 显著的变异主要发生于甲型流感病毒，乙型流感 病毒则少见得多，而丙型流感病毒一般不发生。
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流感病毒感染后可以激发机体的免疫 保护反应。 感染2周内即可产生针对 HA的IgM、IgA、IgG抗体。
它们可以阻断流感病毒对宿主细 胞的吸附和穿入，故有中和病毒、阻 止感染的作用。
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一、流行性感冒（influenza）
简称流感，是一种由流感病毒所致的急性 发热性呼吸道传染病；通过飞沫传播，具 有高度传染性，几乎每年都会在世界某个 地区暴发流行。
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H5N1Re-5株和H9亚型SS株对土三黄鸡的免疫效果对比路彩霞;李军成;何殷娥【摘要】[目的]探究HSN1 Re -5株和H9亚型SS株对土三黄鸡不同的免疫效果.[方法]选用广西桂林市某种鸡场土三黄鸡180只,试验组注射禽流感H5和H9疫苗,对照组不注射疫苗,检测145日龄注射H5和H9疫苗后的抗体水平.[结果]禽流感H5疫苗145日龄注射后第170日龄抗体检测:试验1、2组分别比各自对照组的平均抗体值比较差异达0.01极显著水平;禽流感H9疫苗145日龄注射后第170日龄抗体检测:试验1、2组分别比各自对照组的平均抗体值比较差异不显著.[结论]禽流感H5疫苗145日龄注射后能显著地提高抗体水平;禽流感H9疫苗145日龄注射后不能显著地提高抗体水平.%[Objective] To compare immune efficacy of avian influenza virus (AIV) Re-5 strain (H5N1 subtype) and SS strain (H9 subtype) in Guangxi Sanhuang chickens. [ Method] Oa total of 180 Sanhuang chickens were selected from a breeding chicken farm in Guilin City of Guangxi and assigned into four groups (n =45). At 145 days old, the chickens in the group I and II were inoculated with AIV Re-5 strain and AIV SS strain, but they were kept in cages separately. The two control groups were not inoculated. Antibody levels were determined at 170 days old. [ Result ] The level of antibodies against AIV Re-5 strain was significantly higher in the chickens of the group 1 and group II than in the corresponding control groups, respectively (P <0.01). The level of antibodies against AIV SS strain was not significantly different between the group I and its control group or between the group II and its controlgroup. [ Conclusion] The antibody level of chickens can be increased bythe AIV Re-5 strain but not by the AIV SS strain.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)021【总页数】3页(P12871-12873)【关键词】土三黄鸡;H5疫苗;H9疫苗;免疫效果【作者】路彩霞;李军成;何殷娥【作者单位】广西农业职业技术学院,广西南宁530007;广西农业职业技术学院,广西南宁530007;广西农业职业技术学院,广西南宁530007【正文语种】中文【中图分类】S858.31高致病性禽流感是一种世界范围的禽类疫病，给养禽生产造成了巨大的经济损失，是目前严重危害养鸡业的疾病之一。

升。需注意①禽流感病毒感染的鸡或健康状况异常的鸡， 禁止注射本疫苗；②使用前应先使疫苗达到室温并充分
摇匀：③疫苗开启后，限24小时内用完：④屠宰前28
日内禁止使用；⑤用过的空疫苗瓶或开启后未用完的疫 苗等，均应经消毒后废弃，不可乱扔。
14
第十四页，共34页。
❖ 2.重组禽流感二价灭活疫苗（H5N1亚型， Re-1、Re-4株）为乳自色乳状液！在2～80℃ 保存，有效期为12个月。用于预防H5亚型禽 流感病毒引起的鸡、鸭、鹅的禽流感。接种后 14日产生免疫力，鸡免疫期为6个月：鸭、鹅 首免后3周，加强接种1次，免疫期为4个月。 用法、用量及注意事项同禽流感灭活疫苗 (H5N1)。
次免疫。 ❖ 加强免疫：第一次免疫后3～4周，再用H5N1亚型禽流感灭
活疫苗进行一次加强免疫。
❖ 5．散养禽免疫 ❖ 春、秋两季用H5N1亚型禽流感灭活疫苗各进行一次集中全
面免疫。每月定期补兔。 ❖ 6.鹌鹑、鸽子等其他禽类免疫 ❖ 按照疫苗使用说明书或参考鸡的免疫程序，剂量根据体重进
行适当调整。
12
5
第五页，共34页。
❖ （三）症挞特征
❖ 高致病性禽流感潜伏期几小时到数天，发病急剧，发病 率和死亡率均高，常突然暴发，无明显症状而迅速死亡。 病程稍长时，体温升高，精神沉郁，羽毛松乱；咳嗽、呼 吸啰音和呼吸困难：冠、肉髯、眼睑水肿、发绀或坏死： 眼结膜发炎，眼、鼻有浆液性、黏液性或脓性分泌物；腿 部鳞片有红色或紫黑色出血；排出黄绿色稀便；产蛋量明 显下降，并可见软皮蛋、畸形蛋；有的鸡有神经症状。
6
第六页，共34页。
❖ （四）病变特点 ❖ 眼、鼻有分泌物，冠、肉髯发紫或水肿。有
的可见颜面、头部肿大，鼻窦肿大、充满黏液。 喉头、气管黏膜充血、出血，严重时有水肿， 并伴有黄色纤维塞性渗出物或干酪样渗出物。 腺胃乳头、腺胃及肌胃交接处有出血点，十三 指肠和泄殖腔、扁桃体充血或出血。输卵管黏 膜、卵巢充血、出血，卵泡变形，卵黄变稀易 破裂，引起卵黄性腹膜炎。肾肿大，尿酸盐沉 积。

不断发生，使我国畜牧产业面临极大的挑战。本研
究取鸡新城疫、禽流感（H9 亚型）、禽腺病毒三联
灭活疫苗免疫 7 日龄和 21 日龄 SPF 鸡，于免后不同
时间进行血清抗体测定，来确定该产品的免疫持续
20
饲料博览 2021 年第 5 期
期，以期指导鸡病系灭活疫苗
鸡新城疫病毒、禽流感病毒（H9 亚型）、禽
80％
[ 6-7 ]
。该病主要发生于 3~5 周龄的肉鸡，肉杂
鸡（817）、麻鸡、种鸡和蛋鸡亦可在相似的日龄段
发病，是目前危害养禽业健康发展的最严重的传染
病之一，在我国每年都有不同程度的流行，严重危
害集约化养禽业的持续、稳定、健康发展，给养禽
业造成巨大的经济损失。
近几年来以上三种病毒混合感染在我国家禽上
produced by Harbin Pharmaceutical Group Biological Vaccine Co., Ltd. Seven-day and 21-day SPF chickens were
inoculated subcutaneously with the triple inactivated avian adenovirus vaccine. Blood samples were collected on the
protection standard in the 5th month after immunization. The results showed that the immune duration of chickens
under two weeks old was two months, and that of chickens over two weeks old was four months.

Ｈａｂｎ Ｖｅｅ ｎ ｒ ｓ ａｃ ｎｓｉ ｔ ＣｈｎｅｅＡｃ ｄ ｍｙ ｏ ｒｃ ｌ ｒｌＳ ｉｎ ｅ ，Ｈａｂｎ ０ ０ ，Ｃｈｎ ） ｒ ｉ ｔｒ ａ Ｒｅ ｅ ｒｈ Ｉ ｔｔ ｅ， ｉ ｓ ａ ｅ ｆＡｇ ｉｕｔ ａ ｃｅ ｃ ｓ ｉ ｙ ｕ ｕ ｒ ｉ １ ０ ５ １ ｉａ
Ａｂ ｔａ ｔ ｈ ｕ ｂ ｅ ｋ ｏ ｉｈ ｙ ｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ｖ ａ ｎ ｕ ｎ ａ ｏ ｅ Ｈ５ １ ｓ ｂ ｙ ｅ ａ ｒ ｓ ｈ ｌｂ ｎ ｉａ ｅ ｈ ｔ ｔ ｅ ｗｉ ｓ ｒ ｃ ：Ｔ ｅ ｏ ｔ ｒ ａ ｆｈ ｇ ｌ ａｈ ｇ ｎ ｃ ａ ｉ ｎ ｉ ｆ ｅ ｚ ｆｔ Ｎ ｕ ｔ ｐ ｃ ｏ ｓ ｔ ｅ ｇ ｏ ｅ ｉｄ ｃ ｔｄ ｔ ａ ｈ ｌ ｌ ｈ ｄ
Ｉ ｍ ｕ ｏ ｏ ａＩ ｖ ｌ ａ ｉ ｎ ｏ ａ ｅ ２． Ｎ１ ａ ｉ ｎ ｉ ｆＪ ｚ ｍ Ｕ ｌ ｇ ｃ ｅ ａ ｕ ｔ ｆＣｌ ｄ ． Ｈ５ Ｉ ｖ ａ ｎ ｌｅｎ ａ ｎ ｑＣ Ｉ ｉａ ｏ ２ Ｉｔ ｉ ｕ ｉａ ｔ ａ ｅ ａ ｃ ｎ ａ ｄ ｄ ｔ ｎ ｍ ｉｅ ｎ ｃ ｉ ｔ ｄ ｖ ｃ ｉ ｅ ｃ ｎ ｉ ａ ｅ ｉ ｃ ｖ
表 面抗 原 血 凝 素（ Ａ 和 神 经 氨 酸 酶（ ） 因供 体 ，通 过 反 向遗 传操 作 ，在 符 合人 类 疫 苗 生产 标 准 的 Ｖ ｒ Ｈ ） ＮＡ 基 ｅ ｏ细胞 中 救 获低 致 病 性 的 疫 苗毒 株 ，将 制 备 的 灭 活 全 病 毒 疫 苗 单 次 和 加 强 免 疫 Ｂ Ｌ ／ 鼠 ，检 测 疫 苗 的 免 疫保 护 效 果 Ａ Ｂｃ小
第３ ２卷 第 ９ 期
２１ 年 ９ 月 ００
中
国 预
防
兽医Biblioteka 学 报 Ｖｏ１ ３ Ｎ ｏ９ ． ２． ．

一
察 ，仍 无 菌落者 停止 观察 。
较 高的项 目仍 然未做 。我 公司对 禽流 感灭活疫 苗生 产用毒 种进 行 了系统的
鉴 定 ，本试 验对 支原 体的 检验方 法进
行 了详细的介 绍。
一
二 、结 果 与 讨 论
生 产 用 病 毒 样 品在 支 原 体 液 体
培 养 基 中培 养 并 盲 传 ３ ，未 见颜 代
５ 检 测 支 原 体 用培 养 基 。本 公 ． 司生 产车 间按 兽 药典 制 备 。
液 体 培 养 物 移 植 到 试 管 中培 养 的 同
时 ，取 培 养 物 ０ １～ ０ ２ｍｌ 种 于 ． ． 接
（ ）支原 体检 验 二
１ 液 体 培 养检 验 。将 ５瓶 毒 种 ． 分 别 取 １ 混 合 在一 起 进 行 支 原 体 ｍｌ 检 验 ， 同 时 设 阴性 和 阳 性 对 照 （ 用
Ｃ４ —２ ５ ，Ｃ４ －２为 革 兰 氏 阴 性 球 杆 测 得 的 菌种 的 免疫 原性 ： Ａ — ６ Ｃ ５ ２保 护
菌 ； ４ — 为 革 兰 氏 阴 性 较 细 长 的 Ｃ７ ２
小杆 菌 。Ｃ ７ ２生长 差 ，易死亡 。 ４－
８ ．％ ； ４－ ０６ Ｃ ６ ２保 护 ８ ．％ ； ４～ ４４ Ｃ ７ ２保 护 ９ ． 有所不 同。导 致这样 的结 果 ８ ４ 建 议 在 生 产 前 尽 可 能 的将 菌 ．
ｐ 值 变化 达 ±０ ５时 ，移 植 接 种 到 Ｈ ．
养至 ３ ，液 体 培 养基 变 黄 并轻 微 混 ｄ 浊 ； 种 到 固 体 培 养 基 的 阳性 样 品 接
培 养 ５ｄ后 ，在低 倍 显微 镜下 观察 到
１ 生 产 毒 种 。 禽 流 感 Ｈ５ 基 ． Ｎ１

中华人民共和国农业部公告第2251号正文：----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------中华人民共和国农业部公告第2251号根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，经审查，批准中国农业科学院哈尔滨兽医研究所等5家单位申报的重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（细胞源，Re-6株+Re-4株）等2种兽药产品为新兽药，现核发《新兽药注册证书》，并发布产品试行规程、质量标准、说明书和标签，自发布之日起执行。

农业部公告第2233号“马波沙星片”研制单位之一天津生机集团股份有限责任公司应为天津生机集团股份有限公司，马波沙星原料及马波沙星片监测期应为“三年”。

特此公告。

附件：1.新兽药注册目录2.试行规程3.质量标准4.说明书和标签农业部2015年4月27日附件1：新兽药注册目录新兽药名称研制单位类别新兽药注册证书号备注监测期重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（细胞源，Re-6株+Re-4株）中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、山东信得动物疫苗有限公司、哈尔滨维科生物技术开发公司三类（2015）新兽药证字20号注册3年聚维酮碘口服液深圳市安多福动物药业有限公司、深圳市安多福消毒高科技股份有限公司四类（2015）新兽药证字21号注册3年附件2（略）附件2（略）附件3（略）附件4重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（细胞源，Re-6株+Re-4株）等2种兽药产品说明书和标签一、重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（细胞源，Re-6株+Re-4株）说明书和内包装标签（一）重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（细胞源，Re-6株+Re-4株）说明书【兽药名称】通用名重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（细胞源，Re-6株+Re-4株）商品名无英文名Reassortant Avian Influenza Virus H5 Subtype Vaccine,Inactivated (Cell Source，Strain Re-6+Strain Re-4)汉语拼音Chongzu Qinliugan Bingdu H5 Yaxing Erjia Miehuoyimiao (Xibaoyuan,Re-6 Zhu+Re-4 Zhu) 【主要成分与含量】疫苗中含灭活的重组禽流感病毒H5N1亚型Re-6株和Re-4 株。

禽病防治考试题及答案2010-07-14 00:25:08 来源：阳光畜牧网浏览：8052次一、名词解释高致病性禽流感鸡传染性喉气管炎鸡传染性支气管炎鸡马立克氏病鸭瘟鸭病毒性肝炎鸡毒支原体感染禽霍乱二、填空题1、我国的HAPI主要由??? 亚型引起。

2、新城疫的主要特征是、、及。

3、新城疫病毒表面的和构成纤突，在病毒的上发挥重要作用，并且具有良好的。

4、根据不同毒株对鸡的致病性差异，将新城疫病毒分为3种类型：、和。

5、传染性喉气管炎病毒属于科属。

6、传染性喉气管炎病毒可在增殖，通过接种后，形成的特征病灶。

7、鸡马立克氏病病毒属于科，属。

8、马立克氏病毒是一种典型的病毒，它以三种类型和细胞相互作用：、、。

9、禽白血病的病原是，属于科，属。

10、鸭肝炎病毒属于科，属。

11、鹅细小病毒感染又称，本病主要侵害，以传播快、、、、为特征。

12、鸡毒支原体在固体培养基上，，培养天后可形成样菌落。

13、多杀性巴氏杆菌用染色法呈明显的。

14、根据细菌的和，将多杀性巴氏杆菌分为不同的血清型。

15、鸡球虫病通常由科球虫所引起。

三、选择题1、下列病毒中，属于双股RNA病毒的是（）。

A.传染性法氏囊病毒B.新城疫病毒C.传染性支气管炎病毒D.马立克病毒2、下列病毒中不属于疱疹病毒科的是（）。

A. 鸭瘟病毒B.马立克氏病病毒C.传染性喉气管炎病毒D.鸭肝炎病毒3、鸡球虫病的诊断常用（）。

A．银染色法B．血清学方法C．饱和盐水漂浮法D．显微镜直接观察4、目前已发现的高致病性禽流感病毒主要有（）亚型。

A．H5N7、H7N1 B．H5N1、H7N7 C．H5N2、H7N1 D．H9N1、H7N75、鸡新城疫常用的诊断方法为（）。

A．免疫电泳试验B.琼脂扩散试验C. RT-PCR D. HI6、鸡马立克氏病常用的血清学诊断方法为（）。

A.HIB.病毒中和试验C.琼脂扩散试验D.ELISA7、禽霍乱肝脏的病理变化主要是( )。

A．肝硬化B．肝脂肪样变C．肝肿大质脆D.肝肉样变8、下列说法中，错误的是（）。

43不同方法灭活卵黄抗体的比较试验孙心，梁宛楠，姜宇（哈药集团生物疫苗有限公司 哈尔滨 150040）doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2018.08.024摘要：为确保提取卵黄抗体的安全性，防止其中混入外源病毒，为此使用了化学药品灭活的方法。

试验对不同终浓度的甲醛和二乙烯亚胺（BEI）对卵黄抗体灭活效果进行了比对。

将鸡新城疫病毒（NDV）、禽流感病毒（AIV H9型）、禽传染性囊病病毒（IBDV）、减蛋综合征病毒（EDS-76）和禽脑脊髓炎病毒（AEV）分别混入到卵黄抗体中，混合后加入终浓度为0.03%、0.05%、0.1%甲醛和0.02%BEI于室温条件下，灭活24h，从试验结果我们可以看出0.02%BEI和0.03%甲醛只能灭活部分病毒，而0.05%和0.1%甲醛能灭活全部病毒，并且对抗体活性无任何影响。

因此，综合以上结果选用0.05%的甲醛进行灭活，保证疫苗的安全性。

关键词：灭活；卵黄抗体；BEI；甲醛在制备抗小鹅瘟卵黄抗体时，应选择健康的产蛋母鸡，按一定的免疫程序接种小鹅瘟抗原，获得高免鸡蛋。

试验过程中的免疫鸡群，虽然经过一系列的挑选及其它疫病的免疫，但是还是存在某些病毒的感染，对卵黄抗体的安全性有很大的影响。

因此本试验选用甲醛和二乙亚胺（BEI）两种灭活剂进行试验。

在卵黄抗体中加入甲醛溶液终浓度分别为0.03%、0.05%和0.1%，BEI 的终浓度为0.02%，通过试验比对从中选出最适宜的灭活剂浓度。

1 材料和方法1.1 材料病毒：小鹅瘟病毒、禽流感病毒（H9）、鸡新城疫病毒（Ⅰ株）、禽传染性囊病病毒（B87株）、减蛋公司综合征病毒（EDS-76株）均为研发中心繁殖；禽脑脊髓炎病毒（Van Roekel 株）购自中监所。

化学试剂：甲醛溶液（天津，AR）、BEI（瑞士）。

SPF 种蛋：哈药集团生物疫苗有限公司SPF 鸡场；SPF 鸭蛋：哈尔滨兽医研究所。

1.2 试验方法1.2.1 抗体制备 参照制定的工艺规程制备小鹅瘟卵黄抗体。

鸡推荐免疫程序蛋鸡和种鸡：（供污染严重的鸡场）1、1日龄：马立克氏冻干苗或液氮苗，3头份颈部皮下注射；新城疫弱毒活疫苗，点眼滴鼻。

2、7-10日龄：新城疫IV-H120二联冻干苗，皮下或肌肉注射接种；3、7-14日龄：H5N1亚型禽流感灭活疫苗（Re-1＋Re-4株），皮下或肌肉注射接种；新城疫弱毒活疫苗点眼滴鼻或禽流感一新城疫重组二联活疫苗（rL－H5株）初免,点眼滴鼻、饮水及注射；4、28-42日龄：H5N5亚型禽流感灭活疫苗（Re-l＋Re-4株）皮下或肌肉注射接种或禽流感一新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株），滴鼻、点眼、饮水及注射；5、40-45日龄：新城疫IV系-H120二联冻干苗，2头份滴鼻点眼；6、35-45日龄：传染性喉气管炎冻干苗，2头份滴鼻点眼或涂肛；6、80-90日龄：传染性喉气管炎冻干苗，2头份滴鼻点眼或涂肛；7、110-115日龄：新城疫IV系-H52二联冻干苗，2头份饮水；8、开产前及之后每间隔4－6个月，H5N5亚型禽流感灭活疫苗（Re-1＋Re-4株），皮下或肌肉注射接种；9、其他疫苗免疫根据当地兽医部门进行。

商品肉鸡1、7-l0日龄：禽流感一新城疫重组二联活疫苗（rL－H5株）,滴鼻、点眼、饮水及注射；2、21-24日龄：禽流感一新城疫重组二联活疫苗（rL－H5株），滴鼻、点眼、饮水及注射；其他疫苗免疫根据当地兽医部门进行。

猪推荐免疫程序1、每年春秋两季各免疫一次O型口蹄疫疫苗，肌肉注射；猪瘟疫苗，肌肉注射；2、4-5月免疫一次，猪乙型脑炎疫苗，肌肉注射。

商品猪1、零时（乳前）：猪瘟疫苗1头份肌肉注射（有疫情猪场）；2、15-30日龄：蓝耳病疫苗2M／头肌肉注射（有疫情猪场）；3、20日龄：猪瘟疫苗2头份肌肉注射；4、20-30日龄：伪狂犬病疫苗，1ml／头肌肉注射；5、28-35日龄：O型口蹄疫灭活疫苗初免，肌肉注射；6、30-40日龄：链球菌病疫苗，按说明书剂量使用；仔猪副伤寒疫苗，按说明书剂量使用；7、58-65日龄：O型口蹄疫灭活疫苗强化免疫，肌肉注射；8、60日龄：猪肺疫疫苗，按说明书剂量使用；猪丹毒疫苗，按说明书剂量使用；猪瘟疫苗，按说明书剂量使用（加强免疫）后备猪1、20周龄：乙脑疫苗，2ml／头肌肉注纵，5月份之前间隔2周再免疫一次；2、22周龄：口蹄疫疫苗,2ml／头肌肉注射；3、28周龄：细小病毒疫苗,2ml／头肌肉注射;4、30周龄：猪瘟疫苗，2头份肌肉注射；蓝耳病疫苗，4ml/头肌肉注射（配种前15-30日龄）；生产母猪1、产前4周：大肠杆菌疫苗，lml／头肌肉注射；2、产前4周：伪狂犬病疫苗，2ml／头肌肉注射；3、每年三次：口蹄疫疫苗，3ml／头肌肉注射;4、每年二或三次：猪瘟疫苗，2头份肌肉注射；5、每年一次：乙脑／细小病毒疫苗，2ml／头肌肉注射.公猪1、每年三次：口蹄疫疫苗，2ml／头肌肉注射;2、每年二或三次：猪瘟疫苗，2头份肌肉注射；3、每年二次：伪狂大病疫苗，2ml/头肌肉注射；4、每年一次：乙脑／细小病毒疫苗，2ml／头肌肉注射。