专题02 微生物的培养和应用-2019届高三《生物技术实践》提分练(原卷版)

(时间：90分钟，满分：100分)一、选择题(本题共20小题，每小题2.5分，满分50分)1．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是( )A．碳源B．氮源C．无机盐D．生长因子解析：选A。

自养微生物能够利用二氧化碳和水生成有机物，不利用现成的含碳有机物；而异氧型微生物只能利用现成的含碳有机物，所以它们的主要区别是碳源不同。

2．酵母菌培养液常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制微生物的生长，原因是( )A．碳源供应太充足B．葡萄糖不是酵母菌的原料C．改变了酵母菌培养液的pHD．细胞会发生质壁分离解析：选D。

当培养基中葡萄糖的浓度升高时，会导致培养液的渗透压升高，从而导致细胞发生质壁分离。

3．下列关于细菌的叙述，错误的是( )A．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质B．某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物C．生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质D．含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌解析：选D。

某些细菌如蓝细菌(蓝藻)、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。

生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，主要包括维生素、氨基酸和碱基等。

而微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，它们都是从外界获得补充的。

常用的伊红美蓝乳糖培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，如果有大肠杆菌，则菌落呈黑色。

4．关于灭菌和消毒的下列说法不．正确的是( )A．灭菌是指杀死环境中的所有微生物，包括芽孢和孢子B．灭菌和消毒实质上是相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用的灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法解析：选B。

灭菌与消毒是两个概念。

灭菌是指杀灭一定环境中的所有微生物，包括芽孢和孢子。

根据不同的材料选用不同的灭菌方法，如接种环用火焰烧灼法，培养基用高压蒸汽灭菌法等。

消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，使用的是较为温和的物理或化学方法。

专题测试卷(二) 微生物的培养与应用(时间：60分钟满分：100分)一、选择题(共15小题，1～10小题每小题3分，11～15小题每小题5分，共55分。

每小题只有一个选项符合题意。

)1．下列关于微生物的分离和培养的有关叙述，错误的是( )A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度C．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌；为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌；尿素分解菌中的脲酶能将尿素分解为氨，筛选分离时必须以尿素为唯一碳源。

答案：A2．微生物(除病毒外)需要从外界吸收营养物质，并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。

下列有关微生物营养的说法，正确的是( )A．纤维素分解菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B．在纤维素分解菌生长的培养基中只需碳源、氮源、水、无机盐即可正常生长C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的生长越有利D．生长因子是微生物生长必需的，而微生物本身合成这些物质的能力往往不足解析：纤维素分解菌是异养型微生物，其碳源为有机物，如纤维素等。

硝化细菌是自养型微生物，其碳源物质为CO2，因此A错误；纤维素分解菌的培养基中需加入维生素做生长因子，才能正常生长，因此B错误；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水，将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，因此C错误。

答案：D3．有关培养基配制原则表述正确的是( )A．任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子B．碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到温度、pH、氧、渗透压等的影响D．营养物质的浓度越高越好解析：培养基中碳源和氮源必须具有一定比例，但含量最多的元素不应是碳元素，而是氧元素。

第2讲微生物的培养与应用课时跟踪练1．(2014·全国卷Ⅱ)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。

回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。

在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________________________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。

据此可得出每升水样中的活菌数为________。

(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过____________灭菌。

在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。

这样做的目的是___________________。

(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。

结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。

分析其原因是振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。

解析：(1)为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间，观察空白平板上是否出现菌落。

0.1 mL稀释液中平均有(39＋38＋37)/3＝38个活菌，则每毫升稀释液中活菌的数目为38/0.1＝380个，则稀释前每毫升水样中活菌数目为380×100＝3.8×104个，则每升水样中活菌数目为3.8×104×1 000＝3.8×107个。

(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，以达到迅速彻底灭菌的目的。

高考生物专题复习《微生物的培养技术与应用》真题练习含答案一、选择题1．(2024·重庆高三联考)熔喷布的主要成分是聚丙烯，会对环境造成污染。

某科研小组从土壤中分离到一种能分解聚丙烯的细菌。

下列说法正确的是()A．配制固体培养基时，需要在无菌的环境中进行B．制备培养基时需要先将培养基的pH调节至中性或弱碱性C．从土壤中分离能分解聚丙烯的细菌，可采用平板划线法进行分离与计数D．纯化培养时，在培养皿皿盖做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养2．(2023·淮安高三模拟)如图为实验室中酵母菌纯培养过程的部分操作步骤，下列说法正确的是()A．微生物的纯培养物就是指不含代谢废物的微生物培养物B．步骤①中，用手触摸估计培养基冷却至室温后开始倒平板C．步骤①使用的培养基制备过程是先调pH再灭菌D．③到④过程中，每次划线后都需要灼烧接种环并蘸取菌液3．(2021·山东，14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。

脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。

将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。

甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是()A．甲菌属于解脂菌B．实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力4．(2023·山东，15)平板接种常用在微生物培养中。

下列说法正确的是()A．不含氮源的平板不能用于微生物培养B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物5．(2024·咸阳高三调研)为加速我国北方冬春季秸秆原位还田的腐化过程，研究人员以冻牛粪为材料筛选出耐低温(10 ℃)的纤维素降解菌。

下列相关叙述正确的是()A．选用冻牛粪为材料与其富含纤维素及含耐低温微生物有关B．初筛菌种前，要利用固体培养基在37 ℃条件下扩大培养目标菌种C．用于筛选的培养基是加入刚果红染料的牛肉膏蛋白胨培养基D．应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化6．(2024·湖北宜荆荆恩四市高三联考)营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。

专题02微生物的培养与应用（高考题组）一、单选题1．下列关于微生物实验操作的叙述，错误．．的是A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基【答案】A【解析】接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用高压蒸汽灭菌法处理，A错误；为了防止杂菌污染，每次接种前后，接种环都要进行灼烧灭菌，B正确；接种后，培养皿需要倒置，以防皿盖上水珠落入培养基造成污染，C正确；分离菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于微生物的计数，所用培养基为固体培养基，D正确。

故选A。

2．为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。

下列叙述正确的是（）A．倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B．图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落C．该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的D．菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色【答案】B【解析】A、倒平板后无需晃动，A错误；B、Ⅰ区、Ⅱ区没有出现单菌落，说明细菌数量太多，故应从Ⅲ区挑取单菌落，B正确；C、出现单菌落即达到了菌种纯化的目的，C错误；D、刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，D错误。

故选B。

3．野生型大肠杆菌可以在基本培养基上生长，发生基因突变产生的氨基酸依赖型菌株需要在基本培养基上补充相应氨基酸才能生长。

将甲硫氨酸依赖型菌株M和苏氨酸依赖型菌株N单独接种在基本培养基上时，均不会产生菌落。

某同学实验过程中发现，将M、N菌株混合培养一段时间，充分稀释后再涂布到基本培养基上，培养后出现许多由单个细菌形成的菌落，将这些菌落分别接种到基本培养基上，培养后均有菌落出现。

解密23 微生物的培养与利用A组考点专练考向一培养基及微生物的纯化培养技术1．（2019·福建厦门市·厦门外国语学校高二月考）如表是微生物培养基的成分。

下列有关说法错误．．的是（）A．此培养基可用来培养自养型微生物B．此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源C．若除去①，此培养基可培养圆褐固氮菌D．培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源2．（2019·河北冀州中学（衡水市冀州区第一中学）高二月考）四环素、链霉素、红霉素等抗生素能抑制细菌的生长，它们有的能阻碍细菌细胞壁的形成，导致细菌在低渗环境下膨胀破裂死亡；有的能干扰细菌核糖体的形成；有的能阻止tRNA和mRNA的结合。

请根据以上事实判断下列说法正确是A．干扰细菌细胞壁形成过程是通过影响高尔基体的作用实现的B．阻止tRNA和mRNA的结合会影响细菌蛋白质的合成，抑制细菌的生长C．细菌培养中为保证细菌的渗透压稳定应在培养液中加入HCO3-等无机盐D．干扰细菌核糖体的形成可以阻止遗传信息的转录3．（2020·大通回族土族自治县第一完全中学高二期中）如表为某培养基的配方，下列有关叙述正确的是A．此培养基是天然鉴别培养基B．能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因C．此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中D．此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准4．（2019·静宁县第一中学高二期末）用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目时，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照，对于对照组的要求不包括A．对照组培养基也严格灭菌B．对照组和实验组放在相同的条件下培养C．所用培养基成分及pH值大小完全与实验组一致D．培养基的量的大小，与实验组必须绝对相同5．（2020·上海市泾南中学高二期中）下表是培养某种细菌的培养基。

以下叙述错误．．的是（）A．该培养基属于选择培养基B．表中为该细菌提供碳源的只有乳糖C．表中为该细菌提供氮源的只有蛋白胨D．该培养基可以用来鉴定该细菌是否是大肠杆菌考向二微生物的计数方法6．（2020·贵州省思南中学高二期中）下列关于微生物的培养和分离的叙述，正确的是（）A．倒平板操作时，培养基倒好后应立即将其倒过来放置B．菌落的形状、大小、颜色等不能作为鉴别不同微生物的依据C．分离分解尿素的细菌时，应从周围出现透明圈的菌落中挑取菌株D．分离纤维素分解菌时，可在倒平板时加入刚果红染色，然后接种分解菌7．（2020·北京密云区·高三一模）自然界中所有的微生物（）A．都是原核生物B．都必须在显微镜下才能看到C．都可快速繁殖D．在生态系统中都属于分解者8．（2019·山西祁县中学高二月考）下列有关培养基和菌种鉴定的叙述正确的是（）A．制作固体培养基必须加入的物质是琼脂B．可利用液体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C．菌落的表面光滑与否、有无荚膜是R型和S型菌种鉴定的依据D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌9．（2020·山西省平遥中学校高二月考）关于微生物的叙述，完全正确的是（）①古细菌的细胞壁与大肠杆菌的细胞壁成分不同②青霉素不能杀灭肝炎病毒③酵母菌通过芽孢进行繁殖④自生固氮菌为自养微生物A．①②B．③④C．①②④D．②③④10．（2014·上海黄浦区·）下列关于微生物的有关叙述正确的是（）A．荚膜是细菌的休眠体，能抗不良环境B．酵母菌通过芽孢体进行繁殖C．黏菌与乳酸菌都属于真核生物D．古细菌通常对利福平不敏感考向三微生物的筛选与鉴别11．（2020·辽宁沈阳市·高二期末）以下有关生物技术实践的叙述中，正确的是A．用稀释涂布平板法测定某土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值大B．以尿素为唯一氮源并加入酚红指示剂的培养基可分离并鉴定土壤中分解尿素的细菌C．制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、调pHD．制备果酒过程中，每隔一段时间拧松瓶盖，目的是向瓶中通气保证发酵顺利12．（2020·禄劝彝族苗族自治县第一中学高二期中）关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是A．培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B．选择菌落数在30～300间的所有平板进行计数，以平均数为实验结果C．对10mL土样稀释106倍后，取0.1 mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则该10 mL土样中分解尿素的细菌数为2.55×108个D．应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度13．（2019·全国高三专题练习）下列关于刚果红染色法的说法中，正确的是A．先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，不需用氯化钠溶液洗去浮色B．倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入lmlCR溶液后加入100ml培养基C．培养基中出现透明圈的原因是因为纤维素被分解为葡萄糖导致的D．倒平板时就加入刚果红，长期培养刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈14．（2020·甘肃武威市·武威十八中高三月考）测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是A．细菌个体小，真菌个体大B．细菌易稀释，真菌不易稀释C．细菌在土壤中数量比真菌多D．随机的，没有原因15．（2020·邢台市第二中学高二期末）下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，不正确的是A．用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂不变红B．分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氨和二氧化碳C．统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30—300的平板进行计数D．将实验组和对照组平板倒置，30— 35℃恒温培养24〜48小时考向四微生物的利用16．（2020·山西省平遥中学校高二月考）关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是A．在果酒制作实验中，检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养C．检验以尿素为唯一氮源的培养基是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则可初步鉴定该细菌能分解尿素D．鉴定胡萝卜素粗品的可用纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散速度不同；若样品中有杂质，则会出现不同的色素点17．（2019·四川南充市·阆中中学高二期中）某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表，与此有关的叙述不正确的是A．探究的问题可以是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用B．预期结果是1、3 组的落叶不被分解，2、4 组中的落叶被不同程度的分解C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理D．该实验的自变量为土壤是否灭菌处理18．（2019·河北冀州中学（衡水市冀州区第一中学）高二月考）下列有关现代生物技术的叙述中，不正确的是A．运用固定化酶和固定化细胞进行生产时，都需要为其提供营养物质B．果酒和果醋制作中利用的微生物，结构上主要差别在于有无核膜C．采用稀释涂布平板法和平板划线法都能分离纯化菌种，得到单细胞菌落D．探究加酶洗衣粉的最适温度时，洗衣粉量、污渍的种类属于无关变量19．（2020·长春市第一中学高二期中）取9个洁净培养皿，均分为三组（℃、℃、℃），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL大肠杆菌菌液，37℃培养36小时后，统计菌落数（见表），以下相关叙述错误的是（）A．℃组和℃组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖B．℃组和℃组说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖C．三组实验均采用了稀释涂布平板法，以便菌落计数D．三组实验所使用的培养基均需62℃、30min灭菌20．（2020·辽宁沈阳市·沈阳铁路实验中学高二期中）幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。

第2节微生物的培养技术和应用知识梳理教学目标课程标准目标解读获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。

1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。

2.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌产品与无菌区域不被微生物污染的技术。

3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。

4.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。

5.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。

6.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。

教学重点1.微生物纯培养的基本操作要求。

2.酵母菌的纯培养。

3.微生物选择培养的原理。

4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。

教学难点1.酵母菌的纯培养。

2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。

一、培养基1.培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

2.培养基的类型及用途（1）按物理性质分：固体培养基用于菌种分离、鉴定、计数液体培养基用于工业生产、连续培养半固体培养基用于菌种保存（2）按化学组成分：天然培养基用于工业生产合成培养基用于菌种分离、鉴定（3）按目的用途分：选择培养基添加或缺少某种化学成分用于菌种分离鉴别培养基添加某指示剂或化学药剂用于菌种鉴别3.培养基的营养成分培养的基本配方：不管哪种培养基，一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质(例如:生长因子)以及氧气的要求。

二、无菌技术1.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，防止外来杂菌入侵的保证是无菌技术。

2.无菌技术（操作）泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。

无菌技术包括：实验操作空间消毒；操作者的手、衣着消毒；实验用具、器皿、培养基灭菌；实验操作过程，酒精灯火焰附近进行；实验操作时，避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。

无菌技术目的：防止实验室的培养物被其它外来微生物污染；避免操作者被微生物感染。

高中生物选修一专题2：微生物的培养与应用综合练习题PS：P35～74为答案及解析部分1、[选修一：生物技术实践专题]聚对苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料类水瓶的重要原料,科学家发现了以PET为碳源和能量来源的细菌，该发现对PET类材料的回收利用、环境治理意义重大。

请回答下列问题：（1）实验小组欲从土壤中获取PET降解菌,需将土壤样品置于________为唯一碳源的培养基中进行选择培养，其目的是。

（2）该实验小组选取PET浓度为800mg·L-1的富集液进行系列稀释，分别取10-3、10-4和10-5倍数的稀释液0.1 mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（286、298、297)，(35、32、31),(36、7、2),不适合用于计数的为________倍数的稀释液,用另外两组稀释倍数的稀释液进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是。

（3）倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是。

在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则这个平板不能用来培养大肠杆菌，原因是。

用平板划线法纯化PET降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时,须从上一次划线的末端开始划线，原因是。

（4）在保藏PET降解菌菌种时，可采取的方法进行长期保存。

2、[选修一：生物技术实践专题]农作物秸秆中的纤维素阻碍了堆肥技术在处理有机固体废物领域的发展。

为提高堆肥品质，科研人员探究了温度对纤维素分解菌分解能力的影响，实验步骤如下：①纤维素分解菌的筛选、分离及纯化→②纤维素分解菌菌株数量测定→③纤维素酶活力测定和降解滤纸能力的检测。

请问答下列问题：（1）步骤①中，若用稀释涂布平板法接种，则必须将菌液进行一系列的_____。

已知纤维素酶的最适温度在45～65℃之间，欲从45～65℃的恒温箱中筛选出能高效分解纤维素的细菌，请写出测定纤维素酶的最适温度的实验思路：。

（2）步骤②中，在条件适宜的环境下培养细菌10d后，用（填一种实验用具）在显微镜下可计算细菌数量。

专题 1、2传统发酵技术的应用、微生物的培育与应用1．(2018 年山西模块诊疗 ) 生活饮用水的微生物安全性平时检测是很重要的。

请回答以下问题：(1)培育大肠杆菌所用的 LB 培育基一般用 ______法灭菌。

查验大肠杆菌的含量时，往常将水样用 ________进行一系列的梯度稀释。

(2)将稀释后的水样分别接种到LB 固体培育基， __________( 填“正置”或“倒置”)于恒温培育箱，在______℃条件进行培育。

用该方法统计样本菌落数时________( 填“需要”或“不需要” ) 设置比较组。

(3)关于生活饮用水中大肠杆菌的数目统计，也能够采纳滤膜法，该法是利用滤膜的直径______( 填“大于”或“小于” ) 大肠杆菌的直径，将大肠杆菌留在滤膜长进行的计数。

(4)以下图表示培育和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，以下有关表达错误的选项是________(多选) 。

①②③④ A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立刻将其倒过来搁置B．步骤②接种环火焰上灼烧后快速蘸取菌液后划线C．步骤③多个方向划线，使接种物渐渐稀释，培育后出现单个菌落D．步骤④恒温培育箱培育后可用来对大肠杆菌进行计数2．已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时间有关。

为了测定不一样泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同学设计了一个实验，实验资料、试剂及器具包含：刻度移液管、比色管、不一样浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不一样泡制天数的泡菜滤液等。

回答有关问题：(1)请完美以下实验步骤：①标准管的制备：用 __________________________ 和显色剂制成颜色深浅不一样的系列标准管。

②样品管的制备：用刻度移液管分别汲取必定量的____________________________ ，加到不一样的比色管中，而后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，获取样品管。

③将每个 ____________ 分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅________的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各种品管中亚硝酸盐的含量。