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AMACR_34_E12双重免疫组化标记在前列腺癌诊断中的应用

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・1178　・第二军医大学学报Acad J Sec Mil Med Univ　2006Nov ;27(11)・专题报道・AMACR 、34βE12双重免疫组化标记在前列腺癌诊断中的应用邢继章,徐丹枫3,郑军华,任吉忠,刘玉杉,闵志廉(第二军医大学长征医院泌尿外科,解放军泌尿外科中心,上海200003)[摘要]　目的:通过与α2甲酰辅酶A 消旋酶(AMACR )、34βE12抗体单独免疫组化染色效果对比,评估AMACR/34βE12混合双重免疫组化标记对前列腺癌(PCa )的诊断价值。

方法:31例前列腺标本,包括PCa 18例、良性前列腺增生(BP H )10例和正常前列腺标本3例;4μm 连续切片,分别行AMACR 、34βE12抗体单独免疫组化标记以及AMACR/34βE12双重免疫组化标记,比较单独及双重标记结果。

结果:所有PCa 标本中34βE12单独及双重免疫组化标记均为阴性,而在BP H 和正常前列腺中均为阳性。

PCa 中AMACR 单独免疫组化标记的阳性率为88.9%,而在双重免疫组化标记中AMACR 阳性率为94.4%。

单独应用AMACR 免疫组化标记和双重免疫组化标记对诊断PCa 无显著差异。

结论:应用AMACR/34βE12双重免疫组化标记对诊断PCa 具有一定的临床意义,当标本量少以及病变部位细小局限时尤为重要。

[关键词]　前列腺肿瘤;诊断;免疫组织化学;α2甲酰辅酶A 消旋酶;34βE12[中图分类号]　R 737.25 [文献标识码]　A [文章编号]　02582879X (2006)1121178203Combined immunohistochemical staining of 34βE12and α2methylacyl 2coenzyme A racemase in diagnosis of prostatic carcinom aXIN G Ji 2zhang ,XU Dan 2feng 3,ZH EN G J un 2hua ,REN Ji 2zhong ,L IU Yu 2shan ,MIN Zhi 2lian (Department of Urology ,Changzheng Hospital ,Second Military Medical University ,Urology Center of PL A ,Shanghai 200003,China )[ABSTRACT ]　Objective :To assess the diagnostic value of combined staining of 34βE12and α2methylacyl 2coenzyme A racemase(34βE12/AMACR )by comparing it with the values of 34βE12and AMACR staining separately.Methods :Totally 31prostate specimens (4μm thickness ),including 18prostate cancer (PCa )specimens ,10benign prostatic hyperplasia (BP H )specimens ,and 3normal prostate specimens ,were subjected to 34βE12and AMACR staining separately and a combined staining of both.The results of the 3staining methods were compared.R esults :The results of 34βE12single staining and combined staining were negative in all 18PCa specimens and were positive in all BP H and normal specimens.Single AMACR staining was positive in 88.9%PCa specimens.In the combined staining 94.4%PCa specimens were positively for AMACR.There was an excellent a 2greement between the AMACR staining profiles in the combined staining and in single AMACR staining.Conclusion :Combined34βE12/AMACR staining possesses certain diagnostic value for PCa ,especially when the sample size is small and the lesions are limited or small.[KE Y WOR DS]　prostate cancer ;diagnosis ;immunohistochemistry ;α2methylacyl 2coenzyme A racemase ;34βE12[Acad J Sec Mil Med Univ ,2006,27(11):117821180][作者简介]　邢继章,博士生.E 2mail :ji_zhangg @3Corresponding aut hor.E 2mail :dfxu66@ 前列腺癌(PCa )是一种常见的恶性肿瘤。

近年来,临床常应用血清前列腺特异性抗原(PSA )进行筛选检查,并对可疑病例进行前列腺穿刺活检。

由于穿刺组织细小,有时仅依据H 2E 染色不能准确诊断,因此,敏感免疫组化标记分析在PCa 的诊断中扮演了重要角色。

34βE12是前列腺基底细胞层的特异性标记物,其在PCa 细胞的免疫组化中染色阴性[1～3]。

有研究[4]表明另一种PCa 的标记物α2甲酰辅酶A 消旋酶(α2met hylacyl 2coenzyme A race 2mase ,AMACR )在82%～100%PCa 中过度表达。

本研究分别对前列腺标本切片做AMACR 、34βE12免疫组化标记和AMACR/34βE12双重免疫组化标记,并对染色结果进行比较,以评价双重免疫组化标记在PCa 中的诊断价值。

1　材料和方法1.1　材料　2004年4月到2005年10月病理确诊为PCa 的患者18例,年龄49～75岁,平均(66.23±13.12)岁;其中前列腺癌根治性切除标本6例,前列腺电切标本3例,前列腺穿刺活检标本9例;Glea 2so n 评分小于7分6例,7分及以上12例。

同期BP H 标本10例,正常前列腺标本3例。

1.2　试剂　AMACR (兔单克隆抗体,抗体诊断公司),34βE12(鼠单克隆抗体,DA K O 公司),EnVision 试剂即用型(DA K O 公司),3,3’2二氨基联苯胺盐酸第11期.邢继章,等.AMACR 、34βE12双重免疫组化标记在前列腺癌诊断中的应用・1179　・盐(DAB ,Sigma 公司),EnVision 2HRP 试剂(DA K O 公司),Streptavidin 2A KP (Zymed 公司)。

1.3　免疫组化染色　所有标本10%甲醛溶液固定,石蜡包埋。

4μm 连续切片4张,分别做H 2E 、AMACR 、34βE12及AMACR/34βE12免疫组化标记。

用已购阳性切片作阳性对照,PBS 代替一抗作阴性对照。

1.3.1　AMACR 、34βE12单独免疫组化标记　采用EnVision 法,按公司试剂说明书方法操作。

1.3.2　AMACR/34βE12双重免疫组化标记　石蜡切片常规脱蜡至水,PBS 洗3min ×3;抗原修复,98℃,20min ,室温中冷却20min ,加普通血清封闭,PBS 洗3min ×3;0.3%H 2O 2室温20min ,PBS 洗3min ×3;加AMACR (1ζ30)4℃过夜,PBS 洗3min ×3;加EnVision 2HRP 试剂,37℃,30min ,PBS 洗3min ×3;0.04%A EC +0.03%H 2O 2显色8min ,PBS 洗3min ×3;加20%蛋清孵育抑制内源性生物素,PBS 洗3min ×3;加34βE12(1ζ50),37℃,2h ,PBS 洗3min ×3;加生物素化羊抗免Ig G(1ζ200),37℃,30min ,PBS 洗3min ×3;加St rep 2tavidin 2A KP (1ζ200),37℃,30min ,PBS 洗3min ×3;0.02mol/L 、p H 9.0TBS 洗20,NB T/BCIP 显色30～120min ,蒸馏水洗5min ;核固红衬染5min ,水洗,常规树胶封片。

1.3.3　结果判定　单独标记时,AMACR 染色阳性结果判断标准:400倍镜下随机观察10个视野,以胞质中清晰出现AMACR 棕黄色颗粒表达的细胞数占细胞总数的比例作为判断标准。

分4级,(-):无染色细胞;(+):阳性细胞数<10%;(6):阳性细胞数10%～50%;(7):阳性细胞数>50%。

(6)和(7)界定为组织中AMACR 表达阳性[5]。

34βE12染色阳性的颗粒定位于基底细胞胞质。

双重免疫组化标记时,细胞AMACR 表达阳性的结果表现为胞质内点状红褐色颗粒,34βE12阳性标记为紫蓝色,背景呈淡红色。

组织中阳性表达判定标准同上。

1.4　统计学处理　采用χ2检验和秩和检验,SPSS 11.0统计软件,P <0.05认为有统计学差异。

2　结　果 单独、双重34βE12染色在所有18例PCa 标本均为阴性(图1A );在BP H 和正常前列腺标本中均为阳性。

两种方法AMACR 染色在所有B P H 和正常前列腺标本中均为阴性。

在PCa 标本中,应用AMACR 单独免疫组化标记方法,阴性2例,均为前列腺穿刺活检标本;阳性16例(图1B ),敏感度为88.9%。

应用AMACR/34βE12双重免疫组化标记,AMACR 表达阴性1例,为前列腺电切标本;阳性17例(图1C ),敏感度为94.4%。

应用χ2检验两种方法AMACR 诊断PCa 的敏感度无显著差别(χ2=0.364,P =0.546);手术方式与AMACR 表达之间无显著相关。

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前列腺疾病的免疫组化诊断

前列腺疾病的免疫组化诊断

前列腺疾病的免疫组化诊断余英豪;李慧明【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2014(000)012【总页数】4页(P1329-1332)【关键词】前列腺疾病;病理;诊断;免疫组织化学【作者】余英豪;李慧明【作者单位】南京军区福州总医院病理科，福州 350025;南京军区福州总医院病理科，福州 350025【正文语种】中文【中图分类】R737.25前列腺疾病的诊断在很大程度上依赖穿刺标本的病理学检查，而免疫组化染色在其病理辅助诊断中占有重要地位，病理医师对免疫组化的依赖性很高。

近年来前列腺肿瘤的生物学标志物不断涌现，如何选择合适标志物、合理应用鸡尾酒抗体(双标、三标)以及应用免疫组化检查解决前列腺疾病诊断中的难题，是日常病理工作经常遇到的问题，本文现对这些问题逐一进行讨论。

前列腺疾病诊断中，需选用的免疫组化标志物包括上皮标志物、基底细胞标志物以及在前列腺腺癌中过表达的标志物。

1.1 前列腺上皮标志物前列腺上皮标志物主要有前列腺特异性抗原(prostate specific antigen, PSA)、前列腺特异性膜抗原(prostate specific membraneantigen, PSMA)、前列腺特异性酸性磷酸酶(prostate specific acid phosphatase, PSAP)和P501s(prostein)，这些标志物作用相似，均可表达于前列腺良性和肿瘤性上皮细胞。

PSA虽应用最为广泛，但其在高级别前列腺癌中的反应性不够稳定；PSMA特异性较高，从良性上皮→高级别上皮内瘤变(prostatic intraepith elial neoplasia, PIN)→高级别前列腺癌，阳性细胞逐渐增加，染色也趋于加深；PSAP特异性较低，但能维持前列腺癌放疗后的免疫反应性；P501s是位于高尔基体中的一种跨膜蛋白，对前列腺的特异性很高。

免疫组化染色显示特征性的顶端核周颗粒状染色。

CK34_E12_p63表达在乳腺癌和前列腺癌诊断中的应用价值_胡志红

CK34_E12_p63表达在乳腺癌和前列腺癌诊断中的应用价值_胡志红

[基金项目]九江市科学技术局资助项目(2004-47)CK34βE12、p63表达在乳腺癌和前列腺癌诊断中的应用价值胡志红1,徐　晓2,彭　进3(1九江学院医学院,江西九江332000;2九江学院附属医院;3九江妇幼医院) 【摘要】　目的　探讨CK34βE12、p63表达在乳腺、前列腺良恶性病变鉴别诊断中的价值。

方法　采用免疫组化方法,观察CK34βE12、p63在乳腺、前列腺良恶性病变中的表达情况。

结果　乳腺良恶性病变组织中肌上皮细胞CK34βE12的标记敏感度低、特异性差,p63着色特异、敏感度高。

在乳腺良性病变的腺泡和导管周围可见连续的p63阳性反应的肌上皮细胞围绕;乳腺导管内癌组织p63显示肌上皮呈不连续阳性;乳腺浸润性癌p63染色呈阴性,显示肌上皮消失。

良性前列腺增生及低度前列腺上皮内肿瘤形成(PIN )的大多数腺泡和导管周围可见连续的CK34βE12和p63阳性表达,少数呈间断阳性(即部分细胞不着色),尤以CK34βE12染色明显;高度PIN CK 34βE12、p63染色呈不连续阳性或阴性反应;前列腺癌20例中19例CK 34βE12、p63染色呈阴性,1例CK 34βE12、p63显示局灶性阳性反应。

结论　CK 34βE12不宜作为标记乳腺肌上皮细胞的抗体在临床使用;p63对乳腺肌上皮细胞和前列腺基底细胞反应特异、敏感,有助于乳腺癌和前列腺癌的诊断。

【关键词】　乳腺肿瘤;前列腺肿瘤;免疫组织化学;诊断【中图分类号】　R737 【文献标识码】　A 【文章编号】　1002-266X (2005)32-0010-03Abstract :Objectiv e :T o evaluate the v alve of CK 34βE12,p63immunostaining in diagnosis of benig n and malignant lesions of breast and prostate .M ethods :Ex pressio n of CK34βE12,p63in benign and malignant lesion of breast and prostate were observed by immunohistochemical method .Results :Sensitivity and specifity of CK 34βE12ex pression inall benig n and malig nant lesio ns of breast was low ,w hile p63w as hig h .T here was a continuous layer of myoepithelial cells in the benig n lesions of breast ,they w ere reactive fo r p63.My oepithelial lay er was interruptedly positive for p63in carci -noma in situ .M yoepithelial layer was absent in invasive breast carcinoma .Co ntinuous positive expressions by CK34βE12and p63were found in the acini and ducts of mo st benig n prostatic hy perplasia and low prostatic intraepithelial neoplasia (PI N );Few cases showed interrupted expression ,especially by CK34βE12staining ;Interuped ex pression or nega tiv e re -action w as found in hig hly P IN cases ,CK34βE12and p63staining were negative in 19out of 20prostatic carcinoma cas -es ,1case presented focally positive reactio n by CK 34βE12and p63.Conclusions :CK 34βE12is not an useful antibody to label myoepithelial cells of breast .p63is sensitive and specific in label myoepithelial cells of breast and basal cells of prostate ,and helpful to the diagnosis o f breast carcino ma and prostate cancer .Key words :breast neopalsms ;prostatic neoplasms ;immunohistochemistry ;diag nosis 乳腺癌和前列腺癌是临床常见的恶性肿瘤,近年来,其发病率不断上升,但及时正确诊断极为困难。

免疫组化在前列腺癌病理诊断中作用

免疫组化在前列腺癌病理诊断中作用

免疫组化在前列腺癌病理诊断中作用摘要】前列腺癌的病理诊断在形态学上主要是依据细胞的异型性、组织结构的异型性和浸润性生长方式来进行判断，有其人为的主观因素存在，而且并不是所有的前列腺癌在光镜下都具有典型的诊断特点，常常造成病理诊断困难，容易误诊。

目前常用免疫组化标记前列腺活检标本来协助诊断，因此，高度敏感性的免疫组化标记物就成了前列腺癌病理诊断的一个比较客观、有力的指标。

【关键词】免疫组化前列腺癌前列腺癌严重威胁着全球老年男性健康。

近些年来，随着社会的进步，医学技术的发展，人们的寿命不断延长，再加上人们膳食结构的改变（高脂化），以及血清PSA检测和前列腺穿刺活检等医学诊断技术的推广使用，我国前列腺癌的发病率有明显升高的趋势，对前列腺癌的检出率也逐渐提高[1]。

但是，前列腺癌病变发展慢、起病比较隐匿、发病早期没有特别的症状等，因此，前列腺癌的早诊断及早治疗，就显得尤为重要。

本文阐述了免疫组化在前列腺癌病理诊断中的作用，以期即时正确诊断前列腺癌。

1 前列腺癌的诊断现状前列腺癌在50岁以前很少发病，然而，在全球范围内，75%的前列腺癌发生于65岁及以上的老年男性[2]，并且随着年龄增长,前列腺癌发病的危险性急剧升高。

前列腺癌在男性泌尿生殖系统恶性肿瘤中的发病率已经位居第二位。

前列腺癌的早期诊断主要依赖前列腺穿刺标本的病理检查。

当患者的血清PSA>4.0μg/L，就可以列入可疑前列腺癌患者中，再对其进行B超引导下经直肠前列腺穿刺活检来确诊。

以往对前列腺活检标本的病理诊断，主要依靠常规石蜡切片HE染色的形态学观察。

主要观察细胞的异型性，是否有特别明显的大核仁；组织的异型性，是否缺乏基底细胞层；以及浸润性生长方式，作为判断患者是否患有前列腺癌的依据[3]。

然而，虽然前列腺穿刺活检创伤小、痛苦少，但是获取的前列腺标本有限，组织小，常无足够的腺体和间质，并且部分良性和恶性病变之间的形态差异非常小，因而在临床病理诊断工作中常常遇到前列腺良、恶性病变的鉴别难题，这时免疫组织化学染色就成为必不可缺的诊断手段。

34βE12-P63及P504S在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达及意义

34βE12-P63及P504S在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达及意义

34βE12\P63及P504S在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达及意义摘要：目的：探讨34βE12、P63及P504S在前列腺癌及前列腺增生中的表达情况及其在良恶性病变的鉴别意义。

方法：应用免疫组化SP法，选用P504S 联合34βE12及P63抗体，对117例前列腺电切或穿刺标本进行检测。

结论：联合应用P504S、34βE12及P63免疫组化检测，对前列腺良恶性病变鉴别诊断具有重要意义。

关键词：前列腺癌；前列腺增生；34βE12；P63；P504SAbstract: Aim: to study the 34 β E12, P63 and P504S in prostate cancer and prostate hyperplasia of the expressions in good condition and its identification of m alignant change meaning. Methods: using immunohistochemical SP method, choose P504S 34 β E12 and joint P63 antibody, 117 cases of prostate biopsy specimens were cutting or testing.Conclusion: combined application of 34 β E12 P504S, and P63 immunohistochemical testing, the prostate benign and m alignant lesions in the differential diagnosis is of great significance.Key words: prostate cancer; Prostate hyperplasia; 34 β E12; P63; P504S前列腺癌在世界最常见的肿瘤中位于第六位，在男性常见肿瘤中排第三位，且有上升的趋势。