1．治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下：
(1)过程①采用的是细胞工程中的________技术，过程②采用的是胚胎工程中的________技术。
(2)体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O 2和CO 2，其中CO 2的作用是维
持培养液(基)的________。
(3)如果克隆过程中需进行基因改造，在构建基因表达载体(重组载体)时必须使用________和________两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外，还需有________基因，以便选出成功导入基因表达载体的细胞。
(4)胚胎干细胞可以来自囊胚中的________。在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体________(填“A ”或“B ”)，则不会发生免疫排斥反应。
答案 (1)(体细胞)核移植 (早期)胚胎培养
(2)pH(或：酸碱度)
(3)限制性(核酸)内切酶(或：限制酶) DNA 连接酶(注：两空可颠倒) 标记
(4)内细胞团 B
解析 (1)由图示可知，过程①表示利用个体A 的去核卵(母)细胞和个体B 的体细胞核通过核移植技术构建重组细胞；过程②表示将重组细胞进行早期胚胎培养，培养至囊胚期，然后从内细胞团中获取胚胎干细胞，之后定向诱导分化形成所需要的组织器官并进行器官移植。
(2)动物细胞培养需要适宜的外界条件，例如无菌无毒的环境、营养、温度和pH 、气体环境等，其中CO 2用以维持培养液的pH 。
(3)基因工程中需要用限制酶切割目的基因和运载体，以获得相同的末端，
再用DNA连接酶连接成基因表达载体；基因表达载体包含目的基因、标记基因、启动子、终止子等结构，标记基因用于筛选成功导入基因表达载体的细胞。
(4)胚胎干细胞来自内细胞团细胞或原始性腺细胞；图示克隆器官细胞核来自个体B，获得的组织器官与个体B不会发生免疫排斥反应。
2．某课题组为解决本地种奶牛产奶量低的问题，引进了含高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。
(1)拟进行如下杂交：
♂A(具高产奶基因的纯种)×♀B(具适宜本地生长基因的纯种)→C
选择B作为母本，原因之一是胚胎能在母体内正常________________。若C 中的母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并未提高，说明高产奶是________性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是
________，后代中出现这种母牛的概率是________(假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。
(2)用以上最佳组合，按以下流程可加速获得优良个体。
精子要具有受精能力，需对其进行________处理；卵子的成熟在过程
________中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖，其作用是
____________________。为筛选出具有优良性状的母牛，过程⑤前应鉴定胚胎的______________________。子代母牛的优良性状与过程________的基因重组有关。
(3)为了提高已有胚胎的利用率，可采用________技术。
答案(1)生长发育或胚胎发育隐性♂A×♀C 1/8
(2)获能或增强活力③供能性别、高产奶和适应生长的基因②(3)胚胎分割
解析(1)由于B是具有适宜本地生长基因的纯合子，故选择B作为母本，可使胚胎在母体内正常生长发育。让B与纯合的具有高产奶基因的A杂交得到C，C牛的产奶量并未提高，可推知高产奶是隐性性状，而C为杂合子。因引进的是
含高产奶基因的纯种公牛，故可选用♂A×♀C杂交组合，后代中高产奶且适宜本地生长的母牛的概率为1/4×1/2＝1/8。
(2)胚胎工程中精子要具有受精能力，需对其进行获能处理；卵子的成熟在受精过程(即图中③)中完成。在胚胎培养过程中，培养基中的葡萄糖的作用是供能。为筛选出具有优良性状(即高产奶、适宜本地生长)的母牛，在胚胎移植前需鉴定胚胎的性别、高产奶和适应生长的基因。
(3)采用胚胎分割技术可提高已有胚胎的利用率。
3．下面是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答：
(1)方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的主要生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和________。
(2)用________处理使B牛超数排卵，从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到________(时期)才能与精子结合。
(3)A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵细胞结合，卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到
________。完成受精作用一段时间后，从B牛输卵管中冲出早期胚胎，这个过程叫________。
(4)生产上常用____________期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个性状相同的家畜个体，可以使用________技术。
(5)获得试管牛E和克隆牛F的生殖方式分别是________、________。
答案(1)胚胎移植(2)促性腺激素减数第二次分裂中期(3)两个极体冲卵(4)桑椹胚或囊胚胚胎分割(5)有性生殖无性生殖
解析(2)给雌性动物注射促性腺激素可进行超数排卵；卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才算发育成熟，具有受精能力。
(3)受精的标志是用显微镜镜检时观察到在卵细胞膜和透明带的间隙能够出