肺炎克雷伯菌 ESBL

文章编号：１００７－４２８７（２０１３）０１－０１３３－０２产ＥＳＢＬｓ肺炎克雷伯菌ａａｃ（６′）－Ⅰｂ－ｃｒ基因及耐药性检测丁秋蕾１，杨小娜１，梅志琴３，赵建宏２，时东彦２（１．石家庄市中心医院医务部，河北石家庄０５００１１；２．河北医科大学第二医院检验科，河北石家庄０５００００；３．石家庄市传染病医院检验科河北石家庄０５００１２） ２００６年初，美国学者Ｒｏｂｉｃｓｅｋ等［１］发现了不仅对氨基糖苷类药物有修饰作用，而且对喹诺酮类药物也有修饰作用的新氨基糖苷类修饰酶ａａｃ（６′）－Ⅰｂ－Ｃｒ基因。

为了了解肺炎克雷伯菌中ａａｃ（６′）－Ⅰｂ－Ｃｒ型基因存在情况，我们从１０８株肺炎克雷伯菌（Ｋ．ｐｅｎｕｍｏｉｎｉａｅ）中，筛选出了４３株产ＥＳ－ＢＬｓ菌株，对其进行了ａａｃ（６′）－Ⅰｂ－Ｃｒ基因的检测和药物敏感性测定，现报告如下。

１．材料与方法１．１　菌株来源　１０８株产ＥＳＢＬｓ肺炎克雷伯菌来自河北医科大学第二医院保存的菌株，菌株采用法国梅里埃的ＡＰＩ２０Ｅ鉴定条进行鉴定。

１．２　药敏纸片　所用药敏纸片亚胺培南（ＩＭＰ）和美罗培南（ＭＥＲ）为英国Ｏｘｏｉｄ公司产品；氨苄西林（ＡＭ）、阿莫西林／克拉维酸（ＡＭＣ）、哌拉西林／他唑巴坦（ＴＺＰ）、头孢唑啉（ＣＺ）、头孢呋辛（ＣＸＭ）、头孢曲松（ＣＲＯ）、头孢他啶（ＣＡＺ）、头孢他啶－克拉维酸（ＣＤＯ２）、头孢噻肟（ＣＴＸ）、头孢噻肟－克拉维酸（ＣＤＯ３）、头孢吡肟（ＦＥＰ）、头孢哌酮／舒巴坦（ＣＦＳ）、阿米卡星（ＡＭＫ）、庆大霉素（ＧＥＮ）、诺氟沙星（ＮＯＲ）、环丙沙星（ＣＩＰ）、左氧氟沙星（ＬＥＶ）、头孢西丁（ＦＯＸ）、复方新诺明（ＳＸＴ）均为北京天坛公司产品。

１．３　药敏培养基及试剂　Ｍ－Ｈ琼脂培养基为英国Ｏｘｏｉｄ公司产品，ＰＣＲ相关试剂由大连宝生物工程有限公司提供，ＡＰＩ２０Ｅ鉴定条由法国生物梅里埃公司生产。

１．４　药敏试验及ＥＳＢＬｓ酶的检测　药敏试验采用Ｋ－Ｂ法，产ＥＳＢＬｓ菌株检测采用头孢他啶和头孢他啶－克拉维酸、头孢噻肟和头孢噻肟－克拉维酸纸片做确证试验，按临床实验室结果判断［２］。

儿童多重耐药肺炎克雷伯菌败血症危险因素及治疗预后分析谢锦金;谢建宁【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2014(000)003【摘要】Objective To investigate the risk factors, treatment and clinical outcomes for multidrug resistant(MDR) klebsiella pneumoniae bloodstream infections (KP-BSIs)in children. Methods The Clinical data of 37 children with MDR KP-BSIs were retrospectively analyzed. Results Premature birth, twins, low birth weight,history of invasive procedures,neutropenia and perinatal asphyxia were risk factors for MDR KP-BSIs in children.multi-drug resistance was 94.9%;empirical application of carbapenems vinyl drugs cure rate was 62.5%, four cases ofdeath,strains producing ESBLs were detected. Conclusion MDR of KP-BSIs was serious,and the detection rate of ESBLs-producing was high,to long-term trends in the dynamic monitoring, Screening for the presence of multi-drug resistant positive persons,rational use of antibiotics was essential.%目的：探讨儿童多重耐药肺炎克雷伯菌败血症的危险因素、治疗方法以及临床预后。

esbls的名词解释ESBLs（extended-spectrum beta-lactamases）是一种β-内酰胺酶，它能够水解一类广谱β-内酰胺类抗生素，包括第三代头孢菌素和氟喹诺酮类药物。

ESBLs产生的细菌株对常用的抗生素产生了耐药性，给医疗工作带来了巨大的挑战。

ESBLs最早于1980年在德国被发现，随后在世界范围内广泛传播。

ESBLs一旦广泛传播，会导致细菌菌株之间的传播迅速，而这些细菌菌株也变得对药物治疗具有高度抗药性。

目前已经发现的ESBLs大约有400个亚型，其中有些亚型已经迅速蔓延，并且表现出多重耐药性。

ESBLs主要存在于革兰阴性菌中，如大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌等，这些细菌经常导致呼吸道、泌尿道、血液感染等疾病。

ESBLs基因主要位于细菌染色体或质粒中，通过水平基因转移方式在不同细菌中传播。

这导致了不同医疗环境内的ESBLs感染病例不断增加，加重了公共卫生问题。

ESBLs的耐药机制主要是由于它在细菌细胞内产生一种酶，能够破坏抗生素的β-内酰胺的分子结构，使其失去药效。

这种酶的活性较强，能够迅速破坏第三代头孢菌素的结构，从而使细菌对这些药物产生耐药性。

此外，ESBLs还能够导致细菌菌株产生多重耐药性，包括对其他类抗生素的抗药性。

ESBLs的出现给临床治疗带来了挑战。

由于ESBLs产生的耐药性，导致了一些常用的抗生素对感染的疗效下降。

临床医生不得不转向更为强效的抗生素，如碳青霉烯类，但这些药物往往带来更高的毒副作用和费用。

同时，ESBLs的传播和高度耐药性也给医疗环境中的卫生安全带来了风险，容易导致院内感染，特别是在免疫功能较弱的患者群体中。

为了有效控制ESBLs的传播和治疗，一系列的措施被提出。

首先，加强细菌菌株的监测和细菌学实验，在感染控制和感染源追踪上进行精准的管理。

其次，合理使用和规范使用抗生素，减少滥用和过量使用，以降低抗生素产生抗性菌株的风险。

此外，科学开展抗菌药物研发，寻找新的治疗手段和药物，以提高对ESBLs 感染的有效治疗。

泛耐药肺炎克雷伯菌多部位感染的抗感染治疗摘要目的探讨泛耐药肺炎克雷伯菌引起多部位感染的有效治疗。

方法本文阐述了临床药师对1例多部位泛耐药肺炎克雷伯菌患者的药学监护过程。

临床药师参考泛耐药革兰氏阴性菌的治疗方案结合药敏试验提出适宜的治疗意见。

结果当不能使用替加环素时，米诺环素联用美罗培南和复方磺胺甲噁唑片成功治疗多部位肺炎克雷伯菌感染。

结论临床药师参与临床药物治疗,有利于提高临床治疗水平。

关键词：泛耐药肺炎克雷伯菌；多部位感染；药学监护肺炎克雷伯菌(K. Pneumoniae, KPN)为革兰氏阴性菌，属于肠杆菌科克雷伯菌属，为兼性厌氧菌，约占医院革兰阴性菌感染20%以上[1]，是引起呼吸道感染、尿路感染的常见菌种，偶尔可致血流感染。

全国细菌耐药监测显示,肺炎克雷伯菌的 ESBLs 检出率为 54.5%[2]。

我院最近发现多例同时产ESBLs 和KPC的肺炎克雷伯菌，现将1例泛耐药KPN 导致多部位感染的病例进行分析，以探讨有效的抗感染方案。

1 病例资料患者男性，65岁，已婚。

主因“意识不清13小时余”入院。

患者自2015年10月长期卧床，留置尿管。

2016.1.20尿道口开始出现脓性分泌物，伴恶臭，尿量逐渐减少，尿管中可见黑色絮状物。

1.28 患者21：20被家属发现两眼发直，呼之不应，呼吸动度大，伴右上肢抽动，遂至我院就诊。

以“肺部感染、泌尿系感染”收入ICU。

既往高血压病史10余年；脑梗塞病史3年，遗留右侧肢体活动不利及言语不利；右侧腹股沟疝气病史2年余。

1.28白细胞计数13.89×109/L，中性粒细胞百分比93.4%；C-反应蛋白148mg/L；降钙素原(PCT)150.64ng/ml；动脉血气（FiO20.29）：PO276.4mmHg，PCO222.1mmHg，pH7.419，BE-9.6mmol/L，HCO3-14.1mmol/L，cLac10.8mmol/L，PO2(A-a)e108.5mmHg；胸片：左下肺炎，左侧胸膜增厚可能性大。

１２６６　临床肺科杂志２０１３年７月　第１８卷第７期　新生儿科分离的产ＥＳＢＬ肺炎克雷伯菌基因分型研究　刘晓莺　马靖华　【摘要】　目的分析新生儿科分离的产ＥＳＢＬ肺炎克雷伯菌基因分型。方法选取本院新生儿科重症监护室产ＥＳＢＬ肺　炎克雷伯菌感染患儿５２例，分离菌株，行细菌ＤＮＡ提取和ＰＣＲ扩增检测，分析产ＥＳＢＬ肺炎克雷伯菌的基因分型。结果５２株　病菌中，单基因型２３株、２个以上基因型２９株。ＴＥＭ型ｌ３株、ＳＨＶ型２０株、ＣＴＸ．Ｍ型４ｏ株、ＧＥＳ型７株、ＰＥＲ型３株。ＥＳＢＬ　为阳性菌株３６株，ＥＳＢＬ为阴性菌株１６株，产ＥＳＢＬ肺炎克雷伯菌的阳性率为６９．２％。结论新生儿科广泛存在产ＥＳＢＬ肺炎　克雷伯菌，其中ＣＴＸ—Ｍ型居多。细菌ＤＮＡ提取和ＰＣＲ扩增检测是产ＥＳＢＬ肺炎克雷伯菌基因分型的有效方法。　【关键词】新生儿科；产ＥＳＢＬ肺炎克雷伯菌；基因分型　

Ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ＥＳＢＬ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ＫｌｅｂｓｉｅＨａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｉｎ　ｎｅｏｎａｔａｌ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　Ｌ１Ｕ　Ｘｉａｏ—ｙｉｎ，ＭＡ　Ｊｉｎｇ—ｈｕａ　ｃｌｉｎ一　ａｌ　Ｚａｂｏｒａｔｏｒｒ　ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　ＨｏｓｐｉｔａＺ　ｏｆ　Ｙｕｌｉｎ。Ｙｕｌｉｎ．Ｓｈａｎｘ　７１８０００．Ｃｈｉｎａ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ｏｆ　ＥＳＢＬ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｉｎ　ｎｅｏｎａｔａｌ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　５２　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ＥＳＢＬ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ＩＣＵ　ｎｅｏｎａｔａｌ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｏｕｒ　ｈｏｓｐｉｔａ１．Ｔｈｅ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏ—　ｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｇｉｖｅ　ＤＮＡ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ＰＣＲ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ　ｏｆ　ＥＳＢＬ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｉｎ　ｔｈｅ　５２　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａ，２３　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ｓｉｎｇｌｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ，ａｎｄ　２９　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　２　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ．Ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　１３　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ＴＥＭ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ，２０　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ＳＨＶ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ，４０　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ＣＴＸ—Ｍ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ，７　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ＧＥＳ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ，ａｎｄ　３　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ＰＥＲ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ．Ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ＥＳＢＬ　ｗｅｒｅ　３６　ｓｔｒａｉｎｓ．ａｎｄ　ｔｈｅ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ＥＳＢＬ　ｗｅｒｅ　１６　ｓｔｒａｉｎｓ．Ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　６９．２％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＥＳＢＬ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｅｘｉｓｔｓ　ｗｉｄｅｌｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｎｅｗｂｏｒｎ　ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｃｏｍｍｏｎ　ｇｅｎｐｔｙｐｅ　ｉｓ　ＣＴＸ・Ｍ．　ＤＮＡ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ＰＣＲ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｆｉｒｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ　ｏｆ　ＥＳＢＬ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】ｎｅｗｂｏｒｎ　ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ；ＥＳＢＬ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ；ｇｅｎｏｔｙｐｅ　

克雷伯菌属检验标准操作规程1. 概述克雷伯菌属包括肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、鼻硬结克雷伯菌和鼻臭克雷伯菌4个种。

临床以肺炎克雷伯菌最为常见。

2. 标本类型血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。

3. 鉴定3.1形态与染色革兰阴性粗短杆菌。

3.2培养特性在血琼脂平板上35℃培养18～24小时，呈灰白色、不溶血的菌落。

在麦康凯琼脂平板上形成大而隆起、黏液样、易融合的、粉红色菌落，用接种环挑取呈丝状粘连。

3.3生化反应氧化酶试验阴性，发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖等多种糖类，TSI为A/A，IMViC - - + + ，硝酸盐还原、脲酶和赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力、H2S、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶试验均为阴性。

3.4鉴定要点3.4.1菌属特征琼脂平板上菌落较大、隆起、黏液样、用接种环挑取呈丝状粘连，发酵葡萄糖等多种糖类，IMViC - - + + ，脲酶和赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力试验阴性。

3.4.2 克雷伯菌属的种间鉴别见下表克雷伯菌属种间鉴别的关键性试验（阳性%）菌名吲哚VP 枸橼酸盐脲酶赖氨酸丙二酸盐乳糖肺炎克雷伯菌0 98 98 95 98 93 98产酸克雷伯菌99 95 95 90 99 98 100鼻硬结克雷伯菌0 0 0 0 0 95 0鼻臭克雷伯菌0 0 30 10 40 3 30克雷伯菌属检验标准操作规程3.5 操作步骤3.5.1 氧化酶试验参见《氧化酶试验标准操作规程》。

3.5.2 鉴定从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反进行细菌鉴定。

4. 药敏参见《抗菌药物敏感试验标准操作规程》及CLSI最新版本文件。

5.质量控制见《质量管理程序》。

6. 检验结果解释与分析6.16．检验结果解释与分析肺炎克雷伯菌可产生ESBLs，据国内文献报道产酶率在30%以上，产酶株对青霉索、头孢菌素类及单酰胺类抗生素均产生耐药。

如果检出产ESBLs肺炎克雷伯菌，即使体外药敏试验对青霉素类、头孢菌素类或氨曲南敏感，也应报告该菌对所有青霉素类、头孢菌素类或氨曲南耐药。

探讨下呼吸道肺炎克雷伯菌ESBLs的检测及耐药性分析吴巍摘要】目的研究下呼吸道肺炎克雷伯菌ESBLs的检测和耐药性。

方法选择收集在2014年4月到2016年1月的120例经细菌鉴定和药敏实验分析确定的肺炎克雷伯菌标本作为本研究的研究对象，采用仪器法和双纸片协同对ESBLs进行检验。

结果重症监护病房的肺炎克雷伯菌检出率为15.36%，感染科检出率为8.02%，其感染部位主要是以患者的呼吸道为主，占38.6%。

本研究120株肺炎克雷伯菌标本共检测出ESBL阳性40株，阳性率为33.33%。

结论 ESBLs是肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制，而且产酶的耐药率高于非产酶菌株，对于ESBLs的检测十分重要，需要在临床上予以强化。

【关键词】呼吸道肺炎；克雷伯菌；ESBLs检测[Abstract] Objective To study the detection and drug resistance of Klebsiella pneumoniae ESBLs in the lower respiratory tract. Methods collected in April 2014 to 120 cases in January 2016 by the bacteria identification and susceptibility testing analysis of Klebsiella pneumoniae were used as the research objects, using the instrument method and double disk synergy test on ESBLs. Results the detection rate of Klebsiella pneumoniae in intensive care unit was 15.36%, the infection rate was8.02%, the infection site was mainly in patients with respiratory tract, accounting for 38.6%. In this study, 120 strains of Klebsiella pneumoniae were detected. The positive rate of ESBL was 40, andthe positive rate was 33.33%. Conclusion ESBLs is the resistance mechanism of Klebsiella pneumoniae to beta[Key words] respiratory pneumonia; Klebsiella pneumoniae; ESBLs detectionESBL就是超光谱β-内酰胺酶，其是介导格兰阴性杆菌对于β-内酰胺类抗生素耐药的一个主要机制[1]。