芦丁的提取与鉴定

芦丁，槲皮素分别 用甲醇溶解，加入 ZrOCl2，再加入柠檬 酸
实验现象 芦丁分层上层呈浅 黄色，下层出现紫 红色环。槲皮素分 层上层为浅黄色， 下层为无色
芦丁，槲皮素溶液 都变成紫红色
芦丁，槲皮素溶液 都出现荧光
解析 Molish 反应是鉴定 糖的反应。芦丁含 有葡萄糖和鼠李 糖，所以出现紫环 反应，槲皮素没有 糖结构，所以没反 应。 盐酸镁粉反应是检 查是否有黄酮类化 合物的最常用方 法。芦丁，槲皮素 都含有黄酮结构， 所以出现紫红色。 芦丁，槲皮素都含 有黄酮结构。
芦丁粗品
重结晶
芦丁纯品
原理：黄酮苷难溶于酸水，易溶于碱水。
2 芦丁及槲皮素的纸层析和聚酰胺薄膜层析的结果如何？为什么不同？
在纸层析中 Rf 槲皮素>Rf 芦丁，在聚酰胺薄膜层析中 Rf 槲皮素<Rf 芦丁
纸色谱是正相分配色谱，芦丁的极性比槲皮素大，所以 Rf 槲皮素>Rf 芦丁
聚酰胺薄膜是吸附色谱，芦丁极性与流动相极性相近，易向高处展开，所以 Rf 槲皮素<Rf 芦丁。
芦丁溶液变成绿色 槲皮素溶液变成深 绿色
芦丁溶液加入 ZrOCl2 后颜色加深， 加入柠檬酸后，颜 色变浅。 槲皮素加入 ZrOCl2 后颜色变深，加入 柠檬酸后没变化。
芦丁，槲皮素都黄
酮类化合物，黄酮
类化合物，5-羟基 呈绿色，3，5-二羟 基呈深绿色。
芦丁，槲皮素都有
3-OH，5-OH，所以 遇 ZrOCl2 颜色变 深，芦丁只含 5OH，所以加柠檬酸 后褪色，槲皮素 3OH，5-OH 都有，所 以加柠檬酸，不会
因为槐花米的主要化学成分芦丁含量为 12%~16%,假设实验批次槐花米芦丁含量为 14%.所 以这 20g 槐花米含 2.8g 芦丁。粗制芦丁的提取率为 1.2/2.8=0.43 。可以看出提取率较 低，可能是我们组用棉花过滤时，有槐花米颗粒漏下去滤液中，再过滤一遍，导致损失变 大。虽然产率比较少，但做出来的的样品呈淡黄色，性状较好。
所以可以认为 a 为葡萄糖，b 为鼠李糖。糖试液中含有葡萄糖和鼠李糖。芦丁样品中含有 芦丁，槲皮素样品中含有槲皮素。 （4）薄层色谱
Rf（A）=0.46 Rf（B）=0.40 Rf（C）=0.10 Rf（D）=0.07 因为 Rf（A）≈ Rf（B） Rf（C）≈ Rf（D）
所以可以认为 B 为芦丁，D 为槲皮素。 五．实验结果与讨论
芦丁为双糖苷，具有较大极性，对热水和冷水具有较大的溶解差异，故用水对其进行提取 精制。
芦丁可被稀酸水解，生成槲皮素及葡萄糖，鼠李糖，并通过薄层层析，纸层析鉴定。芦丁 及槲皮素还可以通过化学反应及紫外及红外光谱鉴定。
OH OH
OH OH
HO
O
HO
O
+
H
+百度文库
O
OH
OH O Glc O
OH O
Rha
O H,OH
六．思考题
1 根据芦丁的性质还可以采用那种方法进行提取？试设计槐花米中提取芦丁的另外一种方 法，并说明原理。
槐花
6 倍水，煮沸，加入石灰乳至 PH 到 8~9，
微沸 20min,趁热抽滤
滤渣
加四倍水煮沸，趁热抽滤
滤液
60~70℃加 HCl 至 PH 至 5
搅匀，静置 24h，抽滤，
洗沉淀物至中性，干燥
O H,OH
+
H3C
三． 实验步骤 (1)实验流程
（2）化学检识 检识反应 Molish 反应
盐酸-镁粉反应
醋酸镁反应 三氯化铁反应
二氯氧锆-柠檬酸反 应
实验步骤 芦丁，槲皮素分别 用乙醇溶解，加入 a-萘酚，浓硫酸
芦丁，槲皮素分别 用甲醇溶解，加入 镁粉，浓硫酸
芦丁，槲皮素分别 用甲醇溶解，加入 醋酸镁 芦丁，槲皮素分别 用乙醇溶解，加入 三氯化铁
实验三 芦丁的提取分离与鉴定
2015/3/20
一 .实验目的
1. 掌握用槐花米提取，精制芦丁的原理和操作方法。 2. 根据黄酮类成分的性质，掌握黄酮苷，苷元以及糖部分的鉴定方法。 3. 熟悉提取过程中防止或减少苷水解的方法。 4. 通过紫外光谱的测定熟悉用化学诊断试剂确定黄酮类羟基位置的方法。
二. 实验原理
褪色。
（3）纸层析
Rf(a)=3.2−1.5=0.31
7−1.5
Rf(葡萄糖对照品)= 37.3−−11.5.5=0.33 Rf(b)= 37.9−−11.5.5=0.44 Rf(鼠李糖对照品)= 37.9−−11.5.5=0.44 Rf(芦丁样品)= 57.1−−11.5.5=0.65 Rf(芦丁对照品)= 57−−11..55=0.64 Rf(槲皮素样品)= 57.8−−11.5.5=0.78 Rf(槲皮素对照品)= 67.1−−11.5.5=0.84 因为 Rf(a)≈ Rf(葡萄糖对照品) Rf(b)= Rf(鼠李糖对照品) Rf(芦丁样品) ≈ Rf(芦丁对照品) Rf(槲皮素样品) ≈ Rf(槲皮素对照品)