黄芪多糖对蛋鸡抗氧化性能和蛋品质的影响
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黄芪多糖对蛋鸡抗氧化性能和蛋品质的影响
王翠菊 王洪芳 陈辉 黄仁录 杨秋霞 高杨
(1.河北农业大学动物科技学院,保定 071001;2.沧州职业技术学院,沧州061001)
摘要:本试验旨在研究饲粮中添加不同水平黄芪多糖对蛋鸡抗氧化性能及蛋品质的影响。
试验选取健康、生产性能相近的380日龄海兰灰蛋鸡1440只,随机分为6组,每组4个重复,每个重复60只鸡。以玉米一豆粕型饲粮为基础饲粮,各组分别在基础饲粮中添加0,50,100,150,200和250 mg/kg黄芪多糖,试验期8周。结果表明:在饲粮中添加适量的黄芪多糖可以显著提高血清超氧化物歧化酶( SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)的活性(P<0.05),同时显著降低血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05);蛋黄中SOD和GSH-Px活性也有所提高,MDA含量有所降低,但差异均不显著(P>0.05);在蛋品质方面,添加适量黄芪多糖可以改善蛋黄颜色,提高哈氏单位,增加蛋壳厚度,但差异也均不显著(P> 0.05 )。结果提示,饲粮中添加适量黄芪多糖能够在一定程度上提高蛋鸡机体的抗氧化酶活性,可能通过这种作用防止叶黄素被氧化,增加色素的沉积,从而改善蛋黄颜色。
关键词:黄芪多糖;蛋鸡;抗氧化酶;蛋品质
中图分类号:S816.7 文献标识码:A 文章编号:1006-267 X ( 2011) 02 -0280-05
黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS),是黄芪的主要活性成分之一。诸多试验或临床研究表明,黄芪多糖具有调节免疫力[1-3]、抗病毒[4]、抗氧化[5-6]、抗衰老[7]等生物学功能,但抗氧化方面主要集中于动物感染病毒后对抗氧化酶活性的研究,尤其在雏鸡[8-9]方面报道较多。蛋鸡进入产蛋中后期,机体的生理机能会逐渐退化,抗氧化能力减弱,出现代谢紊乱、自由基过剩。根据自由基学说,随着机体的衰老,机体内脂质过氧化作用不断加剧,过氧化的终产物丙二醛( MDA)等物质含量不断增加,而相应自由基的清除剂超氧化物歧化酶( SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)等酶的活性逐渐降低,进而导致细胞生理功能的减退,使蛋鸡的生产性能下降。另外,鸡蛋中富含脂类物质,尤其是不饱和脂肪酸和胆固醇,容易发生脂质过氧化反应,降低鸡蛋的营养价值[10-11]。研究表明,在饲粮中添加抗氧化剂可改善蛋鸡饲粮品质,进而提高鸡蛋的脂质抗氧化能力[10]。关于黄芪多糖是否能够提高正常生产状态蛋鸡的机体抗氧化水平,有效防止机体及鸡蛋脂质过氧化,国内外还未见有相关报道。鉴于此,本试验利用产蛋后期的蛋鸡为研究对象,探讨饲粮中添加黄芪多糖对蛋鸡抗氧化性能与蛋品质的影响,以期为天然抗氧化剂的开发和应用提供理论依据。
1材料与方法
1.1试验动物与材料
试验动物:380日龄海兰灰蛋鸡1440只。
试验材料:黄芪多糖,山东省济宁市生物工程有限公司生产,批号20090416,纯度74.
55%,主要成分是葡聚糖和杂多糖。
1. 2试验设计
试验选用380日龄健康、生产性能相近的海兰灰蛋鸡1440只,随机分成6组,每组4个重复,每个重复60只鸡。试验采用随机区组试验设计,在玉米-豆粕型基础饲粮上添加0(对照组,I组)、50(II组)、100(Ⅲ组)、150(Ⅳ组)、200(Ⅴ组)和250 mg/kg( VI组)黄芪多糖。预试期1周,试验期8周。自由采食和饮水,按常规免疫程序免疫。基础饲粮组成及营养水平见表1。
表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)
Table 1 Composition and nutrient levels of the basal dietair-dry basis)
项目Items 含量Content 营养水平Nutrient levels 含量Content
原料Ingredients 代谢ME/ ( MJ/kg ) 11.09
玉米Corn 59.35 粗蛋白质CP 17.01
豆粕Soybean meal 17.60 钙Ca 3.62
棉籽粕Cottonseed meal 3.80 总磷TP 0.43
葵粕Sunflower meal 4.00 赖氨酸Lys 0.74
玉米蛋白粉Corn gluten meal 3.00 蛋氨酸+胱氨酸Met+Cys 0.58
植物油Vegetable oil 1.30 色氨酸Trp 0.20
石粉Limestone 8.00
磷酸氢钙CaHPO4 1.60
食盐NaCl 0.30
DL-蛋氨酸DL-Met
0.05
预混料Premix 1.00
合计Total 100.00
每千克预混料中含有One kilogram of premix contained; VA 330 000 IU,VB1 120 mg,VB2
500 mg,D-泛酸钙D-calcium pantothenate 1200 mg,VB6 300 mg,VB12 1.2 mg,VD3 82500 IU,VE 2000 IU,VK3 180 mg,生物素biotin 15 mg,叶酸folic acid 60 mg,烟酸nicotinic acid 2400
mg,胆碱choline 45g, Cu 0.8 g, Fe 6 g, Mn 9g, Zn 6g,I 90 mg,Se 21mg.
1.3样品的采集与处理
试验结束前1天,每个重复随机抽取4枚鸡蛋,标明组号,置于4℃冰箱中保存备用。试验结束后,于次日早晨空腹采血,每组随机抽取4只鸡,翅下静脉采血,每只鸡采血5 mL,倾斜静置于4℃下30 min后,4℃ 3000r/min离心10 min得血清,分装到1 mL离心管中-20℃保存备用。
1.4血清及蛋黄中抗氧化指标的测定
1.4. 1血清中抗氧化指标的测定
血清中MDA含量采用硫代巴比妥酸(TBA )法测定,SOD活性采用黄嘌呤氧化酶法测定,GSH-Px活性采用还原型谷胱甘肽-二硫代二硝基苯甲酸法测定,上述指标的测定均采用试剂盒(南京建成生物工程研究所提供),操作按试剂盒说明书进行。
1.4.2蛋黄中抗氧化指标的测定
蛋黄中SOD和GSH-Px活性的测定:吸取一定量的蛋黄,加入等量的生理盐水,混匀器混匀,抽提2 min , 2500-3000 r/min离心10 min。直接取上清测定GSH-Px活性;取上清后再用生理盐水1:4稀释,取样0.05 mL测定SOD活性,测定方法同血清GSH-Px和SOD活性的测定。
蛋黄中MDA含量的测定:准确吸取蛋黄加入9倍体积的无水乙醇,充分抽提(漩涡混匀器充分混匀)3min, 4 000 r/min离心10 min,取上清0.2 mL,测定方法同血清MDA含量的测定。
1.5蛋品质指标的测定
蛋称重后用游标卡尺测量蛋的纵径与最大横径,并计算蛋形指数;用蛋白高度测定仪测量蛋白高度,经计算转换为哈氏单位;用罗氏比色扇测定蛋黄颜色;用螺旋测微器测量蛋壳的钝端、中部、锐端三处厚度,取其平均值为蛋壳厚度。
1.6数据处理
采用SPSS 13. 0软件进行统计学处理,方差分析使用One-way ANOVA,多重比较采用LSD法,数据以平均值士标准差表示,P<0.05为差异显
2结果
2.1黄芪多糖对蛋鸡抗氧化性能的影响
2.1.1黄芪多糖对血清抗氧化指标的影响
由表2可以看出,在蛋鸡饲粮中添加不同水平黄芪多糖,除试验Ⅳ组血清SOD活性外,各试验组血清SOD和GSH-Px活性与对照组相比均有所增加,其中试验Ⅳ,V,VI组的血清GSH-Px活性显著高于对照组(P<0.05),试验II,V,VI组的血清SOD活性显著高于对照组(P<0.05);除试验111组外,血清MDA含量均下降,其中试验Ⅳ,V,VI组显著低于对照组(P<0.05)。著,P<0.01为差异极显著。
2. 1.2黄芪多糖对蛋黄抗氧化指标的影响
由表3可知,蛋黄中SOD和GSH-Px活性及MDA含量试验各组之间差异不显著(P>0.05)。试验II ,Ⅲ,Ⅳ, V组蛋黄中的GSH-Px和SOD活性较对照组分别提高了184. 40%和29.10% ,99.45%和22.56 %, 74.54%和46.14 % , 54.46 %和16.78%。试验各组蛋黄中MDA含量有不同程度的降低。
2. 2黄芪多糖对蛋品质的影响
由表4可知,试验Ⅲ,Ⅳ,V,VI组的蛋黄颜色与对照组相比,均增加了1个罗氏比色级别;试验Ⅲ,V组蛋白品质较好,哈氏单位为84.29和84.13,比对照组分别提高13.81%和13.60%,但差异均不显著(P>0.05);在饲粮中添加黄芪多糖,添加量在50-100 mg/kg时,蛋壳厚度与对照组差异不显著(P>0.05),但随着添加量的增加,蛋壳厚度逐渐增加,试验VI组蛋壳厚度最厚,为0.39 mm,显著高于试验Ⅱ和Ⅲ组(P<0.05),但与对照组相比差异不显著(P> 0.05 );试验各组平均蛋重差异不显著(P>0.05 )。
3讨论
3. 1黄芪多糖对血清及蛋黄抗氧化指标的影响
脂质过氧化是自由基攻击不饱和脂肪酸的结果,组织自由基的产量影响组织脂质过氧化状态,而MDA就是脂质过氧化物(LPO)氧化形成的终产物,机体内MDA的含量可直接反映LPO的水平,即显示机体脂质受活性氧自由基攻击的损害程度。本试验研究发现,饲粮中添加适量黄芪多糖可显著降低血清中MDA含量,有降低蛋黄中MDA含量的趋势,但影响不显著,说明机体对黄芪多糖的抗氧化性敏感,机体脂质稳定性高。
动物机体抗氧化防御体系中,SOD和GSH-Px活性在清除自由基、抗氧化损伤和维持细胞结构方面起着重要作用。试验表明,黄芪多糖对·OH和O2-有清除作用,可以提高机体抗氧化酶的活性[12]。本试验结果也显示,饲粮中添加适量黄芪多糖可显著提高血清SOD和GSH-Px活性,与血清MDA含量的变化刚好相反,提示黄芪多糖可通过提高体内抗氧化酶的活性,抑制脂质过氧化反应以增强机体的抗氧化功能。但是随着黄芪多糖添加水平的增加,血清和蛋黄中SOD活性与GSH-Px活性之间的变化趋势不一致,这可能是由于在机体的抗氧化系统内可能存在着某种动态平衡机制,即作为抗氧化系统中的SOD和GSH-Px,在某种状况下并非同时增加,而是一种机制激活时,另一种可能处于被抑制状态[13],其具体机制还有待进一步研究。
3. 2黄芪多糖对蛋品质的影响
蛋黄颜色的深浅取决于家禽从饲粮中摄取的类胡萝卜素的数量和种类[14],这些类胡萝卜素物质不能由家禽自行合成,只能来自于饲料。而饲料中的重金属离子及不饱和脂肪酸会使饲料容易被氧化,容易氧化叶黄素而使其失去着色能力,从而使蛋黄颜色变浅。本试验结果显示,当黄芪多糖添加量为100-250 mg/kg时,蛋黄颜色与对照组相比,均增加了1个罗氏比色级别,这可能是由于黄芪多糖提高了机体内抗氧化酶的活性,防止叶黄素被氧化,从而增加了色素的沉积。
哈氏单位是衡量鸡蛋蛋白品质的重要指标。哈氏单位值越大说明蛋白越黏稠,品质越好。本试验表明,添加不同水平的黄芪多糖,哈氏单位呈不同程度提高的趋势,说明添加黄芪多糖存在一定的增强鸡蛋蛋白质代谢的作用,因而鸡蛋在蛋品质方面表现良好,但作用机理有待进一步研究。