冰冻切片基质金属蛋白酶-9原位明胶酶谱法荧光染色试剂盒产

原理酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE，含0.1%明胶）电泳分离，然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性，在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶，最后用考马斯亮蓝将凝胶染色，再脱色，在蓝色背景下可出现白色条带，条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。

复性原理：在电泳过程中，SDS与样品中的MMPs结合（当然是可逆性结合），破坏其氢键、疏水键而使MMPs不能发挥其分解明胶的作用，而只有当将胶置Trition中洗脱（最好是放在摇床上摇，30min/次，做2次或15min/次，4次。

静置于Trition中是不妥的。

）时，由于SDS被Trition结合而去除，从而使MMPs恢复了活性。

2试剂的配制（1）配制10%SDS聚丙烯酰胺凝胶（含1.0mg/ml 明胶，配好后1周内使用，明胶含量低灵敏度高）A．分离胶的配制（注：根据你所用的电泳仪胶的大小确定配制胶的量）10% SDS聚丙烯酰胺凝胶10ml（包括）ddH2O 4.5ml30%储备胶（0.8%BIS+29.2%丙烯酰胺）2ml1.5mol/l Tris（PH 8.8）2.5ml10% SDS 100ul10%过硫酸铵（APS）100ulTEMED 8ul1%明胶（1g明胶-->100ml，37°C水浴溶解）0.5mlB.浓缩胶的配制浓缩胶6mlddH2O 4.5ml30%储备胶0.75ml1mol/l Tris-HCL( PH 6.8) 0.76ml10% SDS 60ul10%过硫酸铵60ulTEMED 6ul（3）5×Tris –甘氨酸电极缓冲液0.125mol/l Tris-HCL，1.25mol/l 甘氨酸，0.5%SDS（PH 8.3）（4）4 ×上样缓冲液0.32% Tris-HCL 6.4ml4%SDS（PH7.2）8ml16%甘油3.2 ml溴酚蓝0.024gddH2O 2.4ml(5) 洗脱液:2.5% Triton X-100，50mmol/L Tris-HCl<6.057g/L> ，5mmol/LCaCl2<0.5549g/L>，pH7. 6 （40分钟两次，中间换液）（6）漂洗液：50mmol/L Tris-HCl，5mmol/L CaCl2，pH7. 6 （20分钟2次）（7）孵育液：50mmol/LTris,pH7.5,150mmol/LNaCl,10mmol/LCaCl2,0.02%NaN3（孵育42小时）（8）染色液：0.05% Coomassic 亮蓝R-250，30%甲醇，10%乙酸（染色3小时）（9）脱色液A、B、C：甲醇浓度分别为30%、20%、10 % ,乙酸浓度分别为10 %、10 %、5% （分别30min、1h、2h脱色）3实验步骤1.取对数期的癌细胞在的无血清培养基DMEM中培养24h。

医学信息2010年06月第23卷第6期Medical Information.Jun.2010.Vol.23.No.6临床医学治疗部位设定好刺激的程序，其操作需要体现个体化的原则,不能以一个处方来解决所有患者的所有问题[17]。

因此，此类疗法在刺激部位和刺激参数（时间、强度、频率）方面还需要大样本多中心的研究。

参考文献：[1]Sheffler L,Chae J.Neuromuscular electrical stimulation in aneurorehabilitation [J].Muscle Nerve,2007,35:562-590.[2］郭友华，燕铁斌，Christina WY Hui-chan．低频电刺激治疗脑卒中偏瘫的神经机制研究进展．中国康复医学杂志，2005,20(2):156-158．[3]沈光宇，钱国全，蔡可夫神经肌肉电刺激对脑卒中早期运动功能恢复的影响南通大学学报（医学版）2008，28（5）:410-411.[4]赵玉兰.频电刺激对脑梗死患者肢体运动功能的影响.中华物理医学与康复杂志,2004,26:575-576.[5]王东岩卫哲曹东辉低频脉冲电穴位治疗改善中风后手腕部功能的研究2008,25(3).[6]王相明侯莹李文低频电刺激治疗卒中后面瘫的疗效观察中国康复医学杂志2009,24(3).[7]杨晓慧张淑丽罗红梅低频脉冲电治疗对脑卒中后尿潴留的临床观察中国老年学杂志,2008,28(11).[8]Rushton DN.Functional electrical stimulation.PhysiolMeas,1997,18:241-275.[9]LevinMF,Hui-Chan CWY.Conventional and acupuncture-like transcu-taneous electrical nerve stimulation excite similar afferent fibers.ArchPhysMed Rehabi,l 1993,74:54-60.[10]李莉,袁家齐,张晨逸.偏瘫患者下肢功能性电刺激和功能强化训练的临床观察.中华物理医学与康复杂志,2000,22:18-19.[11]刘忠良，宋琳，关爽等.功能性电刺激对脑卒中偏瘫患者上肢运动功能恢复的影响[J].中国康复,2005,20(1):52-53.[12]方华，周志贤，刘桂芬功能性电刺激辅助干预脑卒中患者运动功恢复的作用[J]中国临床康复，2004，8(16)：3004-3005.[13]伍少玲,燕铁斌.马超,马晓青,等.神经肌肉电刺激结合功能训练改善脑卒中后吞咽障碍的临床疗效观察[J].中华物理医学与康复杂志,2007,29,537-539. [14]Chae J.Neuromuscular electrical stimulation for motor relearning in hemipare－sis[J].Phys Med Rehabil Clin N Am,2003,14(Suppl):S93-109.[15]Gad e of neuromuscular electrical stimulation in neureorehabilitation:A challenge to all[J].J Rehabil Res Develop,2003,40(6):9-12.[16]Sheffler L,Chae J.Neuromuscular electrical stimulation in aneurorehabilitation [J].Muscle Nerve,2007,35:562-590.[17]燕铁斌积极推广神经肌肉电刺激技术在中枢神经损伤中的应用中国康复医学杂志,2007,22(10):865.编辑/雅兰!!!!!!!在冠心病的发生发展过程中，炎症和免疫反应具有重要意义[1]。

论著基质金属蛋白酶-9在急性肝炎肝衰竭中的表达及其临床意义王兆京袁逸枫庄海文张峰摘要目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在急性肝炎肝衰竭中的表达及其临床意义。

方法2009~2011年共收集急性肝炎肝衰竭患者的肝组织标本17例、正常肝组织标本21例,通过RT -PCR 检测MMP-9的mRN A 表达;用明胶酶谱法检测肝内MMP-9和pro -MMP -9的活性变化;W es-t e rn b l ot 测定其蛋白表达量的变化。

结果急性肝炎肝功能衰竭患者肝脏中MMP-9的mRNA 水平、蛋白水平和酶的活性明显高于正常人。

结论MMP -9在急性肝炎肝功能衰竭的肝脏组织标本中表达显著增高,活性也明显高于正常,其有可能成为急性肝损伤时的潜在治疗靶点。

关键词基质金属蛋白酶9;肝功能衰竭,急性Exp r essi on and clin ica l si gn if i cance of m a tr ix m eta llopr ote i na se -9in a cu te hepa tic fa ilur eW A NG Zha o -jing,Y U A N Yi -feng,Z HUA NG H a i -wen ,ZHA NG F eng .The F irst Aff ilia ted Hos p ita l of Nanjing M e d ica lUn i versit y ,Key Labora tory o f Living Donor Liver Trans planta tion o f M i n istry o f P ublic H ea lth ,Nanjing210029,Ch i naCorres ponding author:Z HA NG F eng,Em a il :zhangf1958@yahoo .cnAb stra ct O b jective To investi gate t he expressio n and cli n i ca l s i gnificance of m atri xm eta llo prote i nase -9(MMP-9)i n acute hepatic fail ure .M e thod sSpeci m ens of acu te hepatic fa il ure were obta i ned freshly fro m pati ents undergoi ng liver transplanta ti on w it h approval fro m eth i cs co mm ittee i n ourinstituti on .The nor m a l li ver ti ssue was obta i ned fro m the donor .The m ethods of RT -PCR and W estern b l otwere used to ana lyze t he expressi on leve l of MM P -9mRNA and protein i n acute li ve r fa il ure group andnor m a l group respecti ve l y .The acti vity of MM P -9and pro -MM P -9i n hepatic ti ssue were assayed byzy m ography .R e s u lts The expressi on levels of MMP-9mRNA i n the acute liver fa ilure were si gnificantlyh i gher than those i n norma l liver (P <005).The zy mography and western blot sho wed si m ilar changes ontha t of t he mRNA .C onc l u si on s MMP-9is up -reg u lated in acute hepatic fail ure pa tients .MMP-9m ay playan i m portant rol e in the acute hepati c fa il ure .K ey wor ds M atr i x m eta ll oprote i nase 9;L i ver fail ure ,acu te基质金属蛋白酶-9(matri x m etallo proteinase 9,M MP -9)在肿瘤的转移和复发中发挥重要作用,但最近的研究表明它在急性肝炎肝功能衰竭时表达也显著增高,是急性肝炎肝功能衰竭时肝损伤的重要促进因素。

胶原蛋白酶2,9检测试剂盒使用说明货号:M1030规格：50assays产品内容：1.2×SDS-PAGE non-reducing buffer1.5ml,−20ºC；2.10×Substrate G,50ml,−20ºC；3.10×Buffer A,50ml,4ºC,使用时用蒸馏水稀释；4.10×Buffer B,50ml,4ºC,使用时用蒸馏水稀释；5.SDS-PAGE凝胶蛋白质考马斯亮蓝染色液，4ºC。

产品说明：基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)以无活性的酶原形式分泌，活化后能够降解细胞外基质的胶原蛋白，又称胶原酶。

通过影响细胞外基质，胶原酶参与胚胎发育、形态发生、组织重塑等过程，并参与炎症、肿瘤、心血管、神经等许多疾病过程。

血浆与组织中的MMP-2、MMP-9参与各种生理与病理过程，其在临床诊断和治疗中的意义日益受到重视。

本试剂盒采用酶谱法(zymography)检测MMP-2、MMP-9活性。

Zymography是一种广为使用的、基于SDS-PAGE电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法，其灵敏度可达1nM，高于ELISA方法2，其基本原理和程序是：制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶，含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳，电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育，凝胶染色与脱色。

凝胶中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶条带的位置，蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮区域，从而能同时指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶谱)及活性。

本试剂盒提供MMP-2、MMP-9特异蛋白底物及酶学反应缓冲液，可检测少至0.1~0.5μl血液中的MMP-2、MMP-9酶谱及活性，检测灵敏度~1nM。

试剂盒可进行50次标准小胶检测，如果小胶加样孔为10~15个，则总计可检测500~750个样品。

基质金属蛋白酶9和颈动脉内膜剥脱术中微栓子脱落的相关性吴立飞;来志超;李天佳;王子军;邵磊;刘暴【期刊名称】《中国医学科学院学报》【年(卷),期】2018(040)004【摘要】目的研究基质金属蛋白酶9(MMP-9)在颈动脉内膜剥脱术(CEA)术前、术中和术后的表达变化及其临床预警作用.方法前瞻性纳入2012年2至9月在北京协和医院血管外科行CEA治疗的颈动脉狭窄患者,根据术中经颅多普勒超声是否监测到栓子脱落将患者分为栓子组和无栓子组,使用酶联免疫吸附法和明胶酶谱法检测CEA术前、颈动脉开放前、开放后30 min、术后12 h血清MMP-9浓度和活性.结果共纳入40例患者,栓子组8例、非栓子组32例.栓子组术后12 h MMP-9浓度显著高于术前[(904.27±369.47)ng/ml比(333.88±126.32)ng/ml,t=4.132,P=0.001)],无栓子组术前、术后12 h MMP-9表达差异无统计学意义[(375.83±194.36)ng/ml比(472.74±271.21)ng/ml,t=-1.643,P=0.081)].明胶酶谱结果同样显示,栓子组术后12 h MMP-9活性较术前显著升高.结论 CEA术后发生微栓子脱落者,其术后12 h血清MMP-9水平较术前显著升高,提示MMP-9可能为CEA术后脑缺血性损伤的潜在生化学标志物.【总页数】5页(P463-467)【作者】吴立飞;来志超;李天佳;王子军;邵磊;刘暴【作者单位】北京市房山区第一医院心血管外科,北京102400;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血管外科,北京100730;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血管外科,北京100730;北京市房山区第一医院心血管外科,北京102400;北京市房山区第一医院心血管外科,北京102400;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血管外科,北京100730【正文语种】中文【中图分类】R543.5;R653;R34【相关文献】1.基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2在子宫剖宫产疤痕中的表达和相关性 [J], 李琼;郭遂群;柳大烈;冯淑英;魏清柱2.基质金属蛋白酶-9基因多态性与颈动脉粥样硬化微栓子形成的相关性研究 [J], 沈焱;邓长林;王静;白向东;马瑞莲;杜秦川;张淑敏;魏欣;李玲;高志嵩;程继明3.血清基质金属蛋白酶-9与颈动脉粥样硬化微栓子形成的相关性研究 [J], 白向东;邓长林;王静;马瑞莲;杜秦川;沈焱;张淑敏;魏新;李玲;高志嵩;程继明4.碱性成纤维细胞生长因子、基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制因子-1在肺癌患者血清中的水平差异及其相关性研究 [J], 赵真庆;王永勇;戴磊;陈铭伍5.喉鳞状细胞癌患者血清及唾液中基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9的水平与肿瘤恶性程度的相关性分析 [J], 朱虹;左文娜;金爱燕;韩庆林;杨怡;王红芹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

化妆品功效评价(Ⅳ)——延缓皮肤衰老功效宣称的科学支持李诚桐;赵华【摘要】概述了皮肤的衰老表现和衰老机制学说,介绍了生物化学法、细胞生物学法、三维重组皮肤模型替代法、动物实验法、主观评估、客观仪器评价法等延缓皮肤衰老化妆品功效评价方法,提供了延缓皮肤衰老功效评价的新思路,展望了延缓衰老化妆品功效评价方法的未来发展方向.【期刊名称】《日用化学工业》【年(卷),期】2018(048)004【总页数】8页(P188-195)【关键词】延缓皮肤衰老化妆品;皮肤衰老;功效评价【作者】李诚桐;赵华【作者单位】北京工商大学理学院化妆品系,北京100048;北京市植物资源研究开发重点实验室,北京100048;北京工商大学理学院化妆品系,北京100048;北京市植物资源研究开发重点实验室,北京100048【正文语种】中文【中图分类】TQ658伴随着人们对精神生活的追求不断提高，消费者更加注重皮肤的保养，并希望通过使用化妆品来延缓皮肤衰老。

市场的需求促使化妆品企业相继推出多种延缓皮肤衰老宣称的产品，而产品是否能够达到宣称目的，以及如何对延缓皮肤衰老宣称提供科学支持，也成为生产企业、消费群体以及市场监管部门所共同关注的话题。

1 皮肤的衰老人的一生中要经历生长期、成熟期和老年期(衰老期)3个阶段。

衰老是一个复杂的、涉及多种不同器官和系统的系列变化过程，是生命的基本特征之一，它是生物个体在生命周期中必然发生的、难以逆转的退行性变化。

在人体衰老阶段，各器官、组织和系统都会发生变化，但从外观上最容易观察到的是皮肤及其附属器官的变化[1]。

皮肤覆盖在身体表面，由表皮、真皮、皮下组织构成，呈多层次分布。

皮肤的衰老是一个多维立体的过程[2]。

皮肤老化在表皮、真皮、皮下组织和附属器官的主要表现有以下几个方面。

1)表皮。

表皮老化主要表现为皮肤变薄，角质形成细胞增大且部分角化不全，其中比较明显的指标为皮肤水分含量的丢失。

由于水合能力降低，皮肤组织细胞的水分减少，细胞皱缩，出现细小皱纹。

基质金属蛋白酶9（MMP—9）的研究及临床应用进展作者：吕锦来源：《医学信息》2016年第21期摘要：基质金属蛋白酶9（MMP-9）属于基质金属蛋白酶超家族成员中明胶酶的一种，又称明胶酶B，因其作用底物广泛，表达细胞众多参与多种疾病及恶性肿瘤的侵袭和转移而备受重视，成为最近国际国内研究的焦点之一。

因此，深入了解MMP-9及其与疾病的关系有助于疾病的及时发现、诊断和治疗。

本文就其生物学特点、检测技术及临床应用进行了综述。

关键词：基质金属蛋白酶9；检测技术；临床应用基质金属蛋白酶（MMPs）是一类活性依赖于锌离子和钙离子的蛋白水解酶，其主要的生理作用是降解细胞外基质。

现已发现26种MMPs（MMP-1～26），称为MMP家族，MMPs 几乎能降解细胞外基质的所有成分，如胶原、明胶、黏性蛋白、纤维黏连蛋白、蛋白多糖等，参与人体许多生理和病理过程[1]。

在MMPs中MMP-9，属于基质金属蛋白酶超家族成员中明胶酶的一种，是人体内最重要的蛋白酶之一。

1 MMP-9的生物学特点[2-3]1.1概述 MMP-9是MMPs家族成员之一，是Reponen和Sahlbergl994年在小鼠胚胎发育中的破骨细胞内发现的。

分子量Mr92×103，根据作用底物又名明胶酶B，依据发现的先后顺序MMP-9又名基质金属蛋白酶9，主要作用是保持酶的稳定性。

MMP-9前体可由单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞、泡沫细胞、成纤维细胞、小胶质细胞及肿瘤细胞等分泌，在87位氨基酸残基或附近被酶解激活，参与炎性反应、组织构形、创伤修复、基质结合的生长因子的动员及细胞因子的表达。

1.2 MMP-9的基因结构和功能人MMP-9基因全长26000bp，位于20q11.2～q13.1，含有13个外显子和12个内含子，编码相对分子质量为92×103的蛋白。

MMP-9的启动子区位点，人的MMP-9启动子区还有核因子κB、表达序列标签结合位点和转化生长因子β控制元件。

GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS80013.2 v.A GENMED冰冻切片胶原纤维（MASSON）染色试剂盒产品说明书（中文版）主要用途GENMED冰冻切片胶原纤维（MASSON）染色试剂是一种旨在使用胞核－胞浆－胶原蛋白三色染料（trichrome），分析和区分存档中的冰冻组织切片中的胶原纤维（collagen fiber）的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心改良传统方法、成功实验证明的。

主要适用于胶原蛋白和平滑肌的鉴别分析。

广泛用于结缔组织、肌肉组织和胶原蛋白的研究等。

产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。

技术背景基于摩罗利（mallory）首次应用三色系统的方法，马森（masson）进行了改良，在三色复合染料体系中，使用苯胺篮（aniline blue）替代绿篮，作为胶原蛋白的染色。

三色复合染料选择性地染色肌肉、胶原纤维、纤维蛋白（fibrin）和红细胞。

肝肾疾病，例如纤维化（cirrhsis）等，其胶原蛋白增多。

产品内容GENMED清理液（Reagent A）XX毫升GENMED包氏液（Reagent B）XX毫升GENMED韦格液（Reagent C）XX毫升GENMED比氏液（Reagent D）XX毫升GENMED酸性液（Reagent E）XX毫升GENMED染色液（Reagent F）XX毫升GENMED修正液（Reagent G）XX毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意安全；有效保证6月用户自备小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器培养箱：用于样品反应孵育微波炉：用于样品反应孵育处理载玻片和盖玻片：用于切片后铺片中性树脂：用于切片封片光学显微镜：用于切片染色后观察分析实验步骤操作一：标准染色1．准备好XX微米厚的冰冻切片2．小心加上XX微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面3．室温下孵育XX分钟4．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）5．小心加入XX微升GENMED包氏液（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面6．放进60℃恒温培养箱孵育XX分钟（注意：避免干枯；如果强化效果，可以室温孵育16小时） 7．小心移去GENMED包氏液（Reagent B）8．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育2分钟9．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）10．小心加入XX微升GENMED韦格液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面11．室温下孵育XX分钟12．小心移去GENMED韦格液（Reagent C）13．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育XX分钟14．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）15．小心加入XX微升GENMED比氏液（Reagent D）在切片上，铺满整个切片样品表面16．室温下孵育XX分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）17．小心移去GENMED比氏液（Reagent D）18．小心加入XX微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面19．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）20．重复实验步骤18至19二次21．小心加入XX微升GENMED酸性液（Reagent E）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：可以孵育15分钟，增强染色效果）22．小心移去切片上的GENMED酸性液（Reagent E）23．小心加上XX微升 GENMED染色液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面24．室温下孵育XX分钟，避免光照（注意：可以延长至10分钟，增强染色效果）25．小心移去切片上的GENMED染色液（Reagent F）26．小心加上XX微升 GENMED修正液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面27．室温下孵育XX分钟28．小心移去切片上的GENMED修正液（Reagent G）29．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育XX分钟30．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）31．放上盖玻片或封片（中性树脂）32．即刻在一般光学显微镜下观察：细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色红细胞――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色操作二：热处理染色1．准备好XX微米厚的冰冻切片2．小心加上XX微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面 3．室温下孵育XX分钟4．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）5．准备1个XX毫升烧杯或小型染色缸6．加入XX毫升GENMED包氏液（Reagent B）7．小心放进上述脱腊处理的切片8．放进微波炉（600瓦）加热XX分钟9．室温下静置15分钟10．取出切片，小心移去切片上的GENMED包氏液（Reagent B）11．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育5分钟 12．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）13．小心加入XX微升GENMED韦格液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面 14．室温下孵育XX分钟15．小心移去GENMED韦格液（Reagent C）16．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育5分钟 17．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）18．小心加入XX微升GENMED比氏液（Reagent D）在切片上，铺满整个切片样品表面 19．室温下孵育XX分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）20．小心移去GENMED比氏液（Reagent D）21．小心加入XX微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面 22．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）23．重复实验步骤21至22二次24．小心加入XX微升GENMED酸性液（Reagent E）在切片上，铺满整个切片样品表面 25．室温下孵育XX分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）26．小心移去切片上的GENMED酸性液（Reagent E）27．小心加上XX微升 GENMED染色液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面 28．室温下孵育XX分钟，避免光照（注意：可以延长至10分钟，增强染色效果） 29．小心移去切片上的GENMED染色液（Reagent F）30．小心加上XX微升 GENMED修正液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面 31．室温下孵育XX分钟32．小心移去切片上的GENMED修正液（Reagent G）33．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育2分钟 34．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）35．放上盖玻片或封片（中性树脂）36．即刻在一般光学显微镜下观察：细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色红细胞――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色注意事项1．本产品为50次操作2．操作时，须戴手套3．试剂具有腐蚀性，注意操作安全4．建议使用玻璃染色缸5．每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干6．试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面7．整个操作，在避光状态下进行8．染色完成后，即刻进行光学显微镜观察9．样品染色后保存，避免光照10．本公司提供系列特定组织染色试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定显色清晰使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。